葛花解酲汤对脾虚湿热型溃疡性结肠炎“炎-癌转化”中相关原抑癌基因表达的影响

探讨葛花解酲汤对脾虚湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)-溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis, UCAC)的“炎-癌转化”小鼠结肠组织中相关原抑癌基因表达的影响。80只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机选出10只为空白组(K组),其余70只建立脾虚湿热模型。脾虚湿热模型建立后,将其随机分为模型1、2、3周期组(M1、M2、M3组)、葛花解酲汤高、中、低剂量组(G、Z、D组)和阳性对照美沙拉嗪组(Y组),10只/组,以氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)/葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)继续建立UC-UCAC的“炎-癌转化”模型。各组给予对应药物治疗4周。观察小鼠一般状态;统计小鼠体重变化;电镜下观察小鼠结肠黏膜超微结构;WB和RT-qPCR分别检测小鼠结肠组织中c-jun、c-fos、c-myc、p53、RB1蛋白及基因的表达。与K组比,M3组小鼠一般状态差,体重增长量显著下降(P<0.01),结肠黏膜上皮细胞核染色不均匀,细胞内线粒体等见大量增生肿胀,c-jun、c-fos、c-myc蛋白及基因表达显著升高(P<0.01),p53、RB1蛋白及基因表达显著降低(P<0.01);与M3组比,各治疗组小鼠一般状态改善,体重增长量升高,结肠黏膜上皮细胞核染色较均匀,细胞内线粒体等增生肿胀情况改善,c-jun、c-fos、c-myc蛋白及基因表达降低,p53、RB1蛋白及基因表达升高,以G、Z和Y组最为显著(P<0.01,P<0.05)。葛花解酲汤可能通过抑制原癌基因c-jun、c-fos、c-myc的激活,促进抑癌基因p53、RB1的表达,调控细胞增殖与凋亡,延缓炎-癌转化进程,修复受损的结肠黏膜组织,预防UCAC的发生。

p16/MTS1基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因缺失 (multipletumorsup pressorgene 1,p16 /MTS1)与骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndrome,MDS)发病的关系。方法 采用PCR方法 ,对 2 9例MDS的 p16 /MTS1基因的缺失情况进行分析 ,讨论其与疾病发生的关系。结果 2 9例MDS患者未见有 p16基因缺失。 结论 p16基因缺失和MDS的发病关系不大。

单体7或7号染色体长臂缺失的意义

本文先介绍带有失去全部染色体7(-7)或失去7号染色体长臂片段(7q-)的疾病,包括MDS和AML,原发性-7(de novo-7),继发性髓系疾病伴有-7者,体质性疾病伴有-7者。本文又论述-7细胞的生物学特性,包括-7发生于哪个阶段的祖细胞,带有-7的祖细胞生长的特点、-7细胞遗传学的异常和缺失的图谱,儿童白血病前期RAS旁路的突变和7q-断点的分析等。总结这些材料,提示先检查患者的染色体,查明缺失的片段和确切的断点,再分析缺失片段及断点附近的基因并进行克隆,由此可能分离出AML和MDS位于7号染色体的抑癌基因,可能为白血病的发病和治疗研究提供新的策略。

高危骨髓增生异常综合征PTEN基因异常表达的临床意义

目的观察高危骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞中PTEN表达情况,探讨其在高危MDS患者临床病理意义以及与疾病转归的关系(相关性),初步评价其对高危MDS的临床意义和判断预后的指导作用。方法采用免疫组化方法(S-P法)检测高危MDS 25例、良性血液病24例(对照组)患者的骨髓(病理石蜡切片)细胞中PTEN表达情况,并对25例高危MDS的治疗反应及疾病转归进行随访。结果高危MDS的PTEN阳性表达率为56.00%;对照组为90%;两者间差异有非常显著性(P<0.01)。以PTEN表达水平标本积分判定≥3分为标准,设高表达组和低表达组:高表达组8例,低表达组17例。高表达组治疗反应率(有效率)62.50%(5/8例);低表达组治疗反应率(有效率)47.06%(8/17例),两者之间差异有显著性(P<0.05)。25例高危MDS均行染色体核型分析,其中异常9例;正常16例;PTEN的表达水平与染色体核型异常无相关性。转急性白血病(MDS-AL)高表达组3/8例(37.50%);低表达组11/17例(64.71%)。结论高危MDS存在PTEN基因表达的异常,PTEN表达与治疗反应有相关性,PTEN对于高危MDS的预后判断有一定的意义。

骨髓增生异常综合征基因缺陷的研究

骨髓增生异常综合征是一种造血干细胞克隆异常性疾病。近代分子遗传学的发展使我们对其分子水平上的形成机制有了进一步的了解。本文主要从原癌基因的异常表达、肿瘤抑制基因表达的缺失和DNA修复机制的异常等方面概括地论述了骨髓增生异常综合征基因缺陷的研究进展。

As_2O_3/TRAIL诱导的骨髓增生异常综合征原始细胞系MDS-L的生物学变化

目的 观察骨髓增生异常综合征 (MDS)髓系原始细胞系MDS L经不同剂量和不同时间的三氧化二砷 (As2 O3 )和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)处理后的生物学变化。方法 体外培养的MDS L细胞经 9种不同浓度的药物及药物组合 (As2 O3 :1,2 ,5mmol/L ;TRAIL :10 0 ,30 0 ,5 0 0 μg/L ,As2 O3 1mmol/L +TRAIL 10 0 μg/L ;As2 O3 2mmol/L +TRAIL 30 0 μg/L ;As2 O3 5mmol/L +TRAIL 5 0 0 μg/L)处理 ,在 2 4 ,4 8和 72h后收获细胞。对未经药物处理的细胞和药物处理后收获的细胞均进行流式细胞仪检测细胞凋亡 ;药物处理 2 4h后的细胞再经体外培养 18d后作形态学观察 ,同时以流式细胞仪检测CD34+ 细胞变化 ,检测药物的促分化作用 ;RT PCR检测P15 ink4b mRNA表达 ;甲基化特异性PCR(MethylationspecificPCR ,Msp)检测P15 ink4bDNA甲基化状态 ;DAB免疫酶标检测P15 ink4b蛋白水平表达。结果 不同的药物组合均可诱导细胞发生凋亡 ,药物处理 4 8h凋亡达高峰 (约 2 5 % ) ,72h时仍有约9%的细胞凋亡。药物处理 (尤其是As2 O3 +TRAIL)导致细胞明显的形态学分化 ,而TRAIL能显著降低CD34+ 细胞比率。未经处理的MDS L细胞基本不表达P15 ink4b,并伴有明显的DNA甲基化。药物处理后P15 ink4b表达增强 。

MDS患者P15基因高度甲基化的研究

目的 :研究P15基因通过甲基化失活在骨髓增生异常综合征 (MDS)发病中的作用。方法 :用甲基化敏感的限制性核酸内切酶消化 ,结合聚合酶链反应 (PCR)技术。结果 :2 0例MDS患者中发现有 9例 (45 % )存在P15基因高度甲基化 ,且多为高危MDS (RAEB、RAEB_t) (P <0 .0 5 )。结论 :P15基因可通过甲基化而失活 ,可能与部分MDS的发生及发展有关。