野蔷薇花瓣转录组分析

为了揭示野蔷薇(Rose multiflora Thunb.)花瓣开放过程中花瓣扩展相关基因的表达情况,试验以野蔷薇为材料,通过RNA-seq技术分析不同开放阶段的花瓣中差异基因的表达,为进一步深入研究野蔷薇花瓣转录水平上的发育调控提供依据。结果表明:转录组分析组装得到52865个单基因(Unigenes),通过对NR数据库的比对,功能注释匹配物种中,与野蔷薇匹配的物种前3位为野草莓(Fragaria vesca subsp.vesca)(36.17%)、粳稻(Oryza sativa Japonica)(13.65%)、棉花(Gossypium hirsutum)(4.04%)。对花瓣开放的3个比较组(FB_CP vs FB_GP,FB_YP vs FB_CP,OF_WP vs FB_YP)的差异基因比较,各阶段的差异基因分别为642、902、1899个。通过对不同开花阶段花瓣扩展相关基因表达分析,可能受EXP,XTH基因家族及细胞壁合成、修饰和水解相关基因XYL,CES的作用。

基于psbA-trnH分析的何首乌野生居群遗传多样性

对产自不同省区的何首乌〔Fallopia multiflora(Thunb.)Harald.〕17个野生居群85个单株的psbA-trnH序列进行了扩增和分析,在此基础上分析了居群间的遗传多样性,并采用NJ法对85个单株进行了聚类分析。结果表明:供试85个单株的psbA-trnH序列长度为384 bp;其中,变异位点为167 bp,简约信息位点为53 bp,分别占序列总长度的43.5%和13.8%。变异类型主要为碱基缺失和替换;变异位点主要集中在235～281 bp区域,根据位点变异情况可将17个居群大体分为3类。各居群间的遗传距离为0.000～0.172,其中,贵州居群与其他16个居群间的遗传距离为0.167～0.172,而其他16个居群间的遗传距离为0.000～0.017。17个居群间的核苷酸多样性指数(Pi)、遗传分化系数(Nst)和基因流(Nm)分别为0.028 56、0.918 68和0.04;除贵州居群外其他16个居群的Pi、Nst和Nm分别为0.015 68、0.837 19和0.10;贵州居群与其周边省区(四川、云南、广西、湖南和湖北)居群的Pi、Nst和Nm分别为0.047 99、0.937 62和0.03。在NJ系统树上,17个居群可聚为4支,且大部分居群的供试单株聚在同一分支中;仅贵州居群单独聚为一支,与序列分析的划分结果基本一致。由研究结果可见:野生何首乌居群总遗传变异的91.868%来自居群间,8.132%来自居群内,居群间的基因交流较少;除贵州居群外其余16个居群的整体遗传多样性水平偏低,说明何首乌居群整体多样性水平在很大程度上受贵州居群的影响。

不同地区何首乌无机元素含量的比较

采用ICP法测定了不同地区何首乌植物及其生境土壤中的15种元素(Al、B、Ba、Ca、Cu、Fe、K、Mg、Mn、Na、Ni、P、Sr、Ti、Zn),分析比较了各种元素在不同地区何首乌体内和生境土壤中的分布规律及不同地区何首乌对无机元素的吸收富集能力.结果表明,不同地区何首乌和土壤中无机元素含量存在着显著差异,德庆、井冈山、靖西三地何首乌的Mn含量较高;不同地区何首乌对元素的富集系数无显著性差异,而何首乌对不同无机元素的富集系数则有显著差异,主要表现在对Ca、K、Mg、Sr的吸收富集能力较强.

超声波-微波协同提取何首乌多糖的工艺研究

研究了超声波-微波协同提取何首乌[Fallopia multiflora(Thunb.)Harald.]多糖的最佳工艺条件,以何首乌多糖提取率为综合指标,考察料液比、提取次数、超声时间、微波时间4个因素对提取效果的影响,在此基础上,利用中心组合试验设计对提取工艺进行优化,最佳工艺条件为料液比1∶21(g∶m L),超声时间15 min,微波时间3 min,提取1次,在此条件下多糖实际提取率可达19.74%。

何首乌叶原生质体制备与融合研究

[目的]研究何首乌叶片原生质体的制备和融合方法。[方法]用机械法制备何首乌叶片的原生质体,用PEG结合高Ca2+-高p H诱导融合法来诱导其原生质体,研究原生质体的融合现象。[结果]何首乌叶片在25℃和35%的蔗糖溶液中处理30 min能够制备出较多的完整原生质体。用20%PEG融合液处理原生质体20min能够有效地诱导何首乌原生质体的融合,2个细胞的融合效率为11.7%,表明用机械法制备的原生质体也是有活性的。[结论]该技术为何首乌原生质体培育奠定了基础。

多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2,4-D0.5-2mg·L^-1的1/2MS培养基上暗培养30d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ5-20mg·L^-1的1/2MS培养基上光培养20d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ10mg·L^-1和GA30.1mg·L^-1的诱导培养基上暗培养20d后,在含麦芽糖的无植物生长调节剂的培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。

微波消解-火焰原子吸收法测定新疆野蔷薇果中金属元素

采用HNO3消解体系对野蔷薇果进行程序升温微波消解制样,应用火焰原子吸收法测定野蔷薇果中的Ca、K、Mn、Zn、Mg、Fe、Cu、Na、Cr、Ni、Sr共11种金属元素的含量。对样品前处理条件进行筛选,确定样品适合的微波消解体系并进行消化结果的准确度和精密度实验。该方法的加标回收率为96.50%～104.50%,相对标准偏差(RSD)≤3.21%。结果表明,新疆野蔷薇果中富含Ca、Mg、K、Na、Mn、Fe等对人体有益的金属元素,而Cr、Ni等金属元素的含量较低。

红刺玫愈伤组织诱导再生体系的建立

红刺玫（Rosa multiflora Thunb.var.cathayensis）为蔷薇科蔷薇属野蔷薇的一个变种,半常绿灌木,花色粉红。红刺玫以花期长、耐受高温和高湿气候等特性成为园林绿化的新宠[1]。但红刺玫的单瓣花和花色单一的缺陷限制了其广泛的应用,改良红刺玫花色引起园艺工作者的极大兴趣。

野蔷薇根总黄酮的提取及纯化工艺

目的:优化野蔷薇根总黄酮提取及纯化工艺。方法:L9(34)正交试验回流提取确定最适提取剂乙醇浓度、料液比、提取时间组合;从静态吸附-解吸、动态吸附-解吸两方面筛选最佳树脂型号,单因素考察最佳纯化条件。结果:UV 508 nm检测波长下,最佳提取条件为50%乙醇溶剂,料液比1∶10,进行90℃、90 min回流提取;14种大孔树脂中,HPD-400型大孔树脂对野蔷薇根总黄酮的吸附-解吸能力最好,树脂纯化最佳上样浓度为浸膏母液稀释1.5倍;上样量35 m L,流速3 s/滴;除杂用水量40 m L,流速1 s/滴;50%乙醇32 m L洗脱,流速2 s/滴。结论:最优提取纯化条件下,总黄酮回收率达50%以上。

胡颓子属植物营养成分分析和开发利用研究Ⅰ.胡颓子属植物营养成分的测定和研究

本文报告了胡颓子属的胡颓子、木半夏和牛奶子的果肉的主要营养成分。结果表明,胡颓子属的果实富含多种氨基酸、微量元素、多种维生索以及糖和有机酸等,且酸甜较可口,具有很高的营养价值和保健作用,开发前景广阔。

野蔷薇根醇提物对大鼠动脉粥样硬化的影响

目的:观察YT对大鼠AS的影响。方法:50只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、YT低、高剂量组、AL组,灌胃给药90 d,每2周称摄食量和体质量,调整灌胃量;空白组喂标准饲料,其余组高脂饮食联合注射维生素D3并加免疫损伤造成AS;末次给药1h后,取主动脉进行病理组织学观察,比色法检测血清中SOD、MDA水平,化学发光法检测血清中CRP水平,ELISA法检测血清中sCD40L、ADNP、IL-18、IL-16水平,放射免疫分析法检测血清中IL-6、TNF-α水平。结果:YT低、高剂量组明显改善AS大鼠主动脉壁增厚、脂质沉积,减少泡沫细胞形成及淋巴细胞浸润;YT低剂量组体质量增加幅度、MDA水平显著降低,摄食量显著增加,YT高剂量组IL-18水平显著降低。结论:YT可通过调节脂质过氧化及炎症反应改善AS。

月季和野蔷薇的试管嫁接研究

【目的】研究月季和野蔷薇的试管嫁接技术,为月季繁殖的有效途径提供参考。【方法】以野蔷薇带芽茎段为外植体,通过比较不同灭菌方法、不同激素种类和浓度的培养基对组培快繁的影响,筛选出适宜的灭菌方法以及培养基,从而建立野蔷薇的无菌快繁体系,并以不同品种月季无菌苗的茎尖为接穗,野蔷薇为砧木进行远缘嫁接。【结果】野蔷薇的外植体灭菌宜采用75%酒精溶液拭擦茎段表面后浸泡10 s,再用0.1%的升汞溶液浸泡10 min,继代增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,生根培养基为WPM+NAA 0.05 mg/L;保留砧木叶片有利于提高嫁接成活率和生根率;以继代增殖培养25 d的月季茎尖为接穗,有利于远缘嫁接的成活。移栽以绯扇-野蔷薇的成活率最高,其次为"卡罗拉-野蔷薇"、"金凤凰-野蔷薇"、"红双喜-野蔷薇"、"龙沙宝石-野蔷薇"、"遗产-野蔷薇"。【结论】不同月季品种与野蔷薇嫁接的成活率因品种而异,砧木保留叶片与否以及接穗的继代培养时间与嫁接成活率有着密切的关系。

多花蔷薇花挥发油化学成分的GC／MS分析

本文采用ＧＣ／ＭＳ技术，分析了经并时蒸馏萃取装置获得的多花蔷薇挥发油化学成分。共鉴定出２８种化合物，为开发、利用这一野生资源提供了科学依据。

燕山东段野生木半夏果实性状的株间变异

以燕山东段碣石山天然分布的木半夏果实为试验材料,对其果实的8个性状变异和各性状间的相关性进行了分析研究。结果表明:(1)果实性状株间变异比较显著;(2)果实各性状变异系数由大到小依次为空瘪率、果实重、果形指数、果实横径、果梗长、种子重、果实纵径、果肉率;(3)果肉率与果实横径成极显著正相关,与果形指数成显著负相关;种子重与果实重成极显著正相关,与空瘪率、果实横径成显著负相关,与果实纵径关系最不紧密;(4)建议在野生木半夏群体中筛选高果肉率和高种子重的单株时应分别进行,以果实横径的大小作为主要参考指标;在以观果效果为主的单株选择上,则宜果梗长短为主要参考指标。

野蔷薇根总黄酮对H_(2)O_(2)诱导损伤的HUVEC线粒体功能及凋亡通路的影响

目的探讨野蔷薇根总黄酮(TF-RM)对H_(2)O_(2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体功能及凋亡通路的影响。方法将SD雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C组(0.08 g·kg^(-1))、TF-RM组(2.5 g·kg^(-1)),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续7 d,制备含药血清。采用H_(2)O_(2)(950μmol·L^(-1))诱导HUVEC损伤,并分别与维生素C及TF-RM低、中、高剂量(5%、10%、15%)含药血清共培养24 h。采用DCFH-DA荧光定量法检测HUVEC中活性氧(ROS)的含量;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;Fluo-4染色法检测细胞内Ca^(2+)浓度;Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC内的ROS水平、线粒体膜电位下降率、Ca^(2+)浓度以及Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,TF-RM各剂量组细胞内的ROS水平、Ca^(2+)浓度及Bax蛋白表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05);TF-RM高剂量组的线粒体膜电位下降率明显降低(P<0.05);TF-RM中剂量组的Caspase 9蛋白表达量明显降低(P<0.05)。结论TF-RM能够改善H_(2)O_(2)诱导的HUVEC线粒体功能损伤,发挥对细胞凋亡的保护作用。

野生木半夏饮料的开发研究

以野生木半夏果为原料 ,开发研制了具有保健作用的木半夏果汁饮料。测定了木半夏果汁的主要营养成分 ,并对加工技术进行了研究。

营实挥发性成分的GC-MS分析

目的:对营实挥发油成分进行分析,为其质量评价提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取营实挥发油,经GC-MS结合计算机检索对其化学成分进行鉴定,用色谱峰面积归一化法确定各化学成分的相对含量。结果:从营实挥发油中分离出95个化学组分,鉴定了其中70个,占挥发油总含量的91.01%。主要成分为软脂酸甲酯和9,12,15-十八烷三烯酸甲酯,相对含量分别为9.132%和10.515%。结论:分析了营实中挥发油的组成和相对含量,该法简便、快速、灵敏度高,为其进一步的开发利用提供了理论依据。

野蔷薇果皮色素的提取和稳定性研究

采用正交试验对野蔷薇果皮色素的最佳提取条件进行了研究,并探讨该色素的稳定性。结果表明:在60℃下采用60%乙醇,以1:6物料比,pH6.0,浸提时间4h条件下色素产率最高;该色素属水溶性色素,耐光性、耐高温性好,在酸性介质以及常用食品添加剂等条件下有较好的稳定性,可作为食品饮料、医药等行业的天然植物色素广泛使用。

野蔷薇根总黄酮对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞的影响

目的研究野蔷薇根总黄酮(Total Flavonoids from Rosa multiflora Thunb,TF-RM)对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的影响。方法将SD大鼠随机分为3组,每组10只:空白对照组,维生素C(Vit C)组(0.08 g·kg-1),TF-RM组(2.5 g·kg-1),连续灌胃给药7 d,制备含药血清。采用H2O2诱导HUVEC损伤,分别加入Vit C、TF-RM低、中、高剂量含药血清,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,微量酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测内皮素-1(ET-1)含量。结果与模型组比较,Vit C组、TF-RM低、高剂量组细胞活力明显提高(P<0.05,P<0.01);Vit C组、TF-RM中、高浓度组正常细胞增加,早、晚期凋亡、坏死细胞减少;Vit C组、TF-RM高剂量组LDH含量显著降低(P<0.05,P<0.01);TF-RM高浓度组NO含量显著提高(P<0.05),ET-1含量显著降低(P<0.01)。结论TF-RM对H2O2诱导损伤的血管内皮细胞具有明显保护作用。

气候变化背景下药用植物何首乌在中国适生区分布预测

【目的】预测中国境内药用植物何首乌[Fallopia multiflora(Thunb.)Harald]在气候变化背景下的适生区分布格局变迁及其相对稳定适生区。【方法】基于何首乌的138个分布数据以及当代(1995-2000年)和未来(21世纪20-80年代)的气候数据,同时考虑3种温室气体排放情景,用最大熵模型预测其地理分布。【结果】1何首乌的当代适生区主要分布于四川、重庆、陕西、广西、云南、湖北等地境内;2何首乌当代适生区总面积为205.38×104 km2,占中国国土面积的21.39%;3何首乌当代适生区面积53.86%的区域为相对稳定适生区,受气候变化影响相对较弱;4在气候变化背景下,何首乌总适生区及低度适生区面积将大幅减少,中度适生区面积将保持相对稳定,而高度适生区面积将大幅增加。【结论】未来气候变化对何首乌分布的负面影响主要体现在总适生区面积的缩减,预测何首乌相对稳定适生区的面积为110.61×104 km2,该地区可作为其规范化种植候选地,剩余受气候变化影响显著的区域可作为何首乌野生种质资源调查和收集的优先区域。