猪Mu阿片受体基因单核苷酸多态性分析

Mu阿片受体(简称MOR)属于G蛋白藕联受体,分布在痛觉传导区,以及与情绪和行为有关的区域,影响动物的神经反应和行为表现。该研究以长白猪、大白猪和杜洛克猪为试验材料,用8对引物对Mu阿片受体基因的5′UTR区域、整个编码区和3′UTR区域用PCR SSCP方法进行了扫描,发现5处突变基因座(GenBank登录号:AF521309)。统计结果发现基因型频率分布与品种有关,大白猪突变基因型频率显著高于长白和杜洛克,本研究推测分布上的差异可能是由于长期的选择压力造成的。

Mu阿片受体多态性与海洛因依赖的关联研究

目的:探讨上海汉族人群中Mu阿片受体(OPRM1)基因A118G位点、C1031G位点多态性与海洛因依赖关联性。方法:采用病例对照研究,分别检测201名海洛因依赖者(依赖组)和249名健康对照(对照组)OPRM1基因A118G和C1031G位点基因型及等位基因频率,分析海洛因依赖者OPRM1受体基因多态与物质依赖的相关性。结果:A118G和C1031G位点多态性在依赖组和对照组间的分布差异无显著性;单体型分析两位点4种单体型均与海洛因依赖间无关联。结论:OPRM1基因A118G和C1031G位点与海洛因依赖无显著相关性。

Mu阿片受体在大鼠“泻剂结肠”肠道低反应中的作用

目的 研究mu阿片受体对“泻剂结肠”大鼠结肠动力的影响 ,“泻剂结肠”大鼠肠道阿片受体含量的变化。方法 以“泻剂结肠”为模型 ,用电刺激离体肌条收缩反应试验、放射性配体结合等方法。结果 外源性增加DAMGO明显抑制电刺激“泻剂结肠”大鼠离体肌体收缩反应 ,收缩波振幅降低 ,这种抑制作用是剂量相关 ,mu阿片受体拮抗剂Naloxone明显加强电刺激“泻剂结肠”大鼠离体肌条收缩反应 ,收缩波振增加 ,与正常组相比 ,“泻剂结肠”大鼠肠道mu阿片受体含量增加。结论 内源性阿片肽通过阿片受体介导参与了慢传输性便秘肠道动力的调控 。

猪Mu阿片受体基因外显子Ⅲ单核苷酸多态性

行为规癖 (古板行为 )是母猪一种常见的异常行为 ,表现为重复、不变化的行为模式 ,并且不带有明显的目的性。Mu阿片受体 (Muopioidreceptor,简称MOR)属于G蛋白偶联受体 ,分布在痛觉传导区以及与情绪和行为有关的区域 ,影响动物的神经反应和行为表现。本研究以Mu阿片受体基因作为候选基因 ,探讨影响母猪规癖性状的可能性。根据Mu阿片受体基因外显子Ⅲ的序列设计引物 ,用PCR -SSCP的方法对大白猪、长白猪和杜洛克猪进行单核苷酸多态性分析 ,发现该位点存在多态性。对两种纯合子片段克隆并测序表明 ,mRNA第 1169处存在C→T的单碱基突变 ,在第 12 2 6处存在C→A的单碱基突变 ,均为沉默突变。统计结果发现 3种基因型 (AA ,AB ,BB)在各品种中的分布不一致 ,χ2 独立性检验差异极显著 (P <0 0 1)。将大白猪 3种基因型同行为规癖性状进行最小二乘分析 ,结果表明 ,BB基因型与其他 2种基因型相比有较高的无食咀嚼表现频率 ,同AA型比较差异极显著 (P <0 0 1) ,咬栏和站立基因型间差异不显著。因此 。

瑞芬太尼痛觉过敏小鼠中脑导水管周围灰质Mu阿片受体和神经元限制性沉默因子表达水平的变化

目的:观察瑞芬太尼痛觉过敏小鼠中脑导水管周围灰质(periaquductal gray,PAG)中Mu阿片受体(Mu-opioid receptor,Mor)和神经元限制性沉默因子(neuron-restrictive silencer factor,NRSF)表达水平的变化。方法:32只小鼠采用随机数字表法随机分入4组(n=8):对照组(C组)、切口痛组(I组)、瑞芬太尼组(R组)和切口痛+瑞芬太尼组(IR组)。采用Von Frey细丝和BME-410A型热痛刺激仪测量小鼠术前24 h和术后2,6,24,48 h的机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical thresholds,PWMT)和热缩足反射潜伏期((paw withdrawal thermal latency,PWTL)。Western印迹检测术后48 h小鼠PAG中Mor和NRSF的表达水平。结果:与C组和术前基础值比较,I组、R组和IR组术后2~48 h PWMT和PWTL均显著降低(P<0.01);术后2,6 h时R组较I组PWMT和PWTL略高(P<0.01),术后24,48 h时两组间差异无统计学意义(P>0.05);与I组比较,IR组术后PWMT和PWTL显著降低,并持续到术后48 h(P<0.01)。与C组和I组比较,R组和IR组Mor表达均显著降低(P<0.01),NRSF表达显著升高(P<0.01),C组和I组之间Mor和NRSF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:术中短时程输注瑞芬太尼可诱导小鼠术后痛觉过敏,同时瑞芬太尼还诱导PAG中Mor水平降低及NRSF水平增加,该变化可能参与瑞芬太尼诱导的痛觉过敏的形成。

泻剂结肠大鼠结肠中的mu、kappa阿片受体变化

目的:探讨mu、kappa阿片受体在泻剂结肠大鼠结肠中的变化.方法:以泻剂复制大鼠泻剂结肠模型,观察泻剂结肠的mu、kappa阿片受体活性.结果:泻剂结肠的mu阿片受体的最大结合数和解离常数明显高于对照组(207.00±22.9vs82.00±4.23fmol/mg.p,P<0.01;3.30±0.45vs2.40±0.57mmol/L,P<0.05).与对照组相比,泻剂结肠的kappa阿片受体最大结合数明显增高(957.00±102.41vs459.00±52.41fmol/mg.p,P<0.01),解离常数无明显的差异.结论:mu,kappa阿片受体可能参与了泻剂结肠的功能紊乱,mu阿片受体较重要.

Mu型阿片受体:肿瘤的潜在治疗靶点

目前，围手术期麻醉管理可影响手术患者，尤其是肿瘤手术患者预后这一观点逐渐引起众多学者重视。最近研究发现，围手术期阿片类镇痛药物的使用可能影响肿瘤患者的预后。

Mu阿片受体抑制肿瘤细胞增殖和促血管生成作用研究进展

Mu阿片受体(Mu opioid receptor,MOR)是阿片类药物的主要作用受体,在肿瘤细胞中高度表达。有研究认为MOR对肿瘤的复发和转移有影响。MOR影响肿瘤复发和转移的作用机制繁杂,不同研究之间也存在争议。文章综述MOR及其亚型对肿瘤细胞的作用,不同的药物浓度差异对肿瘤细胞带来的不同影响,以及MOR通过多种信号通路、肿瘤微血管结构、内皮细胞对肿瘤血管生成的影响,以期为临床治疗中抑制肿瘤复发和转移提供理论参考。

不同剂量喷他佐辛抑制吗啡的镇痛作用

目的:研究不同剂量喷他佐辛对吗啡镇痛效果的影响及可能机制。方法:60只C57BL/6J小鼠随机分为10组(n=6),其中5组喷他佐辛注射前2小时预先注射生理盐水,另外5组预先注射kappa受体拮抗剂nor-BNI(10 mg/kg),随后各组同时皮下注射不同剂量喷他佐辛(0、10、30、56、100 mg/kg)和吗啡(10 mg/kg),分别于药物注射前和注射后30、60、90、120 min对小鼠进行机械痛阈(压尾试验)和热痛阈(热板试验,甩尾试验)测定,并分别计算药物时效的曲线下面积(area under curve,AUC)作为药物镇痛效应的量化指标。结果:1不同剂量喷他佐辛(0、10、30、56、100 mg/kg)在与吗啡合用后的压尾AUC分别为(244.1±19.5)、(166.5±9.6)、(146.6±8.3)、(130.7±7.8)、(124.5±10.1)(g·h);热板AUC分别为(27.9±4.0)、(24.4±1.6)、(22.8±1.6)、(23.3±2.1)、(22.7±1.2)(s·h);甩尾AUC分别为(13.1±1.9)、(12.0±1.7)、(10.4±0.8)、9.5±0.9)、(9.7±1.3)(s·h)。这提示喷他佐辛可剂量依赖地抑制吗啡的镇痛作用。2使用κ受体拮抗剂nor-BNI后,不同剂量喷他佐辛(0、10、30、56、100 mg/kg)与吗啡合用后的压尾AUC分别为(252.2±16.7)、(167.7±11.0)、(145.1±9.8)、(132.6±5.1)、(127.3±8.0)(g·h);热板AUC分别为(28.0±1.7、(25.0±1.6)、(23.0±1.2)、(22.0±1.4)、(21.2±1.3)(s·h);甩尾AUC分别为(14.4±1.8)、(11.2±1.4)、(10.2±0.8)、(9.7±0.7)、(10.1±0.8)(s·h),与上述未使用nor-BNI的各组相比差异均无统计学意义(P>0.05),结果表明kappa受体拮抗剂存在的情况下,大剂量喷他佐辛对吗啡镇痛依然存在抑制作用。结论:喷他佐辛可剂量依赖地抑制啡产生的镇痛作用,该抑制作用与kappa受体激动无关。

内吗啡肽对小鼠树突状细胞免疫功能的影响

目的研究内吗啡肽-1和内吗啡肽-2对小鼠骨髓来源树突状细胞表型和免疫功能的影响。方法从7～8周龄的C57BL/6J小鼠提取骨髓前体细胞培养,经CD11c免疫磁珠分选,获得纯化的树突状细胞(dendritic cells,DC)。未成熟DC用脂多糖或脂多糖+不同浓度内吗啡肽共培养,流式细胞术检测DC的表型;检测内吗啡肽对DC趋化性的影响。在DC和T淋巴细胞共培养的条件下,用氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入测定的方法检测T淋巴细胞的增殖能力。结果内吗啡肽抑制DC的趋化性;与T淋巴细胞体外共培养时,经内吗啡肽-1或内吗啡肽-2处理的DC能抑制T淋巴细胞的增殖反应。上述内吗啡肽的作用都能被Mu阿片受体特异性拮抗剂CTOP翻转或部分翻转,提示内吗啡肽的作用是由Mu受体介导的。结论内吗啡肽可通过作用于Mu阿片受体,改变树突状细胞的部分免疫功能,调节免疫反应。

内吗啡肽在小鼠树突状细胞的诱导表达

目的研究内吗啡肽-1和内吗啡肽-2在小鼠树突状细胞的表达。方法从7～8周龄的C57BL/6J小鼠骨髓提取骨髓前体细胞培养,经CD11c(树突状细胞的特异性标记)免疫磁珠分选,获得纯化的树突状细胞。流式细胞仪分析表明,CD11c阳性细胞纯度达95%以上。免疫荧光染色研究内吗啡肽-1和内吗啡肽-2在树突状细胞的表达;酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA)的方法,检测培养树突状细胞上清液中的内吗啡肽-1和内吗啡肽-2的含量。结果免疫荧光染色表明,活化的树突状细胞内可分泌内吗啡肽-1和内吗啡肽-2;酶免疫测定检测结果表明,不同的Toll样受体(toll like receptor,TLR)配体活化树突状细胞促使分泌不同浓度的内吗啡肽-1和内吗啡肽-2。结论活化的树突状细胞可诱导内吗啡肽的表达。

瑞芬太尼聚己内酯对脊髓缺血再灌注损伤兔体感诱发电位的影响

目的:观察腹主动脉内灌注Mu阿片受体(MOR)激动剂瑞芬太尼聚己内酯(REM-PCL)对脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)兔体感诱发电位(SEP)的影响。方法:30只健康新西兰大白兔随机分为对照组、R组和RG组,每组10只。R组和RG组采用肾下腹主动脉阻断法制备SCIRI模型,于阻断血流时经腹主动脉局部灌注REM-PCL 0.1mg/kg,RG组于REM-PCL灌注结束后再局部灌注MOR拮抗剂GSK1521498(1 mg/kg),对照组局部灌注等容量生理盐水。分别于阻断前,再灌注15、30、60 min及再灌注24 h监测血清神经特异性烯醇化酶(NSE)质量浓度和SEP;再灌注6、12和24 h进行神经行为学评分,然后于再灌注24 h取脊髓组织检测MOR mRNA和感觉神经元异常率。结果:3组血清NSE质量浓度变化、SEP变化、神经行为学评分、脊髓组织MOR mRNA表达水平和感觉神经元异常率差异均有统计学意义(P均<0.05)。RG组上述指标测值及变化趋势与对照组相似(P>0.05)。与对照组和RG组比较,再灌注期间R组血清NSE质量浓度明显较低,SEP OL延长程度较小,IPA较快恢复,神经行为学评分较低;再灌注24 h时,R组脊髓组织MOR mRNA表达水平较高,感觉神经元异常率明显较低(P<0.05)。结论:腹主动脉内灌注REM-PCL可以通过激活MOR,减轻脊髓电生理功能障碍。

口服NKTR-118在OIC患者中的Ⅱ期研究

Nektar Therapeutics公司宣布NKTR-118（Ⅰ）在阿片诱导便秘（OIC）患者中的Ⅱ期随机双盲安慰剂对照研究的阳性头条结果。OIC是最常见的致人衰弱的阿片相关肠功能障碍（OBD）。（Ⅰ）是一种外周阿片拮抗剂，靶向介导OBD的肠内神经系统中的mu阿片受体，每日口服一次。压倒性的证据证明了25mg／天和50mg／天两种不同剂量每天一次的疗效，（Ⅰ）的Ⅱ期研究很早就终止。

脑室注射ACTH对抗羟甲芬太尼引起的镇痛

通常中枢注射促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）能够拮抗阿片的镇痛作用，然而其机制尚未阐明。本实验用辐射热─甩尾法测定痛阈，ｓｃｍｕ型阿片受体高选择性激动剂──羟甲芬太尼（０．８μｇ·ｋｇ－１），引起明显的镇痛效应，然后ｉｃｖＡＣＴＨ。发现小剂量的ＡＣＴＨ（１５．６～２５０ｎｇ）即可剂量依赖性抑制羟甲芬太尼的镇痛效应，其最大抑制率为７７．３％，半数有效量为１０７ｎｇ。单独注射ＡＣＴＨ２５０ｎｇ对基础病阈无影响。结果提示，ＡＣＴＨ在ｍｕ型阿片受体介导的镇痛中起重要作用。

瑞芬太尼聚己内酯对脊髓缺血再灌注损伤中运动诱发电位的影响

目的:应用诱发电位监测脊髓电生理的改变,探讨腹主动脉内灌注Mu阿片受体激动剂REM-PCL对Mu阿片受体信号转导介导的神经元保护效果。通过建立兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)模型,腹主动脉内灌注Mu阿片受体激动剂REMPCL和选择性Mu阿片受体拮抗剂GSK1521498对Mu阿片受体信号转导介导的神经元保护效果和作用机制进行探讨,并应用诱发电位监测脊髓电生理的改变以及REM-PCL干预后的影响,为临床脊髓保护提供理论和实验依据。方法:30只健康新西兰大白兔随机分为对照组(C组)、REM-PCL组(RP组,0.1 mg·kg-1)和REM-PCL+GSK1521498组(RG组,0.1 mg·kg-1REM-PCL+1 mg·kg-1GSK1521498),每组10只。采用肾下腹主动脉阻断法,建立兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)模型。分别于阻断前、再灌注15 min、再灌注30 min、再灌注60 min及再灌注24 h监测血清神经特异性烯醇化酶浓度和MEP变化。再灌注24 h神经行为学评定后取脊髓组织检测Mu阿片受体mRNA表达情况并观察其病理学改变。结果:运动诱发电位可准确反映SCIRI程度。C和RG组血清NSE浓度明显增加而Mu阿片受体mRNA表达明显降低(P<0.01),MEP和脊髓灰质病理损害严重(P<0.01)。RP组血清NSE浓度明显降低而Mu阿片受体mRNA表达明显增加(P<0.01),MEP和脊髓灰质的病理损害程度明显轻于C和RG组(P<0.01),神经行为学评分恢复迅速(P<0.01)。结论:SCIRI能导致脊髓电生理功能损害,应用REM-PCL可以通过激活Mu阿片受体减轻脊髓缺血再灌注损伤。

侧脑室内注射神经肽S对瑞芬太尼痛觉过敏小鼠镇痛效果的研究

目的研究侧脑室内注射神经肽S对瑞芬太尼痛觉过敏小鼠镇痛效果的影响,探究神经肽S对疼痛影响的作用机制。方法将雄性,体质量为20 g±2 g的56只昆明系雄性小鼠,分为对照组、瑞芬太尼组、切口痛组、切口痛-瑞芬太尼组。然后利用切口痛-瑞芬太尼模型进行实验,分为Saline组、NPS 0.1 nmol/L组、NPS 1 nmol/L组、NPS 10 nmol/L组,每组8只;侧脑室注射不同剂量NPS,利用甩尾实验和热板实验观察NPS对切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏小鼠的镇痛效果。做小鼠全脑冠状切片的免疫组化染色,统计分析c-Fos免疫反应在光镜下位于神经元核内蓝黑色颗粒;收集脑组织样本进行蛋白免疫印迹检测Mor和NRSF蛋白的表达水平。结果利用瑞芬太尼联合切口痛成功构建了切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏小鼠疼痛模型,在甩尾实验和热板实验中,发现NPS治疗能有效延长小鼠的甩尾潜伏期和热板实验潜伏应答期;c-Fos免疫组化染色发现NPS治疗能显著减少c-Fos阳性细胞的数目;蛋白免疫印迹实验结果证明NPS治疗能够显著下调Mor蛋白水平,而上调NRSF蛋白的水平,说明NPS能够有效地缓解疼痛,且NPS的治疗作用还呈现剂量依赖性,在0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L 3个剂量当中,随着剂量升高NPS的保护作用越强。结论在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏小鼠疼痛模型中,侧脑室注射NPS能够有效缓解疼痛,对瑞芬太尼引起的痛觉过敏有明显的镇痛效果。