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ESTABLISHMENT OF A MAMMARY CANCER CELL LINE Ca 761-86 AND ITS BIOLOGICAL CHARACTERISTICS IN INBRED 615 MICE
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作者 程一棹 黄敏 +5 位作者 王明俭 郑怀祖 袁保和 许广源 程佳 钱振超 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1989年第4期43-48,共6页
A cell line designated as Ca 761-86 has been established from the solid mouse mammary cancer (Ca 761) by suspension culture. It has been passaged for more than 212 generations. Moderate round cells were predominant an... A cell line designated as Ca 761-86 has been established from the solid mouse mammary cancer (Ca 761) by suspension culture. It has been passaged for more than 212 generations. Moderate round cells were predominant and most of them were mononuclear. Some characteristics of malignant cells and A-type viral-like particles were observed by electron microscopy. The results of cytochemical studies (DNA, RNA, SDH, 5' AMPase, ACP etc.) were comparable to the ultramicroscopic results. It multiplied approximately 27.4 fold on day 5 with mitotic index reaching 1.8% on day 3. This cell line was a hyperdiploid with karyotype of 45 or 45, -2X, tril2, tri17, +M1-5. Cell agglutination was observed when treated with ConA (≥7 fig, ml). Spontaneous agglutination might also take place without adding any ConA. After 5×106 cells of Ca 761-86 suspension were transplanted into the normal inbred 615 mice by different ways (subcutan eous, intrafoot-pad or intraperitoneal), the transplan lability rate reached 100%. Spontaneous remission was never observed and its metastatic ability reserved. PPLO were not detected. Ca 761-86 may be of value for practical purposes. 展开更多
关键词 line ESTABLISHMENT OF A MAMMARY CANCER cell line Ca 761-86 AND ITS biological characteristics IN INBRED 615 MICE RER ConA CA
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ESTABLISHMENT OF A CELL LINE INFECTED WITH SRS MOUSE LEUKEMIA VIRUS AND ITS BIOLOGICAL CHARACTERISTICS
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作者 程立 孔宪寿 郑葆芬 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1992年第2期27-31,共5页
NIH/3T3 cells were infected with a cell-free extract from the mouse SRS ascltic tumor and propagated at vitro. Experimental results showed that type A and type C virus particles were observed in the cytoplasm of infec... NIH/3T3 cells were infected with a cell-free extract from the mouse SRS ascltic tumor and propagated at vitro. Experimental results showed that type A and type C virus particles were observed in the cytoplasm of infected NIH/ 3T3 cells by electron-microscopy, X-C assay and reverse transcriptase were both positive. Free proviral-DN A of the leukemia vims was found in the infected NIH/3T3 cell by Southern blot hybridization.Morphologically, the NIH/3T3 cells infected in vitro appeared spherical and formed monolayer cell colonies of various sizes after 24 - 48 hours. When the cultured cells were Inoculated into nude mice (BALB/ c, nu nu ) subcutaneously, flbrosarcoma was Induced, 100%. Inoculation of the cell-free extract of the same cultured cells into Inbred SW-1 newborn mice, resulted in the production of lymphocytic leukemia and lymphoma in 52. 3% within 191 days. 展开更多
关键词 SRS NIH ESTABLISHMENT OF A cell line INFECTED WITH SRS MOUSE LEUKEMIA VIRUS AND ITS biological characteristics
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ESTABLISHMENT OF A MURINE ASCITES HEPATOMA CELL LINE H_(22)-F_(25)/L AND ITS BIOLOGICAL CHARACTERISTICS
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作者 凌茂英 郑怀祖 +2 位作者 龙翔 刘希风 顾寿智 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1992年第1期35-39,共5页
Having been passed for 160 generations, a cell linedesignated as H22-F25/L was established from a murine tumorlymphatic metastatlc model H22-F25 which had been set up in our college. The cell line was in suspension cu... Having been passed for 160 generations, a cell linedesignated as H22-F25/L was established from a murine tumorlymphatic metastatlc model H22-F25 which had been set up in our college. The cell line was in suspension culture with a rapid proliferation and stable growth. The peak tune of cell division and proliferation was 48 and 96 hours after culture. In a week, the cell number was Increased by 25 tunes. H22-F25/L still keeps the features of a poorly differentiated cancer. Its tumor inducing rate (in vivo)was 100% in 615 mice. Lymph node metastasis rate was 50% and pulmonary metastasis rate 10%. H22- F25/ L Is a population of heterogenetlc tumor cells Including 2 stem cell lines (the model number of chromosomes being 43 in 40% tumor cells and 86 in 32%) and some side lines. The common marker chromosomes M1, M2, M3 and M4 were present in all stem and side lines. 展开更多
关键词 ESTABLISHMENT OF A MURINE ASCITES HEPATOMA cell line H L AND ITS biological characteristics
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Establishment and biological characteristics of human multiple myeloma cell line CZ-1 被引量:8
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作者 侯健 林法迎 +2 位作者 张波 张玲珍 丁思奇 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期115-119,共5页
Background There were only 3 multiple myeloma (MM) cell lines established in China. In this study,we succeeded in establishing a novel MM cell line and analyzed its biological characteristics. Methods Mononuclear... Background There were only 3 multiple myeloma (MM) cell lines established in China. In this study,we succeeded in establishing a novel MM cell line and analyzed its biological characteristics. Methods Mononuclear cells isolated from the peripheral blood (PB) and bone marrow (BM) of a patient with advanced MM (λ light chain type) were cultured in medium. Cell morphology was analyzed by Wright-Giemsa-staining and cytochemical staining,immunophenotyping by flow cytometry and cytogenetic analysis by chromosome RHG-banding technique. Quantitative fluorescent polymerase chain reaction (PCR) was used to detect Epstein - Barr virus (EBV) DNA. Results The established cell line could survive and proliferate in the presence of feeder cells or conditioned medium. The cells secreted λ light chain and were negative for EBV. The Wright-Giemsa-staining showed typical plasmablast or plasma cell morphology. The cytochemical staining of the cells showed the following reactivity patterns: positive for acid phosphatase,negative for myeloperoxidase. The immunoprofile of the cells was concordant with that of MM cells: positive for CD_ 10 ,CD_ 28 ,CD_ 38 ,CD_ 138 ,CD_ 56 ,CD_ 49d ,CD_ 44 ,CD_ 54 and CD_ 58 ,negative for CD_ 19 , CD_ 40 ,CD_ 95 ,CD_ 95L ,CD_ 34 ,CD_2 and CD_5. The cytogenetic analysis showed complex chromosome abnormality of i (1q+),8q+,13q+,i (17q),i (18q) and +M. There was no difference in morphology,immunophenotype and cytogenetics between cells from PB and BM. Conclusions An MM cell line secreting λ light chain named CZ-1 was established. The cells from both PB and BM have the same biological characteristics. 展开更多
关键词 multiple myeloma·cell line·biological characteristics
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化瘀解毒汤抑制多发性骨髓瘤恶性生物学特性的作用机制
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作者 李祚涛 李海亮 +4 位作者 严志民 林洁 陈小芸 刘彦权 王钇力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1438-1443,共6页
目的:探讨化瘀解毒汤对多发性骨髓瘤(MM)细胞恶性生物学特性的影响及其分子机制,为抗MM的中医替代治疗提供实验基础与理论依据。方法:采用不同浓度化瘀解毒汤干预骨髓瘤U266细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性改变情况,Annexin V/PI双染流式... 目的:探讨化瘀解毒汤对多发性骨髓瘤(MM)细胞恶性生物学特性的影响及其分子机制,为抗MM的中医替代治疗提供实验基础与理论依据。方法:采用不同浓度化瘀解毒汤干预骨髓瘤U266细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性改变情况,Annexin V/PI双染流式细胞术检测凋亡情况,Western blot检测凋亡及相关信号通路蛋白表达变化实时荧光定量PCR技术检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)以及白细胞介素-6(IL-6) mRNA的表达变化。结果:化瘀解毒汤可抑制U266细胞的增殖活性,并诱导其发生凋亡,呈浓度及时间依赖性(r=-0.713,r=-0.827)。化瘀解毒汤干预U266细胞48 h后,可下调抗凋亡蛋白Bcl-2、survivin的表达,并上调促凋亡蛋白Bax的表达,同时抑制TLR4/NF-κB信号通路的磷酸化水平。化瘀解毒汤干预U266细胞后,可显著降低HMGB1、IL-6 mRNA的表达,但对CXCR4 mRNA的表达基本无影响。结论:化瘀解毒汤能抑制U266细胞增殖活性并诱发程序性死亡,其分子机制可能与调控各凋亡蛋白表达以及抑制TLR4/NF-κB通路激活并下调HMGB1、IL-6 mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 化瘀解毒汤 多发性骨髓瘤 恶性生物学特性 抗癌机制
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循环浆细胞与高危多发性骨髓瘤及免疫球蛋白基因重排的关系 被引量:1
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作者 任慧娟 苏晓甜 +1 位作者 陈秋雨 刘健 《临床肿瘤学杂志》 2023年第10期887-892,共6页
目的探讨循环浆细胞(CPC)的预后意义和免疫球蛋白(IG)基因重排的关系。方法收集2017年1月至2019年12月我院新诊断的MM患者118例。采用多参数流式细胞术(MFC)进行CPC和骨髓浆细胞(BMPC)定量,并采用IGH FR1和IGK引物基于NGS进行针对IG重链... 目的探讨循环浆细胞(CPC)的预后意义和免疫球蛋白(IG)基因重排的关系。方法收集2017年1月至2019年12月我院新诊断的MM患者118例。采用多参数流式细胞术(MFC)进行CPC和骨髓浆细胞(BMPC)定量,并采用IGH FR1和IGK引物基于NGS进行针对IG重链(IGH)和轻链(IGK)基因的的克隆性测试,确定CPC水平与临床病理特征和IG重排的关系。结果118例患者CPC水平为0.02%(0,0.14),根据CPC水平的中位值0.02%分为低CPC组和高CPC组。CPC与改良ISS分期、R2-ISS分期、β-2微球蛋白、乳酸脱氢酶、血红蛋白和BMPC/总淋巴细胞比值有关(P<0.05)。将CPC水平进行对数转化后,CPC与BM有核细胞或总淋巴细胞中浆细胞比例呈正相关[r_(s)=0.239(P=0.009)和r_(s)=0.317(P<0.001)]。中位随访时间为39.5个月。改良ISS不能区分Ⅱ期和Ⅲ期之间的OS差异(P=0.361)。但对改良ISSⅡ期和Ⅲ期患者进一步分层,高CPC组和低CPC组患者中位OS分别为33.50个月和58.30个月,差异有统计学意义(P=0.037)。在有(+)或没有(-)克隆性IGH重排患者中,CPC比例分别为0.025%(0.00,0.17)和0.01%(0.00,0.13),P=0.027。此外,在克隆性IGH重排(+)和/或IGK重排(+)的患者中,CPC比例为0.03%(0.00,0.15),高于克隆性IGH重排(-)且IGK重排(-)的患者[0.01%(0.00,0.015),P=0.030]。结论高水平CPC可以预测高危MM,IGH重排在高CPC组患者中更常见,为改良ISS危险分层,尤其是Ⅱ~Ⅲ期MM患者提供额外的预后信息。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 循环浆细胞 预后 遗传学特征 免疫球蛋白基因重排
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橘皮化合物5⁃ATAN诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其机制研究 被引量:1
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作者 林丽 张志华 +4 位作者 王津晗 李倩 黄姝怡 刘强 王亚非 《解剖学研究》 CAS 2023年第4期337-341,共5页
目的探讨橘皮提取物(5⁃ATAN)对多发性骨髓瘤细胞U266增殖和凋亡的影响及其机制。方法用6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的5⁃ATAN处理对数生长期U266细胞24h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式... 目的探讨橘皮提取物(5⁃ATAN)对多发性骨髓瘤细胞U266增殖和凋亡的影响及其机制。方法用6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的5⁃ATAN处理对数生长期U266细胞24h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位,Western blotting法检测细胞色素C、BCL⁃2、BAX、pro⁃caspase 3、pro⁃caspase 9及cleaved⁃caspase 3、cleaved⁃caspase 9、PARP、Bad、p⁃Bad的表达。结果5⁃ATAN对U266细胞的增殖有抑制作用,呈剂量依赖性(P<0.05);细胞凋亡率随药物浓度的增加显著增加(P<0.05),线粒体膜电位随5⁃ATAN浓度的增加显著降低(P<0.05)。抗凋亡蛋白Bcl⁃2、p⁃Bad及pro⁃caspase 3、pro⁃caspase 9及PARP的表达逐渐降低;细胞色素C及促凋亡蛋白Bax、cleaved⁃caspase 3、cleaved⁃caspase 9、PARP(89KDa)的表达逐渐升高(P<0.05)。结论5⁃ATAN抑制多发性骨髓瘤的增殖,促进其凋亡,可能与线粒体凋亡信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 橘皮提取物 多发性骨髓瘤细胞 U266细胞株 细胞增殖 细胞凋亡
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白消安抑制多发性骨髓瘤细胞恶性生物学特性的分子机制
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作者 黄涛 殷悦 +2 位作者 骆云龙 林方珩 刘德斌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1426-1431,共6页
目的:探讨白消安对多发性骨髓瘤细胞恶性生物学特性的影响,并探索其分子机制。方法:予不同浓度梯度白消安干预多发性骨髓瘤RPMI8226细胞,MTT法检测细胞增殖活力,Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR技术检测... 目的:探讨白消安对多发性骨髓瘤细胞恶性生物学特性的影响,并探索其分子机制。方法:予不同浓度梯度白消安干预多发性骨髓瘤RPMI8226细胞,MTT法检测细胞增殖活力,Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR技术检测凋亡调控分子Bax、Bcl-2及Wnt3a/β-catenin通路信号分子mRNA的表达情况,Western blot技术检测Bax、Bcl-2及Wnt3a/β-catenin通路蛋白的表达改变。结果:白消安可明显抑制骨髓瘤RPMI8226细胞细胞增殖活性,并诱导其凋亡(P<0.05)。予不同浓度白消安干预细胞48 h后,可使抗凋亡蛋白Bcl-2表达减低,并上调促凋亡蛋白Bax的表达,同时抑制Wnt3a/β-catenin信号通路激活以诱导RPMI8226细胞发生程序性死亡(P<0.05)。结论:白消安可抑制骨髓瘤RPMI8226细胞恶性生物学特性,其作用机制可能与调控Bcl-2家族蛋白表达及抑制Wnt3a/β-catenin信号通路激活有关。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 白消安 恶性生物学特性 分子机制
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miR-214对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其机制
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作者 盛秀云 张磊 王艳军 《山东医药》 CAS 2023年第34期47-50,共4页
目的探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞中微小RNA-214(miR-214)的表达对瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其机制。方法采用RT-qPCR法检测MM细胞株IM-9、U266、Lp-1、H929及人正常浆细胞中miR-214的表达。取U266细胞,随机分为miR-214 mimics组... 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞中微小RNA-214(miR-214)的表达对瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其机制。方法采用RT-qPCR法检测MM细胞株IM-9、U266、Lp-1、H929及人正常浆细胞中miR-214的表达。取U266细胞,随机分为miR-214 mimics组和mimics-NC组,分别转染miR-214 mimics和mimics-NC至两组U266细胞,RT-qPCR法检测转染后两组细胞miR-214的表达差异采用平板克隆形成实验、CCK-8实验、流式细胞术分别检测转染后两组细胞集落形成数目,24、48、72、96 h时OD值以及凋亡率和细胞周期占比的差异,Western blotting法检测转染后两组细胞中FOXM1蛋白表达差异。结果miR-214在IM-9、U266、Lp-1、H929细胞中的表达低于正常浆细胞(P均<0.05)。转染后,与mimics-NC组相比,miR-214 mimics组U266中miR-214表达升高(P<0.05),集落形成数目下降(P<0.05),24、48、72、96 h时OD值降低(P均<0.05),细胞凋亡率、细胞周期G_(0)/G_(1)占比明显升高(P均<0.05),S期和G_(2)/M期占比明显降低(P均<0.05),FOXM1蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论MM细胞中miR-214呈低表达,上调miR-214可抑制MM细胞增殖并促进其凋亡,细胞周期阻滞于G_(0)/G_(1)期;其机制可能是通过抑制FOXM1基因表达实现的。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 微小RNA-214 叉头框蛋白M1 细胞肿瘤生物学特性
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Mangiferin抑制多发性骨髓瘤恶性生物学特性与发挥抗癌效应机制的实验研究
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作者 刘彦权 殷悦 +2 位作者 陈玉婷 沈建箴 唐焕文 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期794-800,共7页
目的:探讨纯中药提取物Mangiferin对多发性骨髓瘤(MM)细胞恶性生物学行为的影响,分析Mangiferin抗骨髓瘤效应的分子机制,为MM替代治疗提供实验依据。方法:不同浓度Mangiferin干预人MM细胞株U266、RPMI8226细胞后,CCK-8法检测细胞增殖,An... 目的:探讨纯中药提取物Mangiferin对多发性骨髓瘤(MM)细胞恶性生物学行为的影响,分析Mangiferin抗骨髓瘤效应的分子机制,为MM替代治疗提供实验依据。方法:不同浓度Mangiferin干预人MM细胞株U266、RPMI8226细胞后,CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡及相关信号通路蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP)、CXC趋化因子受体(CXCR)家族的表达变化。结果:Mangiferin可抑制U266、RPMI8226细胞增殖活性,并诱导其凋亡。当Mangiferin干预U266和RPMI8226细胞48 h后,U266和RPMI8226细胞中Bcl-2家族促凋亡蛋白Bax表达上调,并下调survivin、Bcl-xL蛋白的表达同时水解活化caspase-3以促进细胞凋亡,且显著下调U266细胞中Bcl-2蛋白表达以诱导细胞凋亡(P<0.05)。在Mangiferin干预MM细胞后,其不仅可增加肿瘤抑制因子p53的表达水平,同时通过抑制抗凋亡分子的表达并下调AKT、NF-κB磷酸化水平继而诱发MM细胞程序性死亡。Mangiferin干预后可明显下调U266细胞CXCR4、MMP2及MMP9的表达(P<0.05),对CXCR2、CXCR7以及MMP13的表达基本无影响(P>0.05);而干预RPMI8226细胞后可下调CXCR4、MMP9、MMP13的表达(P<0.01),对MMP2表达影响微弱,对CXCR2、CXCR7的表达基本无影响(P>0.05)。结论:Mangiferin能抑制MM细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活并通过影响Bcl-2家族蛋白表达以及使MMP、CXCR家族核心成员表达受抑等有关。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 MANGIFERIN 恶性生物学行为 程序性细胞死亡 抗癌机制
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生长分化因子15在多发性骨髓瘤细胞MM.1R中的表达及生物学作用研究
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作者 吴菁 王禹 +5 位作者 覃宏平 王其财 黄春妮 姚奕斌 凌志安 李若林 《右江医学》 2023年第4期307-313,共7页
目的探讨生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的表达,并初步分析其对细胞生物学功能的影响。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测GDF15在多发性骨髓瘤细胞株MM.1R中的表达... 目的探讨生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的表达,并初步分析其对细胞生物学功能的影响。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测GDF15在多发性骨髓瘤细胞株MM.1R中的表达水平。再通过构建GDF15的过表达和沉默质粒分别转染MM.1R细胞株,检测细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭、细胞周期和凋亡。结果在72 h、96 h、120 h三个时间点,过表达GDF15组细胞增殖较阴性对照组明显增高,差异有统计学意义(P均<0.05);过表达GDF15后MM.1R细胞的迁移和侵袭能力有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。在72 h和96 h,沉默GDF15组细胞增殖较阴性对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组相比,沉默GDF15组能显著抑制MM.1R细胞的迁移和侵袭能力。48 h后,沉默组G0/G1期细胞比例显著高于阴性对照组,沉默组S期细胞比例显著低于阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05),但未见明显诱导MM.1R细胞凋亡的作用。结论GDF15基因影响多发性骨髓瘤细胞MM.1R的增殖、迁移和侵袭能力,并调节细胞周期,这可能会促进多发性骨髓瘤的进展。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 生长分化因子15(GDF15) 生物学行为 细胞增殖 细胞迁移
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北京油鸡胚胎成纤维细胞系建立与生物学特性研究 被引量:23
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作者 周向梅 马月辉 +2 位作者 关伟军 文杰 李晗 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期209-215,共7页
采取组织块直接培养法,对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养,成功地建立了成纤维细胞系.并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察,以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析.结果表明,该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24 h... 采取组织块直接培养法,对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养,成功地建立了成纤维细胞系.并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察,以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析.结果表明,该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24 h;细胞染色体中二倍体占主体,为76%~88%;乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同工酶电泳图谱与本室其它细胞系有明显差别;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性.该细胞系的建立,使北京油鸡这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来,也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料. 展开更多
关键词 成纤维细胞 细胞系 乳酸脱氢酶 胚胎 鸡胚 PDT 细胞染色体 北京油鸡 生物学特性研究 继代培养
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姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞表达Survivin、Bcl-2、Bax的影响 被引量:13
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作者 刘波 白庆咸 +2 位作者 陈协群 高广勋 顾宏涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期762-766,共5页
为探讨姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的抑制生长和诱导凋亡的作用机制,应用MTT法检测姜黄素对肿瘤细胞的杀伤效应;用流式细胞术(FCM)分析姜黄素作用后肿瘤细胞凋亡及细胞周期的变化;用RT-PCR方法检测Survivin、Bcl-2、Bax mRNA水... 为探讨姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的抑制生长和诱导凋亡的作用机制,应用MTT法检测姜黄素对肿瘤细胞的杀伤效应;用流式细胞术(FCM)分析姜黄素作用后肿瘤细胞凋亡及细胞周期的变化;用RT-PCR方法检测Survivin、Bcl-2、Bax mRNA水平的变化。结果表明:姜黄素明显抑制RPMI8226细胞的增殖,并表现为时间、剂量依赖性,24、48小时IC50值分别为12.15μmol/L、4.9μmol/L;凋亡率由10.6%增加到36.9%(p<0.05),细胞发生G2/M期阻滞;RPMI8226细胞细胞强表达Survivin、Bcl-2,弱表达Bax。RPMI8226细胞经10μmol/L姜黄素处理24小时后,survivin、Bcl-2 mRNA表达下调,而Bax表达上调。结论:姜黄素抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖,并诱导凋亡。姜黄素的抗瘤机制可能与凋亡相关蛋白survivin、bcl-2、bax在转录水平的调节有关。 展开更多
关键词 姜黄素 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞系 SURVIVIN BCL-2 BAX
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云南矮马耳缘组织成纤维细胞系的建立及其生物学特性 被引量:12
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作者 周向梅 马月辉 +1 位作者 关伟军 赵德明 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期863-868,共6页
A Yunnan pony ear marginal tissue fibroblast cell line (NYPEM 2/2) was successfully established using the explant of the ear marginal tissue and then trypsinization the cells from the outgrowth. Observations on cell m... A Yunnan pony ear marginal tissue fibroblast cell line (NYPEM 2/2) was successfully established using the explant of the ear marginal tissue and then trypsinization the cells from the outgrowth. Observations on cell morphology and dynamic growth, analysis of karyotype and isoenzymes of lactate dehydrogenase and malate dehydrogenase were carried out. The expression of recombinant green fluorescence protein in the cells were also undertaken. The results showed that the population doubling time (PDT) of the cells was 24 h; the frequency of cell chromosome number to be 2n=64 was 92.9%; the banding patterns of the isozymes of the two enzymes had significant difference between the Yunnan pony ear marginal fibroblast cell line and the fibroblast cell lines of PEM 2/2, MSHEM 2/2 and BLCHE 2/2 derived from the Picdmont bovine ear, Mongolian ovine ear and Beijing local chicken embryo respectively. Tests for the contamination from bacteria, fungi or mycoplasma were negative; the transfection efficiency for the recombinant plasmid was 32.3%. This newly established cell line make the Yunnan pony breed, a national important genetic resource preserved at cell level, as well as will provide an effective experimental material for genetic studies on the Yunnan pony. 展开更多
关键词 云南矮马 耳缘组织 成纤维细胞系 生物学特性 细胞培养
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多发性骨髓瘤局部成瘤小鼠模型的建立 被引量:8
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作者 刘瑜 周美玉 +1 位作者 孟文彤 徐才刚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期647-651,共5页
本研究探讨多发性骨髓瘤小鼠模型建立的方法。于BALB/c小鼠皮下接种6×105MPC-11骨髓瘤细胞,待荷瘤小鼠出现皮下结节后随机将其中5只处死,取其皮下结节进行HE染色及免疫组织化学(CD138,κ轻链)检测。同时,在荷瘤第5、7、9、11、12... 本研究探讨多发性骨髓瘤小鼠模型建立的方法。于BALB/c小鼠皮下接种6×105MPC-11骨髓瘤细胞,待荷瘤小鼠出现皮下结节后随机将其中5只处死,取其皮下结节进行HE染色及免疫组织化学(CD138,κ轻链)检测。同时,在荷瘤第5、7、9、11、12、35、65天进行荷瘤小鼠血清免疫固定电泳的动态监测。在荷瘤前、荷瘤后第15天和30天对荷瘤小鼠进行血红蛋白的检测。在荷瘤第35及65天进行荷瘤小鼠血清IL-6水平检测。每周观察荷瘤小鼠的生存情况,测量荷瘤小鼠的肿瘤大小,体重变化。结果表明:荷瘤小鼠出现皮下结节的高峰为荷瘤后12-15天,在荷瘤第12天荷瘤小鼠血清中可检测到单克隆免疫球蛋白。皮下结节HE染色、免疫组织化学检测CD138(+)及κ轻链(+)证实了瘤组织为浆细胞来源。荷瘤后第12天时可在小鼠血清中检测出M蛋白,表现为IgG及κ轻链的浓聚条带。荷瘤小鼠的死亡高峰为荷瘤后第20-40天,中位生存时间为31天。在荷瘤第15天时小鼠开始逐渐出现贫血,荷瘤组与正常对照组小鼠的Hb水平在荷瘤第15天及30天时差异有统计学意义(p<0.05)。荷瘤小鼠血清IL-6水平高于正常对照组。结论:采用MPC-11骨髓瘤细胞于BALB/c小鼠皮下接种(接种浓度为6×105个肿瘤细胞)建模,具有造模简单、荷瘤成功率较高、肿瘤生长变化易于观察等优点。监测本模型肿瘤大小的变化、血清IL-6水平及血清免疫固定电泳的变化可用于对多发性骨髓瘤疗效的评价。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 BALB/C小鼠 MPC-11骨髓瘤细胞株 动物模型
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奥沙利铂诱导人骨髓瘤细胞RPMI8226凋亡机制的实验研究 被引量:5
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作者 刘保兰 刘心 +2 位作者 周柰岑 齐美颖 徐波 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期99-104,共6页
本研究探讨奥沙利铂对人骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖抑制作用及其分子机制。将奥沙利铂作用于骨髓瘤细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制率,光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态及超微结构变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,半定量RT... 本研究探讨奥沙利铂对人骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖抑制作用及其分子机制。将奥沙利铂作用于骨髓瘤细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制率,光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态及超微结构变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,半定量RT-PCR检测Bcl-2、caspase-8及caspase-3 mRNA表达量的变化,Western blot检测Bcl-2蛋白表达量变化。结果表明,奥沙利铂可抑制RPMI8226细胞增殖,抑制率呈时间(r=0.979)和浓度(r=0.949)依赖性增强;24 h后在光学显微镜下可见奥沙利铂组细胞数量减少,排列紊乱,细胞形态变得不规则,体积变小,细胞碎片增多,可见凋亡细胞;48 h电子显微镜下可见细胞典型凋亡改变,凋亡小体形成。流式细胞术检测结果显示,奥沙利铂组RPMI8226细胞凋亡率明显增高(P<0.05);奥沙利铂作用24 h后,骨髓瘤细胞被阻滞于S期(P<0.05);而作用48 h后G0/G1期细胞所占比例明显增高(P<0.05);奥沙利铂作用48 h,细胞Bcl-2 mRNA与Bcl-2蛋白表达量未见明显变化,caspase-8及caspase-3 mRNA表达量增加(P<0.05)。结论:奥沙利铂可诱导RPMI8226细胞凋亡,其机制可能与其将细胞阻滞于S期,上调caspase-8、caspase-3 mRNA表达有关;奥沙利铂诱导RPMI8226细胞凋亡可能不通过调节Bcl-2基因表达实现。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞株 奥沙利铂 细胞凋亡 CASPASE BCL-2
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雷公藤内酯醇对硼替佐米诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 杨洋 董红娟 +3 位作者 高广勋 王一苇 顾宏涛 陈协群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期335-338,共4页
本研究旨在探讨雷公藤内酯醇对硼替佐米诱导骨髓瘤细胞株NCI-H929(H929)凋亡的影响。通过MTT法检测不同浓度的雷公藤内酯和硼替佐米单用及联用对H929细胞的增殖抑制作用;采用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果表明... 本研究旨在探讨雷公藤内酯醇对硼替佐米诱导骨髓瘤细胞株NCI-H929(H929)凋亡的影响。通过MTT法检测不同浓度的雷公藤内酯和硼替佐米单用及联用对H929细胞的增殖抑制作用;采用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果表明:雷公藤内酯醇(10-100 ng/ml)和硼替佐米(10-100 nmol/L)单用和联用均可抑制H929细胞增殖,呈浓度依赖性,雷公藤内酯醇和硼替佐米联用组的细胞凋亡率明显高于单用硼替佐米组。经非抑制浓度的雷公藤内酯醇(10 ng/ml)联合硼替佐米(40 nmol/L)处理H929细胞24 h后的凋亡率明显高于单用硼替佐米组(P<0.05)。结论:雷公藤内酯醇能够显著增强硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞的促凋亡活性。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 硼替佐米 骨髓瘤 NCI-H929细胞
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天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究 被引量:9
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作者 冯若飞 马忠仁 +4 位作者 关伟军 李明生 乔自林 冯玉萍 周雪雁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期726-732,共7页
采集天祝白牦牛胚胎肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法继代培养和细胞纯化,扩增至F3代后冷冻保存,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进... 采集天祝白牦牛胚胎肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法继代培养和细胞纯化,扩增至F3代后冷冻保存,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示,原代和传代细胞生长形态良好,群体倍增时间为27.2 h;染色体2n=60;二倍体为74%,占主体;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,LDH5浓度较高,活性较强;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明本研究已成功建立天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系,该细胞系的建立,使天祝白牦牛这一国家重要种质资源在细胞水平上得以保存,也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。 展开更多
关键词 天祝白牦牛 肾组织 成纤维细胞系 生物学特性
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多发性骨髓瘤血管新生的体外研究 被引量:4
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作者 陈文明 吴垠 +2 位作者 朱嘉芷 Jeannette Soria Massoud Mirshahi 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期310-314,共5页
探讨多发性骨髓瘤细胞系培养上清液对人骨髓来源内皮细胞系(HBMEC)的增殖、迁移及血管新生的作用。用含2%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养液培养骨髓瘤细胞系获得上清液,将此培养液培养HBMEC,研究其时HBMEC的增殖及迁移的影响,并将此液... 探讨多发性骨髓瘤细胞系培养上清液对人骨髓来源内皮细胞系(HBMEC)的增殖、迁移及血管新生的作用。用含2%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养液培养骨髓瘤细胞系获得上清液,将此培养液培养HBMEC,研究其时HBMEC的增殖及迁移的影响,并将此液放入含有携带HBMEC微珠的三维纤维蛋白中,研究其对血管新生的影响。结果表明,与含2%FBS的RPMI 1640培养液比较,骨髓瘤细胞系培养液对HBMEC的增殖有明显促进作用(P<0.001),并促进HBMEC的迁移,诱导毛细血管管腔的形成(长度及宽度)(P<0.001)。结论:骨髓瘤细胞系可能通过分泌某些细胞因子促进HBMEC增殖、迁移及血管新生。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 多发性骨髓瘤细胞系 骨髓来源内皮细胞系 血管新生 MM
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裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系的建立及其生物学特性研究 被引量:9
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作者 陈莉 许小平 +4 位作者 王健民 吕书晴 居小萍 周虹 黄正霞 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期507-511,共5页
目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性。方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K56g-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内... 目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性。方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K56g-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内接种等方法研究其生物学特性。结果:建立1株裸鼠高成瘤性人白血病多药耐药细胞系K562-n/VCR。与K562-n细胞比较,K562-n/VCR细胞对VCR耐药为其297.38倍,对蒽环类、鬼臼类等多种化疗药物具有交叉耐药性,bcr-abl融合基因仍为阳性,裸鼠体内成瘤性不变,但成瘤潜伏期缩短,成瘤体积明显增大。结论:裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系K562-n/VCR具有其独特的生物学特性。 展开更多
关键词 裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系 建立 生物学特性 长春新碱 致癌性试验
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