经腹腔诱导免疫耐受抑制EAE的实验研究

目的 通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)动物模型 ,研究经腹腔诱导免疫耐受的方法及机制。 方法 腹腔内注射可溶性髓鞘碱性蛋白 (MBP)或转输可溶性 MBP致敏的腹腔抗原提呈细胞 (MBP-APC) ,观察各组动物 EAE的发病情况 ,检测各组动物迟发型超敏反应 (DTH)和淋巴细胞体外增殖应答。结果 腹腔内注射 MBP及 MBP-APC的动物发病率明显低于 EAE组 ,临床症状减轻 ,由 MBP引起的 DTH和体外特异的MBP淋巴细胞增殖反应也明显降低。结论 腹腔注射 MBP或 MBP-APC可引起黏膜耐受 ,抑制 EAE的发生。目的 通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)动物模型 ,研究经腹腔诱导免疫耐受的方法及机制。 方法 腹腔内注射可溶性髓鞘碱性蛋白 (MBP)或转输可溶性 MBP致敏的腹腔抗原提呈细胞 (MBP-APC) ,观察各组动物 EAE的发病情况 ,检测各组动物迟发型超敏反应 (DTH)和淋巴细胞体外增殖应答。结果 腹腔内注射 MBP及 MBP-APC的动物发病率明显低于 EAE组 ,临床症状减轻 ,由 MBP引起的 DTH和体外特异的MBP淋巴细胞增殖反应也明显降低。结论 腹腔注射 MBP或 MBP-APC可引起黏膜耐受 ,抑制 EAE的发生。

可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫耐受的机制

目的探讨可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫耐受的机制。方法将EAE小鼠随机分为MOG肽治疗组、卵清蛋白(OVA)处理组和对照组,分别于EAE诱导的第6～16天腹腔注射MOG肽、OVA肽和同等剂量的PBS,通过比较各组小鼠临床评分,脾脏(SP)大小,脾脏和中枢神经系统(CNS)的脑和脊髓浸润淋巴细胞数,流式细胞术分析T细胞表型及其功能,探讨T细胞迁移在可溶性MOG肽诱导的EAE免疫耐受中的作用;流式细胞术分析脾脏、CNS浸润CD11b+抗原提呈细胞(APC)的成熟,免疫荧光技术分析成熟APC与效应性CD4+T细胞的相互作用,研究成熟APC在T细胞迁移中的作用。结果腹腔注射可溶性MOG肽可抑制脾脏内的效应性T细胞向CNS迁移,并诱导脾脏APC成熟,抑制CNS浸润APC成熟;MOG肽诱导的成熟APC可与MOG反应性CD4+T细胞相互作用并聚集在一起,进而抑制效应性T细胞的迁移。结论可溶性MOG肽通过诱导脾脏APC成熟,成熟APC与MOG-T细胞相互作用,抑制脾脏MOG-T细胞向CNS迁移,诱导EAE免疫耐受。

粘附细胞作为APC提高MS淋巴细胞对髓鞘抗原增殖反应的探索

目的 比较粘附细胞作为APC能否较一般方法提高T细胞对神经髓鞘类抗原的增殖反应性和显示出MS对神经髓鞘类抗原的特异自身免疫反应特征。方法 选HLA DR15亚型MS和正常人外周血单个核细胞 ,体外培养。分别用一般T淋巴细胞增殖试验和富集粘附细胞法检测对人神经髓鞘、蛋白脂蛋白 (PLP)和碱性髓鞘蛋白(MBP)淋巴细胞增殖反应性。结果 富集粘附细胞法使MS组和对照组T淋巴细胞对神经髓鞘、PLP和MBP的增殖较标准法提高 (P <0 .0 5 ) ;使MS组以MBP和PLP的增殖反应较对照组的差别具有显著性的意义 ;而对TT无明显提高作用。结论 富集粘附细胞法可提高T淋巴细胞对神经髓鞘、PLP和MBP的增殖反应性 (MS和NC) ,多数情况使MS组和NC组的差别具有显著性的意义 ,对非髓鞘类抗原 (如TT)无这种作用。

多发性硬化/实验性自身免疫性脑脊髓炎中树突状细胞亚群的研究进展

树突状细胞(DC)与T细胞同为多发性硬化(MS)的主要责任细胞。DC与先天性和获得性免疫系统密切相关,并可促进或抑制髓鞘抗原特异性免疫反应。DC亚群是自身免疫反应结局的重要决定因素,但其组织特异性也可能与DC亚群的功能有关。因此,该文综述了近10年来的最新文献,深入了解DC亚群的表型、功能及其在多发性硬化症及其动物模型中的作用,有助于基于DC亚群设计免疫干预方案来治疗MS。

慢性实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠模型不同阶段抗原提呈细胞免疫应答作用分析

目的对MOG35-55肽段诱导的实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠不同时期病理变化特点进行观察分析,探讨在EAE的发生、发展和迁延过程中抗原提呈细胞(APC)所起的作用及其作用机制。方法利用MOG35-55肽段作为免疫原诱导C57BL/6小鼠制作慢性非缓解型EAE模型,在不同时期观察实验动物神经功能变化,进行组织病理学检查,通过WB、RT-PCR等方法检测部分免疫指标。结果研究发现MOG35-55肽段可以成功诱导出慢性非缓解型EAE动物模型。与对照组比较,EAE组小鼠在发病过程中,脑组织出现以单核巨噬细胞、淋巴细胞为主的浸润;脑组织中C3表达降低(P<0.05),MHCⅠ、MHCⅡ和IL-12蛋白表达增加(P<0.05);IL-27和B7 mRNA表达增加(P<0.05)。结论中枢神经系统内APC的活化、MHC分子、IL-12表达增加是EAE发生的早期事件并贯穿整个病理变化过程,由APC免疫应答引发的下游伴随事件可以造成EAE动物模型髓鞘直接损伤,APC可能是慢性EAE最终发生的最重要启动和致病因素之一。

神经胶质抗原2胶质细胞与中枢神经系统疾病的研究进展

神经胶质抗原2(NG2)胶质细胞是兼具神经元和胶质细胞特性的特殊细胞,其细胞表面特异性表达NG2硫酸软骨素蛋白多糖。NG2胶质细胞是脑内区别于神经元、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的细胞亚群,广泛存在于发育和成年的哺乳动物中枢神经系统(CNS)中,参与调节CNS的重建、神经网络、轴突生长和多种CNS疾病。CNS失衡在帕金森病、阿尔茨海默病等神经系统疾病的发病机制中发挥重要作用。因此,深入研究NG2与CNS疾病的相关性,可以为疾病的治疗提供新思路。

一种新型融合免疫球蛋白-mGE对慢性小鼠EAE治疗作用的分析评估

目的利用一种新型融合免疫球蛋白-m GE对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)进行治疗并评估疗效,以期能够为单独或联合其他药物治疗此病提供新的思路和方法。方法 MOG35-55肽段诱导C57BL/6小鼠制作慢性非缓解型EAE模型成功后,随机抽取部分模型小鼠,利用一种新型Ig G-IGE的Fc段融合免疫球蛋白进行治疗,观察临床体征及组织病理变化情况,同时检测一些重要的免疫相关指标并加以比对分析。结果 m GE可以通过降低抗原提呈细胞(APC)的主要组织相容性复合物(MHC)类分子,上调抑制性Fc受体CD32的表达从而阻断APC抗原提呈及淋巴细胞激活,明显缓解慢性EAE的神经功能损害症状。结论 m GE可以通过减少APC抗原提呈而缓解慢性EAE的神经功能损伤症状。m GE治疗慢性非缓解型EAE的作用确切,可作为单独或联合其他药物治疗EAE的备选方法之一。

中枢神经系统自身免疫性疾病的遗传研究进展

中枢神经系统(central nervous system,CNS)自身免疫性疾病是一类免疫系统攻击自身神经系统,造成神经系统组织结构和功能损伤的疾病。该类疾病表现复杂多样,遗传易感因素与环境的共同作用可能导致其发病。CNS自身免疫性疾病多为复杂的多基因遗传病,其遗传易感性由多种低外显率的等位基因共同决定的。人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)与CNS自身免疫性疾病的发病最为相关,一些非HLA基因也参与自身免疫性疾病的发病。不同人种患者的风险基因可能不同。基因检测技术的广泛应用和发展加深了我们对CNS自身免疫性疾病遗传学发病机制的理解。未来,CNS自身免疫性疾病的遗传学研究将不仅仅局限于单纯的基因位点与疾病易感性的相关性,疾病预测和治疗靶点开发将成为CNS自身免疫性疾病遗传研究的热点。

髓鞘相关抑制分子和视神经再生

哺乳动物视神经损伤后不能成功再生,除了视网膜神经节细胞再生能力低下外,与中枢神经系统中存在抑制微环境密切相关。少突胶质细胞产生的髓鞘相关抑制分子是构成这种抑制微环境的重要成分。目前已经鉴定的抑制分子主要有 Nogo、髓磷脂相关糖蛋白及少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白,他们通过同一受体复合体转导抑制信号。通过阻滞抑制分子及其受体或改变神经元的内在状态,可以克服抑制分子的抑制作用,促进视网膜神经节细胞轴索再生,为人类视神经损伤修复带来希望。

经腹腔诱导免疫耐受抑制EAE的实验研究(英文)

目的通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)动物模型,研究经腹腔诱导免疫耐受的方法及机理。方法腹腔内注射可溶性髓鞘碱性蛋白(MBP)或转输可溶性MBP致敏的腹腔抗原提呈细胞(MBP-APC),观察各组动物EAE的发病情况,检测各组动物迟发型超敏反应(DTH)和淋巴细胞体外增殖应答。结果腹腔内注射MBP及MBP-APC的动物发病率明显低于EAE组,临床症状减轻,由MBP引起的DTH和体外特异的MBP淋巴细胞增殖反应也明显降低。结论腹腔注射MBP或MBP-APC可引起粘膜耐受,抑制EAE的发生。

Nogo-66蛋白对慢性高眼压大鼠视网膜小胶质细胞功能的影响

目的 探讨Nogo-66蛋白对慢性高眼压大鼠视网膜小胶质细胞表面抗原CD11b及MHC-Ⅱ表达的影响及其对损伤组织抗原呈递作用的干预性质.方法 对照实验研究.采用随机数字表法,将实验动物分为4组：高眼压＋Nogo-66蛋白组,正常眼压＋Nogo-66蛋白对照组,高眼压＋损伤对照组,正常眼压＋损伤对照组.应用532-激光行周边前房角光凝＋巩膜浅层静脉关闭术,建立慢性高眼压动物模型.实验组大鼠接种：于双后足趾及背部皮下多点注射无菌等渗10%Nogo-66蛋白磷酸缓冲液（PBS）,注射后7 d、1个月,分别以0.005%的Nogo-66蛋白PBS注射液2 μl进行玻璃体腔内注射.对照组大鼠接种：以等渗PBS等量于相同部位注射.初次接种后1个月,免疫组织化学法标记视网膜小胶质细胞表面抗原CD11b和MHC-Ⅱ,应用Image-Pro Plus Version 6.0图像分析软件进行图像处理,获得小胶质细胞表面抗原阳性表达的量化指标.实验组与对照组大鼠眼压均值比较,采用两样本计量资料的方差分析;小胶质细胞表面抗原阳性表达水平比较,采用配伍设计多个样本均数比较的t检验.结果 实验组大鼠于建模后7 d眼压开始升高,1个月时眼压最高为（24.16±2.70）mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）,与对照组（15.93±3.28）mm Hg比较,差异有统计学意义（F=2.10,P〈0.05）.在Nogo-66蛋白干预下,正常眼压＋Nogo-66蛋白组大鼠视网膜小胶质细胞MHC-Ⅱ阳性表达百分比为（11.45±1.97）%,显著高于高眼压＋Nogo-66蛋白组（3.92±1.03）%,差异有统计学意义（t=2.14,P〈0.05）;正常眼压＋Nogo-66蛋白组大鼠视网膜神经节细胞层小胶质细胞CD11b表达百分比为（8.15±1.97）%,显著高于高眼压组（1.78±0.63）%,差异有统计学意义（t=2.35,P〈0.05）.结论 外源性Nogo-66蛋白能够刺激视网膜神经节细胞层及神经纤维层小胶质细胞表面抗原CD11b及抗原呈递分子MHC-Ⅱ的阳性表达,提示Nogo-66蛋白具有中枢免疫原性,其有可能激活抗原呈递细胞,完成其呈递损伤抗原的作用.

透明质酸酶对早产兔生发基质-脑室内出血后神经胶质抗原2及髓鞘碱性蛋白表达的影响

目的探讨透明质酸酶(HAase)对生发基质-脑室内出血(GM-IVH)早产兔脑组织的神经保护作用。方法将80只孕29 d新生新西兰大白兔采用随机数字表法分为正常组、GM-IVH对照组、HAase治疗组。GM-IVH对照组和HAase治疗组予50 g/L丙三醇腹腔注射,诱发GM-IVH;对照组予同等剂量9 g/L盐水。颅脑超声筛查GM-IVH情况。HAase治疗组经前囟侧脑室注射透明质酸酶,GM-IVH对照组予同等剂量9 g/L盐水。分别于出生3、7、14 d处死并留取脑组织。采用免疫组织化学方法检测神经胶质抗原2(NG2)的表达,蛋白印记法检测髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达。结果3组早产兔随着时间的推移,NG2的表达水平逐渐降低[正常组、GM-IVH对照组、HAase治疗组NG2在第3、7、14天依次为(62.65±33.58)×10^4、(15.61±4.22)×10^4、(13.54±4.51)×10^4;(54.58±25.48)×10^4、(48.91±22.49)×10^4、(7.18±2.28)×10^4;(148.13±27.30)×10^4、(88.38±14.55)×10^4、(77.98±18.96)×10^4],同一时间点NG2表达水平HAase治疗组均高于GM-IVH对照组,3组在任何时间点两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。3组新生早产兔MBP表达水平随日龄增加而增加[正常组、GM-IVH对照组、HAase治疗组MBP在第3、7、14天依次为(0.30±0.22)×10^3、(1.91±0.43)×10^3、(5.67±2.14)×10^3;(0.87±0.12)×10^3、(1.15±0.22)×10^3、(2.54±0.69)×10^3;(0.91±1.01)×10^3、(2.25±0.66)×10^3、(3.40±1.10)×10^3],其中正常组、HAase治疗组在出生后任何时间点两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论经HAase治疗后,可在一定程度上提高早产兔NG2、MBP的表达,促进少突胶质细胞发育和髓鞘形成。