胃癌患者病灶组织CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达变化研究

目的:探究胃癌患者病灶组织角蛋白7(CK7)、人表皮生长因子受体-2(HER2)、错配修复蛋白MutL同源物1(MLH1)、错配修复蛋白MutS同源物2(MSH2)及错配修复蛋白MutS同源物6(MSH6)的表达变化情况。方法:选取2020年2月—2023年1月苏州市相城人民医院收治的120例胃癌患者为研究对象,比较病灶组织及癌旁组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达情况,并比较不同性别、年龄、TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况及病灶位置者的病灶组织CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6表达情况。结果:胃癌患者病灶组织CK7、HER2阳性率及MLH1、MSH2、MSH6表达缺失率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄及病灶位置病灶组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ期、Ⅳ期病灶组织CK7、HER2阳性率高于Ⅰ期、Ⅱ期,MLH1、MSH2、MSH6表达缺失率均显著低于Ⅰ期、Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度较低者病灶组织的CK7、HER2阳性率显著高于分化程度较高者,MLH1、MSH2及MSH6表达缺失率显著低于于分化程度较高者,差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移者CK7、HER2阳性率显著高于无淋巴结转移者,MLH1、MSH2及MSH6表达缺失率显著低于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌患者病灶组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达相对异常,且不同TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况者的差异较大。

刺参多功能表皮生长因子6(megf6)cDNA克隆及在肠再生过程中的表达分析

为了探究刺参Apostichopus japonicus多功能表皮生长因子6(multiple epidermal growth factor 6)的生物学信息和功能,利用RACE技术克隆了体质量为(92.0±4.0)g的成体刺参megf6基因(Aj-megf6)cDNA全长序列,并分析了该基因的信息学特征及其在肠再生过程中表达水平的变化。结果表明:刺参megf6基因的cDNA序列全长为5665 bp,共编码了1604个氨基酸,具有37个EGF样结构域;该基因编码蛋白的相对分子质量为172500,理论等电点为4.74,该蛋白具有信号肽,为分泌蛋白,属于亲水性、非跨膜蛋白,共有53个磷酸化位点,分别为23个Ser位点、12个Thr位点、18个Tyr位点;MEGF6氨基酸多序列比对发现,刺参MEGF6与其他物种的氨基酸序列一致性为38.59%~49.07%,其中与紫球海胆Strongylocentrotus purpuratus的一致性最高,为49.07%,其次为长棘海星Acanthaster planci(48.71%);基于MEGF6氨基酸序列的系统进化树分析显示,刺参与紫球海胆、长棘海星聚为一支,该结果符合刺参的分类和进化地位,MEGF家族成员间比对分析显示,MEGF家族成员间具有一定的分化;实时定量PCR(qPCR)结果显示,在刺参肠再生过程中megf6 mRNA表达量呈先升高后降低的趋势,其中再生6 d时的表达量达到峰值,为对照组的126.47倍,再生18 d时降至正常水平。研究表明,刺参megf6基因的表达与刺参肠管形态的变化趋势相一致,推断megf6可能在刺参肠再生过程中发挥重要作用。

CDK4/6抑制剂联合内分泌治疗乳腺癌的破局和困局

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤,也是导致女性死亡的主要原因之一。仅2022年,中国约有34.1万的乳腺癌新发病例,呈逐年快速增长趋势。据统计,激素受体阳性/人类表皮生长因子受体-2阴性乳腺癌约占所有乳腺癌的70%。内分泌治疗是该类乳腺癌治疗的基石,其联合CDK4/6抑制剂的治疗方案已得到国内外专家的一致共识,成为激素受体阳性/人类表皮生长因子受体-2阴性乳腺癌的标准治疗。截止目前国内已上市的CDK4/6抑制剂包括达尔西利、哌柏西利、瑞波西利和阿贝西利。对于激素受体阳性/人类表皮生长因子受体-2阴性局部晚期和转移性乳腺癌,CDK4/6抑制剂联合芳香化酶抑制剂或氟维司群一线或二线及以上治疗均可大幅度降低疾病进展或死亡风险,奠定了CDK4/6抑制剂在晚期一线或后线治疗地位。在早期辅助治疗阶段,阿贝西利、瑞波西利已显示出显著延长患者iDFS及OS疗效,而需要接受新辅助治疗、内脏危象及CDK4/6抑制剂经治等患者研究目前仍在探索之中。该文系统性介绍CDK4/6抑制剂的药理学特征及临床研究进展,总结CDK4/6抑制剂联合内分泌治疗的破局和困局。

2,4-二取代-6-氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究

为寻找具有抗肺癌活性的先导化合物,以2,4,6-三氯-1,3,5-三嗪为起始原料通过2~4步反应合成一系列2,4-二取代-6-氯三氮唑衍生物,结构由NMR和MS鉴定。体外细胞抗肺癌活性研究表明,多个化合物(T3、T10、T14、T15和T16)对受测细胞株表现良好的抗增殖活性,尤其是对突变型细胞株PC9、HCC827和H1975。其中,N2-([1,1′-联苯]-4-基)-6-氯-N4-(3-硝基苯基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺的抗增殖活性最强,所有IC50值均小于10μmol/L。尽管该化合物因为亲脂性过高难以进入后续研究,但其可作为先导化合物为该类结构衍生物的开发提供一定的指导意义。

不同临床病理特征乳腺癌患者CK5/6、EGFR、AR、Ki67表达情况及临床指导意义

目的探讨不同临床病理特征乳腺癌患者细胞角蛋白5/6(CK5/6)、表皮生长因子受体(EGFR)、雄激素受体(AR)、增殖细胞核抗原(Ki67)表达情况及临床指导意义。方法回顾性收集239例乳腺癌患者临床资料,均经病理学检查确诊,统计乳腺癌组织中不同临床病理特征CK5/6、EGFR、AR、Ki67阳性表达情况,采用Pearson相关分析CK5/6、EGFR、AR、Ki67表达情况与乳腺癌患者临床病理特征的相关性。结果乳腺癌组织中CK5/6、EGFR、AR、Ki67阳性表达率分别为15.90%、20.92%、90.38%、31.80%。Pearson相关分析显示,CK5/6与肿瘤直径呈正相关(r=0.64,P<0.05),EGFR、Ki67与肿瘤直径、组织学分级呈正相关(r分别=0.58、0.68、0.50、0.52,P均<0.05),EGFR与临床分期呈正相关(r=0.68,P<0.05),AR与组织学分级呈正相关(r=0.30,P<0.05),Ki67与淋巴结转移、临床分期呈正相关(r分别=0.48、0.49,P均<0.05)。结论随着乳腺癌患者病情进展可引起CK5/6、EGFR、AR、Ki67阳性表达升高,乳腺癌患者CK5/6、EGFR、AR、Ki67阳性表达情况与患者临床病理特征具有显著相关性,临床可通过检测乳腺癌患者CK5/6、EGFR、AR、Ki67阳性表达情况对患者病情进展程度进行评估。

柚皮苷对复发性口腔溃疡大鼠TNF-α、IL-6和EGF水平的影响

目的探讨柚皮苷对复发性口腔溃疡(ROU)大鼠表皮生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6水平的影响。方法建立ROU大鼠模型,随机分为模型组、柚皮苷低(25 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组、阳性对照组及对照组,每组10只。检测各组大鼠口腔溃疡持续时间、数量、间隔时间等变化,观察溃疡组织病理学变化,比较各组TNF-α、EGF、IL-6的血清、组织蛋白水平及阳性表达情况。结果与对照组比较,模型组TNF-α、IL-6血清及蛋白水平升高(P<0.05),EGF血清及蛋白水平降低(P<0.05),TNF-α、IL-6阳性表达增强,棕褐色或棕黄色颗粒明显增多,EGF阳性表达减弱,棕褐色或棕黄色颗粒减少;与模型组比较,柚皮苷低、中、高剂量组大鼠口腔溃疡持续时间、数目均逐渐减少(P<0.05),间隔时间逐渐增加(P<0.05),TNF-α、IL-6血清及蛋白水平逐渐降低(P<0.05),EGF血清及蛋白水平升高(P<0.05),TNF-α、IL-6阳性表达减弱,棕褐色或棕黄色颗粒明显减少,EGF阳性表达增强,棕褐色或棕黄色颗粒逐渐增多。结论柚皮苷可促进溃疡大鼠愈合,其机制可能与抑制炎症因子表达有关。

CDK4/6抑制剂联合内分泌药物治疗HR阳性/HER2阴性乳腺癌疗效与安全性的Meta分析

目的 评价4种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂(达尔西利、阿贝西利、瑞波西利、哌柏西利)联合内分泌药物治疗激素受体(HR)阳性/人表皮生长因子受体2(HER2)阴性乳腺癌的疗效和安全性。方法 计算机检索PubMed、the Cochrane Library、Web of Science、Embase、中国知网、万方数据、维普网,收集CDK4/6抑制剂联合内分泌药物(试验组)对比单用内分泌药物或联用安慰剂(对照组)的随机对照试验(RCT),检索时限为建库至2023年4月。筛选文献、数据提取和质量评价后,采用RevMan 5.4.1软件进行Meta分析。结果 共纳入22篇文献,涉及15项RCT,合计18 574例患者。Meta分析结果显示,试验组患者的无进展生存期[HR=0.77,95%CI(0.74,0.79),P<0.000 01]、总生存期[HR=0.91,95%CI(0.87,0.94),P<0.000 01]、客观缓解率[OR=1.71,95%CI(1.51,1.93),P<0.000 01]、临床获益率[OR=1.73,95%CI(1.52,1.95),P<0.000 01]均显著优于对照组。试验组患者的≥3级不良反应[OR=10.28,95%CI(6.97,15.17),P<0.000 01]、中性粒细胞减少[OR=65.09,95%CI(36.43,116.31),P<0.000 01]、白细胞减少[OR=22.90,95%CI(15.40,34.04),P<0.000 01]、贫血[OR=5.71,95%CI(4.51,7.22),P<0.000 01]、腹泻[OR=3.00,95%CI(1.19,7.51),P<0.05]、恶心[OR=1.99,95%CI(1.52,2.60),P<0.00001]发生率均显著高于对照组。结论CDK4/6抑制剂联合内分泌药物治疗HR阳性/HER2阴性乳腺癌的疗效显著,不良反应发生率较高,尤其是血液毒性反应。

华蟾素对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株增殖、凋亡的影响及机制研究

目的:探讨华蟾素对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:分别采用四氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪检测华蟾素对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞增殖、凋亡的影响。用ELISA检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)及血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果:1不同浓度华蟾素对RPMI 8226细胞的增殖均有抑制作用,随药物浓度的增加及作用时间的延长,药物的作用效果增强;2不同浓度华蟾素(0.0625、0.125、0.25、0.5μg/m L)作用于RPMI 8226细胞72h,细胞凋亡率分别为(14.92±1.59)%、(19.17±2.10)%、(19.43±2.63)%和(27.47±3.39)%,与对照组(2.98±0.67)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。0.5μg/m L浓度华蟾素凋亡率高于其于各组(P<0.01);3与对照组比较,不同浓度华蟾素作用于RPMI 8226细胞72h,细胞上清中IL-6及VEGF水平下降,其中高浓度华蟾素组(0.25及0.5μg/m L)的变化有显著性差异(P<0.01),但低浓度组(0.0625及0.125μg/m L)变化无统计学意义(P>0.05)。结论:华蟾素在体外具有抗多发性骨髓瘤的作用,并呈时间和剂量的依赖性,与其直接细胞毒作用及诱导凋亡有关,降低瘤细胞分泌IL-6及VEGF的水平可能是其作用机制之一。

联合检测CK5/6、CK14和表皮生长因子受体对基底样三阴乳腺癌的诊断价值

目的探讨联合检测CK5/6、CK14和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对基底样三阴乳腺癌的诊断价值。方法北京协和医院2000年1月至2011年12月经组织病理学证实的115例三阴乳腺癌患者,收集其临床及病理资料。应用免疫组织化学法检测所有石蜡标本中CK5/6,CK14和EGFR的表达,以此判定是否为基底样三阴乳腺癌。以三者联合检测结果作为金标准,计算CK5/6,CK14和EGFR单独检测、两两联合检测的敏感性和特异性。进一步分析基底样三阴乳腺癌和非基底样三阴乳腺癌在年龄、肿瘤大小、组织学类型等临床及病理特征方面的差异。结果115例三阴乳腺癌患者平均患病年龄为(50.7±13.6)岁。免疫组织化学结果显示,单独检测CK5/6,基底样三阴乳腺癌阳性率为29.6%(34/115),CK14为21.7%(18/83),EGFR为60.9%(70/115)。CK14,CK5/6和EGFR三者联合检测阳性率为67.8%(78/115)。将三者联合检测的阳性例数作为金标准,则EGFR与CK5/6联合检测敏感性及特异性分别可达98.7%及100%。基底样三阴乳腺癌与非基底样三阴乳腺癌在组织学类型、分级,淋巴结转移情况,死亡率方面差异有统计学意义(P均<0.05),基底样三阴乳腺癌总生存期显著缩短(HR=0.363,95%CI:0.139~0.947)。结论 CK14、CK5/6和EGFR联合检测能够标识出最多数量的基底样三阴乳腺癌。基底样三阴乳腺癌预后比非基底样三阴乳腺癌预后更差,病理识别很重要。

血清血管内皮生长因子和白细胞介素-6在多发性骨髓瘤中的临床意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)和实体瘤骨转移患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素 (IL) 6水平变化的临床意义。方法:MM组37例,其中临床Ⅰ期7例,Ⅱ期8例,Ⅲ期22例;实体瘤骨转移阳性对 照组8例和正常对照组17例;用ELISA方法检测血清VEGF和IL 6的水平。结果:MM组和实体瘤骨转移组血清 VEGF和IL 6水平明显高于正常对照组(P<0.01),且MM组的VEGF水平明显高于实体瘤骨转移组(P<0.05)。 随着临床分期增加,VEGF和IL 6水平呈递增趋势,VEGF水平在Ⅲ期高于Ⅰ期组和Ⅱ期组(P<0.05),IL 6在Ⅱ期 组高于Ⅰ期组(P<0.05)。各骨损评分组间IL 6水平差异存在显著性(P<0.05)。VEGF与血肌苷,尿轻链λ存 在密切的关系(P<0.01);IL 6与血钙,C反应蛋白存在密切的关系(P<0.01)。IL 6水平在临床参数C反应蛋 白、血钙、β2微球蛋白异常组高于其正常组(P<0.05);而VEGF水平在血肌苷、血轻链λ、尿轻链λ的异常组高于 其正常组(P<0.05)。结论:检测血清VEGF和IL 6水平对于MM患者的诊断及鉴别诊断、临床分期、骨损程度和 病情的判断具有重要意义。

多发性骨髓瘤患者血清血管内皮生长因子、IL-6水平的观察

目的:研究多发性骨髓瘤(MM)患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)及IL-6的含量与其临床分期及预后的关系。方法:采用酶联免疫吸附测试(ELISA)法,分别检测30例多发性骨髓瘤患者血清中VEGF及IL-6含量,并观察其与MM的临床分期、肿瘤量分级的关系,及对病情预后判断的预测意义。结果:MM患者血清中的VEGF及IL-6含量较正常对照组均明显升高(P<0.001)。Ⅰ期、Ⅱ期MM患者的血清VEGF水平明显低于Ⅲ期患者(P<0.001),Ⅰ期与Ⅱ期患者间血清VEGF含量亦呈显著性差异(P<0.001);随着临床分期增加,MM患者血清IL-6水平呈递增趋势,各期间比较均有显著性差异(P<0.01)。IL-6及VEGF水平在临床参数Hb、β2-MG异常组高于其正常组(P<0.05),提示与瘤细胞负荷相关。结论:血管生成的调控因子VEGF和骨髓基质细胞分泌的IL-6可能与MM的疾病进程有关,其水平升高是MM的预后不良因素。

乳腺癌新辅助化疗前后ER、PR、HER-2、EGFR、CK5/6的表达及预测化疗效果的意义

目的：观察乳腺癌新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy,NAC）前后雌激素受体（ER）,孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER-2）、细胞角蛋白5/6（CK5/6）、表皮生长因子受体（EGFR）表达及对化疗疗效的预测价值.方法：收集82例确诊为乳腺浸润性导管癌的病例,临床Ⅱa～Ⅲb期,取NAC前后乳腺癌灶组织,应用免疫组织化学（IHC） Envision二步法检测ER、PR、HER-2、EGFR及CK5/6的表达水平,并将指标表达情况与化疗效果进行对比,评价其对化疗效果的预测价值.结果：7例患者化疗后达病理完全缓解（pCR）不能进行IHC检测,其余75例患者在NAC前后ER、PR、HER-2、EGFR、CK5/6的表达变化差异无统计学意义,完全缓解（CR）8例,部分缓解（PR）61例,客观有效率（CR＋ PR）84.1％ （69/82）,疾病稳定（SD）7例,无疾病进展（PD）病例;ER（＋）组与ER（-）组、PR（＋）组与PR（-）组化疗疗效差异具有统计学意义（P＜0.05）,但HER-2（＋）组与（-）组、EGFR（＋）组与EGFR（-）组、CK5/6（＋）组与CK5/6（-）组的化疗有效率差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论：NAC前后ER、PR、HER-2、EGFR及CK5/6表达变化对乳腺癌化疗效果判断的参考意义不大,NAC前ER、PR阳性的乳腺癌病人对化疗更敏感,二者可作为预测化疗疗效的指标.

转染EGFRL858R的肺腺癌细胞中IL-6和VEGF表达水平及其意义

目的:探讨肿瘤细胞癌基因表皮生长因子受体(EGFR)L858R型突变与肺腺癌恶性转移患者癌细胞中白细胞介素6(IL-6)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的关系及其意义。方法:将含EGFRL858R全长基因质粒的载体转染EGFR野生型肺腺癌细胞系H460(EGFRL858R-H460组),空载体转染H460细胞作为对照组(Vec-H460组),QRT-PCR法检测2组细胞中IL-6和VEGF mRNA表达水平。将含IL-6siRNA的载体转染带有EGFRL858R型突变的细胞系H1975(IL-6siH1975组),转染空载体的H1975细胞作为对照组(Vec-H1975组),QRT-PCR法检测2组细胞中IL-6和VEGF mRNA表达水平,Western blotting法检测2组细胞中VEGF蛋白表达水平。结果:与Vec-H460组比较,EGFRL858R-H460组细胞中IL-6和VEGF mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与Vec-H1975组比较,IL-6siH1975组细胞组IL-6和VEGF mRNA表达水平明显降低(P<0.01),VEGF蛋白表达强度明显降低。结论:肺腺癌细胞系中EGFRL858R型突变可升高肺腺癌患者癌细胞中IL-6和VEGF mRNA表达水平,其中IL-6mRNA水平升高可能是VEGF mRNA表达水平升高的原因,这些变化可能是EGFRL858R型突变参与肺腺癌恶性转移进程的途径之一。

EG FL6在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的:探讨表皮生长因子样蛋白(EGFL)6在胃癌中的表达及其与临床病理因素及预后的关系。方法:收集2016年3月至2018年2月间温州医科大学附属第二医院育英儿童医院接受手术切除的原发性胃癌组织及癌旁组织各80例,以免疫组织化学染色法判定组织中EGFL6的表达,对染色结果与相关临床病理因素及预后进行统计学分析。结果:EGFL6的表达与胃癌肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期具有相关性(P<0.05);EGFL6的表达、患者年龄、肿瘤直径、细胞分化、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期均与胃癌患者的预后相关(P<0.05)。结论:EGFL6的表达与胃癌患者临床病理因素存在相关性,提示EGFL6在胃癌的发生发展中起重要作用。

小陷胸汤对5-氟尿嘧啶介导的小鼠肠黏膜损伤的保护作用研究

目的:探究小陷胸汤对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)介导的小鼠肠黏膜损伤的保护作用。方法:将100只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、小陷胸汤低、中、高剂量(8.3、16.6、33.2g/kg)组。除正常对照组外,其余各组采用5-FU(30 mg/kg,ip,7 d)诱导肠黏膜损伤小鼠模型。小陷胸汤给药组造模同时按照设定剂量以10 mL·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常对照组和模型组给予等量蒸馏水,连续处理7 d。采用苏木素-伊红染色法(HE)观察小肠的病理形态学变化并测定肠绒毛高度/隐窝深度(VH:CD)比值;采用阿利新蓝染色法(AB)测定小肠黏膜杯状细胞数量;采用分光光度法检测血清内毒素(ET)、D-乳酸(D-LA)及小肠组织二胺氧化酶(DAO)水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测小肠组织IL-6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达;采用Western blot法检测小肠组织IL-6、STAT3及EGFR蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠体质量显著降低,腹泻评分、粪便质量、粪便含水量及小肠推进率明显升高(P<0.01),小肠黏膜VH:CD比值和杯状细胞数量降低(P<0.01),血清ET和D-LA水平升高,小肠组织DAO水平降低(P<0.05),脾指数和胸腺指数降低(P<0.01),血清IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),小肠组织IL-6、STAT3 mRNA表达升高,EGFR mRNA表达降低(P<0.01);小肠组织IL-6、STAT3蛋白表达升高,EGFR蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组相比,小陷胸汤能够明显改善上述指标(P<0.05)。结论:小陷胸汤对5-FU介导的肠黏膜损伤具有保护作用,其作用机制可能与小陷胸汤激活EGFR信号转导,下调IL-6/STAT3信号通路,减轻5-FU诱导的肠黏膜炎症反应,改善免疫功能有关。

单宁酸通过抑制TRAF6向细胞质膜的招募抑制Akt信号通路

目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,也称Akt)信号通路在大多数人类实体肿瘤中过度激活、表达失调,促进肿瘤细胞增殖。植物单宁属于植物多酚类物质,能够抑制肿瘤细胞的增殖。然而,单宁酸通过何种机制调控肿瘤细胞中过度激活的Akt信号通路仍不清楚。方法:本实验选用人胶质瘤U87细胞作为模型,研究单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞EGFR/Akt信号通路的分子机制。结果:单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞Akt的磷酸化以及受Akt信号通路调控的相关蛋白4EBP-1和核糖体S6蛋白的磷酸化。进一步研究发现,单宁酸抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis receptor-associated factor6,TRAF6)向细胞质膜的招募,导致与TRAF6相互作用的Akt蛋白减少,进而抑制人胶质瘤细胞中Akt的磷酸化激活。利用EGFR组成型激活突变体EGFR v III研究单宁酸对TRAF6向细胞质膜招募的影响发现:一方面单宁酸对EGFR的抑制作用需要EGFR胞外区第2~7外显子区域的存在;另一方面单宁酸对EGFR磷酸化的抑制是导致TRAF6向细胞质膜招募减少的原因。结论:EGFR是单宁酸发挥其抗肿瘤作用的受体蛋白,单宁酸通过抑制EGFR的磷酸化改变TRAF6向细胞质膜的招募进而介导了单宁酸对肿瘤细胞中Akt磷酸化的抑制,从而控制蛋白质的翻译,为食品来源单宁酸的抗肿瘤研究提供理论依据。

VEGF对多发性骨髓瘤骨髓基质细胞分泌IL-6的影响

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)对多发性骨髓瘤患者骨髓基质细胞分泌白细胞介素6(IL-6)的影响,探讨多发性骨髓瘤(MM)的发病机制,为开发骨髓瘤新的治疗途径提供依据。方法骨髓来源于18例骨髓瘤患者,并取8例缺铁性贫血患者的骨髓做正常对照组。常规分离培养骨髓基质细胞(BMSCs),观察BMSCs生长情况,流式细胞仪检测BMSCs表型,取2-3代BMSCs进行实验,加入不同浓度外源性VEGF或作用不同时间,收集BMSCs上清液,以ELISA方法检测IL-6浓度。结果骨髓的基质细胞在体外成贴壁生长,为成纤维细胞形态,流式细胞仪检测其表型为CD54(+)、CD33(-)、CD31(-).骨髓瘤患者BMSCs分泌IL-6的结果高于正常对照BMSCs,两者差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度重组VEGF作用于骨髓瘤患者BMSCs或VEGF作用不同时间,均有显著刺激BMSCs分泌IL-6增多,呈现剂量和时间依赖性,P<0.05。结论在多发性骨髓瘤中,VEGF除了可以促进骨髓肿瘤血管的新生,支持瘤细胞的浸润转移,还可以明显刺激骨髓基质细胞分泌IL-6,促进肿瘤生长,针对VEGF的相关治疗将成为治疗骨髓瘤的新途径。

晚期NSCLC患者胸腔积液中IL-6水平及其与EGFR-TKIs治疗疗效的相关性

目的研究晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液中白细胞介素-6(IL-6)水平及其与表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗疗效的相关性。方法选取75例NSCLC患者进行研究,应用流式荧光法对所有患者胸腔积液中IL-6水平进行检测,根据患者5年生存状态绘制受试者工作特征(ROC)曲线,确定其胸腔积液IL-6的最佳截断值,并依据该截断值将患者分为升高组(n=20)和无变化组(n=55),2组均应用EGFR-TKIs治疗。观察并比较2组临床治疗效果,采用Spearman秩相关分析法分析胸腔积液中IL-6水平与EGFR-TKIs治疗疗效的相关性。结果治疗后,IL-6水平升高组患者客观缓解率为40.00%,显著低于IL-6水平无变化组患者(70.91%),差异具有统计学意义(P<0.05)。胸腔积液IL-6水平与EGFR-TKIs治疗疗效呈负相关(P<0.05)。升高组的无复发生存期(RFS)、总生存期(OS)均显著短于无变化组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论晚期NSCLC患者胸腔积液中IL-6水平与EGFR-TKIs治疗疗效呈负相关,且与生存预后相关,可将其作为预测EGFR-TKIs治疗疗效的有效指标。

重组人血管内皮抑素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226增殖和相关蛋白表达的影响

目的:研究重组人血管内皮抑素(恩度)在体外对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226细胞增殖、细胞周期及细胞相关蛋白表达的影响。方法:用CCK-8检测恩度对RPMI 8226细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡和细胞周期的改变;Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达变化;以实时定量PCR和Westernblotting检测RPMI 8226细胞血管细胞粘附因子1(VCAM-1)、白细胞介素6(IL-6)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA以及蛋白表达变化;ELISA检测细胞上清液中细胞因子IL-6和VEGF水平。结果:恩度对RPMI 8226细胞有增殖抑制作用,250 mg/L恩度对RPMI 8226细胞72 h增殖抑制率为(59.5±5.6)%(P<0.05),细胞G1期比例增加(P<0.05),但对细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达无显著影响;经恩度作用后RPMI 8226细胞VCAM-1表达下降(P<0.05),IL-6和VEGF表达及分泌降低(均P<0.05)。结论:恩度能通过改变细胞周期变化抑制RPMI 8226细胞增殖,并能减少VCAM-1表达及IL-6、VEGF分泌,对细胞凋亡无明显改变。

EGFR通过IL-6/STAT3信号通路对肺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探究表皮生长因子受体(EGFR)对肺癌细胞增殖、凋亡的影响及相关机制。方法以人正常支气管上皮细胞16HBE及肺癌细胞A549、H1299、MSTO-211H为研究对象,qRT-PCR、western blot分别检测细胞中EGFR mRNA、蛋白水平。将MSTO-211H细胞分为NG组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-EGFR组、pcDNA3.1-EGFR+anti-IL-6组、pcDNA3.1-EGFR+JSI-124组;qRT-PCR检测EGFR mRNA水平;CCK-8法及平板克隆实验、Hoechst33342染色法及流式细胞仪分别检测细胞增殖、凋亡情况;western blot检测EGFR、细胞周期素D1(CyclinD1)、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及白介素-6/Janus蛋白酪氨酸激酶/信号转导子与转录激活子3(IL-6/JAK/STAT)通路相关蛋白表达。结果与16HBE细胞比较,A549、H1299、MSTO-211H中EGFR mRNA及蛋白表达水平显著升高,且MSTO-211H细胞中EGFR mRNA及蛋白表达水平最低,因此选择MSTO-211H细胞进行后续实验;与NG组、pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-EGFR组MSTO-211H细胞凋亡活动明显减弱,且细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),克隆形成率、EGFR、CyclinD1、Bcl-2、IL-6、p-JAK/JAK、p-STAT/STAT蛋白表达显著升高(P<0.05);与pcDNA3.1-EGFR组比较,pcDNA3.1-EGFR+anti-IL-6组、pcDNA3.1-EGFR+JSI-124组MSTO-211H细胞凋亡活动明显增强,细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),克隆形成率、CyclinD1、Bcl-2、IL-6、p-JAK/JAK、p-STAT/STAT蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论过表达EGFR可促进MSTO-211H细胞增殖并抑制细胞凋亡,可能是通过促进IL-6/JAK/STAT信号通路活化实现的。