甲状腺乳头状癌组织中线粒体DNA含量的变化

目的探讨线粒体DNA(mtDNA)含量变化在甲状腺乳头状癌发生中的作用及其意义。方法应用Taq Man实时荧光定量聚合酶链反应检测29例甲状腺乳头状癌,14例甲状腺腺瘤,11例结节性甲状腺肿及其配对正常甲状腺组织的mtDNA含量变化,并结合甲状腺乳头状癌主要临床病理参数进行分析。结果(1)29例甲状腺乳头状癌中mtDNA相对含量为224.13±217.24;配对癌旁正常甲状腺组织mtDNA相对含量为88.69±44.06,两者差异显著(P<0.01)。与癌旁正常甲状腺组织相比,甲状腺乳头状癌中mtDNA含量增加、无明显变化和减少的比例为21∶2∶6。(2)25例甲状腺良性病变中mtDNA相对含量为129.48±105.27;配对瘤旁正常甲状腺组织mtDNA相对含量为89.44±29.75,两者无显著差异,但低于甲状腺乳头状癌组(P<0.05)。(3)甲状腺良性病变中,甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿的mtDNA含量差别无统计学意义。(4)甲状腺乳头状癌的mtDNA含量变化与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移等临床病理参数无关(P>0.05)。结论mtDNA含量增加与甲状腺乳头状癌发生有关,但与其临床病理参数未见相关性,是肿瘤发生的早期事件。

线粒体DNA含量与急性冠脉综合征的关系

目的探讨外周血线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)含量与急性冠脉综合征(acutecoronary syndrome,ACS)的关系。方法连续入选于承德医学院附属医院行冠状动脉造影的患者244例,根据造影结果将入选者分为ACS组(183例)和对照组(61例)。采用实时定量PCR的方法检测2组外周血mtDNA含量,ACS组根据病变血管支数分为单支病变组、双支病变组、三支病变组,Gensini评分定量评估患者冠脉血管狭窄程度,分析mtDNA含量与病变血管支数、Gensini评分的关系。结果 ACS组患者mtD-NA含量低于对照组(P<0.001)。根据病变血管支数分组后,单支、双支、三支血管病变组mtDNA含量均低于对照组(P<0.05),双支、三支血管病变组mtDNA含量均低于单支血管病变组(P<0.05)。根据Gensi-ni评分结果将所有冠脉造影者分为4组,结果显示随Gensini评分的增加,mtDNA含量下降(P<0.01)。将Gensini评分及mtDNA含量进行线性回归分析显示,Gensini评分与mtDNA含量呈负相关(r=-0.644,P<0.001)。ROC曲线分析显示,mtDNA含量用于诊断ACS的曲线下面积为0.855(P<0.001),敏感度及特异度分别为0.756和0.833。结论 MtDNA含量与ACS密切相关,且与代表冠脉狭窄程度的Gensini评分相关,mtDNA含量检测在ACS诊断中有一定的应用价值。

裂褶菌胞外多糖对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及代谢产物的影响

目的研究裂褶菌(Schizophyllum commne Fr)胞外多糖(SPG)对D-半乳糖致衰老小鼠各项指标的影响。方法建立D-半乳糖衰老小鼠模型,以其学习记忆成绩,免疫器官指数,血清、肝、脑中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,脑中单胺氧化酶(MAO)活力,肝、脑细胞线粒体DNA含量为指标,对SPG的抗衰老作用进行研究。结果与模型组比较,SPG可恢复D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力;拮抗免疫器官萎缩;提高其血清、肝和脑中SOD活性;减少MDA在体内积累;抑制脑中MAO活性;降低肝、脑细胞线粒体DNA相对含量。最适剂量为200 mg.kg-1。结论高剂量SPG具有明显抗衰老作用(P<0.01),且具有靶向性,对血清和肝组织的抗衰老作用较强,对大脑的改善作用不如前者。

原生动物线粒体DNA的研究进展

目前已完成了多种原生动物mtDNA全序列的测定 ,对线粒体基因组有了较全面和深入的认识。本文总结了原生动物线粒体基因组结构、基因组成及基因表达等方面的研究进展 ,有助于进一步了解原始线粒体基因组的组成及其mtDNA进化 。

生育男性和白细胞精子症患者精子线粒体基因缺失和含量的研究

目的:测定生育男性与白细胞精子症患者精子线粒体DNA(mtDNA)含量、mtDNA4977bp缺失及精浆活性氧(ROS)水平,探讨精液中白细胞增加、ROS水平升高与精子mtDNA变化的相关性。方法:选取门诊白细胞精子症患者78例(病例组)、正常生育男性31例(对照组),采用Percoll梯度离心法将精液样本分为上清层、30%层和80%精子层,分别应用荧光实时定量PCR技术对每个精子mtDNA含量及mtDNA4977bp缺失进行定量分析,同时应用流式细胞术测定精浆ROS水平。结果:病例组精浆中ROS含量显著高于对照组(P<0.01)。与对照组比较,病例组各层精子mtDNA含量均显著升高,其P值均<0.01。在上清层和80%层,病例组mtDNA4977bp缺失与对照组差异不显著;而在30%层,病例组mtDNA4977bp缺失明显高于对照组(P<0.01)。对照组与病例组各样本中ROS含量分别与30%层精子和80%层精子的mtDNA含量间呈显著正相关(r=0.347,P<0.01;r=0.456,P<0.01),与上清层精子mtDNA含量无相关性。结论:白细胞增多和ROS升高可能是导致精子mtDNA含量显著增高的原因之一,但是对于mtDNA4977bp缺失没有显著影响。

卵母细胞质移植对兔原核胚体外发育的影响

卵母细胞胞质中存在着大量的母源性信息,正常受精卵的发育启动和早期卵裂主要由这些母源性信息所控制。为了评估卵胞质含量对早期胚胎发育的影响,以假显微注射兔原核胚为对照,采用显微注射技术将兔原核期胚胎去除或增加一定量的细胞质:试验一,增加5%和20%的细胞质;试验二,移入5%小鼠MⅡ期卵母细胞胞质。胚胎经显微操作后进行R1/R2序贯培养。结果显示,(1)增量5%组胚胎的2细胞胚(72.00%)、8细胞胚(60.00%)、桑椹胚(58.00%)和囊胚(54.00%)的发育率均显著(P<0.05)高于增量20%组胚胎(分别为47.62%、35.71%、33.33%和30.95%),但与对照组之间无显著差异(P>0.05);囊胚细胞数在2个增量组和对照组3者之间也无显著差异(P>0.05)。(2)将5%小鼠M期卵胞质移入兔原核胚后,各阶段胚胎发育率和囊胚细胞数与增量5%组、对照组相比均无显著差异;早期胚胎经PCR检测,在2细胞胚(5/5)、8细胞胚(5/5)和桑椹胚(5/5)均全部检测到了供体小鼠mtDNA的D-loop区3′端片段,而在囊胚却仅有1枚(1/5)能够检测到。结果表明,增加少量细胞质不会对兔原核胚的体外发育造成显著影响,但胚胎发育率随着细胞质体积的增加有下降趋势,而异种卵胞质对兔原核胚的发育没有明显影响,在囊胚期虽仍能检测到异种卵胞质中mtDNA的存在,但异种mtDNA会随胚胎发育而逐渐减少。

卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)拷贝数在卵巢储备功能下降中的研究

目的:初步探讨卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)拷贝数对卵巢储备功能下降患者生育潜能的影响。方法:选取IVF-ET治疗的不孕症患者80例,按照卵巢储备功能状态分为卵巢储备功能下降(DOR)组和卵巢储备功能正常(NOR)组,胚胎移植日收集患者自愿捐赠的未受精的废弃MII期卵母细胞,Real-timePCR方法定量检测比较卵母细胞mtDNA拷贝数。结果:共收集到废弃的MII期卵母细胞110个,其中DOR组46个,NOR组64个。DOR组卵母细胞mtDNA拷贝数下降(9.96×104±5.21×104vs1.77×105±7.27×104),组间具有显著性差异(P<0.05)。结论:卵巢储备功能下降患者卵母细胞mtDNA拷贝数减少,可能与其卵母细胞发育潜能下降相关。