The significance of proto-oncogene HGF/SF receptor c-Met mRNA expression in nasopharyngeal carcinoma

Objective: To explore the expression of c-Met mRNA in nasopharyngeal carcinomas (NPC) and its relation with clinical biological behavior. Methods: In situ hybridisation was used to detect mRNA expression of c-Met in 15 cases of non-tumor nasopharyngeal (NP), 55 cases of NPC. Results: The positive rates of c-Met mRNA in NP and NPC cells were 13.3% (2/15) and 61.8% (34/55) respectively. The expression of c-Met mRNA was significantly correlated with lymph node metastasis, local invasion (skull base erosion), and clinical stage. In cases with cervical lymph node metastasis, local invasion, and clinical stage III and IV (UICC), the positive rates of expression of c-Met mRNA were significantly higher than that in those without the conditions mentioned above (P < 0.05 or P < 0.01). But it was not significantly correlated with age, gender, histo- logic grade, and cranial nerve palsy (P > 0.05). Conclusion: The abnormal expression of c-Met gene was well correlated with the biological behavior of metastasis and invasion. To detection the expression of c-Met mRNA could serve as an important index to estimate the prognosis of NPC. C-Met may be a new diagnostic/therapeutic target of NPC.

子宫颈鳞癌中PTEN、C-myc、P27的表达及其临床意义

目的:探讨PTEN、C-myc、P27在正常宫颈黏膜上皮、宫颈上皮内瘤变(CINⅡ-Ⅲ)及宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测40例正常宫颈黏膜上皮、40例宫颈上皮内瘤样病变(CINⅡ-Ⅲ)及40例宫颈鳞癌组织中PTEN、C-myc及P27的表达。结果:PTEN、C-myc、P27的阳性表达率在正常宫颈黏膜上皮、宫颈上皮内瘤样病变(CINⅡ-Ⅲ)及宫颈鳞癌中分别为87.50%、50.00%、32.10%,25.00%、52.50%、82.50%和78.90%、40.30%、12.50%;PTEN蛋白和P27蛋白的失表达和C-myc蛋白的高表达,与宫颈鳞癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05);宫颈鳞癌组织中PTEN及P27的表达具有相关性(P<0.01)。结论:PTEN、P27蛋白低表达和C-myc蛋白的高表达与宫颈癌的发生、发展、浸润及转移有关,联合检测PTEN、C-myc及P27的表达可以在一定程度上预测宫颈癌患者预后并指导治疗。

myc族癌基因与食管癌浸润和转移的关系

目的 :为研究食管癌病人癌组织中 myc基因的扩增情况 ,探讨 myc基因与食管癌浸润和转移的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)进行测定。结果 :淋巴结转移阳性组的 myc基因扩增率 (71.4% )明显高于淋巴结转移阴性组 (16 .7% ) ,且myc族癌基因的扩增率随癌浸润程度的加重而增高 ,具有明显相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :myc族癌基因的过表达与食管癌的浸润和转移关系密切 ,m yc基因的表达情况可作为评价食管癌预后新的指标。

原癌基因蛋白质c-Myc及骨膜蛋白在脑胶质瘤中的表达及与肿瘤侵袭转移的相关性

目的探讨原癌基因蛋白质c-Myc及骨膜蛋白在脑胶质瘤中的表达及与肿瘤侵袭转移的相关性。方法回顾性分析2017年2月—2018年10月行肿瘤切除术的脑胶质瘤82例作为研究组,根据WHO胶质瘤分级分为低级别组32例、高级别组50例;另选取同期行颅内减压手术的脑外伤60例作为对照组。检测并比较脑胶质瘤组织、正常脑组织中c-Myc和骨膜蛋白表达阳性率,c-Myc和骨膜蛋白与肿瘤侵袭转移的相关性采用Pearson直线相关分析。结果研究组c-Myc和骨膜蛋白表达阳性率均高于对照组(P<0.01)。高级别组c-Myc和骨膜蛋白表达阳性率均高于低级别组(P<0.05,P<0.01)。c-Myc和骨膜蛋白与肿瘤侵袭转移呈显著正相关(P<0.01)。结论c-Myc及骨膜蛋白在脑胶质瘤中呈高表达,并且与肿瘤侵袭转移呈正相关。脑胶质瘤组织中c-Myc和骨膜蛋白表达水平可为患者病情和预后评估提供参考。

NDRG1在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与侵袭、转移的关系

目的研究NDRG1(N-myc downstream regulated gene 1)基因在乳腺浸润性导管癌中的表达,及其与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化法检测26例伴淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌和45例无淋巴结转移的乳腺癌中的NDRG1、MMP2、MMP9、TIMP2、E-cad的表达状态。结果乳腺癌伴淋巴结转移的标本中NDRG1的表达率低于无淋巴结转移标本(P<0.01)。NDRG1蛋白的表达与TIMP2的表达正相关(P<0.05);而与MMP2、MMP9和E-cad的表达无关(P>0.05)。结论NDRG1与浸润性导管癌的侵袭和转移能力密切相关,可能是一个候选的肿瘤转移抑制基因,并且可能成为乳腺癌的一个有用的预后指标。

癌基因Gli2促进肾癌细胞的体外侵袭能力

目的:研究Gli2与肾癌细胞侵袭之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色的方法对41例肾癌临床标本中Gli2的表达情况进行检测,并分析Gli2在局部侵袭性肾癌和非局部侵袭性肾癌中的表达差异。运用肾癌细胞模型,通过过表达Gli2质粒或添加Gli2特异性抑制剂干预细胞,采用体外侵袭实验分析Gli2在肾癌细胞侵袭能力中的作用,RT-PCR检测Gli2对细胞侵袭相关基因的调控作用。结果:Gli2蛋白在T_(3-4)期肾癌中的表达水平明显高于T_(1-2)期(P<0.05),Gli2过表达能明显促进肾癌细胞的体外侵袭能力,反之,Gli2特异性的抑制剂Gant61则显著减弱肾癌细胞的体外侵袭能力。Gli2抑制肾癌细胞上皮标记物E-Cadherin的表达,上调间质标记物N-Cadherin,Vimentin,MMP-2及MMP-9的表达;Gli2抑制剂的作用则相反。结论:Gli2通过调控侵袭相关基因的表达促进肾癌细胞的侵袭。

胃癌组织的细胞早期凋亡与Bcl-2蛋白、PAI-1活性的研究

目的 研究不同胃癌组织中的细胞凋亡与侵袭转移的相关性。方法 收集 4 1例胃癌新鲜组织 1.0cm3大小 ,分离单细胞悬液 ,流式细胞仪检测早期凋亡指数 (EAI) ;免疫组化SABC法检测邻近胃癌组织中Bcl- 2蛋白的表达 ;- 80℃冰箱冻存后成批匀浆 ,检测上清液的PAI- 1比活性。结果 EAI在弥漫型胃癌与肠型胃癌以及有无淋巴结转移中差异显著 [(18.2± 3.5 ) %vs (11.4± 3.7) % ,P <0 .0 0 1;(14 .2± 3.9) %vs (2 0 .7± 3.5 ) % ,P <0 .0 0 1) ]。肠型胃癌 84 % (11 13)Bcl- 2阳性 ,弥漫型胃癌中只有 36 % (12 2 8)阳性 ,差异显著 (P <0 .0 5 )。淋巴结转移的胃癌中 5 9% (17 2 9)Bcl- 2阳性 ,无淋巴结转移的 33% (4 12 ) ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。弥漫型胃癌的PAI- 1比活性高于肠型胃癌组织 [(0 .76± 0 .12 )vs (0 .5 4± 0 .12 )Au ml,P <0 .0 1) ],有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者 [(0 .71± 0 .18)vs (0 .5 2± 0 .18)Au ml,P <0 .0 5 ) ]。结论 EAI与Bcl- 2是肿瘤组织中细胞早期凋亡的指标 ,两者在不同组织和有无淋巴结转移中有重要意义 ;其与侵袭转移指标PAI- 1无直接的相关性。

钙激活中性蛋白酶抑制剂对肝癌细胞生物学行为及Src基因表达的影响及意义

目的观察钙激活中性蛋白酶-2(Calpain-2)抑制剂ALLM对不同迁移能力肝癌细胞系侵袭迁移能力及Src基因表达的影响,并探索ALLM抑制肝癌的机制。方法常规细胞培养肝癌细胞系MHCC97-H、MHCC97-L、HepG2及正常人肝细胞HL-7702,经高浓度抑制剂ALLM处理后采用划痕实验、Transwell实验及western-bolt方法观察3株肝癌细胞及人正常肝细胞侵袭迁移能力及肝癌细胞中Src基因表达变化。结果与对照组比较,经ALLM处理的MHCC97-H、MHCC97-L的迁移距离、穿膜细胞的吸光度OD值差异具有统计学意义(P<0.05);转移性MHCC97-H、MHCC97-L肝癌细胞系Src蛋白的表达量显著下降(P<0.01);HepG2及正常人肝细胞HL-7702与转移性肝癌细胞迁移距离、穿膜细胞吸光度OD值及Src表达量比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论ALLM抑制Calpain-2的活性使肝癌细胞的迁移和侵袭能力显著下降,其机制可能与抑制原癌基因Src的表达和Src蛋白的活性有关。

ABC294640抑制卵巢癌侵袭及转移的实验研究

目的:观察ABC294640对人卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法:用细胞侵袭小室法(Transwell)检测ABC294640对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;用细胞蛋白免疫印迹(Western blotting)法分析ABC294640对卵巢癌细胞中c-Myc蛋白表达水平的调节作用。建立卵巢癌腹腔移植瘤模型,观察ABC294640对肿瘤体内转移作用的影响及其对体内c-Myc表达的影响。结果:50μmol的ABC294640作用卵巢癌细胞后其侵袭、迁移能力受到显著抑制,细胞中c-Myc蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。在裸鼠腹腔移植瘤模型中,与对照组比较,ABC294640用药组中腹腔转移灶数量显著减少(P<0.01)。肿瘤组织中c-Myc表达水平显著低于对照组(P<0.01)。结论:ABC294640能抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力,其抗肿瘤侵袭转移的作用机制可能与c-Myc蛋白的表达下调有关。

乳腺浸润性癌中E2F1和P16蛋白的表达及意义

目的探讨转录因子E2F1和P16蛋白在乳腺浸润性癌中的表达及其对乳腺癌发生、发展及预后评估的意义,并为乳腺癌的靶向治疗提供一定的依据。方法采用免疫组织化学方法检测61例乳腺浸润性癌、49例导管内乳头状瘤及58例乳腺增生组织中E2F1和P16蛋白的表达情况。结果 E2F1在乳腺浸润性癌、导管内乳头状瘤及乳腺增生组织中的阳性率分别为78.7%、12.2%和1.7%,前者与后二者分别比较差异有统计学意义(P<0.05);P16在乳腺浸润性癌、导管内乳头状瘤及乳腺增生组织中的阳性率分别为34.4%、57.1%和70.7%,前者与后二者分别比较差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织中E2F1和P16阳性表达与患者年龄及肿瘤TNM分期差异无统计学意义(P>0.05),与淋巴结转移及组织学分级差异有统计学意义(P<0.05),E2F1和P16蛋白在癌组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,呈显著负相关性(r=-0.297,P<0.05)。结论 E2F1、P16蛋白可能参与了乳腺癌的发生和发展,E2F1蛋白的阳性表达与P16失表达可能是患者预后差的指标,二者联合检测更有利于评估预后,同时可为乳腺癌新的生物靶向治疗提供依据。

H-ras癌基因转染后SMMC7721细胞转移特性的体内外检测

目的 :研究H -ras癌基因与肝癌转移行为的关系。方法 :应用基因转移技术将H -ras癌基因导入人肝癌细胞株SMMC772 1,通过对几种转移相关指标的体内外检测 ,观察转染前后细胞转移特性的变化。结果 :体外检测显示转染后细胞的粘附、运动能力提高 ,Ⅳ型胶原酶 (cⅣase)的分泌增加 ,表皮生长因子受体 (EGFR)表达增加 ,且上述变化与H -ras基因的蛋白产物p2 1的表达有明确的相关关系。裸鼠体内实验性转移试验为阴性结果。结论 :H -ras癌基因能在体外诱导人肝癌细胞转移表型的产生 ,提高细胞的转移潜能 ,但在活体内还受多种正性、负性调控因子的影响。

TRIM55在胃癌组织、细胞中的表达变化及其与肿瘤恶性生物学行为的关系

目的观察胃癌组织中TRIM55的表达变化,探讨TRIM55与胃癌预后的关系,以及TRIM55表达变化对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法胃癌患者91例,取肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测TRIM55,分析TRIM55表达与胃癌临床病理参数及预后的关系。将胃癌MGC803细胞分为两组,即转染靶向TRIM55的siRNA组(si-TRIM55组)和转染阴性对照干扰组(si-NC组),采用CCK-8实验检测两组细胞增殖能力,采用Transwell实验检测细胞迁移能力和侵袭能力。结果胃癌组织中TRIM55高表达率高于癌旁组织(P<0.05)。TRIM55高表达率在Ⅰ+Ⅱ期者低于Ⅲ期者,无淋巴结转移者低于有淋巴结转移者,T 1+T 2期者低于T 3+T 4期者(P均<0.05)。TRIM55高表达患者5年生存率和中位生存期低于低表达者(P均<0.05),淋巴结转移、TNM分期、TRIM55表达水平是胃癌预后的独立影响因素。si-TRIM55组培养24、48、72、96 h细胞增殖能力均低于si-NC组(P均<0.05)。Transwell细胞迁移实验和侵袭实验中,si-TRIM55组穿膜细胞数均少于si-NC组(P均<0.05)。结论TRIM55在胃癌组织中高表达,并与较差的预后相关;降低TRIM55表达可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和转移。

MTA1、nm23、c-myc在肝癌组织中的表达及其相关性

目的检测肝癌组织及相应癌旁组织中MTA1、nm23、c-myc的表达,探讨三者之间的相关性及与肝癌侵袭、转移和肝癌生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学法检测60例肝癌组织及其相应癌旁组织中MTA1、nm23、c-myc蛋白的表达,并结合相关临床病理特征进行分析。结果①肝癌组织中MTA1蛋白、c-myc蛋白的阳性表达率显著高于其相应癌旁组织(P<0.01),而肝癌组织中nm23蛋白的阳性表达率显著低于其相应癌旁组织(P<0.01)。②在肝癌组织中MTA1蛋白、c-myc蛋白的高表达及nm23蛋白的低表达,均与肿瘤分化程度,肝内、外转移及门静脉癌栓相关(P<0.05)。此外,MTA1蛋白的高表达及nm23蛋白的低表达还与HBsAg水平有关(P<0.05),c-myc蛋白的高表达还与有无肿瘤包膜有关(P<0.05)。③Spearman相关分析显示,MTA1与nm23的表达呈负相关(rs=-0.625,P<0.01),MTA1与c-myc的表达呈正相关(rs=0.392,P<0.05),而nm23与c-myc之间未见明显相关性。结论 MTAl、c-myc蛋白水平的高表达和nm23蛋白水平的低表达与肝癌的侵袭、转移有关,三者的联合检测可用于判断肝癌的生物学行为,有助于肝癌的基础研究及临床治疗。

长链非编码RNA LINC00342在头颈鳞癌中的生物学功能及临床意义

目的明确长链非编码RNA LINC00342表达水平与头颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)患者临床病理参数的关系,研究LINC00342在头颈鳞癌细胞中的生物学功能。方法分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库头颈鳞癌转录组中LINC00342的表达,利用转录组测序技术检测山西医科大学第一医院27例喉鳞癌组织中该基因的表达;利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测人胚肺二倍体细胞2BS和头颈鳞癌细胞系FD-LSC-1、CAL-27、Detroit562中LINC00342的表达水平;使用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲降头颈鳞癌细胞中该基因的表达,利用细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭等实验检测肿瘤细胞恶性表型的变化;生物信息学方法构建以LINC00342为核心的竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络,并进行基因本体论(gene ontology,GO)富集分析。使用SPSS 25.0软件和GraphPad Prism 6软件进行统计学分析及作图。结果TCGA数据库收录的头颈鳞癌组织与数据库对应的正常组织相比,LINC00342的相对表达量差异无统计学意义(P=0.522);但其表达水平与患者颈淋巴结转移、病理学分级呈正相关,男性患者的表达水平高于女性患者(P值均<0.05)。通过转录组测序发现,LINC00342在我院27例喉鳞癌中的相对表达量高于癌旁正常黏膜组织(t=1.56,P=0.036)。LINC00342在头颈鳞癌细胞系FD-LSC-1、CAL-27和Detroit562中表达均显著上调(t值分别为-12.17、-23.26和-388.57,P值均<0.001)。分别转染si-LINC00342-1和si-LINC00342-2敲降LINC00342,可抑制头颈鳞癌细胞FD-LSC-1、CAL-27和Detroit562增殖(t值分别为8.95和4.84,2.70和5.55,2.02和3.70)、克隆形成(t值分别为6.66和6.17,7.38和11.65,4.90和5.79)、迁移(t值分别为8.21和7.19,5.76和6.46,6.28和9.92)和侵袭能力(t值分别为9.29和10.25,11.30和11.36,8.02和8.66),同时促进FD-LSC-1及CAL-27细胞凋亡(t值分别为-2.21和-5.83,-3.05和-5.25),差异有统计学意义(P值均<0.05)。以LINC00342为中心的ceRNA调控网络包括10个下调的微核糖核酸(microRNA)节点和647个上调的mRNA节点,GO分析表明这些mRNA主要聚类在22个生物过程、32个分子功能以及12个细胞组分方面。结论LINC00342高表达与头颈鳞癌恶性进展相关,具有促进头颈鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭以及拮抗凋亡的重要生物学功能,是头颈鳞癌潜在的重要分子标志物。

miRNA-34a及Notch1对浸润性膀胱尿路上皮癌细胞转移潜能的影响

目的探讨微小RNA(miRNA)-34a(miR-34a)及Notch1对浸润性膀胱尿路上皮癌(invasive bladder urothelial carcinoma,IBUC)细胞株转移潜能的影响。方法体外培养IBUC细胞系T24与5637细胞,分别以miR-34a表达质粒与其对照质粒及小干扰RNA(siRNA)Notch1表达质粒与其对照质粒转染IBUC细胞珠T24与5637细胞,以便经miRNA载体过表达miRNA-34a及RNA干扰技术沉默Notch1。通过细胞转染实验、细胞增殖实验、细胞迁移实验以及细胞侵袭实验研究抑癌因子miR-34a及沉默癌基因Notch1对IBUC细胞转移潜能的影响。结果 miR-34a表达质粒与siRNA Notch1表达质粒的转染结果:转染miR-34a后,T24细胞与5637细胞的miR-34a表达均显著增高,分别为转染对照质粒的T24细胞与5637细胞的10.69倍与14.27倍(P均<0.01);转染si-Notch1后,Notch1蛋白的表达水平下降;MTS法检测结果显示,转染miR-34a后及转染si-Notch1后,T24及5637细胞的增殖均受到明显抑制,增殖速率均减慢,(P均<0.01);转染miR-34a的T24与5637细胞迁移细胞与侵袭细胞数量均减少,同株细胞的组间计数比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论在IBUC的T24与5637细胞株中,过表达miR-34a与沉默Notch1均能抑制T24与5637两种细胞株的迁移、侵袭能力,依据我们前期实验的结果推测,在IBUC中,miR-34a可靶向调节Notch1继而对细胞的迁移、侵袭发挥抑制作用。miR-34a有望作为一个新的肿瘤抑制因子,为IBUC的早期诊疗及预后评价提供理论参考。