基于全时段多波长融合特征定量指纹图谱的满药仙灵脾颗粒质量控制方法研究

目的建立全时段多波长融合特征定量指纹图谱,为仙灵脾颗粒质量控制提供科学依据。方法选取270 nm、327 nm、353 nm 3个波长,建立10批仙灵脾颗粒的高效液相(HPLC)指纹图谱,确定18个共有峰,通过对照品指认出8个成分;指纹图谱与多指标成分含量测定结合,建立全时段多波长融合特征定量指纹图谱,并将8个成分进行相对于内标物柚皮苷的含量测定;同时选取5个批次的仙灵脾颗粒,对其8个成分进行绝对定量,确定建立的含量测定方法的误差率。结果建立了全时段多波长融合特征定量指纹图谱,运用其对仙灵脾颗粒指认出的成分进行相对定量,其结果与绝对定量相比,误差率小于5%。结论所建立的方法准确可靠,可用于仙灵脾颗粒的质量控制,并为中药复方的质量评价提供参考。

鼻渊通窍颗粒全时段等基线多波长融合指纹图谱研究及质量标志物预测分析

目的构建鼻渊通窍颗粒的全时段等基线多波长融合指纹图谱,并对其质量标志物(QMarker)进行分析预测。方法采用超高效液相色谱法,结合多波长融合技术,对3波长(286 nm、300 nm、330 nm)的色谱数据利用计算机编程软件实现多波长融合,建立同时反映3个波长信息的指纹图谱,并利用相关文献和数据库预测鼻渊通窍颗粒潜在的有效物质、靶点和通路,构建“成分-靶点-通路”网络,最后基于“五原则”预测鼻渊通窍颗粒的Q-Marker。结果建立了鼻渊通窍颗粒全时段等基线多波长融合指纹图谱,确定了22个共有峰并指认出14个化学成分;通过网络药理学构建了包含鼻渊通窍颗粒16个成分、44个靶点、20条相关通路的“成分-靶点-通路”网络,分析得出以上16种成分均可能为鼻渊通窍颗粒的有效物质;通过“五原则”对Q-Marker进行预测,发现绿原酸、阿魏酸、连翘酯苷A、黄芩苷、盐酸麻黄碱、丹酚酸B、蒙花苷、盐酸伪麻黄碱基本满足“五原则”,建议将以上8种成分作为鼻渊通窍颗粒的Q-Marker。结论本研究利用全时段等基线多波长融合,成功构建了鼻渊通窍颗粒的指纹图谱,并预测了Q-Marker,可为鼻渊通窍颗粒质量的全面控制提供参考。

多波长自动融合指纹图谱策略及其在蜂胶质量评价中的应用

提出了一种简化数据处理过程的多波长自动融合指纹图谱策略,并应用于蜂胶乙醇提取物的质量评价。运用超高效液相色谱(UPLC)技术对5个厂家的15批蜂胶乙醇提取物进行220、245、270、320 nm的多波长检测。样品采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(3 mm×100 mm,2.7μm)色谱柱进行分离;以甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行全峰匹配,实现了每个样品多个波长下各色谱峰数据的自动融合。以270 nm单波长为对照,比较其与多波长融合在共有色谱峰、相似度评价、聚类分析、主成分分析方面的差异。蜂胶多波长融合指纹图谱包含33个特征峰,其中14个特征峰可定性,分别为咖啡酸、ρ-香豆酸、阿魏酸、异阿魏酸、3,4-二甲氧基肉桂酸、肉桂酸、槲皮素、山奈素、芹菜素、异鼠李素、乔松素、白杨素、高良姜素、咖啡酸苯乙酯。各批次特征峰保留时间的相对标准偏差(RSD)均小于1.00%,峰面积RSD为14.39%~112.02%,平均值为37.94%。15批蜂胶融合指纹图谱的相似度为0.902~0.994,主成分分析、聚类分析均可将样品分为4类。蜂胶270 nm单波长的指纹图谱包含32个特征峰,12个特征峰可定性。15批蜂胶单波长指纹图谱的相似度为0.928~0.997,主成分分析、聚类分析均可将样品分为3类。相比于270 nm单波长,多波长融合的相似度评价更敏感,主成分分析和聚类分析更准确。该多波长自动融合指纹图谱策略可对多波长数据进行快速、自动处理,丰富不同组分在各波长下的色谱信息,提高蜂胶指纹图谱差异评价的准确性。

基于多波长融合HPLC指纹图谱结合多成分定量的桑叶质量控制研究

目的建立多波长融合高效液相指纹图谱结合多成分定量测定桑叶的分析方法,为桑叶的质量评价和质量控制提供参考。方法桑叶水提取物制成干浸膏粉后,用体积分数70%甲醇超声提取30 min,色谱柱为ZORBAX SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为体积分数0.1%甲酸甲醇溶液-体积分数0.02%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1),进样体积为10μL,柱温为35℃,指纹图谱检测波长为254、285、300、312和344 nm,含量测定检测波长为254 nm。结果运用多波长融合技术对5波长指纹图谱进行拟合,建立桑叶融合指纹图谱,确立52个共有峰,指认6个特征峰,并采用系统指纹定量法对桑叶进行定性及整体定量分析;同时结合6个特征组分的准确含量测定,对桑叶品质进行综合评价。结果显示,10批不同产地的桑叶质量差异较大。结论所建立的方法全面的反映不同地域来源的桑叶品质,可为桑叶药材的质量控制提供更检测依据。

四波长融合指纹图谱评价金卷升板胶囊质量

目的建立金卷升板胶囊四波长融合色谱指纹图谱。方法采用高效液相色谱法,分别于254,275,330,360 nm波长处进样检测,所得图谱导入中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统4. 0版软件,建立对照指纹图谱,采用系统指纹定量法对11批样品进行质量评价。结果 11批样品共有65个共有峰,其中5号峰为没食子酸峰,12号峰为绿原酸峰,37号峰为黄芩苷峰,49号峰为芦荟大黄素峰,64号峰为大黄素甲醚峰;样品质量等级,S7和S10质量好,S1,S2,S3,S5,S6,S8,S9质量良好,S4和S11质量中等。结论基于多波长融合技术的系统指纹定量法可为金卷升板胶囊的质量评价提供参考。

基于全时段多波长融合指纹图谱的中药木蝴蝶中总黄酮类成分研究

目的利用自主研发的全时段多波长融合软件,建立中药木蝴蝶有效组分的指纹图谱。方法采用高效液相色谱法,Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),0.1%甲酸水溶液(A),流动相为乙腈(B),进行梯度洗脱(0~10 min,15%~57%B;10~15 min,57%~65%B),柱温:30℃,检测波长:256、280、300、320 nm,流速为0.4 m L·min^(-1)。结果不同产地的中药木蝴蝶指纹图谱与参照图谱相比相似度均>0.9,但是各产地有一定的差异性,根据聚类分析大体可分为3类,其中大理、广西、亳州、四川为一类,昆明、贵州为一类,丽江、湖南为一类。结论建立了中药木蝴蝶有效组分全时段多波长融合指纹图谱,经方法学考察,该方法简便、准确、重复性好,可以为中药木蝴蝶的质量控制提供依据。

栀子多波长融合HPLC指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法(HPLC)建立栀子药材的特征图谱,为栀子药材的质控提供依据。方法采用Phenomenex Luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液变波长梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温35℃。结果通过测定10批不同批号栀子药材,标定9个共有峰,并通过"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版",计算10批药材相似度均在0.9以上。结论此法重复性好,结果准确可靠,为更好地控制该药材的内在质量提供了科学依据。

土木香、总状土木香药材醇提部分的分时段多波长融合指纹图谱鉴别

目的构建土木香、总状土木香药材醇提物的多波长融合指纹图谱,以实现两种药材的种属鉴别。方法采用高效液相色谱法—二极管阵列检测器联用(HPLC-DAD)法构建两种药材的指纹图谱,采用SPSS 19.0、SIMCA-P11.5 Demo软件对24批药材聚类分析、主成分分析,采用夹角余弦法计算24批药材的相似度。结果成功构建了24批药材的多波长融合指纹图谱,聚类分析和主成分分析结果发现,样本分为两大类:S7~S12、S22~S24样本为一类,即总状土木香;S1~S6、S13~S21样本为一类,即土木香,其分类结果与原植物形态学鉴定一致。结论总状土木香、土木香醇提物的化学特征性成分具有一定的差异,所构建的多波长融合指纹图谱方法可初步实现两种药材的鉴别。

附子理中丸多波长融合HPLC指纹图谱研究

目的:采用反相高效液相色谱法对附子理中丸融合指纹图谱进行研究。方法:采用CenturySILC18BDS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱(0～10min,3%→7%B;10～20min,7%→15%B;20～60min,15%→70%B并保持10min);流速1.0mL·min-1;柱温(30.0±0.2)℃;检测波长为265,280,254,230nm。结果:运用多波长融合指纹图谱技术对色谱图进行处理,确立31个共有峰,同时建立了附子理中丸的统一化色谱指纹图谱,并用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件对四波长融合后的指纹图谱进行数字化评价,结果表明融合后的指纹图谱信息更加丰富。结论:所建立的多波长融合指纹图谱可用于附子理中丸的质量控制。

复方黄白胶囊的多波长融合HPLC指纹图谱

目的:建立复方黄白胶囊的高效液相指纹图谱,为其质量控制提供新的方法。方法:运用主成分分析法获取多波长融合色谱指纹图谱。Agilent Zorbax SB-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测波长210～400 nm。通过复方黄白胶囊与药材阴性样品图谱比对,判别色谱峰的来源,采用窗口目标检测因子分析法确定色谱峰化学成分的归属。结果:10批复方黄白胶囊样品的融合指纹图谱与共有模式间的相似度>0.9。融合指纹图谱中识别出药材来源的共有峰共计25个,其中13个色谱峰化学成分的归属得到了确认。结论:建立的多波长融合指纹图谱可用于复方黄白胶囊的质量控制。

栀子全时段融合指纹图谱的构建及特征峰的鉴定

目的建立栀子的指纹图谱并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS)对其共有峰进行定性分析。方法采用Kromasil 100-5 C18柱,以乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,体积流量为1 m L/min,柱温为35℃,检测波长为238、327、440 nm。使用Matlab 7.1软件编程,对3波长下的CSV格式数据进行全时段融合。结果各色谱峰分离度良好,3波长融合指纹图谱全面体现了栀子238、327、440 nm特征吸收波长的指纹信息,标定20个共有峰,并完成其中16个成分的鉴定。10批不同批次的栀子指纹图谱与对照指纹图谱之间相似度较好,相似度大于0.90以上。结论实现了栀子融合指纹图谱的测定,同时解析了图谱中的化学组成,并制定了主成分与栀子苷相对峰面积的范围,为全面控制药材质量提供了数据支撑。

双莲方全时段多波长融合HPLC指纹图谱

目的:建立临床有效方剂双莲方的全时段多波长融合指纹图谱,为双莲方的质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法,Welch Ultimate LP-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.1%甲酸水(A)-甲醇(B)进行梯度洗脱(0~20 min,25%~60%A;20~40 min,60%~65%A%;40~70 min,65%~45%A),流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长254,300,320,365 nm。结果:以木犀草素的色谱峰为参照峰,共确定18个色谱峰,建立了临床有效方剂双莲方的全时段多波长指纹图谱。根据此图谱,对其他成分进行相对定量,规定双莲方中其他成分相对木犀草素的含量不得低于0.39,0.24,0.46,0.45,0.73,0.28,0.16,0.41,0.51,2.37,0.77,0.22,0.60,0.36,0.62,0.80,0.52,0.96。结论:该方法简单、准确、科学,适用于双莲方的质量评价。

气滞胃痛颗粒全时段多波长融合指纹图谱研究及多成分定量分析

目的:采用全时段多波长融合指纹定量为主要技术手段,对气滞胃痛颗粒进行质量控制。方法:Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.02%甲酸溶液-乙腈,线性梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测器波长230,254,283 nm,使用Matlab软件编程,对dif格式数据进行全时段多波长融合。结果:白芍药苷在56.5～452 mg.L-1,芍药苷在107～856 mg.L-1,甘草苷在73.4～687 mg.L-1,柚皮苷在109～872 mg.L-1,新橙皮苷在48.0～384 mg.L-1,甘草酸盐在38.6～308 g.mL-1线性关系良好,r均为0.999 8。结论:该方法简便、准确,重复性好,可以为气滞胃痛颗粒的质量控制提供依据。

多波长覆盖融合指纹图谱评价不同产地川芎药材差异性

目的:建立10批不同产地川芎药材多波长覆盖融合指纹图谱,并对共有峰进行初步指认,通过指纹图谱比较不同产地川芎药材的差异性,为其质量控制和药材鉴别提供依据。方法:采用超高液相色谱法建立不同产地川芎药材的指纹图谱;采用全时段多波长融合技术对dif数据进行多波长融合;采用Spss 19.0数据统计软件,对不同产地川芎药材的共有峰进行聚类分析,区别其差异;采用Q-TOF-MS法对指纹图谱中的共有峰进行指认。结果:建立了川芎药材的多波长融合指纹图谱,确定了20个共有峰并对其中的8个峰进行了指认,通过聚类分析和相似度评价可知云南川芎与其他产地的川芎相比存在着一定的差异性。结论:该指纹图谱重复性良好,能够区分不同产地川芎药材,可作为川芎药材质量评价的一种手段。

UPLC-Q-TOF-MS联用研究不同厂家前列癃闭通片指纹图谱

目的通过建立前列癃闭通片(Qianlielong Bitong Tablets,QBT)的UPLC指纹图谱,考察了9个厂家58批次QBT的质量,为完善该制剂的质量控制奠定基础。方法采用UPLC法,色谱柱Eclipse Plus C18 RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,采用全时段多波长融合技术,体积流量0.3 mL/min;柱温30℃。建立QBT的指纹图谱,并对各样品的指纹图谱进行相似度评价,结合聚类分析评价58批样品的质量,指认了指纹图谱中主要共有峰的化学成分并确定了其药材归属。结果首次建立QBT的UPLC指纹图谱,对其中16个共有峰进行了化学成分鉴定,分别是辛弗林(1号峰)、虎杖苷(2号峰)、金丝桃苷(3号峰)、新圣草苷(4号峰)、柚皮苷(5号峰)、橙皮苷(6号峰)、新橙皮苷(7号峰)、枸橘苷(8号峰)、朝藿定A(9号峰)、朝藿定B(10号峰)、朝藿定C(11号峰)、淫羊藿苷(12号峰)、芒柄花素(13号峰)、宝藿苷(14号峰)、大黄素(15号峰)、大黄素甲醚(16号峰),确定了16个特征峰来源于方中4味中药,峰1、4~8归属枳壳药材,峰2、3、15、16归属虎杖药材,峰9~12、14归属淫羊藿药材,峰13归属黄芪药材。对9个生产企业58批次样品进行相似度评价,相似度分布在0.600~0.912,通过聚类分析大致可聚为4类。结论建立QBT的指纹图谱,该方法简便、可靠,为进一步评价和监测QBT的质量提供参考。