褪黑素受体MT1和转录因子Sp1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:检测乳腺癌组织中褪黑素受体MT1与转录因子Sp1的表达,探讨两者表达的相关性及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法和蛋白质印迹技术检测MT1和Sp1在90例乳腺癌组织和50例癌旁正常乳腺组织中的表达情况。结果:MT1在乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为64.4%和22.0%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。Sp1在乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为74.4%和28.0%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹半定量检测结果与免疫组织化学结果相一致。乳腺癌组织中MT1、Sp1的表达与TNM分期、肿瘤浸润及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级无明显相关性(P>0.05)。乳腺癌组织中MT1的表达与Sp1的表达呈正相关(r=0.523,P<0.01)。结论:MT1、Sp1可能共同参与了乳腺癌的侵袭和转移,检测两者的表达对判断乳腺癌临床进展、预后推测具有一定的参考价值。

SSRI联合MT1/MT2受体激动剂对伴生物睡眠节律紊乱特征抑郁症治疗后的PSG分析

SSRI联合MT1/MT2受体激动剂对伴生物睡眠节律紊乱特征抑郁症治疗干预后的PSG检测进行评估分析。方法:选取于我院就诊的80例伴生物睡眠节律紊乱特征抑郁发作患者作为观察对象。分为治疗组和对照组各30例,治疗组接受MT1/MT2受体激动剂+一种SSRI类药物联合治疗。对照组接受一种SSRI类药物。分别对两组患者多导睡眠监测(PSG),评估汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、匹兹堡睡眠质量指数(PQSI)表和生活质量综合评定量表(GQOLI-74)。观察分析治疗组和对照组的PSG指标及情绪、睡眠、生活质量相关量表评估结果差异,并对SSRI+MT1/MT2对伴生物睡眠节律紊乱特征抑郁症干预治疗进行分析。结果:治疗前两组患者HAMD评分、PSQI评分、GQOLI-74评分、TESS评分两两对比差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后第7天、第14天、第28天HAMD评分、PSQI、评分TESS评分呈持续降低趋势,治疗组较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05),与治疗组相比,对照组主观抑郁分值及焦虑分值更高;对照组存在更严重的睡眠问题,且药物不良反应率低。治疗后第7天、第14天、第28天GQOLI-74评分呈持续升高趋势,治疗组较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),可见改联合治疗能否更快更有效的改善伴生物节律紊乱特征抑郁症状且不加重药物副作用,提升生活质量。对两组受试者监测多导睡眠(PSG),对照组REM期睡眠潜伏期较治疗组组的长,差异具有统计学意义(p<0.05),与治疗组相比较,对照组具有更长的入睡后清醒时间,且睡眠效率更低。结论:SSRI联合MT1/MT2受体激动剂对伴生物睡眠节律紊乱特征抑郁症治疗效果显著,有助于改善患者的HAMD评分、PSQI评分、GQOLI-74评分及PSG指标。

绵羊附睾褪黑素受体1的表达与定位

为研究褪黑素受体1(MT1)在不同年龄绵羊附睾中的表达模式,选用幼龄绵羊(2~3月龄)、青年绵羊(6~8月龄)和成年绵羊(2~3岁)的附睾,采用实时荧光定量PCR和免疫组化技术检测不同年龄绵羊附睾各部位MT1基因mRNA的表达量和MT1的分布情况。结果表明:幼龄绵羊附睾尾MT1基因的转录水平极显著高于附睾头和附睾体(P<0.01);青年绵羊附睾体和附睾尾MT1基因的转录水平显著高于附睾头(P<0.05);成年绵羊附睾尾MT1基因的转录水平显著高于附睾头和附睾体(P<0.05),附睾各部位MT1基因的转录水平随年龄增长呈明显降低趋势;定位结果显示,MT1在各年龄组绵羊附睾的各个部位均有分布,且主要分布在附睾上皮细胞中。综合上述结果,不同年龄绵羊附睾的不同部位均有MT1表达和分布,并随年龄增长各部位的表达量降低,相同年龄绵羊附睾尾MT1的表达水平较高。

下丘脑褪黑素受体亚型基因及蛋白表达的研究(英文)

目的 :应用 PT- PCR技术和免疫组织化学染色显示人胚胎下丘脑褪黑素受体及其亚型的分布。方法 :取人胚胎下丘脑组织 ,抽提总 RNA并应用 RT- PCR方法检测其 m RNA,扩增所得阳性产物用自动测序仪测序 ;石蜡包埋下丘脑组织 ,应用鼠抗人 m t1 和 MT2 受体单克隆抗体分别检测褪黑素 mt1 和 MT2 受体亚型 m RNA及其蛋白的表达。结果和结论 :人胚胎下丘脑组织中存在 m t1 和 MT2 受体亚型 m RNA的表达及其蛋白的翻译 ,提示在该组织中有 m t1 和 MT2

2-Iodomelatonin上调NRF2表达对缺血性脑损伤神经保护作用

目的探讨褪黑激素受体1(MT1)激动剂2-Iodomelatonin通过上调核因子E2相关因子2(NRF2)对大脑中动脉栓塞小鼠的神经保护作用。方法采用大脑中动脉栓塞(MCAO)法制备小鼠缺血性脑损伤体内模型,给予2-Iodomelatonin及NRF2抑制剂(Nrf2-IN-1)干预。采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法检测小鼠大脑的梗死体积,Western Blot法检测缺血损伤后大脑皮质半暗带NRF2表达水平,改良神经功能缺损程度评分(mNSS)评估2-Iodomelatonin和Nrf2-IN-1干预对小鼠缺血性脑损伤亚急性期运动功能的影响。结果TTC染色结果显示,2-Iodomelatonin干预可以显著降低缺血性脑损伤小鼠的大脑梗死体积(F=7.79,q=5.06,P<0.05)。Western Blot结果显示,2-Iodomelatonin干预可上调小鼠皮质梗死半暗带NRF2的表达水平(F=10.56,q=3.99,P<0.05)。mNSS评分结果显示,2-Iodomelatonin干预可以显著改善缺血性脑损伤第14天的运动功能损伤(F=6.12,q=4.79,P<0.05),该效应可被Nrf2-IN-1逆转(q=3.60,P<0.05)。结论2-Iodomelatonin干预可以通过上调NRF2降低缺血性脑损伤小鼠的大脑梗死体积并改善14 d时的运动功能损伤。

人外周血淋巴细胞和粒细胞褪黑素受体亚型mt_1的检测

目的 检测人外周血淋巴细胞和粒细胞的褪黑素受体 (MR)亚型mt1和其细胞内定位。方法 分离出健康成年人外周血淋巴细胞和粒细胞 ,应用RT PCR技术分别检测其亚型mt1的mRNA ,阳性产物用自动测序仪测序 ;同时将所分离的淋巴细胞和粒细胞制成细胞涂片 ,应用免疫组化染色检测mt1在淋巴细胞和粒细胞上的分布。结果 RT PCR产物电泳显示 :人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1阳性条带 ,片段长度约 3 70bp ,测序结果显示扩增产物与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合 ;免疫组化结果显示 :人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白 ,分布于细胞膜、细胞浆和细胞核 ,以细胞膜和细胞浆为主。结论 人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在MR的亚型mt1,外周血淋巴细胞和粒细胞为褪黑素作用的外周靶器官 。

关于Ramelteon的综述——一种选择性的MT1／MT2受体可能作为飞行机组人员的抗疲劳的药物

背景机组人员疲劳越来越被人们认识到是影响飞行安全的重要因素。目前针对疲劳的对抗措施仅限于民航领域，从睡眠卫生学重要性的教育到针对咖啡因、酒精和抗组胺药的自我用药。商业飞行中，时差或昼夜节律失常的处置，不允许飞行员服镇静催眠药。方法Ramelteon是一种投放市场仅仅一年的新药，我们写了一篇综述，论述机组成员用它治疗疲劳时的适应症、作用、副作用。结果Ramelteon适合用于治疗入睡困难的失眠。

SSRI及SSRI+MT1/MT2对伴生物睡眠节律紊乱特征抑郁症干预治疗分析

分析SSRIs和SSRIs+MT1/MT2对伴生物睡眠节律紊乱的抑郁症的治疗价值。方法 观察80例在我院治疗的以生物睡眠节律紊乱为特征的抑郁发作患者。采用随机数字表法,每组30名受试者,分为治疗组和对照组。对照组接受 SSRI 药物。我们观察并分析了治疗组和对照组在与情绪、睡眠和生活质量相关的 PSG 指数和量表结果方面的差异,以评估 SSRI 和 SSRI+MT1/MT2 对生物睡眠抑制的疗效。分析节律障碍介入治疗的特点。结果 在情绪、睡眠、生活质量相关量表中,治疗组的主观抑郁和焦虑评分高于对照组,对照组的HAMD评分高于对照组。有统计学意义(P <0.05)。对照组睡眠问题更严重,患者感觉睡眠比她的PSQI差(t 13.430,P <0.05)。在生活质量评分方面,治疗组的 GQOLI-74 评分高于对照组(P<0.05),我们将展示联合疗法是否可以更快更好地改善伴有生物节律紊乱的抑郁症状。两组间的多导睡眠图(PSG)监测显示,治疗组和对照组的总睡眠时间无显著差异(P >0.05)。此外,对照组和治疗组之间的睡眠潜伏期(1.663,p0.102)和清醒(1.127,p0.265)没有统计学上的显著差异。与治疗组相比,对照组的REM睡眠潜伏期比治疗组长,差异有统计学意义(p<0.05)。结论 SSRI+MT1/MT2联合治疗能更快速有效地改善抑郁症状和生物睡眠节律紊乱,在保证患者QOL的前提下进行有效治疗。预计提供抑郁症的治疗计划。

褪黑素对前额叶皮层锥体神经元兴奋性的影响及MT1R-cAMP-PKA信号通路在其中的作用

目的评价褪黑素对前额叶皮层锥体神经元兴奋性的影响及褪黑素受体1-环磷酸腺苷-蛋白激酶A(MT1R-cAMP-PKA)信号通路在其中的作用。方法取出生14~21 d的雄性SD大鼠,取脑组织,制备厚约350μm的脑片,置于人工脑脊液中。采用随机数字表法,将脑片分为5组(n=6):对照组(C组)、褪黑素组(M组)、MT1/2R拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺+褪黑素组(L+M组)、MT2R拮抗剂4-苯基-2-丙酰胺曲胺+褪黑素组(P+M组)和PKA抑制剂腺苷-3,5-环状硫代磷酸三乙基铵盐+褪黑素组(R+M组)。C组细胞外灌流人工脑脊液2 min;M组细胞外灌流1μmol/L褪黑素2 min;L+M组细胞外灌流1μmol/L MT1/2R拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺和1μmol/L褪黑素的混合液2 min;P+M组细胞外灌流1μmol/L MT2R拮抗剂4-苯基-2-丙酰胺曲胺和1μmol/L褪黑素的混合液2 min;R+M组电极内液持续给予1 mmol/L PKA抑制剂腺苷-3,5-环状硫代磷酸三乙基铵盐,细胞外灌流1μmol/L褪黑素2 min。采用全细胞膜片钳技术,记录前额叶锥体神经元膜电位和钳制电流。结果与C组比较,M组钳制电流升高,膜电位降低(P<0.05);与M组比较,L+M组和R+M组钳制电流降低,膜电位升高(P<0.05),P+M组钳制电流和膜电位差异无统计学意义(P>0.05)。结论褪黑素可抑制前额叶皮层锥体神经元兴奋性,其机制与激活MT1R-cAMP-PKA信号通路有关。

急性坏死性胰腺炎胰腺组织中褪黑激素受体表达及褪黑激素干预作用

目的 探讨急性坏死性胰腺炎（ANP）胰腺组织中褪黑激素受体MT1表达及褪黑激素（MT）干预作用.方法 54只SD大鼠随机分为假手术组（SO组）、急性坏死性胰腺炎组（ANP组）、MT干预组（MT组）,每组18只.应用胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠的方法诱导ANP模型,MT组于诱导模型前30 min腹腔注射MT.术后4 h、8 h和12 h分批处死大鼠（每个时间点6只）,以免疫组化和实时定量PCR分别检测胰腺组织中MT1蛋白及MT1 mRNA的表达;检测血清淀粉酶、胰腺组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）及TNFα的含量,并行胰腺病理检查.结果 （1）ANP组胰腺病理损伤呈进行性加重,MT组胰腺病理损伤较ANP组明显减轻（P＜0.05）.（2）淀粉酶、MDA、TNFα水平在ANP组较S0组明显增高（P＜0.05或P＜0.01）,而MT组较相应时间点ANP组显著降低[12 h,（2348.00±278.90）U/L比（3194.83±538.10）U/L,（2.255±0.472）μmol/L比（2.960±0.722）μmol/L,（102.929±29.399）ng/L比（378.544±183.454）ng/L,P＜0.05].SOD水平在ANP组各时点较SO组显著降低（P＜0.01）,而MT组较ANP组显著升高[12 h,（11.448±1.594）U/L比（8.427±1.950）U/L,P＜0.05].（3）与SO组相比,MT1蛋白及MT1 mRNA表达在ANP组胰腺组织中明显下降（P＜0.05）,且随ANP病变加重表达减弱,而MT组表达较ANP组明显增多.结论 MT干预可提高SOD活力,降低MDA、TNFα水平,故能显著减轻ANP时胰腺病理损伤,MT1在ANP发病机制中可能具有重要作用,MT对ANP中的干预作用可能与上调胰腺组织中MT1的表达有关.

增生性瘢痕组织中褪黑素受体的表达

目的 检测人增生性瘢痕组织和正常皮肤中褪黑素受体含量的差异,探讨其意义.方法 人增生性瘢痕组织和正常皮肤各10例,免疫组化检测组织中褪黑素受体GPR50的表达,荧光定量PCR（SYBR Green）检测组织中褪黑素受体MT1、MT2 mRNA含量,并将PCR阳性产物基因测序.结果 免疫组化显示褪黑素受体GPR50表达于细胞膜和细胞质,正常皮肤表皮基底层细胞、毛囊和汗腺均有褪黑素受体阳性表达,增生性瘢痕组织表皮、残留的毛囊和汗腺内也存在褪黑素受体表达;同时发现增生性瘢痕真皮成纤维细胞有广泛褪黑素受体阳性表达,而正常皮肤组织中则少见表达.荧光定量PCR显示增生性瘢痕组织中MT1、MT2 mRNA含量分别为（1.16584 4±0.21829）和（0.99550 ±0.14624）拷贝数/μl cDNA,正常皮肤中为（0.99081±0.26485）和（0.77083±0.15927）拷贝数/μl cDNA,增生性瘢痕组织中MT1、MT2 mRNA含量均高于正常皮肤（P〈O.05）,同时MT1 mRNA含量在两种组织中均高于MT2 mRNA（P〈0.05）;基因测序显示扩增产物与GeneBank中人MT1、MT2受体基因序列相吻合.结论 褪黑素受体在增生性瘢痕组织和正常皮肤中均有表达,而且在增生性瘢痕组织中高于正常皮肤,褪黑素受体在增生性瘢痕形成过程中可能发挥着重要作用.

褪黑素对大鼠牙乳头细胞和牙齿发育的影响

目的研究褪黑素(MT)对大鼠牙乳头细胞及牙齿发育的影响。方法新生鼠牙乳头细胞的分离培养与鉴定,应用免疫组化检测培养第4代牙乳头细胞褪黑素MT1、MT2受体,四唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度褪黑素对牙乳头细胞增殖的变化,双荧光标记检测褪黑素对SD新生大鼠牙本质生长情况的影响。结果培养第4代牙乳头细胞存在MT1受体,主要分布于细胞膜、细胞浆和细胞核周围,呈棕黄色阳性颗粒,而MT2受体呈阴性;MTT法检测吸光度(A)值,高浓度MT组明显小于对照组(P<0.05);荧光标记检测10天牙本质生长距离褪黑素组明显小于对照组(P<0.05)。结论褪黑素能够明显抑制牙乳头细胞的增殖,对牙本质生长的早期发育起抑制作用。