发芽对绿豆皮提取物抗氧化和抗炎活性的影响

为揭示发芽前后绿豆皮提取物(Mung bean coat extract,MBCE)营养物质和体外抗氧化、抗炎活性的变化,以期拓展其应用范围。取未发芽绿豆和发芽4 d绿豆制备MBCE并测定其化学成分含量,通过测定对DPPH自由基、羟基和超氧阴离子自由基的清除能力评价MBCE抗氧化活性,通过建立体外胰蛋白酶抑制模型评价MBCE的抗炎活性。结果表明,发芽后MBCE总缩合单宁和总糖减少,还原糖、总蛋白质和总黄酮增多,总酚变化不大;发芽前后MBCE均具有抗氧化和胰蛋白酶抑制活性,其活性可能与化学成分密切相关;且发芽前MBCE胰蛋白酶抑制活性优于未发芽MBCE。以上研究表明,发芽前后的绿豆皮均具有丰富的营养成分和良好的活性,极具高值化利用潜能。

基于BSA-seq技术定位绿豆种皮颜色基因

种皮颜色是作物重要的驯化性状和形态标记,绿豆种皮颜色与黄酮类化合物含量有关。挖掘绿豆种皮颜色相关基因有助于开发新品种,提高绿豆种皮的应用价值。本研究以冀绿9号(黑色种皮)和资源330(黄色种皮)为亲本构建F2分离群体,采用BSA-seq方法进行定位。结果表明,SNPs和InDels关联区域交集位于4号染色体共3.26 Mb的区段,包含324个基因,其中非同义突变基因共49个,移码突变基因15个。进一步开发KASP分子标记进行精细定位,筛选出高质量KASP引物11对。最终将绿豆种皮色位点定位于4号染色体上的KA330~KA421之间,物理距离为16、302、330~18、013、421 bp(1.71 Mb)。结合转录组数据分析和qRT-PCR表达分析共筛选出6个候选基因,其中LOC106758748基因注释为MYB90,其功能为参与调控黄酮类化合物生物合成,故可能是调控绿豆种皮颜色的关键基因。本研究结果可为绿豆种皮色相关基因的克隆和在育种中的利用提供一定的理论依据。

微波-超声协同提取废弃绿豆种皮中的绿色素

以绿豆芽生产中废弃的绿豆种皮为原料，采用微波一超声波协同提取绿豆种皮色素；通过紫外一可见光谱、高效液相色谱和荧光光谱，初步判定绿豆皮色素的成分；研究了影响绿豆皮色素稳定性因素。结果表明，绿豆皮色素提取的最佳工艺是：乙醇体积分数80％，温度80℃，时间15min，微波功率30w，超声协同；初步判定绿豆皮色素的主要显色成分为叶绿素；绿豆皮色素在温度小于80oC、pH=7—9时比较稳定；Fe^2＋、Fe^3＋、Al^3＋等金属离子对绿豆皮色素稳定性影响较大，遇Cu2＋、Zn^2＋离子分别有沉淀生成；随氧化剂的增大，色素吸光度有变小趋势，这可能是氧化剂破坏绿豆皮色素中的不饱和键所致；还原剂对该色素吸光度的影响很小，常用食品添加剂对该色素无太大影响。

响应面试验优化超声波-酶法提取绿豆皮黄酮类化合物工艺

采用Box-Behnken法优化绿豆皮黄酮类化合物提取工艺。应用超声波-酶法提取,考察超声功率、超声时间、加酶量、酶解时间对黄酮类化合物得率的影响,运用Design-Expert 8.0.5.0软件对绿豆皮黄酮类化合物得率的二次回归模型进行分析,确定最优提取工艺为超声功率192 W、超声时间28 min、加酶量0.24%、酶解时间40 min,在此条件下黄酮类化合物得率为(0.831±0.02)%(n=3),回归模型的预测值与实测值接近,该模型拟合较好;与在相同超声条件下,只用超声波提取相比,黄酮类化合物得率提高了18.54%。绿豆皮黄酮类化合物提取液在光谱条件下扫描,出现黄酮类化合物特征峰带,说明绿豆皮提取液中有黄酮类物质的存在;利用超高效液相色谱分析得出,发芽后绿豆皮中主要含有牡荆素和异牡荆素2种碳苷类黄酮化合物,分别占绿豆皮总黄酮含量的51.99%和45.42%。

绿豆衣清爽饮料护色工艺优化

将绿豆芽生产中"烫豆"工艺的副产物加工成绿豆衣清爽饮料,依据绿豆衣中叶绿素的保护机理对绿豆浸提的护色工艺进行改进,在单因素实验基础上对护色剂进行复配,采用正交实验设计方法确定最佳护色剂配比,提出了绿豆浸提的最佳工艺为:浸提初始温度80℃,浸提时间20min,护色剂(柠檬酸钠0.20%、异VC钠0.016%、三聚磷酸钠0.05%),pH7.76。浸提液经高温高压(121℃,20min)杀菌后仍能保持绿豆自然的黄绿色泽。浸提和护色工艺对绿豆籽粒的种子活力影响很小,仍可进行绿豆芽的加工生产。

绿豆、红小豆和黑豆种皮18种元素分析

为全面了解绿豆皮、红小豆皮和黑豆皮的18种元素含量,充分开发利用豆皮资源,提高豆类加工产品的附加值,用元素分析（elemental analyzer,EA）仪和电感耦合等离子体发射光谱（inductively coupled plasmaatomic emission spectrometer,ICP-AES）仪测定了3种豆皮的N、C、S、Ca、Mg、K、P、Na、B、Ba、Co、Cr、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn和Sr元素含量。结果表明,EA仪测定豆皮中N、C和S方法检出限为32～96μg/g,回收率为97%～115%,相对标准偏差为0.20%～2.63%（n=5）;ICP-AES测定豆皮中Ca、Mg、K、P、Na、B、Ba、Co、Cr、Cu、Fe、Mn、N i、Zn和S r元素方法检出限为0.02～152μg/g,回收率为84%～11 8%,相对标准偏差为0.44%～4.46%（n=5）。黄豆标准物N、Mg、P、B、Ba、Co、Cr、Mn、Ni、Zn和Sr元素测定值在推荐范围内,S、Ca、K、Na、Cu和Fe元素测定值接近推荐值。分析方法快速、简便,达到了应用的要求。

芽用绿豆品种子粒性状及其豆芽生理特性研究

以21份芽用绿豆品种为材料,研究了种皮色泽、种皮比重等种皮性状、百粒重等物理特性、发芽期间的生物产量变化规律、种子吸水速率等生理特性以及绿豆芽产量、豆芽形态特征和感官品质等芽用特性指标,分析了各项物理生理特性指标与芽用特性指标的相关性。结果表明,芽用绿豆品种的产出比、下胚轴粗和下胚轴长等特性指标范围分别为111.7～143.2、7.21～11.79和0.245～0.353;品种的种皮色泽与绿豆芽生物产量、绿豆芽下胚轴粗及下胚轴长无显著相关,而与品种的百粒重呈显著相关性;百粒重与绿豆芽生物产量呈显著负相关;下胚轴粗与绿豆芽生物产量呈极显著负相关;初步建立了适用于评价绿豆品种芽用特性的指标:豆芽产量、下胚轴粗和下胚轴长,筛选出具有较好芽用特性的绿豆品种MB01、MB07、MB19和MB45。

绿豆专用型种衣剂包衣对绿豆形态指标与光合特性的影响

以绿豆品种绿丰2号为试验材料,以研制的绿豆专用型种衣剂包衣为处理,以常规大豆种衣剂(CK1)及微生物种衣剂包衣(CK2)为阳性对照,以未进行包衣的空白种子为阴性对照(CKW),测定其对绿豆形态指标与光合特性的影响。结果表明:运用适宜浓度(活性成分用量分别为100%(Z3)、125%(Z4))的绿豆专用种衣剂可有效增加绿豆总叶绿素含量与净光合速率(二者均显著高于对照CK0、CK1及CKW)、气孔导度(Z3处理高于各对照46.97%~84.82%,达极显著水平),改善光合性能;与常规大豆种衣剂包衣相比降低绿豆株高0.20~1.63 cm,茎粗提高2.07%~6.74%,根长以及侧根数分别增加14.85%~20.30%与11.81%~27.57%,进而调控绿豆苗期地上地下干物质积累与植株形态,确保绿豆苗期健康生长。

蒲公英、绿豆皮保健饮料的工艺研究

以蒲公英、绿豆皮为主要原料研制保健饮料。通过正交试验确定蒲公英及绿豆皮中有效成分的提取条件及饮料生产的最佳工艺。实验结果表明,蒲公英等采用水提法,最佳提取条件:浸提温度为80℃,料液比1∶20(g/mL),浸提时间为30 min;将浸提液进行科学调配得蒲公英、绿豆皮保健饮料,最优配方:蒲公英提取液25%、绿豆皮提取液20%、白砂糖14%、柠檬酸0.1%。该保健饮料生产工艺简单、可行,为蒲公英和绿豆皮资源的有效利用提供了参考。

澄清型绿豆衣饮料的配方研究

以护色后的绿豆浸提液、枣花蜂蜜和干菊花为主要原料,制备澄清型绿豆衣饮料。利用均匀设计进行澄清型绿豆衣饮料的配方研究,通过感官评定确定饮料的最佳配方为:绿豆浸提液92.58%、枣花蜜2.8%、白砂糖3.2%、菊花提取液1.4%、柠檬酸0.02%。该饮料呈自然的淡黄色,色泽清亮,口感清爽、香气适宜。

绿豆皮对高脂饲料联合链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠糖脂代谢的改善作用

通过建立的高脂饲养联合链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠模型,探究绿豆皮对糖尿病小鼠糖脂代谢的影响。动物实验结果表明,将6%的绿豆皮添加到高脂饲料中,通过连续8周的干预,与模型组糖尿病小鼠相比,干预组小鼠的血糖、血脂和糖化血清蛋白水平显著降低(P<0.05),胰岛素分泌水平显著升高(P<0.05),葡萄糖耐量显著改善(P<0.05)。通过对肝组织和胰腺组织进行病理学观察发现,补充绿豆皮可有效缓解糖尿病小鼠的肝和胰腺组织损伤。绿豆皮对糖尿病小鼠具有显著的改善作用,为扩大绿豆皮的应用以及辅助降糖功能食品的开发具有重要的意义。

不同种皮色绿豆黄酮类含量的初步研究

采用硝酸铝络合溶液提取比色法,对3类种皮色的22个绿豆品种进行种皮中黄酮类物质含量的测定。结果表明,3类种皮色绿豆皮中黄酮类物质含量从高到低依次为黑种皮>绿种皮>黄种皮,且绿豆种皮色与绿豆种皮中黄酮类含量呈现极显著相关关系;相同种皮色之间黄酮类含量也存在一定的差异,其中,黑种皮中黄酮类含量最高的是黑珍珠品种,含量为6.46%±0.30%,绿种皮中黄酮类含量最高的是1133-5-2-1-2品种,含量为5.59%±0.32%,黄种皮中黄酮类含量最高的是资源330品种,含量为4.09%±0.10%。研究结果可为今后绿豆品种的选育提供一定的理论依据。

绿豆衣提取物对大鼠肝微粒体CYP3A4活性的影响

目的:研究绿豆衣提取物(MBSC)对大鼠肝微粒体中细胞色素P450(CYP)3A4酶活性的影响。方法:采用高效液相色谱法,以咪达唑仑为CYP3A4探针药物,建立检测咪达唑仑代谢产物1-羟基咪达唑仑在大鼠肝微粒体孵育体系中浓度的方法,对体外肝微粒体孵育体系中孵育时间、肝微粒体量、孵育时间进行优化,以优化后的条件先后评价绿豆衣提取物对CYP3A4活性的影响及其潜在作用机制。结果:MBSC初提物可显著抑制CYP3A4酶活性,其活性仅为对照组的38.14%(P<0.05),且IC_(50)值为489.7μg·ml^(-1),抑制机制为竞争-非竞争性抑制。结论:绿豆衣提取物在体外对大鼠CYP3A4酶的活性具有抑制作用,尚需进一步应用体内模型评价其对CYP3A4活性的影响。

绿豆衣和绿豆仁中黄酮含量的测定与比较

绿豆衣和绿豆仁中富含黄酮类物质,本文在优化实验条件的基础上,用芦丁作为标准物质,通过紫外-可见分光光度计测定并比较了绿豆衣和绿豆仁中的黄酮含量,发现绿豆衣的黄酮含量(0.82%)高于绿豆仁(0.47%)。该结论对绿豆的综合利用具有重要的参考价值。

鼓粒期遮光对黑绿豆种皮花青素积累及相关基因表达特性的影响

为明确黑绿豆种皮各花青素组分积累规律和遮光对其的影响,以普通绿豆和黑绿豆为试验材料,在大田栽培条件下于花后5d开始对豆荚进行遮光处理。采用分光光度法结合液相色谱串联质谱的方法测定了2个绿豆种皮中不同时期各种花青素组分的积累,利用Real-time PCR方法分析了花青素合成结构基因的表达,并测定了3种花青素合成酶的活性。结果显示,黑绿豆种皮在花后16d(S3时期)开始大量积累花青素,近成熟期时(S4时期)能检测到的花青素组分分别为:飞燕草色素(88.67%,主调色素)、矢车菊色素(8.68%)、原花青素(1.05%)、矮牵牛花色素(0.94%)、天竺葵色素(0.34%)和芍药花色素(0.32%)。其中, 3种主要花青素的主调色素组分分别为飞燕草素-3-O-葡萄糖苷(76.61%)、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(89.17%)、原花青素B3 (28.64%)。Real-time PCR分析表明,黑绿豆种皮花青素合成结构基因PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、F3’H、F3’5’H、DFR、LDOX和UFGT相对表达量显著高于普通绿豆,其中DFR (371.85倍)、LDOX (44.09倍)和F3’5’H (32.99倍)的差异表达倍数最大。黑绿豆种皮中PAL、CHI和UFGT的活性也均大于普通绿豆。9个花青素合成的结构基因表达量和2个花青素合成相关酶的活性与多数花青素组分含量和总含量都呈显著正相关关系。11个花青素合成结构基因的表达量和3个花青素合成相关酶活性在遮光条件下均显著降低,最终导致花青素各组分含量和总量显著降低。研究结果为黑绿豆种皮着色的调控机制解析奠定了基础,也有助于黑绿豆育种的辅助选择。

黔产绿豆衣水分、总灰分及浸出物测定

目的:测定绿豆衣药材中水分、总灰分及浸出物的含量,为建立绿豆衣质量标准提供实验依据。方法:按照《中国药典》2015年版四部0832(第二法)水分测定、2302灰分测定和2201浸出物测定法对绿豆衣进行水分、总灰分、浸出物测定。结果:绿豆衣水分含量在10.9%~12.0%之间;总灰分含量在2.3%~2.5%之间;浸出物含量在3.0%~3.4%之间。结论:建议绿豆衣水分限度值为15%;总灰分限度值为3.0%;浸出物标准不得少于2.5%。

黔产中药材绿豆衣薄层色谱鉴别方法研究

目的:研究绿豆衣薄层色谱鉴别方法,为黔产绿豆衣的质量标准建立提供依据。方法:以聚酰胺薄膜板,正丁醇∶乙酸∶水∶氯仿(6∶2∶2∶1)的上层液为展开剂,展开后喷以1%三氯化铝溶液后晾干,置紫外灯光(365 nm)下检视,与对照品牡荆素、异牡荆素比较。结果:绿豆衣药材与对照品牡荆素、异牡荆素在聚酰胺薄膜板相应位置上显相同颜色的荧光斑点。结论:该方法简单可行,重现性好,结果可靠,可用于绿豆衣薄层色谱标准的制定。

生物种衣剂对绿豆生长及产量的比较研究

以绿豆品种小明绿为试验材料,采用拌种方法,对比研究Ⅰ型生物种衣剂(T_(1)),Ⅱ型生物种衣剂(T_(2))及商品化的化学种衣剂(T_(3))对绿豆生长及产量的影响。田间试验结果显示,T_(1)处理在结荚期显著促进绿豆干物质的积累,在幼苗期显著降低还原糖含量;T_(2)处理在幼苗期显著增加还原糖含量;T_(3)处理在分枝期显著增加还原糖含量。T_(1)、T_(2)、T_(3)处理分别比对照增产2.88%、10.98%、13.71%。结果表明,Ⅱ型生物种衣剂能促进绿豆的生长,对绿豆有明显的增产效果。