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中华蜜蜂肠粘蛋白AcMucin5AC-1的鉴定和定位分析
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作者 李小青 郭悦 +2 位作者 张洁 周泽扬 党晓群 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1150-1160,共11页
【目的】本研究旨在鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana肠粘蛋白AcMucin5AC-1的结构、分布及对中肠的影响,为解析蜜蜂中肠的生理功能提供理论依据。【方法】利用生物信息学比较分析中华蜜蜂AcMucin5AC蛋白的序列特征;利用RT-qPCR检测AcMuci... 【目的】本研究旨在鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana肠粘蛋白AcMucin5AC-1的结构、分布及对中肠的影响,为解析蜜蜂中肠的生理功能提供理论依据。【方法】利用生物信息学比较分析中华蜜蜂AcMucin5AC蛋白的序列特征;利用RT-qPCR检测AcMucin 5 AC-1在中华蜜蜂4日龄幼虫中肠和表皮以及2日龄幼虫感染中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)后0,12,24,48和72 h时中肠中的表达量。通过原核表达系统对中华蜜蜂AcMucin5AC-1进行表达,亲和层析柱纯化重组蛋白并制备相应多克隆抗体;Western blot检测AcMucin5AC-1在中华蜜蜂健康3-6日龄幼虫中以及4日龄幼虫中肠、表皮和围食膜中的表达,应用间接免疫荧光试验分析AcMucin5AC-1在中华蜜蜂4日龄幼虫中的定位。通过饲喂法利用RNAi沉默中华蜜蜂2日龄幼虫AcMucin 5 AC-1后12,24,48和72 h时分析RNAi干扰效率,利用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法探究RNAi干扰2日幼虫AcMucin 5 AC-1后24,48和72 h时对中华蜜蜂幼虫整体组织形态的影响。【结果】中华蜜蜂基因组中有8个AcMucin5AC基因,其氨基酸序列均含有粘蛋白结构域。RT-qPCR检测结果表明,AcMucin 5 AC-1在中华蜜蜂4日龄幼虫中肠中表达量较表皮中的高,且在感染CSBV病毒的12和72 h时的2日龄幼虫中肠中比对照组显著下调。成功获得约50 kD的重组蛋白AcMucin5AC-1和多克隆抗体,Western blot结果显示在中华蜜蜂3-6日龄幼虫以及4日龄幼虫中肠、表皮和围食膜的总蛋白中均能检测到AcMucin5AC-1。间接免疫荧光试验结果表明AcMucin5AC-1主要定位在4日龄幼虫中肠和围食膜。RNAi效率检测结果表明,2.0μg/头ds AcMucin 5 AC-1干扰24 h时中华蜜蜂AcMucin 5 AC-1较ds EGFP对照组表达量下调92%。HE染色检测结果表明,在AcMucin 5 AC-1的RNAi后72 h时中华蜜蜂幼虫整个肠腔的细胞间的致密程度减弱,形态结构紊乱。【结论】中华蜜蜂AcMucin5AC-1是位于幼虫的中肠和围食膜的粘蛋白,AcMucin 5 AC-1的下调影响中华蜜蜂幼虫中肠的形态,暗示该基因在幼虫中肠发育过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 mucin5ac 原核表达 RNAI 组织定位
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Cdc42蛋白参与中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞黏蛋白高分泌
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作者 何明欣 周向东 +3 位作者 杨雅楼 徐立 张华 李琪 《疑难病杂志》 CAS 2023年第9期982-986,共5页
目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组:对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 ... 目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组:对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 siRNA组、阴性siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Cdc42蛋白的相对含量,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白的表达水平。结果与对照组相比,NE组Cdc42蛋白含量明显增加(P<0.05),细胞MUC5AC蛋白表达水平亦显著增高(P<0.001);与NE组比较,NE+Cdc42 siRNA组的MUC5AC蛋白水平显著降低(P<0.05),其Cdc42蛋白含量亦明显降低(P<0.001);Cdc42 siRNA组以及阴性siRNA组的Cdc42蛋白、MUC5AC蛋白含量相较于对照组变化不大(P>0.05)。结论Cdc42在NE诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的形成过程中可能发挥着重要的介导作用。 展开更多
关键词 气道黏蛋白5AC 细胞分裂周期蛋白42 中性粒细胞弹性蛋白酶 黏液高分泌
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黏液-纤毛标志物Mucin 5AC-acetylated alpha-tubulin在过敏性鼻炎患者鼻黏膜中的表达 被引量:1
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作者 郭沐涛 周穗子 邱前辉 《中国临床新医学》 2023年第1期31-36,共6页
目的探究过敏性鼻炎(AR)患者鼻腔黏液-纤毛清除功能在鼻黏膜分子水平上的损伤表现和严重程度。方法选取2021年3月至2022年3月期间在我院进行鼻中隔偏曲手术的40例患者的下鼻甲黏膜组织,其中AR患者21例(AR组),非AR患者(对照组)19例。通... 目的探究过敏性鼻炎(AR)患者鼻腔黏液-纤毛清除功能在鼻黏膜分子水平上的损伤表现和严重程度。方法选取2021年3月至2022年3月期间在我院进行鼻中隔偏曲手术的40例患者的下鼻甲黏膜组织,其中AR患者21例(AR组),非AR患者(对照组)19例。通过免疫荧光染色方法在蛋白水平上观察及评估黏液分泌标志物Mucin 5AC(MUC5AC)和纤毛标志物acetylated alpha-tubulin(acet.α-tubulin)表达情况。结果与对照组相比,AR组黏液分泌的总免疫荧光强度增加32.365%,纤毛长度缩短将近1/2,纤毛脱落评分上升将近3倍,纤毛总免疫荧光强度下降24.555%。结论AR患者黏液分泌量显著增加,纤毛排列不齐、变短、稀疏以及脱落增加可能是导致AR患者鼻腔黏膜黏液-纤毛清除功能减弱,继而加重AR症状严重程度的分子依据。 展开更多
关键词 过敏性鼻炎 黏液-纤毛清除功能 Mucin 5AC Acetylated alpha-tubulin
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金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠肺组织黏蛋白5AC及水通道蛋白5表达的影响 被引量:25
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作者 柏正平 刘雨 +5 位作者 谭小宁 谭电波 邓秀娟 李仲普 刘俊 谭光波 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第8期54-59,共6页
目的观察金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)、水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,探讨其治疗气道黏液高分泌的可能机制。方法24只SD大鼠随机分成正常组、模型组、金水六君煎组和阿奇霉素组,每组... 目的观察金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)、水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,探讨其治疗气道黏液高分泌的可能机制。方法24只SD大鼠随机分成正常组、模型组、金水六君煎组和阿奇霉素组,每组6只。采用烟熏加气管内脂多糖滴入制作大鼠COPD气道黏液高分泌模型,成模后给予相应药物干预,连续2周。观察大鼠一般情况,小动物肺功能仪检测肺功能,HE染色观察肺组织病理,PAS染色检测气道杯状细胞数及黏液量,RT-PCR和Western blot分别检测肺组织MUC5AC、AQP5基因与蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织HE染色符合COPD病理改变,肺功能及AQP5基因与蛋白表达明显降低(P<0.05),气道杯状细胞数、黏液量增加及MUC5AC基因与蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,金水六君煎组大鼠肺功能明显改善(P<0.05,P<0.01),气道杯状细胞数、黏液量减少及肺组织MUC5AC基因与蛋白表达明显降低(P<0.05),肺组织AQP5基因与蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论金水六君煎可促进肺组织AQP5表达,抑制MUC5AC表达,纠正黏蛋白/水盐比例失衡可能是其治疗COPD气道黏液高分泌的机制之一。 展开更多
关键词 金水六君煎 慢性阻塞性肺疾病 气道黏液高分泌 黏蛋白5AC 水通道蛋白5 大鼠
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红茶提取物在炎性气道黏液高分泌中的作用 被引量:15
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作者 邬海桥 丁阳平 周向东 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期126-129,144,共5页
目的观察茶黄素(TF)各单体在人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)诱导气道黏液高分泌中的作用。方法采用HNE刺激人肺腺癌细胞A549,导致黏液高分泌,以TF各单体(TF1、TF2、TF3)进行干预。采用MTT法测定各单体对A549细胞的活性影响,确定作用剂量后... 目的观察茶黄素(TF)各单体在人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)诱导气道黏液高分泌中的作用。方法采用HNE刺激人肺腺癌细胞A549,导致黏液高分泌,以TF各单体(TF1、TF2、TF3)进行干预。采用MTT法测定各单体对A549细胞的活性影响,确定作用剂量后将A549细胞分为4组进行实验,分别为①对照组:无血清培养基培养;②HNE刺激组:HNE(50 nmol/L)刺激24 h;③TF单体干预组:分别用TF1、TF2、TF3(浓度分别为50、100、200μg/mL)作用24 h后,再予HNE刺激24 h;④AG1478干预组:先用表皮生长因子受体阻断剂AG1478(5μmol/L)处理30 min后,再予HNE刺激24 h。测定不同剂量TF1、TF2、TF3作用后黏蛋白(MUC)的变化及TF3(200μg/mL)作用时间不同(12、24、36 h)后MUC的变化。RT-PCR检测MUC5AC mRNA的变化;ELISA测定MUC5AC蛋白表达的变化。结果HNE刺激组的MUC5AC mRNA表达和MUC5AC蛋白含量显著高于对照组(P<0.01);而给予TF1、TF2、TF3预处理后,与HNE刺激组相比,两指标均明显下调(均P<0.01),且呈剂量依赖关系,其中以TF3作用最明显。TF3的作用时间也与MUC5AC的下调呈正相关;而AG1478干预组对黏液的下调作用较TF各组更强(P<0.01)。结论TF各单体虽不能完全抑制炎性黏液的分泌,但可明显降低炎性气道的黏液高分泌状态,以TF3作用最强。 展开更多
关键词 茶黄素类 黏蛋白5AC 人中性粒细胞弹性蛋白酶
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CCR3在哮喘小鼠气道组织Muc5ac表达中的作用 被引量:3
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作者 王涛 张建勇 +2 位作者 王秀丹 郑飞彦 杨红霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1019-1023,共5页
目的:探讨CCR3在哮喘小鼠气道黏蛋白5ac(Muc5ac)表达中的作用。方法:将50只清洁级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、地塞米松干预组、SB328437干预组及溶剂对照组二甲基亚砜组,各10只。测定BALF中细胞总数、分类,ELISA检测IL-4、T... 目的:探讨CCR3在哮喘小鼠气道黏蛋白5ac(Muc5ac)表达中的作用。方法:将50只清洁级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、地塞米松干预组、SB328437干预组及溶剂对照组二甲基亚砜组,各10只。测定BALF中细胞总数、分类,ELISA检测IL-4、TNF-α,肺组织HE染色,免疫组化和RT-PCR检测Muc5ac、CCR3的表达。结果:在BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、IL-4,TNF-α水平、AB-PAS阳染面积、黏蛋白Muc5ac、CCR3蛋白IOD及Muc5ac mRNA、CCR3 mRNA表达方面,哮喘组与地塞米松干预组、SB328437干预组,具有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。结论:SB328437可抑制肺组织CCR3表达,进而抑制Muc5ac的表达和分泌,从而控制气道炎症。 展开更多
关键词 哮喘 小鼠 黏蛋白5ac(Muc5ac) 趋化因子受体3拮抗剂
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克拉霉素抑制气道黏液高分泌细胞内机制的研究 被引量:9
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作者 罗琳 尤列.皮尔曼 +1 位作者 维克多.科罗索夫 周向东 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期630-634,共5页
目的研究克拉霉素(CLA)抑制气道黏液高分泌的细胞内分子机制。方法运用中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)刺激人类支气管上皮细胞株HBE16构建气道黏液高分泌模型,予以CLA和信号末端调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂U0126进行干预,采用RT-PCR检... 目的研究克拉霉素(CLA)抑制气道黏液高分泌的细胞内分子机制。方法运用中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)刺激人类支气管上皮细胞株HBE16构建气道黏液高分泌模型,予以CLA和信号末端调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂U0126进行干预,采用RT-PCR检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平,ELISA法检测细胞上清液中MUC5AC蛋白含量,Western blotting检测细胞内磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)、磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化c-Jun N端激酶(p-JNK)、磷酸化P38(p-P38)的含量。结果克拉霉素和U0126均能降低气道黏液高分泌模型中MUC5AC基因转录和蛋白表达水平,并且使p-ERK表达水平下降,但对p-EGFR、p-JNK、p-P38的表达无明显作用。结论克拉霉素能抑制细胞内信号通路分子ERK1/2磷酸化水平,从而减少了气道上皮细胞产生MUC5AC,由此发挥抑制气道黏液高分泌的作用。 展开更多
关键词 黏蛋白5AC 中性粒细胞弹性蛋白酶 克拉霉素 信号末端调节激酶
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机械牵张对人气道黏膜上皮细胞黏蛋白5AC表达的影响及其信号通路机制研究 被引量:7
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作者 钟甜 尤列.皮尔曼 +1 位作者 维克多.科罗索夫 周向东 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期397-400,共4页
目的观察机械牵张对人气道黏膜上皮细胞黏蛋白(MUC)表达的影响,并对其信号转导机制进行初步探讨。方法采用多功能小型生物撞击机构建体外培养的人气道黏膜上皮细胞牵张模型,分别给予丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的三条主要通路抑制... 目的观察机械牵张对人气道黏膜上皮细胞黏蛋白(MUC)表达的影响,并对其信号转导机制进行初步探讨。方法采用多功能小型生物撞击机构建体外培养的人气道黏膜上皮细胞牵张模型,分别给予丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的三条主要通路抑制剂:JNK抑制剂(SP600125)、p38蛋白激酶抑制剂(SB203580)及ERK1/2抑制剂(U0126)(浓度均为30μmol/L),并设未进行机械牵张的对照组和单纯机械牵张组。采用流式细胞仪检测牵张前后胞内游离Ca2+荧光强度的变化,激光共聚焦显微镜观察胞内游离Ca2+的分布情况,并分别采用RT-PCR和ELISA方法检测MUC5AC mRNA表达和蛋白分泌量。结果牵张能显著升高人气道黏膜上皮细胞胞内Ca2+浓度、MUC5AC mRNA和蛋白表达(均P<0.01)。U0126和SB203580能抑制牵张所致MUC5AC mRNA和蛋白表达增加(均P<0.01)。结论机械牵张能升高人气道黏膜上皮细胞黏蛋白表达,其机制可能与胞内Ca2+浓度的升高以及ERK1/2、p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 机械牵张 游离钙离子 丝裂素活化蛋白激酶 黏蛋白5AC
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Wnt/β-catenin信号通路参与高渗条件下气道上皮细胞黏液高分泌 被引量:3
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作者 李琪 陈贵华 周向东 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期603-608,共6页
目的研究高渗刺激对人气道上皮细胞(16HBE)黏蛋白(MUC)5AC分泌的影响,以及Wnt/β-catenin信号通路可能的介导作用。方法使用浓氯化钠配置高渗培养液,用高渗培养液刺激16HBE细胞,细胞分为常规培养(阴性对照组)以及高渗培养液刺激3、6、9... 目的研究高渗刺激对人气道上皮细胞(16HBE)黏蛋白(MUC)5AC分泌的影响,以及Wnt/β-catenin信号通路可能的介导作用。方法使用浓氯化钠配置高渗培养液,用高渗培养液刺激16HBE细胞,细胞分为常规培养(阴性对照组)以及高渗培养液刺激3、6、9、12 h组。ELISA法检测MUC5AC分泌量,Western blotting法检测人气道Wnt家族蛋白Wnt1、Wnt2、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt7a、Wnt10a、Wnt10b的表达情况。将Wnt4小片段siRNA转染16HBE细胞,再给予高渗培养液刺激。采用ELISA法检测培养上清的MUC5AC分泌量,采用Western blotting法检测细胞内经典Wnt/β-catenin通路相关信号分子的表达量,细胞免疫荧光法检测核因子(NF)-κB p65核转位情况。结果高渗培养的16HBE细胞上清及胞质中检测到的MUC5AC分泌量显著高于阴性对照组,且MUC5AC分泌量在一定范围内呈时间依赖性(均P<0.05)。高渗刺激组Wnt1、Wnt2、Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a、Wnt10a和Wnt10b表达量较阴性对照组无明显变化(均P>0.05),而Wnt4表达量显著升高(P<0.05)。高渗刺激组细胞内β-catenin和Cyclin D1的相对表达量显著高于阴性对照组,细胞免疫荧光法提示NF-κB p65核转位(均P<0.05);而经转染Wnt4 siRNA后,高渗培养组上清及胞质内MUC5AC分泌量显著低于未转染的高渗培养组(P<0.05),细胞内β-catenin、CyclinD1水平及NF-κB p65的核转位现象也受到显著抑制(均P<0.05)。结论高渗盐水可诱导16HBE细胞MUC5AC高分泌,Wnt/β-catenin信号通路在该效应中有重要的参与作用。 展开更多
关键词 高渗透压 黏蛋白5AC Wnt/β-eatenin信号通路 核因子ΚB
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Elafin在人支气管上皮细胞系16HBE胞质内对黏蛋白5AC生成的影响 被引量:1
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作者 魏华生 尤列.皮尔曼 +1 位作者 维克多.科罗索夫 周向东 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第7期809-813,共5页
目的探讨Elafin在胞质内对表皮生长因子(EGF)诱导的黏蛋白(MUC)5AC生成的影响及其作用机制。方法体外培养人支气管上皮细胞系16HBE,将已构建好的pEGFP-N1-Elafin载体通过LipofectamineTM2000转染到16HBE细胞中,以转染空质粒载体的16HBE... 目的探讨Elafin在胞质内对表皮生长因子(EGF)诱导的黏蛋白(MUC)5AC生成的影响及其作用机制。方法体外培养人支气管上皮细胞系16HBE,将已构建好的pEGFP-N1-Elafin载体通过LipofectamineTM2000转染到16HBE细胞中,以转染空质粒载体的16HBE细胞作为对照,均给予外源性EGF作为刺激物共同孵育。以RT-PCR和ELISA分别检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC mRNA水平和MUC5AC含量。间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜检测细胞核中核因子(NF)-κB的活性。免疫共沉淀法结合Western blot检测SUMO-1-p-IκBα含量。结果转染重组质粒的细胞中MUC5ACmRNA水平、MUC5AC的含量(0.36±0.09)以及NF-κB的活性显著低于转染空载体的对照组细胞(MUC5AC的含量0.55±0.07)(P<0.01),而SUMO-1-p-IκBα的含量则显著高于后者(P<0.01)。结论 Elafin能够通过促进p-IκBα的类泛素化阻止NF-κB的活化,从而下调MUC5AC的生成。 展开更多
关键词 ELAFIN 核因子-ΚB 小泛素样修饰蛋白-1 类泛素化 黏蛋白5AC
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宣肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织病理、气道杯状细胞及黏蛋白5AC的影响 被引量:4
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作者 李先莉 史利卿 +5 位作者 马建岭 季坤 温绍惠 王梁敏 李渊 魏双颖 《中国医药导报》 CAS 2022年第34期8-12,共5页
目的观察宣肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织病理、气道杯状细胞及黏蛋白5AC(MUC5AC)的影响。方法将鼠龄10~12周,体重(230±20)g的40只Wistar雄性大鼠,按随机数字表法分为空白组、模型组、中药组、西药组,每组10只。除... 目的观察宣肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织病理、气道杯状细胞及黏蛋白5AC(MUC5AC)的影响。方法将鼠龄10~12周,体重(230±20)g的40只Wistar雄性大鼠,按随机数字表法分为空白组、模型组、中药组、西药组,每组10只。除空白组正常饲养外,其余各组采用注入脂多糖加熏香烟方法制备COPD大鼠模型。造模完成后中药组给予宣肺健脾方(1 ml/100 g),西药组给予沐舒坦(1 ml/100 g),空白组及模型组给予等量0.9%生理盐水,连续14 d。各组进行苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及分类,进行阿尔辛蓝-过碘酸希夫(AB-PAS)染色观察杯状细胞,行免疫组织化学法检测MUC5AC。结果空白组肺组织结构完整,未见炎症细胞浸润,模型组肺组织结构破坏及炎症反应明显,中药组肺组织结构及炎症反应较模型组改善。模型组BALF中白细胞总数、中性粒细胞数、淋巴细胞数高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中药组BALF中白细胞总数、中性粒细胞数、淋巴细胞数低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。空白组偶有少量杯状细胞,模型组杯状细胞增生高于空白组;中药组、西药组杯状细胞增生低于模型组。模型组相对着色面积高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中药组相对着色面积低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组肺组织MUC5AC蛋白表达高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中药组MUC5AC蛋白表达低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论宣肺健脾方可能通过抑制杯状细胞化生,下调MUC5AC的表达,减少气道黏液高分泌;同时可减轻肺组织病理损害。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 气道黏液高分泌 宣肺健脾方 杯状细胞 黏蛋白5AC
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针刺对干眼症患者泪液黏蛋白5AC表达的影响 被引量:31
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作者 吴德佩 杨军 《中国中医眼科杂志》 2012年第4期267-269,共3页
目的观察针刺治疗干眼症的疗效及对泪液黏蛋白(Mucin,MUC)5AC表达的影响。方法 50例(100只眼)干眼症患者采用针刺局部和远端相结合的方法,取穴睛明、攒竹、太阳、四白等,治疗前后观察患者干眼症状,并行泪液分泌试验(Schirmer I test,SIt... 目的观察针刺治疗干眼症的疗效及对泪液黏蛋白(Mucin,MUC)5AC表达的影响。方法 50例(100只眼)干眼症患者采用针刺局部和远端相结合的方法,取穴睛明、攒竹、太阳、四白等,治疗前后观察患者干眼症状,并行泪液分泌试验(Schirmer I test,SIt)、泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)检查,免疫组化方法检测泪液黏蛋白5AC的表达量。结果泪液分泌量(mm/5 min):治疗前5.2±2.6,治疗后7.3±2.1(t=2.71,P=0.03)。泪膜破裂时间(s):治疗前3.7±1.4,治疗后6.9±3.8(t=2.59,P=0.04)。泪液黏蛋白5AC表达量(μg/ml):治疗前0.77±0.13,治疗后0.99±0.11(t=1.98,P=0.05)。临床疗效:显效43只眼,有效46只眼,无效11只眼,总有效率为89%。结论针刺治疗可以促进泪液黏蛋白5AC的表达,提高泪膜稳定性,明显改善干眼症状。 展开更多
关键词 针刺 干眼症 黏蛋白5AC
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芪仙汤提取物缓解苯并芘诱导的人气道上皮细胞黏蛋白5AC高表达的机制研究 被引量:1
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作者 孙亦鹏 史兆雯 +4 位作者 倪振华 缪夏轶 林玉华 毕俊杰 王雄彪 《上海医学》 CAS 2021年第4期251-256,共6页
目的探讨芪仙汤提取物对苯并芘(BaP)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC的抑制作用及其可能的机制。方法以人支气管黏液上皮细胞NCI-H292细胞株为研究对象,用BaP刺激细胞构建MUC5AC升高模型(模型组),分别用芪仙汤提取物240μg/mL(低浓度... 目的探讨芪仙汤提取物对苯并芘(BaP)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC的抑制作用及其可能的机制。方法以人支气管黏液上皮细胞NCI-H292细胞株为研究对象,用BaP刺激细胞构建MUC5AC升高模型(模型组),分别用芪仙汤提取物240μg/mL(低浓度组)和480μg/mL(高浓度组)处理细胞株,空白组予二甲基亚砜(DMSO)处理。采用CCK-8法检测芪仙汤提取物处理后细胞活性的变化,实时荧光定量PCR检测MUC5AC和细胞色素P4501A1(CYP1A1)mRNA水平,免疫印迹法检测MUC5AC、CYP1A1、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、磷酸化ERK(p-ERK)1/2、相对分子质量为90000核糖体S6激酶(RSK)和磷酸化p90 RSK(p-p90 RSK)蛋白质表达水平,荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果浓度≤480μg/mL的芪仙汤提取物对NCI-H292细胞株活力无显著影响。与模型组相比,芪仙汤低、高浓度组MUC5AC蛋白质和MUC5AC mRNA水平均显著降低(P<0.05或0.01),ROS荧光强度值均显著降低(P<0.05或0.01),CYP1A1 mRNA水平均显著降低(P值均<0.01),p-ERK 1/2和p-p90 RSK蛋白质水平亦显著降低(P值均<0.01)。结论芪仙汤可下调BaP诱导的人气道上皮细胞MUC5AC基因和蛋白质高水平表达,其机制与抑制芳香烃受体活化介导的ROS和ERK通路激活相关。 展开更多
关键词 芪仙汤 黏蛋白质类 黏蛋白5AC 活性氧 苯并芘 芳香烃受体
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IL-32及IL-5对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及地塞米松的干预作用 被引量:2
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作者 郑飞彦 代大华 +2 位作者 王莉 杨红霞 张建勇 《现代医药卫生》 2017年第19期2912-2914,共3页
目的探讨白介素32(IL-32)及IL-5对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及地塞米松的干预作用。方法将清洁级雄性BALB/c小鼠30只随机分成生理盐水(NS)对照组(NS组)、哮喘模型(AS)组(AS组)、AS+地塞米松(DEX)干预组(AS+DEX组),各10只。AS组第1... 目的探讨白介素32(IL-32)及IL-5对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及地塞米松的干预作用。方法将清洁级雄性BALB/c小鼠30只随机分成生理盐水(NS)对照组(NS组)、哮喘模型(AS)组(AS组)、AS+地塞米松(DEX)干预组(AS+DEX组),各10只。AS组第1、13天予0.2 mL卵清蛋白(OVA)混悬液腹腔注射致敏,第19天予5%OVA溶液雾化激发,每次30 min,连续5 d。AS+DEX组在雾化激发前30 min予地塞米松(2 mg/kg)腹腔注射干预,连续5 d,余同AS组。NS组用生理盐水进行致敏和激发。用酶联免疫吸附试验检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子IL-32吸光度(OD)和IL-5含量,苏木精-伊红染色及阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色肺组织,逆转录-聚合酶链反应检测Muc5ac mRNA表达,免疫组织化学法检测Muc5ac及IL-32蛋白表达。结果 AS组小鼠BALF中IL-5含量、IL-32 OD、AB-PAS阳性表达面积、Muc5ac mRNA,Muc5ac及IL-32蛋白表达均较NS组明显增高,AS+DEX组上述指标均较AS组明显降低,但仍高于NS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-32和IL-5可促进哮喘小鼠气道黏蛋白Muc5ac高表达,DEX可能通过下调二者的表达抑制黏液高分泌。 展开更多
关键词 哮喘 气管 白细胞介素5 白细胞介素32 地塞米松 黏蛋白5AC 小鼠
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AMD3100干预CXCR4对哮喘小鼠气道黏蛋白MUC5ac蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 王莉 刘小静 张建勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期1082-1087,共6页
目的探讨AMD3100(Plerixafor,普乐沙福)干预CXCR4对哮喘小鼠气道黏蛋白MUC5ac的影响及可能机制。方法6~8周BALB/C雌性小鼠分为正常组(NS组)、哮喘组(AS组)和CXCR4阻滞剂AMD3100组(AMD组),各8只。卵清蛋白(OVA)致敏后,雾化吸入OVA激发制... 目的探讨AMD3100(Plerixafor,普乐沙福)干预CXCR4对哮喘小鼠气道黏蛋白MUC5ac的影响及可能机制。方法6~8周BALB/C雌性小鼠分为正常组(NS组)、哮喘组(AS组)和CXCR4阻滞剂AMD3100组(AMD组),各8只。卵清蛋白(OVA)致敏后,雾化吸入OVA激发制备哮喘模型,各组在激发前进行干预。通过酶联免疫吸附法检测肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-4,IL-5及CXCR4,肺组织行HE染色、AB-PAS染色观察肺组织病理学改变;免疫组织化学检测CXCR4、气道MUC5ac蛋白表达变化,RTPCR检测肺组织CXCR4 mRNA表达水平。结果AMD3100组小鼠BALF中IL-4、IL-5、CXCR4水平、支气管周围炎症病理评分、气道上皮杯状细胞和黏液物质阳性相对着色面积、肺组织MUC5ac蛋白、CXCR4蛋白表达及CXCR4 mRNA表达水平较哮喘组降低,但仍高于正常对照组(P<0.05)。结论AMD3100干预CXCR4蛋白的表达,抑制哮喘小鼠气道炎症反应及下调MUC5ac的表达,减轻气道黏液高分泌,改善哮喘症状。 展开更多
关键词 支气管哮喘 AMD3100 CXC趋化因子受体4 MUC5ac蛋白
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Qingfei oral liquid downregulates TRPV1 expression to reduce airway inflammation and mucus hypersecretion injury caused by respiratory syncytial virus infection and asthma in mice 被引量:1
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作者 Xiao-Ping Jing Wu-Ning Yan +1 位作者 Wei-Wei Cheng Hai-Rong Zeng 《Traditional Medicine Research》 2020年第4期229-237,共9页
Objective:Qingfei oral liquid(QF),an experimental Chinese medicine prescription developed from the ancient priscription of traditional Chinese medicines Ma Xin Shi Gan decoction and Tingli Dazao Xie Fei decoction,has ... Objective:Qingfei oral liquid(QF),an experimental Chinese medicine prescription developed from the ancient priscription of traditional Chinese medicines Ma Xin Shi Gan decoction and Tingli Dazao Xie Fei decoction,has been effectively used since decades to treat patients with viral pneumonia and asthma.In our previous study,we had demonstrated that QF can significantly reduce airway hyperresponsiveness,hyperemia,lung tissue edema,inflammatory lung tissue infiltration in mice,airway mucus secretion,and peripheral airway collagen hyperplasia;however,its mechanism of action is unknown.Methods:Fifty 6–8-week-old male BALB/c mice were equally and randomly divided into five groups:the control,ovalbumin(OVA),OVA+respiratory syncytial virus(RSV),QF,and dexamethasone(Dxms)groups.The QF group was administered QF at 1.17 g·kg−1·d−1,the Dxms group received dexamethasone injections at 0.2 mg·kg−1·d−1,and the remaining groups were administered PBS.Inflammation in the lung tissue was assessed by hematoxylin and eosin(HE),periodic acid–Schiff(PAS),and Van Gieson staining.ELISA was used to evaluate the IL-13,IL-25,and IL-33 in the mice.Western blotting was used to examine changes in the proteins levels of transient receptor potential vanilloid-1(TRPV1)and mucin 5AC(MUC5AC)in the lung tissues of mice.Results:Histopathological evaluation revealed that the OVA and OVA+RSV groups exhibited lung tissue edema and inflammatory lung tissue infiltration in the HE staining and airway secretions in the PAS staining;collagen hyperplasia around the airway was increased in these two groups compared with the control group.The QF group exhibited significantly reduced lung tissue edema,inflammatory lung tissue infiltration,airway secretions,and collagen hyperplasia around the airway compared with the OVA+RSV group.We analyzed the serum levels of IL-13,IL-25,and IL-33 in the mice and found that these levels were higher in the OVA and OVA+RSV groups than in the control group(P<0.05 in the OVA group,P<0.01 in the OVA+RSV group).The QF group exhibited significantly decreased serum levels of IL-13,IL-25,and IL-33 compared with the OVA+RSV group(all P<0.05).The Dxms group also exhibited significant decreases in the serum levels of IL-13 and IL-33(all P<0.05)but no significant decrease in the serum levels of IL-25 compared with the RSV+OVA group.Finally,we examined the protein levels of TRPV1 and MUC5AC in the lung tissues of mice using Western blotting.After identifying RSV infection in the mice with asthma,the protein levels of TRPV1 and MUC5AC in the lung tissues of mice were significantly higher than those in the control group(P<0.05,P<0.01).We found that compared with RSV+OVA,QF can significantly downregulate the protein level of TRPV1;further,the protein level of MUC5AC was also significantly reduced(all P<0.001).Conclusion:QF can inhibit RSV replication and reduce airway inflammation and mucus hypersecretion injury caused by RSV infection and asthma,and its mechanism of action may be associated with the downregulation of TRPV1 expression and a decrease in airway mucus hypersecretion injury. 展开更多
关键词 Qingfei oral liquid Viral pneumonia ASTHMA Respiratory syncytial virus infection Transient receptor potential vanilloid-1 Mucin 5AC
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慢性阻塞性肺疾病对大鼠胃黏膜化学屏障黏蛋白5AC的影响
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作者 忻晓霞 丁瑞峰 +3 位作者 黎敏 吴昆 张爱民 陈楠 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期2060-2063,共4页
目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPP)大鼠胃黏膜损伤及胃黏膜中黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达水平。方法将大鼠随机分为实验组和对照组,每组8只。实验组用熏香烟联合气道内滴注脂多糖建立COPD模型;对照组不做处理。实验组第1天和第14天予气道内... 目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPP)大鼠胃黏膜损伤及胃黏膜中黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达水平。方法将大鼠随机分为实验组和对照组,每组8只。实验组用熏香烟联合气道内滴注脂多糖建立COPD模型;对照组不做处理。实验组第1天和第14天予气道内注入脂多糖0.2 mL,第2~28天(第14天除外)置于烟熏箱内被动吸烟。用透射电镜观察胃黏膜的改变情况,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠胃黏膜MUC5AC蛋白的表达水平;用实时荧光定量聚合酶链反应法检测MUC5AC mRNA的表达水平。结果透射电镜观察到实验组大鼠胃黏膜胃主细胞排列稍不规则,胞质内可见丰富的酶原颗粒(ZG),酶原颗粒密度稍不均匀,胞质内线粒体(M)呈椭圆形或短杆状,线粒体大多内脊模糊、少数线粒体轻度肿胀、外膜破裂;粗面内质网(RER)丰富、排列稍不规则,内质网轻度肿胀、结构稍模糊,对照组无上述表现。对照组和实验组胃黏膜MUC5AC蛋白的表达量分别为(77.07±8.89)和(54.76±13.85)pg·mL^(-1),MUC5AC mRNA表达水平分别为1.01±0.25和0.32±50.21,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论COPD对大鼠胃黏膜可造成损伤,其损伤可能与胃黏膜化学屏障MUC5AC的减少有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 胃黏膜 黏蛋白5AC
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黏蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC和MUC6)在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义 被引量:6
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作者 庄婷 薛梅 +5 位作者 房爱菊 管冰心 梁艳 王志蕙 王妍 孟斌 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第5期107-111,共5页
目的检测黏蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC和MUC6)在乳腺浸润性导管癌中的表达,并探讨其临床病理学意义。方法收集207例乳腺浸润性导管癌标本,应用组织芯片以及免疫组化等技术对黏蛋白家族成员M UC1、M UC2、M UC5AC和M UC6进行检测,并对其与... 目的检测黏蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC和MUC6)在乳腺浸润性导管癌中的表达,并探讨其临床病理学意义。方法收集207例乳腺浸润性导管癌标本,应用组织芯片以及免疫组化等技术对黏蛋白家族成员M UC1、M UC2、M UC5AC和M UC6进行检测,并对其与临床病理学特征的关系进行分析。结果 M UC1在89.4%的被检测病例中表达。MUC1高表达的乳腺癌病例更倾向于具有低组织学级别、雌激素受体(ER)阳性、无淋巴结转移等特点。MUC1的亚细胞定位,即胞浆伴胞膜表达与乳腺癌术后复发转移具有相关性。MUC2的阳性率很低,仅为4.3%。MUC5AC与MUC6在患者标本中的表达率分别是42.0%和22.2%。除了MUC5AC与低级别导管癌、ER阳性有关,以及MUC6与HER-2呈正相关外,与乳腺癌其他因素均无明显相关性。结论 MUC1在大多数乳腺浸润性导管癌中都有表达,而MUC2、MUC5AC及MUC6的表达率则相对较低。MUC1的异位表达可能是潜在的预后不良因素。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 MUC1 MUC2 MUC5AC MUC6 组织芯片
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Elafin对气道上皮细胞黏蛋白5AC的调节作用 被引量:3
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作者 刘峰 周向东 +2 位作者 余红梅 李琪 钟有清 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期296-300,共5页
目的探讨天然内生多肽Elafin对气道上皮细胞黏蛋白5AC(MUC5AC)的调节作用。方法通过培养气道上皮细胞,选择采用香烟烟雾提取物(CSE)以及脂多糖(LPS)作为刺激因素,使用细胞免疫荧光法以及ELISA法,分别检测各组气道上皮细胞MUC5AC的胞内... 目的探讨天然内生多肽Elafin对气道上皮细胞黏蛋白5AC(MUC5AC)的调节作用。方法通过培养气道上皮细胞,选择采用香烟烟雾提取物(CSE)以及脂多糖(LPS)作为刺激因素,使用细胞免疫荧光法以及ELISA法,分别检测各组气道上皮细胞MUC5AC的胞内蛋白以及胞外蛋白分泌的表达情况。结果单纯LPS刺激组细胞内的MUC5AC蛋白的分泌水平为(0.785±0.005)μg/ml,单纯CSE刺激组细胞内的MUC5AC蛋白的分泌水平为(0.803±0.005)μg/ml,均较对照组明显增多(均P<0.01)。在LPS刺激前予Elafin预处理组细胞内的MUC5AC蛋白的分泌水平为(0.363±0.003)μg/ml,显著低于单纯LPS刺激组(P<0.01)。在CSE刺激前予Elafin预处理组细胞内的MUC5AC蛋白的分泌水平为(0.406±0.006)μg/ml,显著低于单纯CSE刺激组(P<0.01)。单纯予Elafin处理组细胞内的MUC5AC蛋白的分泌水平先后为(0.176±0.002)μg/ml及(0.193±0.004)μg/ml(P<0.05),均较对照组显著降低。结论 Elafin可以通过阻断气道黏蛋白的生成及分泌,从而达到抑制气道黏液高分泌的目的。 展开更多
关键词 ELAFIN 气道上皮细胞 黏蛋白5AC 气道黏液高分泌
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黏蛋白MUC5AC与眼病的关系 被引量:3
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作者 祁媛媛 赵少贞 《国际眼科纵览》 2014年第3期160-164,共5页
眼表黏蛋白MUC5AC是由结膜杯状细胞分泌的大分子胶样分泌性黏蛋白,其溶解于泪膜的水液层,具有清理眼表碎屑、防止眼表结构受到伤害、润滑眼表、促进泪液排出、维持泪膜稳定、防止病原体侵入、对眼表止血等作用.MUC5AC黏蛋白与许多眼表... 眼表黏蛋白MUC5AC是由结膜杯状细胞分泌的大分子胶样分泌性黏蛋白,其溶解于泪膜的水液层,具有清理眼表碎屑、防止眼表结构受到伤害、润滑眼表、促进泪液排出、维持泪膜稳定、防止病原体侵入、对眼表止血等作用.MUC5AC黏蛋白与许多眼表疾病有密切关系.感染性疾病、免疫性疾病、准分子激光手术、配戴角膜接触镜及维生素缺乏等均可引起MUC5AC表达水平的下降或反应性升高,引起多种临床症状,并使眼表抵御外界侵袭的能力下降,发生干眼、眼表过敏性疾病、变性类疾病等. 展开更多
关键词 眼表 黏蛋白MUC5AC 眼疾病
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