Antibody Detection on Mycoplasma capricolum subsp. Capripneumoniae in Qinghai Province

[Objective] The aim was to investigate the prevalence of Mycoplasma capricolum subsp. Capripneumoniae in Qinghai Province. [Method] By using indirect hemagglutination test kit for detecting Mycoplasma capricolum subsp. Capripneumoniae,208 goat serums were detected. [Result] The positive rate of goat sera was 16.3%,and the positive rate of sera from different regions ranged from 6.7% to 24.3%. [Conclusion] The infection rate of Mycoplasma capricolum subsp. Capripneumoniae was high in Qinghai Province,so it is necessary to strengthen the prevention and control of this disease.

山羊传染性胸膜肺炎病原体4株国内分离株的重新分类

山羊传染性胸膜肺炎（Contagious Caprine Pleuropneumonia,CCPP）是由山羊支原体山羊肺炎亚种（M.capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp）引起的高度接触性传染病,对4株CCPP中国分离株进行分子特征研究,确定其分类地位。针对3段基因（A、B、C）,对扩增产物进行酶切鉴定和测序,将结果与丝状支原体簇的6个成员进行遗传衍化分析。在A片段,4株中国分离株的扩增产物经PstI酶切后的结果与Mccp代表株F38相同,为548、420、128等3条带,其他5个丝状支原体簇成员只有420、128bp两条带。在B片段,序列分析结果显示4株中国分离株与F38同源性为99.5%,与山羊支原体山羊亚种Mcc代表株kid的同源性为98.9%,与丝状支原体山羊亚种MmcZZ株同源性仅为95.4%。在C片段研究发现,4株中国分离株的序列与Mmc模式株PG3株同源性为67.4%~67.6%,与2株Mcc8601-50和California Kid同源性为95.1%~98.4%,与3株Mccp97097ET、Gabes和F38的同源性为99.6%~99.8%。通过对中国分离的87001、87002、367、1653等4株CCPP病原体的分子特征研究,首次提出其与山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）亲缘关系最近,应归属为Mccp,并将国内流行的山羊传染性胸膜肺炎的病原定名为Mccp。

一株山羊支原体山羊肺炎亚种的分离鉴定与分子特征

从送检的山羊肺炎肺脏中成功分离到一株支原体,经过3次克隆纯化后进行生化试验、电镜观察、PCR及酶切、基因特征鉴定,结果显示分离物SD3属于山羊支原体山羊肺炎亚种成员。将培养物经气管接种2只山羊可引起1只山羊典型发病,体温升高至41.5℃,IgG和IgM抗体效价明显升高,其中IgG抗体变化与临床表现基本同步。剖检发现肺脏发生严重病变,并从中再次分离到该病原体。

从山羊中检测山羊支原体山羊肺炎亚种

山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasmacapricolumsub—sp．capripneumonia，Mccp）最早由MacOwan和Minette于1976年分离，是引起山羊传染性胸膜肺炎（Contagiouscap—rineplemopneumonia，CCPP）的病原体。CCPP是山羊的一种急性或慢性呼吸道传染病，以纤维素性胸膜怖炎为主要特征，被感染羊群无年龄和性别差异，发病率和死亡率都很高。该病的发生最早可追溯到1873年的阿尔及利亚，现广泛流行于非洲和亚洲养羊国家，危害极大，被世界动物卫牛组织（OIE）列入重要疾病名录。

丝状支原体山羊亚种FJ-GT株的分离和鉴定

为明确福建省某羊场发生的疑似山羊传染性胸膜肺炎病例的病原,对肺组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定,用16S r RNA通用引物对分离株进行克隆测序。将分离菌株命名为FJ-GT。结果显示菌落呈典型的油煎蛋状,中心有棕褐色突起;分离株能发酵葡萄糖,不能水解精氨酸,不分解尿素,血细胞吸附试验呈阴性,胆固醇需要试验、美兰还原反应和氯化四氮唑还原反应均呈阳性,溶血试验为β溶血;PCR结果扩增出丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri,Mmc)特异大小为394 bp的目的片段;菌株16S r RNA序列与丝状支原体山羊亚种标准株PG3的序列比较,同源性为99.5%。鉴定结果表明本次分离到的支原体为丝状支原体山羊亚种。本研究首次从病原学角度证明了福建省存在由丝状支原体山羊亚种引起的羊支原体性肺炎,对福建省羊支原体性肺炎的诊断和有效防控具有重要的指导意义。

山羊支原体山羊肺炎亚种0297基因的序列分析及原核表达

山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原为山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp),该病是一种呼吸道传染病,给山羊养殖业带来了严重损失。为了能对该病进行更好的诊断和预防,从临床发生CCPP的山羊肺脏组织中提取Mccp 0297基因,并且在测定其序列的基础上,将该序列与GenBank中已收录的其他9株Mccp的0297基因序列进行比对分析,并对该序列所编码的蛋白进行结构预测及原核表达。结果表明,PCR扩增到全长为717 bp的Mccp 0297基因,其核苷酸序列与其他9株Mccp的0297基因序列的同源性在99%以上;该序列编码的P0297蛋白具有很强的亲水性并可能存在多处的抗原表位分布,原核表达大小约为43 ku的P0297蛋白。

山羊支原体山羊肺炎亚种M1601生长曲线与pH值的测定

为了研究山羊支原体山羊肺炎亚种分离株M1601株在Thiaucourt肉汤培养基中的生长及繁殖特性。利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度及pH值进行了测定，并绘制了生长曲线。结果表明，传代稳定的M1601在Thiaucourt肉汤培养基中培养6～60h为对数生长期．pH值逐渐下降：培养60～72h进入稳定期．pH值降为6．27．培养72h进入衰亡期。这为山羊支原体山羊肺炎亚种培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供了参考数据，以便在生产上更合理地应用其生长规律。

山羊传染性胸膜肺炎分子诊断方法的研究进展

山羊传染性胸膜肺炎（contagious caprine pleuropneumonia,CCPP）是由山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,MCCP）引起的山羊急性或慢性呼吸道传染病,其病原MCCP的分离培养困难,同丝状支原体簇其他成员之间具有相似的生化和血清学性质,因此用传统的病原学和血清学方法无法对其进行准确鉴定。而基于PCR的分子检测技术,凭借其特异性高和敏感性强等诸多优点已被广泛应用于疾病的早期临床诊断。本文综述了CCPP的分子诊断方法,以期为该病的防治提供技术参考。