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血清MyD88和TRAF-6联合检测在儿童重度急性呼吸道感染诊断和预后评估中的价值
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作者 杨静 刘华朋 柳旎 《检验医学》 CAS 2024年第3期237-242,共6页
目的探讨血清髓系分化初级反应蛋白88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)在儿童重度急性呼吸道感染辅助诊断和预后评估中的价值。方法选取2020年1月—2022年6月南阳市中心医院儿童急性呼吸道感染患儿80例(急性呼吸道感染组)。... 目的探讨血清髓系分化初级反应蛋白88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)在儿童重度急性呼吸道感染辅助诊断和预后评估中的价值。方法选取2020年1月—2022年6月南阳市中心医院儿童急性呼吸道感染患儿80例(急性呼吸道感染组)。根据病原学检测结果分为非细菌感染组(42例)和细菌感染组(38例)。根据患儿病情严重程度分为轻度组(28例)、中度组(20例)、重度组(32例)。根据患儿预后情况分为预后良好组(58例)和预后不良组(22例)。以同期80名体检健康儿童为正常对照组。采用多因素Logistic回归分析评估急性呼吸道感染患儿预后的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标诊断儿童重度急性呼吸道感染和评估预后的效能。结果急性呼吸道感染组血清MyD88、TRAF-6水平显著高于正常对照组(P<0.001)。细菌感染组血清MyD88、TRAF-6水平显著高于非细菌感染组(P<0.001)。轻度组、中度组、重度组血清MyD88、TRAF-6水平依次升高(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血清MyD88、TRAF-6单项检测和联合检测诊断重度急性呼吸道感染的曲线下面积(AUC)分别为0.762、0.734、0.876。预后不良组细菌感染、下呼吸道感染、重度病情所占比例和白细胞(WBC)计数、反应蛋白(CRP)、MyD88、TRAF-6水平均显著高于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,重度病情、CRP升高、MyD88升高、TRAF-6升高均是儿童急性呼吸道感染预后不良的危险因素[比值比(OR)值分别为1.693、1.864、3.218、2.869,95%可信区间(CI)分别为1.142~2.510、1.228~2.830、1.561~6.633、1.511~5.446,P<0.05]。ROC曲线分析结果显示,血清MyD88、TRAF-6、CRP单项检测和联合检测判断急性呼吸道感染患儿预后的AUC分别为0.848、0.900、0.817、0.951。结论急性呼吸道感染患儿血清MyD88、TRAF-6水平显著升高,联合检测对儿童重度急性呼吸道感染的辅助诊断和预后评估均有较高的临床价值。 展开更多
关键词 髓系分化初级反应蛋白88 肿瘤坏死因子受体相关因子6 C反应蛋白 急性呼吸道感染 儿童
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血清HDAC4和MYD88水平与急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血转化的关系研究
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作者 刘昌佳 郝洁 +4 位作者 刘敏肖 李银 唐进松 李凡 李鑫 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第11期1313-1317,共5页
目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)和髓样分化蛋白88(MYD88)水平与重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓后发生出血转化的关系。方法选取2020年5月至2022年5月在该院就诊并进行rt-PA静脉溶栓治疗的169例ACI... 目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)和髓样分化蛋白88(MYD88)水平与重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓后发生出血转化的关系。方法选取2020年5月至2022年5月在该院就诊并进行rt-PA静脉溶栓治疗的169例ACI患者作为研究对象,并根据患者进行rt-PA静脉溶栓后是否发生出血转化将其分为转化组(46例)和非转化组(123例),另外选取同期在该院进行体检的156例体检健康者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验对各组血清HDAC4、MYD88水平进行检测,并对转化组和非转化组的一般资料进行比较;采用Pearson相关对ACI患者血清HDAC4和MYD88水平的相关性进行分析;采用多因素Logistic回归分析影响ACI患者rt-PA静脉溶栓后出血转化的相关因素;进一步通过受试者工作特征(ROC)曲线评估HDAC4、MYD88水平及二者联合对ACI患者rt-PA静脉溶栓后出血转化的诊断价值。结果ACI组血清HDAC4水平低于对照组,血清MYD88水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);非转化组和转化组ACI患者的性别、年龄、体重指数、空腹血糖及高血脂、冠心病占比比较,差异均无统计学意义(P>0.05),而患者心房颤动占比、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、发病至溶栓时间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);转化组较非转化组血清HDAC4水平降低,血清MYD88水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析结果显示,ACI患者血清HDAC4水平与MYD88呈负相关(r=-0.401,P<0.001);多因素Logistic回归分析显示,心房颤动、发病至溶栓时间、NIHSS评分、MYD88水平是ACI患者rt-PA静脉溶栓后发生出血转化的危险因素,HDAC4水平是ACI患者rt-PA静脉溶栓后发生出血转化的保护因素(P<0.05);血清HDAC4、MYD88联合检测ACI患者rt-PA静脉溶栓后发生出血转化的曲线下面积为0.876,灵敏度和特异度分别为65.22%和98.37%,优于HDAC4和MYD88单独诊断(Z二者联合-HDAC4=2.298,P=0.022;Z二者联合-MYD88=2.545,P=0.011)。结论ACI患者血清HDAC4和MYD88水平与rt-PA静脉溶栓后发生出血转化密切相关。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶4 髓样分化蛋白88 急性脑梗死 静脉溶栓 出血转化
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基于TLR4/MyD88/NF-κB通路介导的NLRP3炎性小体活性探讨振腹推拿改善CUMS模型大鼠海马组织炎性损伤的手法机制研究
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作者 周可林 董硕 +4 位作者 薛小娜 国生 魏培栋 付国兵 杨靖颐 《环球中医药》 CAS 2024年第10期1948-1954,共7页
目的 观察振腹推拿对抑郁症模型大鼠海马组织Toll样受体4(Toll-like Receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)/核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路介导的NLR蛋白3(NLR protein 3,NLRP3)炎... 目的 观察振腹推拿对抑郁症模型大鼠海马组织Toll样受体4(Toll-like Receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)/核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路介导的NLR蛋白3(NLR protein 3,NLRP3)炎性小体活性的影响,探讨振腹推拿改善抑郁症模型大鼠海马区炎性损伤的作用机制。方法 将40只大鼠随机分为4组,采用慢性不可预见性温和应激方法复制抑郁症大鼠模型。采用离子钙接头蛋白-1(ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba1)免疫荧光染色检测各组大鼠海马组织海马回(cornuammonis, CA)的小胶质细胞活化程度,采用酶联免疫吸附法法检测大鼠海马组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α、白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、IL-10的含量,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR(Real time-PCR,RT-PCR)法检测各组大鼠海马组织中TLR4、MyD88、磷酸化核因子-κB(phospho-nuclear factor kappa-B,p-NF-κB)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)蛋白及其基因表达。结果 (1)与正常组比较,模型组大鼠海马组织CA1、CA2、CA3、CA4区的活化小胶质细胞占比均显著升高(P<0.01)。与模型组大鼠比较,振腹组、氟西汀组大鼠海马组织CA1、CA2、CA4区的活化小胶质细胞占比均显著降低(P<0.01),氟西汀组大鼠海马组织CA3区的活化小胶质细胞占比与模型组相比降低有统计学差异(P<0.05),振腹组大鼠海马组织CA3区的活化小胶质细胞占比与模型组相比仅有降低趋势。(2)与正常组比较,模型组大鼠海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1含量显著升高(P<0.01),IL-10含量显著降低(P<0.01)。与模型组大鼠比较,振腹组、氟西汀组大鼠IL-10含量均显著升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6、Caspase-1含量均显著降低(P<0.01)。(3)与正常组比较,模型组大鼠海马组织TLR4、MyD88、p-NF-κB、NLRP3、ASC的蛋白和mRNA含量均显著升高(P<0.01)。与模型组大鼠比较,氟西汀组大鼠海马组织TLR4、MyD88、p-NF-κB、NLRP3的蛋白含量均显著降低(P<0.01),ASC的蛋白含量下降有统计学意义(P<0.05);氟西汀组大鼠TLR4、MyD88、p-NF-κB、NLRP3、ASC的mRNA含量均显著降低(P<0.01)。与模型组大鼠比较,振腹组大鼠海马组织TLR4、ASC的蛋白含量下降有统计学意义(P<0.05),MyD88、p-NF-κB、NLRP3的蛋白含量显著降低(P<0.01);振腹组大鼠TLR4、MyD88、NF-κB、NLRP3的mRNA含量均显著降低(P<0.01),ASC的mRNA含量均降低有统计学意义(P<0.05)。结论 振腹推拿缓解抑郁模型大鼠抑郁样行为的其机制与抑制海马组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路介导的NLRP3炎性小体活性、改善海马组织炎性损伤有关。 展开更多
关键词 振腹推拿 抑郁症 海马 炎性损伤 Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子-κB通路 NLR蛋白3炎性小体 小胶质细胞活化
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水晶兰苷调节PUM1-TLR4/MyD88信号通路改善IL-1β诱导软骨细胞炎症反应的机制研究
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作者 徐开民 赵红燕 +4 位作者 邓鹏 丁晓明 咸宝安 柏明晓 杨彬 《实用骨科杂志》 2024年第12期1080-1084,共5页
目的研究水晶兰苷对大鼠膝软骨细胞中Pumilio RNA结合家族成员1(Pumilio RNA-binding family member 1,PUM1)-Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response 88,MyD88)信号通路及... 目的研究水晶兰苷对大鼠膝软骨细胞中Pumilio RNA结合家族成员1(Pumilio RNA-binding family member 1,PUM1)-Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response 88,MyD88)信号通路及白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α相关炎性因子的影响,探讨水晶兰苷对大鼠膝骨关节炎软骨细胞的作用机制。方法将大鼠软骨细胞随机分为对照组、模型组、低剂量组、高剂量组,除对照组外,其余3组均通过10 ng/mL的IL-1β诱导细胞炎症,构建大鼠膝关节炎模型;低剂量组、高剂量组分别给予25μg/mL、50μg/mL水晶兰苷进行24 h干预。酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)检测上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测软骨细胞中PUM1、TLR4和MyD88的mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测软骨细胞中PUM1、TLR4和MyD88的蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α含量均升高(P<0.05),PUM1的mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),TLR4和MyD88的mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,低剂量组和高剂量组的IL-1β、IL-6及TNF-α含量均降低(P<0.05),PUM1的mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),TLR4和MyD88的mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论水晶兰苷通过上调PUM1表达,抑制TLR4和MyD88信号通路的传递,进而降低下游炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6表达。 展开更多
关键词 水晶兰苷 Pumilio RNA结合家族成员1 TOLL样受体4 髓样分化因子88 炎症 软骨细胞
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下调丝氨酸/精氨酸富集剪接因子6通过调控髓系分化因子88选择性剪接抑制巨噬细胞炎症反应
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作者 付育 张璐瑶 +3 位作者 程博 石炜业 李霓 王英泽 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1563-1573,共11页
丝氨酸/精氨酸富集剪接因子6(serine/arginine-rich splicing factor 6,SRSF6)属于SR蛋白家族,主要在RNA剪接中发挥调控作用。SRSF6表达或功能失调能够导致部分基因选择性剪接异常,进而引发肿瘤、糖尿病和胸膜纤维化等炎症性疾病发生发... 丝氨酸/精氨酸富集剪接因子6(serine/arginine-rich splicing factor 6,SRSF6)属于SR蛋白家族,主要在RNA剪接中发挥调控作用。SRSF6表达或功能失调能够导致部分基因选择性剪接异常,进而引发肿瘤、糖尿病和胸膜纤维化等炎症性疾病发生发展,但是SRSF6在炎症中的作用尚未阐明。本研究采用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立炎症反应体系,探究SRSF6在炎症中的表达及作用,初步分析SRSF6在炎症中的靶点和机制。研究发现,LPS刺激肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)等炎症相关因子表达增加,同时,SRSF6 mRNA和蛋白质表达水平均随LPS刺激时间延长而显著增加(P<0.05)。进一步探究SRSF6表达对炎症因子的影响,上调表达SRSF6促进LPS诱导的炎症因子表达增加(P<0.05),而下调SRSF6则抑制炎症因子表达(P<0.05),并且核因子-κB(nuclear factor,NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的激活受到SRSF6下调的抑制(P<0.05),提示SRSF6在巨噬细胞中参与调控炎症反应。髓系分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)是TLR4信号通路中的关键接头分子,MyD 88 mRNA剪接异构体MyD88-L和MyD88-S在炎症反应中分别发挥促炎和抑炎的相反功能。RNA结合蛋白数据库分析和RNA结合蛋白免疫沉淀实验发现,SRSF6蛋白结合MyD 88 mRNA;剪接分析结果显示,下调SRSF6促进抑炎型剪接异构体MyD88-S mRNA表达增多(P<0.01),并且敲低MyD88-S能够恢复SRSF6下调所抑制的炎症因子表达。以上研究结果发现,SRSF6在巨噬细胞中通过调控MyD 88选择性剪接,从而影响炎症信号通路激活及炎症因子表达,这为深入解析SRSF6在炎症性疾病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 丝氨酸/精氨酸富集剪接因子6 巨噬细胞 炎症反应 髓系分化因子88 选择性剪接
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MyD88和TRIF在新生儿脑损伤中的表达及其与炎症反应的关系
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作者 庄玮清 季晓云 《临床和实验医学杂志》 2024年第19期2085-2089,共5页
目的探讨髓样分化因子88(MyD88)和β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)在新生儿脑损伤中的表达及其与炎症反应的关系。方法前瞻性选取2021年10月至2023年9月入同济大学附属妇产科医院诊断并接受治疗的新生儿脑损伤患儿103例为研究对象,作... 目的探讨髓样分化因子88(MyD88)和β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)在新生儿脑损伤中的表达及其与炎症反应的关系。方法前瞻性选取2021年10月至2023年9月入同济大学附属妇产科医院诊断并接受治疗的新生儿脑损伤患儿103例为研究对象,作为新生儿损伤组。同时选择同期无神经系统疾病的正常新生儿80例,作为对照组。收集所有新生儿的临床资料,并采集外周静脉血3 mL,检测两组新生儿血清中降钙素原、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-2、IL-1β、IL-8和IL-6水平,采用实时荧光定量PCR检测血清中MyD88和TRIF mRNA表达,采用Pearson相关性分析对MyD88和TRIF mRNA表达与炎症反应的关系进行分析,并采用受试者操作特征(ROC)曲线评估MyD88和TRIF mRNA表达在新生儿脑损伤中的诊断价值。结果两组新生儿的胎龄、年龄、出生体重、男性占比、生产方式比较,差异均无统计学意义(P>0.05);脑损伤组Apgar评分为(7.42±1.87)分,明显低于对照组[(8.78±4.72)分],差异有统计学意义(P<0.05)。脑损伤组新生儿血清降钙素原、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8和IL-6水平分别为(6.21±0.73)ng/L、(5.94±1.83)pg/mL、(8.93±2.95)pg/mL、(3.17±1.02)pg/mL、(32.98±9.83)pg/mL、(14.51±4.37)pg/mL,均明显高于对照组[(0.59±0.18)ng/L、(2.68±0.79)pg/mL、(4.19±1.36)pg/mL、(1.29±0.73)pg/mL、(7.37±2.91)pg/mL、(2.97±0.85)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。脑损伤组新生儿血清中MyD88和TRIF mRNA表达水平分别为2.46±0.73、2.11±0.65,均明显高于对照组(1.03±0.29、0.79±0.22),差异均有统计学意义(P<0.05)。MyD88和TRIF mRNA表达均与炎症反应指标降钙素原、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8和IL-6均呈正相关(P<0.05)。血清MyD88 mRNA检测诊断新生儿脑损伤的最佳临界值为1.561,敏感度和特异度分别为77.50%和86.25%,ROC曲线下面积(AUC)为0.868(95%CI:0.804~0.932);血清TRIF mRNA检测诊断新生儿脑损伤的最佳临界值为1.249,敏感度和特异度分别为78.75%和87.64%,AUC为0.883(95%CI:0.823~0.938);MyD88联合TRIF mRNA诊断的敏感度和特异度分别为88.75%和93.64%,AUC为0.903(95%CI:0.852~0.955),MyD88联合TRIF mRNA诊断的AUC明显优于血清MyD88和TRIF单独检测的AUC(P<0.05)。结论脑损伤新生儿血清中MyD88和TRIF表达升高,且与炎症反应因子呈正相关,血清MyD88和TRIF检测对新生儿脑损伤具有一定的诊断价值,二者联合检测诊断价值更高。 展开更多
关键词 脑损伤 髓样分化因子88 新生儿 β干扰素TIR结构域衔接蛋白 炎症反应 相关性 诊断价值
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Bruton’s tyrosine kinase inhibitors in primary central nervous system lymphoma:New hopes on the horizon
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作者 Leonardo S Lino-Silva Sabrina B Martínez-Villavicencio Luisa Fernanda Rivera-Moncada 《World Journal of Clinical Oncology》 2024年第5期587-590,共4页
In this editorial,we comment on the article by Wang et al.This manuscript explores the potential synergistic effects of combining zanubrutinib,a novel oral inhibitor of Bruton’s tyrosine kinase,with high-dose methotr... In this editorial,we comment on the article by Wang et al.This manuscript explores the potential synergistic effects of combining zanubrutinib,a novel oral inhibitor of Bruton’s tyrosine kinase,with high-dose methotrexate(HD-MTX)as a therapeutic intervention for primary central nervous system lymphoma(PCNSL).The study involves a retrospective analysis of 19 PCNSL patients,highlighting clinicopathological characteristics,treatment outcomes,and genomic biomarkers.The results indicate the combination’s good tolerance and strong antitumor activity,with an 84.2%overall response rate.The authors emphasize the potential of zanubrutinib to modulate key genomic features of PCNSL,particularly mutations in myeloid differentiation primary response 88 and cluster of differentiation 79B.Furthermore,the study investigates the role of circulating tumor DNA in cerebrospinal fluid for disease surveillance and treatment response monitoring.In essence,the study provides valuable insights into the potential of combining zanubrutinib with HD-MTX as a frontline therapeutic regimen for PCNSL.The findings underscore the importance of exploring alternative treatment modalities and monitoring genomic and liquid biopsy markers to optimize patient outcomes.While the findings suggest promise,the study’s limitations should be considered,and further research is needed to establish the clinical relevance of this therapeutic approach for PCNSL. 展开更多
关键词 primary central nervous system lymphoma Zanubrutinib Bruton’s tyrosine kinase PROGNOSIS myeloid differentiation primary response 88 gene Cluster of differentiation 79B gene
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TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在牛奶蛋白过敏发病机制中的作用研究
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作者 金雪锋 陈琪 +4 位作者 张炎 张颖 余楚烈 汤卫红 潘炜 《浙江医学》 CAS 2024年第22期2380-2384,2390,共6页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)-髓样分化因子88(MyD88)-NF-κB信号通路在牛奶蛋白过敏(CMPA)发病机制中的作用。方法前瞻性选取2020年11月至2023年6月在杭州市儿童医院门诊就诊及住院的30例CMPA患儿为研究对象,另选取同期在本院体检或择期... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)-髓样分化因子88(MyD88)-NF-κB信号通路在牛奶蛋白过敏(CMPA)发病机制中的作用。方法前瞻性选取2020年11月至2023年6月在杭州市儿童医院门诊就诊及住院的30例CMPA患儿为研究对象,另选取同期在本院体检或择期手术的30例儿童作为正常对照组。抽取CMPA患儿饮食回避治疗前后及正常对照组儿童静脉血,采用Western blot法检测TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平,流式细胞术、ELISA法检测细胞炎症因子水平及牛奶特异性IgE。采用Spearman秩相关分析CMPA患儿饮食回避前TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平之间及其与细胞炎症因子水平的相关性。结果CMPA患儿饮食回避前TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平及IL-1β、IL-5和IL-6水平均高于饮食回避后和正常对照组儿童(均P<0.05)。Spearman秩相关分析显示,TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平与MyD88蛋白表达水平均呈正相关(rs=0.496、0.488,P=0.005、0.006);NF-κB p65蛋白表达水平与IL-1β、IL-6水平均呈正相关(rs=0.475、0.394,P=0.008、0.031),而NF-κB p65蛋白表达水平与IL-5水平无相关性(rs=0.167,P=0.378)。CMPA患儿饮食回避前后及与正常对照组牛奶特异性IgE阳性率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论TLR4-MyD88-NF-κB信号通路参与了CMPA的发病,且与下游细胞炎症因子IL-1β、IL-6水平呈正相关,针对TLR4-MyD88-NF-κB信号通路进行干预,有望缓解CMPA的症状。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 髓样分化因子88 核因子ΚB 牛奶蛋白过敏 儿童
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猪MyD88基因的克隆及组织表达谱分析 被引量:4
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作者 李强 李学伟 +2 位作者 朱砺 陈磊 李明洲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1429-1434,共6页
本研究旨在克隆猪MyD88的基因序列,并研究其在不同组织中的表达差异。利用RT-PCR技术从猪肠系膜淋巴结组织总RNA中克隆出猪MyD88的cDNA序列,用相关软件进行了基因结构和功能预测,并利用Real-time PCR技术对MyD88基因的组织表达谱进行了... 本研究旨在克隆猪MyD88的基因序列,并研究其在不同组织中的表达差异。利用RT-PCR技术从猪肠系膜淋巴结组织总RNA中克隆出猪MyD88的cDNA序列,用相关软件进行了基因结构和功能预测,并利用Real-time PCR技术对MyD88基因的组织表达谱进行了分析。序列分析结果表明克隆到的序列全长为897 bp(EF198416),其882 bp的开放阅读框编码的293个氨基酸残基组成猪髓样分化因子88(MyD88);推导的氨基酸序列分析显示:猪MyD88蛋白具有典型的死亡结构域和TIR结构域,相似性分析结果显示,MyD88在进化过程中具有高度保守性,与人、牛、褐鼠和小鼠的氨基酸序列相似性分别为88.4%、85.7%、78.8%和78.2%;Real-time PCR结果表明:MyD88在11个组织中的相对表达水平存在差异,其在派伊氏小体和肠系膜淋巴结中表达量相对较高,在心脏和肌肉组织中表达量较低。猪MyD88基因的克隆和表达研究为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 髓样分化因子88 基因克隆 序列分析 组织表达谱
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针刺对急性脑出血大鼠TLR4/MyD88信号通路关键因子表达的影响 被引量:6
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作者 陈秋欣 朱路文 +3 位作者 庞秀明 张瑜 孙忠人 刘鹏 《世界中西医结合杂志》 2019年第6期815-818,825,共5页
目的探讨针刺百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠TLR4/MyD88信号通路关键因子Toll样受体4(TLR-4)、髓样细胞分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将54只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺+模型组(简... 目的探讨针刺百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠TLR4/MyD88信号通路关键因子Toll样受体4(TLR-4)、髓样细胞分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将54只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺+模型组(简称针刺组),每组再以1d、3d、7d时间点分为3个亚组,每组6只。自体血注入法建立脑出血大鼠模型。采用针刺百会穴透曲鬓穴干预,在1d、3d、7d3个时间点采用Longa评分法对脑出血后大鼠神经功能进行评估;采用Western-blot法检测血肿组织TLR-4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结果与模型组相比,各时间点针刺组大鼠神经功能缺损明显减轻(P<0.05)。与假手术组相比,模型组各时间点TLR-4、MyD88、NF-κB蛋白表达显著上升(P<0.01);与模型组相比,针刺组各时间点TLR-4、MyD88、NF-κB蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论针刺可能通过调控TLR4/MyD88信号通路中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达,减轻脑出血后炎性损伤,改善大鼠神经功能缺损症状,发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 针刺 脑出血 TOLL样受体4 髓样细胞分化蛋白 核转录因子-ΚB
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芒果苷对慢性炎症大鼠外周血单核细胞髓样分化因子88表达的影响 被引量:5
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作者 卫智权 邓家刚 +1 位作者 阎莉 邓静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期482-486,共5页
目的探讨芒果苷对脂多糖诱导慢性炎症大鼠外周血单核细胞髓样分化因子88表达的调控作用。方法以间断尾静脉注射小剂量脂多糖(200μg.kg-1)建立慢性炎症大鼠模型,大鼠随机分为对照组、模型组、泼尼松(5 mg.kg-1.d-1)组与芒果苷高、中、... 目的探讨芒果苷对脂多糖诱导慢性炎症大鼠外周血单核细胞髓样分化因子88表达的调控作用。方法以间断尾静脉注射小剂量脂多糖(200μg.kg-1)建立慢性炎症大鼠模型,大鼠随机分为对照组、模型组、泼尼松(5 mg.kg-1.d-1)组与芒果苷高、中、低剂量(MGF-H、MGF-M、MGF-L,200、100、50 mg.kg-1.d-1)组,灌胃给药,共4周。第4周末分离外周血单核细胞并经磁珠分选纯化,分别以RT-PCR、流式细胞术检测单核细胞髓样分化因子88的表达水平。结果与模型组比较,MGFH组外周血单核细胞髓样分化因子88过表达被明显抑制,全血白细胞计数与血清超敏C反应蛋白水平明显降低。结论芒果苷可抑制脂多糖诱导慢性炎症大鼠外周血单核细胞髓样分化因子88的过表达,可能与其抗炎作用有关。 展开更多
关键词 芒果苷 慢性炎症 髓样分化因子88 丝裂原激活的蛋白激酶 单核细胞 脂多糖
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Toll样受体4/髓样分化蛋白88在早期自然流产母-胎界面的表达 被引量:6
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作者 杨美霞 贺帅 +4 位作者 赵紫薇 陈晶 郝奋 黄世琪 宋芳 《解剖学杂志》 CAS 2019年第4期342-345,I0001,共5页
目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)与早期自然流产的相关性.方法:选择30例正常妊娠妇女作为对照组,采用免疫组织化学显色对30例早期自然流产患者(流产组)母-胎界面的蜕膜和绒毛组织中TLR4、MyD88蛋白表达进行定位观察,... 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)与早期自然流产的相关性.方法:选择30例正常妊娠妇女作为对照组,采用免疫组织化学显色对30例早期自然流产患者(流产组)母-胎界面的蜕膜和绒毛组织中TLR4、MyD88蛋白表达进行定位观察,采用RT-PCR技术对其TLR4和MyD88 mRNA表达进行半定量分析.结果:TLR4和MyD88蛋白在流产组和对照组的绒毛及蜕膜组织中均有表达,定位表达于绒毛滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质内,阳性反应强弱不等.RT-PCR半定量分析结果显示,在绒毛组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组;在蜕膜组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组.流产组绒毛和蜕膜组织中TLR4与MyD88的表达均呈正相关.结论:TLR4和MyD88可能参与早期自然流产的病理过程,且TLR4可能通过MyD88信号途径参与早期自然流产的发生. 展开更多
关键词 TOLL样受体4 髓样分化蛋白88 早期自然流产 绒毛 蜕膜
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新生儿窒息后Toll样受体4及髓样分化因子88表达变化在多器官功能障碍综合征中的意义 被引量:6
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作者 王胜会 董文斌 +2 位作者 黄俊梅 熊安芳 雷小平 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期780-784,共5页
目的研究窒息新生儿外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体4(TLR4)及其信号转导途径中髓样分化因子88(MyD88)的变化与新生儿窒息后多器官功能障碍综合征(MODS)的关系。方法对窒息后24h之内入院的50例窒息新生儿和10例健康足月新生儿,应用... 目的研究窒息新生儿外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体4(TLR4)及其信号转导途径中髓样分化因子88(MyD88)的变化与新生儿窒息后多器官功能障碍综合征(MODS)的关系。方法对窒息后24h之内入院的50例窒息新生儿和10例健康足月新生儿,应用免疫组化的方法检测窒息后第1、3、7天(PBMCs)TLR4及MyD88的表达情况,并与窒息后全身炎症反应综合征(SIRS)和MODS的发生及预后情况进行比较。结果①窒息新生儿外周血单个核细胞的TLR4和MyD88的表达在窒息后第1天增强,第3天开始减弱,第7天左右恢复正常。②在窒息后第1天,TLR4和MyD88的表达与新生儿危重症评分呈显著负相关(r=-0.74、-0.73,P均<0.01),TLR4和MyD88两者呈显著正相关(r=0.70,P<0.01);发生SIRS、MODS和预后差的病例,其窒息后第1天TLR4和MyD88的表达呈++~+++的比例增多,与未发生SIRS、MODS和预后好的病例相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿窒息早期可能激活了TLR4及其信号转导通路MyD88,引起单核巨噬细胞系统释放一系列炎症因子,导致了SIRS和MODS的发生。TLR4及其信号转导通路MyD88可以作为诊断新生儿窒息后SIRS和MODS的早期指标和估计预后的指标之一。 展开更多
关键词 新生儿 窒息Toll样受体4 髓样分化因子88 全身炎症反应综合征 多器官功能障碍综合征
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基于TLR4/MyD88/NF-kB信号通路探讨追风透骨胶囊减缓兔膝骨关节炎模型软骨退变的作用机制 被引量:9
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作者 曹寅生 易强 +3 位作者 邝高艳 危建文 金久楚 罗振华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第2期240-248,共9页
目的 观察追风透骨胶囊对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)模型关节软骨退变的干预作用,并基于Toll样受体4(Toll like receptor 4, TLR4)/髓细胞分化初级反应蛋白88(myeloid differentiation primary response protein 88, MyD8... 目的 观察追风透骨胶囊对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)模型关节软骨退变的干预作用,并基于Toll样受体4(Toll like receptor 4, TLR4)/髓细胞分化初级反应蛋白88(myeloid differentiation primary response protein 88, MyD88)/核因子kappa-B(nuclear factor kappa-B, NF-κB)信号通路探讨追风透骨胶囊的可能作用机制。方法 从50只6月龄雄性新西兰兔中随机选取10只作为正常组,其余40只为KOA造模组,用改良Videman造模法制备兔KOA模型。模型验证后,从正常组中随机选取6只作为空白组(A组),KOA造模组抽取30只随机分为模型组(B组)、硫酸氨基葡萄糖组(C组)、追风透骨胶囊低剂量组(D组)、追风透骨胶囊中剂量组(E组)、追风透骨胶囊高剂量组(F组),每组6只。A、B组予蒸馏水灌胃,C、D、E、F组予相应药物灌胃,疗程均为6周。给药结束后,取造模侧膝关节软骨,予大体及HE染色观察,并用Pelletier评分及Mankin评分评估;以Western blot、RT-PCR法检测软骨中TLR4、My D88、NF-κB蛋白及其mRNA的表达;免疫组化法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的含量。结果 与A组比较,B组膝关节软骨破坏明显,Pelletier评分及Mankin评分均升高(P<0.01),软骨中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及其mRNA表达水平均上调(P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α含量均升高(P<0.01)。与B组比较,C、D、E、F组的软骨损伤程度轻,软骨Mankin评分均降低(P<0.01),软骨中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及m RNA表达水平均下调(P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α含量均降低(P<0.01),此外,F组软骨Pelletier评分较B组降低明显(P<0.05)。结论 追风透骨胶囊能延缓改良Videman造模法诱导的兔KOA模型关节软骨退变,其作用机制可能与下调软骨中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及m RNA的表达,抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的活化,降低IL-1β、IL-6、TNF-α在软骨中的含量,从而减轻炎症反应相关。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 追风透骨胶囊 Toll样受体4 髓细胞分化初级反应蛋白88 核因子kappa-B 白细胞介素-1β 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α
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七鳃鳗myd88基因的生物学特性及其下游分子的表达模式分析 被引量:2
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作者 赵春晖 赵培哲 +1 位作者 刘欣 李庆伟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期690-697,共8页
髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MYD88)是Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的关键接头分子,在先天性免疫和适应性免疫中都起到重要作用。为了揭示七鳃鳗Myd88的生物学功能,研究首次从七鳃鳗(Lampetra jap... 髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MYD88)是Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的关键接头分子,在先天性免疫和适应性免疫中都起到重要作用。为了揭示七鳃鳗Myd88的生物学功能,研究首次从七鳃鳗(Lampetra japonica)中克隆了myd88基因,其ORF为852 bp,共编码283个氨基酸,推测的分子量为32.432 k D,等电点为6.25,无信号肽。多重序列比对表明七鳃鳗Myd88的氨基酸序列与其他物种同源性较高,具有高度保守的N端死亡结构域和C端的TIR结构域的Box1、Box2和Box3基序。实时荧光定量PCR分析表明:myd88基因在七鳃鳗各组织中均有低水平转录表达,鳃中表达量最高,其次是肌肉、髓和肾。脂多糖(LPS)体内刺激七鳃鳗后,七鳃鳗myd88在白细胞中表达量升高最显著,其次是在鳃中的表达量也明显升高,表明七鳃鳗Myd88参与七鳃鳗的抗菌免疫过程。此外,LPS刺激七鳃鳗还能诱导TLR信号通路Myd88依赖途径的下游信号分子Irak1、Traf6、Ikkβ和Nfkb在各组织中的转录表达。研究结果表明七鳃鳗中可能存在TLR/Myd88信号通路,为进一步探究该信号通路参与免疫应答的起源与进化奠定了基础。 展开更多
关键词 七鳃鳗 髓样分化因子88 表达模式 免疫应答
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创伤性脑损伤后Toll样受体4表达变化对小鼠海马区MYD88mRNA的影响 被引量:6
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作者 张欣 贺晓生 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2016年第1期33-36,共4页
目的研究创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后抑制Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)与小鼠海马区髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88)mRNA表达变化以及对小鼠行为变化的关系。方法... 目的研究创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后抑制Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)与小鼠海马区髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88)mRNA表达变化以及对小鼠行为变化的关系。方法采用Mamarou自由落体方法建立小鼠TBI模型,腹腔注射TLR4抑制剂CLI-095,采用实时定量聚合酶链(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)反应及矿场实验,高架十字实验,Morris水迷宫方法检测创伤72 h后海马区MYD88表达变化情况及行为学变化特征。结果模型建立并抑制TLR4后,72 h海马区MYD88mRNA表达量较仅腹腔注射溶剂减少(P<0.05),但处理组及对照组MYD88mRNA表达量均高于假损伤组(P<0.05)。矿场实验,高架十字实验,Morris水迷宫检测TBI后小鼠出现运动水平下降,抑制TLR4后有所好转(P<0.05),但仍低于假损伤组(P<0.05)。结论 TBI影响小鼠行为水平,抑制TLR4可下调MYD88mRNA表达,并可对小鼠神经功能恢复发挥一定作用,可能是神经损伤修复的关键因素之一。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 TOLL样受体4 髓样分化因子88
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藏药檀香清咽片对慢性支气管炎模型大鼠支气管肺MyD88/NF-κB/ICAM-1信号通路的影响 被引量:4
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作者 邵国强 杜青 +2 位作者 李跃辉 达瓦桑珠 扎西次仁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期633-638,共6页
目的探讨藏药檀香清咽片对慢性支气管炎大鼠模型的疗效及支气管肺组织MyD88/NF-κB/ICAM-1信号通路表达的影响。方法采用熏烟法联合脂多糖(LPS,2 g·L^(-1))气管注射法建立慢性支气管炎大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、假手术组、... 目的探讨藏药檀香清咽片对慢性支气管炎大鼠模型的疗效及支气管肺组织MyD88/NF-κB/ICAM-1信号通路表达的影响。方法采用熏烟法联合脂多糖(LPS,2 g·L^(-1))气管注射法建立慢性支气管炎大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、阳性药(桂龙咳喘宁片1 g·kg^(-1))组、檀香清咽片高、中、低剂量(1.44、0.72、0.36 g·kg^(-1))组,灌胃干预,连续15 d。采用伊红-苏木精(HE)染色观察支气管肺组织病理改变,并统计支气管炎症细胞浸润情况;ELISA法检测外周血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素10(IL-10)含量;Western blot法和免疫组织化学法检测支气管肺组织中髓样细胞分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)和抗细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达情况。结果与正常组和假手术组比较,模型组大鼠支气管黏膜上皮细胞受损严重,肺泡隔增宽,支气管炎性浸润明显增加,血清TNF-α含量明显增多,IL-10含量明显降低,支气管肺组织中MyD88、NF-κB和ICAM-1蛋白表达水平明显上升(P<0.05、0.01);与模型组比较,檀香清咽片组大鼠支气管肺组织病理损伤和炎性改变减轻,血清TNF-α含量明显减少,IL-10含量无显著变化,支气管肺组织中MyD88、NF-κB和ICAM-1蛋白表达水平明显下调(P<0.05、0.01)。结论檀香清咽片可有效改善支气管肺组织炎性浸润,可能与减少炎性介质TNF-α等的释放,调控MyD88/NF-κB/ICAM-1信号通路表达有关。 展开更多
关键词 檀香清咽片 慢性支气管炎 髓样细胞分化蛋白88 核转录因子-ΚB 抗细胞间黏附分子1 肿瘤坏死因子
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雷公藤甲素对感染性休克大鼠脑组织的保护及对TLR4/Myd88信号通路的调控 被引量:1
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作者 徐梅 汪砚雨 +2 位作者 李晓玲 林新 王勉 《浙江中医药大学学报》 CAS 2021年第7期732-738,743,共8页
[目的]研究雷公藤甲素(triptolide,TL)对感染性休克(septic shock,SS)大鼠脑组织的保护作用,并探讨相关机制。[方法]从80只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠中随机抽取15只,仅剖腹不结扎盲肠及穿孔,设为正常组;其余65... [目的]研究雷公藤甲素(triptolide,TL)对感染性休克(septic shock,SS)大鼠脑组织的保护作用,并探讨相关机制。[方法]从80只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠中随机抽取15只,仅剖腹不结扎盲肠及穿孔,设为正常组;其余65只随机分为SS组,TL低、高剂量组和阳性药物组,以盲肠结扎穿孔法建立SS模型。TL低、高剂量组建模前1h分别以TL 200、400μg·kg-1灌胃;阳性药物组以地塞米松10mg·kg-1灌胃;正常组与SS组予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。建模后12h检测脑组织含水量;检测脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;苏木精-伊红(hematoxylineosin,HE)染色观察海马CA1区病理学形态变化,Nissl染色观察海马CA1区神经元形态、数量;Western blot检测脑组织Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)、磷酸化核转录因子-κB(phospho-nuclear transcription factor-κB,p-NF-κB)蛋白相对表达量。[结果]与正常组比较,SS组脑组织含水量、MDA、TNF-α、IL-1β含量增加,脑组织SOD活性减低,TLR4、MyD88蛋白相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65均升高(P<0.05);与SS组比较,TL低、高剂量组,阳性药物组脑组织含水量、MDA、TNF-α、IL-1β含量减少,脑组织SOD活性增加,TLR4、MyD88蛋白相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05);与TL低剂量组比较,TL高剂量组、阳性药物组脑组织含水量、MDA、TNF-α、IL-1β含量减少,脑组织SOD活性增加,TLR4、MyD88蛋白相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P<0.05)。HE染色显示,SS组细胞体积缩小、数量减少、排列紊乱,多数发生空泡样改变及死亡;TL低、高剂量组及阳性药物组多数细胞边界清晰,排列较整齐,少数萎缩、深染、空泡变性。Nissl染色显示,SS组细胞排列稀疏,边缘模糊,染色浅,神经元数目减少,胞质中尼氏体数量明显减少;TL低、高剂量组,阳性药物组神经元数量增加,染色较清晰,胞质中尼氏体数量增加。[结论]TL可减轻SS大鼠脑组织水肿,减轻氧化应激及炎症反应,改善脑组织病理变化,保护神经元,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88信号通路相关蛋白表达有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 感染性休克 氧化应激 炎症反应 病理变化 TOLL样受体4 髓样分化因子88 核转录因子-ΚB
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αGVHD小鼠靶器官组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达变化及意义 被引量:4
19
作者 江洋洋 涂三芳 +1 位作者 吴远彬 李玉华 《山东医药》 CAS 2018年第4期8-11,共4页
目的探讨异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)小鼠模型靶器官组织中Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达变化及意义。方法以C57BL/6雄性小鼠和BALB/c雌性小鼠为allo-BMT... 目的探讨异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)小鼠模型靶器官组织中Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达变化及意义。方法以C57BL/6雄性小鼠和BALB/c雌性小鼠为allo-BMT的供、受鼠,受鼠接受白舒非+环磷酰胺方案致死剂量预处理后,输注供鼠来源骨髓细胞及脾脏淋巴细胞,建立aGVHD模型(aGVHD组)。以BALB/c雄性小鼠和BALB/c雌性小鼠为同基因骨髓移植(Syn-BMT)的供、受鼠,受鼠经等剂量药物预处理后输注供鼠来源骨髓细胞,建立Syn-BMT模型为对照(Syn-BMT组)。移植后第14天,两组分别取5只存活小鼠,处死后取肝、肠、脾及皮肤组织,分别采用实时荧光定量PCR、Western blotting及免疫组化法检测各组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65、NF-κB p50 mRNA及蛋白相对表达量、蛋白阳性表达率。结果 aGVHD组肝、肠、脾和皮肤组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65、NF-κB p50mRNA相对表达量及蛋白相对表达量、蛋白阳性表达率均较Syn-BMT对照组增加(P均<0.05)。结论 aGVHD模型小鼠肝、肠、脾和皮肤组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白在基因水平和蛋白水平均表达上调。TLR4/MyD88/NF-κB信号通路可能参与了allo-BMT后aGVHD的发病过程。 展开更多
关键词 急性移植物抗宿主病 异基因骨髓移植 Toll样受体4 髓样分化蛋白88 核转录因子ΚB
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鸡髓样分化因子88的原核表达及单克隆抗体制备 被引量:2
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作者 赵兴旺 刘冉冉 +3 位作者 郑麦青 文杰 陈继兰 赵桂苹 《生物技术通讯》 CAS 2011年第6期850-854,共5页
目的:克隆、表达、纯化鸡髓样分化因子88(MyD88),制备其单克隆抗体。方法:从脾脏cDNA中扩增857bp的MyD88基因片段,插入pMAL-c5X表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE分析MBP(麦芽糖结合蛋白)-MyD88重组... 目的:克隆、表达、纯化鸡髓样分化因子88(MyD88),制备其单克隆抗体。方法:从脾脏cDNA中扩增857bp的MyD88基因片段,插入pMAL-c5X表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE分析MBP(麦芽糖结合蛋白)-MyD88重组融合蛋白的表达,切胶纯化目的蛋白;免疫BALB/c小鼠,制备针对MyD88的单克隆抗体,Western印迹检测抗体特异性,制备腹水并进行抗体亚型鉴定和效价测定。结果:构建了鸡MyD88原核表达载体pMAL-MyD88,并在大肠杆菌中获得高表达,目的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在;建立了3株抗鸡MyD88单克隆抗体细胞株,制备了腹水,亚型分别为IgG1、IgG1和IgG2a,轻链均为κ,腹水抗体的效价均为1∶2×105。结论:在原核表达系统中表达、纯化了重组鸡MyD88,制备了针对鸡MyD88的单克隆抗体,为后续的MyD88定量和功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡髓样分化因子88 原核表达 单克隆抗体
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