丹酚酸B对心肌缺血再灌注损伤的作用

目的:探究丹酚酸B对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及其可能的作用机制。方法:本实验选用人诱导多功能干细胞来源的心肌细胞(hiPSC-CMs),通过缺氧6 h复氧24 h建立心肌损伤模型,选取丹酚酸B(7.5、15、30、60和120μg/mL)5个剂量研究其对hiPSC-CMs及hiPSC-CMs心肌损伤模型阻抗与场电位的影响。后进行动物实验,分为假手术组,心肌缺血再灌注模型组,丹酚酸B低(15 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量组,阳性对照普萘洛尔(2.5 mg/kg)组,灌胃给药4 d后,进行冠状动脉左前降支结扎手术(缺血30 min,再灌注24 h)建立大鼠MIRI模型,采用TTC染色法观察大鼠心脏缺血区域面积;HE染色法观察大鼠心肌结构病理形态;全自动生化分析仪测定血清中心肌酶活性探究丹酚酸B用药在MIRI中的作用;使用试剂盒检测丹酚酸B在MIRI过程中可能存在的抗氧化机制。结果:丹酚酸B有增强hiPSC-CMs收缩力,减轻心肌损伤,改善场电位功能的作用。并且可以有效减少MIRI模型大鼠的心肌缺血面积,改善心肌结构损伤,降低心肌酶活性。此外,还能够降低MIRI大鼠血清中丙二醛(MDA)含量,提升超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)活性,在改善心肌损伤的过程中发挥抗氧化作用。结论:丹酚酸B可以有效降低MIRI,并发挥着改善心肌细胞生理功能,保护心脏的作用。其作用机制可能与降低血清MDA水平、提高SOD和GSH活性有关。

实时心肌超声造影对STEMI患者PCI术后继发心肌缺血再灌注损伤的评估价值

目的 探讨实时心肌超声造影对急性ST段抬高心肌梗死患者早期经皮冠状动脉介入术后继发心肌缺血再灌注损伤(IRI)的评估价值。方法 纳入2019年4月至2021年12月中山市人民医院收治的120例溶栓后行早期经皮冠状动脉介入术后急性ST段抬高心肌梗死患者作为研究对象,根据其术后4 h是否发生IRI进行分组,其中发生IRI者56例(IRI组),未发生IRI者64例(非IRI组),两组患者均完善实时心肌超声造影,采用单因素和多因素分析影响S急性ST段抬高心肌梗死患者早期经皮冠状动脉介入术后继发IRI的风险因素,并采用受试者工作曲线分析评估价值。结果 IRI组年龄高于非IRI组、术后心肌梗死溶栓分级(TIMI)分级低于IRI组,术后冠状动脉狭窄程度高于非IRI组,差异有统计学意义(P <0.05);IRI组超声参数A值、K值及MBF值均较非IRI组偏低(P <0.05)。多因素分析结果显示,术后心肌梗塞溶栓分级及心肌显峰强度值、再充盈平均速度和曲线上升平台期的平均斜率等参数是影响急性ST段抬高心肌梗死患者术后继发IRI的风险因素(P <0.05)。受试者工作曲线结果显示,术后TIMI分级、左心室再充盈平均速度、局部心肌血流量及心肌显峰强度值单一诊断的AUC分别为0.934、0.792、0.759和0.710;敏感度分别为81.23%、80.78%、75.06%和58.32%;特异度分别为72.35%、66.28%、64.81%和73.92%。将特异度最高指标心肌显峰强度值和敏感度最高指标再充盈平均速度进行联合诊断,结果显示,其曲线下面积为0.838,敏感度为77.83%、特异度为79.04%。结论 实时心肌超声造影对急性ST段抬高心肌梗死患者早期经皮冠状动脉介入术后继发IRI的评估价值较高,其敏感度和特异度均较高,值得临床推广。

超声心动图斑点追踪成像诊断急性ST段抬高型心肌梗死患者心肌缺血再灌注损伤的价值

目的:探讨超声心动图斑点追踪成像(STI)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者心肌缺血再灌注损伤的诊断价值。方法:回顾性分析2019年8月至2022年8月该院收治的85例STEMI患者的临床资料,统计患者经皮冠状动脉介入术(PCI)后心肌再灌注损伤发生情况,依据是否发生心肌缺血再灌注损伤分为发生组、未发生组,比较两组超声心动图常规参数[左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、三尖瓣口舒张早期血流速度峰值(E)及舒张末期血流速度峰值(A)],STI技术参数[纵向应变(LS)、径向应变(RS)及圆周应变(CS)],并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估超声心动图常规参数、STI技术参数及联合检测对心肌缺血再灌注损伤的诊断价值。结果:85例患者经PCI治疗后,31例发生再灌注损伤,发生率为36.47%;发生组LVEF水平低于未发生组,LVEDV、LVESV值大于未发生组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组E、A值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);发生组LS、CS、RS峰值均低于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,LS、CS、RS诊断心肌缺血再灌注损伤的曲线下面积(AUC)均>0.7,具有一定诊断价值,高于LVEF、LVEDV、LVESV的AUC,而常规参数和STI参数联合检测诊断心肌缺血再灌注损伤的AUC>0.9,诊断价值较高。结论:超声心动图STI技术可用于评估STEMI患者心肌缺血再灌注损伤的发生情况,与超声心动图常规参数联用可提高诊断价值。

双龙方对大鼠心肌缺血／再灌注后无复流影响的研究

目的探索双龙方对大鼠心肌缺血/再灌注后无复流的影响。方法将200只大鼠随机分为5组,每组40只:模型组、假手术组、双龙方5 g生药/kg组、双龙方2.5 g生药/kg组、双龙方1.25 g生药/kg组。各组大鼠在造模前连续灌胃5 d,模型组和假手术组灌胃同体积蒸馏水。给药结束后,对大鼠冠状动脉左前降支进行结扎,假手术动物只穿线不结扎。结扎后4 h,实施再灌注。再灌注4 h后,采用小动物高分辨率超声影像系统对各组大鼠行超声心动图检查和心肌声学造影;超声检查结束后,于腹主动脉取血,分离血清,测定血清cTnT、CRP、CK、LDH水平;大鼠取血完毕后,取出心脏,切片,分别用硫磺素S和硝基四氮唑蓝(N-BT)染色评估心肌无复流面积和梗死面积。结果与模型组比较,双龙方组的心肌无复流面积和梗死面积均明显减小(P<0.01或P<0.05);心脏B超显示心功能指标明显改善,左心室前壁缺血区厚度明显增加,收缩末期左心室内径和容积明显降低,短轴缩短率、射血分数和每搏输出量明显提高(P<0.01或P<0.05);心肌声学造影显示心肌血液灌注明显改善,左心室前壁心肌组织的微血管密度、血流速和血液灌注量明显增加(P<0.01或P<0.05);心肌损伤相关的血液学指标未见明显改善,血清cTnT、CRP、CK、LDH水平未见明显变化。结论双龙方可以明显减小大鼠的心肌梗死面积和无复流面积,可明显对抗心肌缺血/再灌注后的无复流,改善受损心肌组织的血液灌注,改善心功能,抑制心肌损伤。

斑点追踪技术评价犬急性心肌缺血及再灌注心内膜下心肌和心外膜下心肌径向应变

目的应用斑点追踪技术检测犬急性心肌缺血及再灌注不同时间点心内膜下心肌和心外膜下心肌的径向应变。方法选取20只健康成年杂种犬,结扎左冠状动脉第一对角支,分别对结扎前、结扎即刻、60、120和180min及再灌注即刻、60和120min基底水平、乳头肌水平和心尖水平心内膜下和心外膜下心肌的径向应变进行比较。结果在急性缺血过程中,基底水平心肌起代偿作用,其径向应变上升;乳头肌水平和心尖水平心肌下降明显,心尖水平心肌甚至出现反向运动。在急性缺血及再灌注过程中,心内膜下心肌对缺血更加敏感。再灌注后,乳头肌水平和心尖水平心内膜下和心外膜下心肌及跨壁的径向应变仍低于基础状态。结论斑点追踪技术可以评价犬局部及整体心脏功能,并判断急性心肌缺血的透壁程度。

急性广泛前壁心梗患者介入手术中和术后重组人脑利钠肽干预的研究

目的观察新活素——重组人脑利钠肽(rh BNP)对行急诊经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的急性前壁心梗患者缺血再灌注损伤、循环炎性因子及预后的影响。方法将首次急性广泛前壁心梗患者86例随机分为A组(即治疗组,给予直接PCI术+rh BNP)和B组(即对照组,给予直接PCI术+常规药物治疗),每组43例。观察2组患者术后即刻TIMI血流情况,2组TIMI 3级血流者心肌组织的再灌注情况,PCI术前、术后24 h测定肿瘤坏死因子ɑ(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)和脑利钠肽(BNP)水平。随访至术后6个月,观察2组患者心室重构和主要心脏不良事件发生的情况。结果 A组术后即刻无复流或慢血流的发生率显著低于B组(P<0.05);TIMI 3级血流者,PCI术后90 min ST段抬高或降低恢复的百分比、校正的TIMI帧数计数(CTFC)、1个月后室壁运动积分指数(WMSI)A组显著优于B组(P<0.05);2组患者术前BNP、CRP、TNF-α、IL-6无统计学差异;术后24 h,BNP、CRP、TNF-α、IL-6 A组显著优于B组(P<0.05)。经PCI术后6个月的随访,A组MACE发生率明显低于B组(P<0.05)。结论 rh BNP能预防和处理冠脉无复流,改善心肌组织水平的再灌注,降低炎性因子水平,改善心功能,减少临床事件的发生。

应用斑点追踪成像技术对急性心肌缺血及再灌注心内膜下心肌和心外膜下心肌旋转及扭转功能的研究

目的:本研究旨在应用斑点追踪成像(STI)技术通过测定心内、外膜下心肌、跨壁旋转及扭转角度等指标对急性心肌缺血及再灌注期间心脏功能进行评价。方法:对20只健康成年杂种犬结扎左冠状动脉第一对角支下方180 min并再灌注120 min,分别对结扎前、结扎即刻、结扎60 min、结扎120 min和结扎180 min及再灌注即刻、再灌注60 min和再灌注120 min基底水平和心尖水平的旋转及扭转指标进行比较。结果:①基底水平旋转的比较:随着缺血时间延长,跨壁角度逐渐减低。再灌注即刻,跨壁角度一过性增大。再灌注120 min,跨壁角度最低。②心尖水平旋转的比较:跨壁角度从结扎即刻开始下降,至结扎180 min达到最低值。再灌注即刻,跨壁角度快速上升。再灌注60 min、120 min缓慢上升。③扭转的比较:随着缺血时间的延长,跨壁扭转角度明显下降。结扎180 min跨壁扭转角度最低。再灌注即刻跨壁扭转角度快速恢复。结论:STI技术通过定量分析左室心内膜及心外膜下心肌局部和整体的旋转及扭转,可以判断心脏功能的变化。心内外膜下心肌旋转角度及跨壁角度、扭转角度及跨壁角度是评价急性心肌缺血及再灌注后室壁运动及心脏功能的有效手段。

人重组促红细胞生成素对离体心肌缺血再灌注损伤保护机制初步探讨

目的探讨人重组促红细胞生成素(rHuEPO)对离体心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法利用Langendorff离体心灌注模型,平衡30min,停搏液使心脏停跳90min,再灌注60min。24只Wistar大鼠随机分为3组:对照组、rHuEPO预处理组、rHuEPO灌注组。预处理组实验前24h腹腔给予rHuEPO5000u/kg,灌注组于缺血前10min灌注rHuEPO终浓度50u/mL的灌注液。观察各组再灌后脂质过氧化(MDA)含量、心肌凋亡及胞内Bcl-2、Bax蛋白表达情况,电镜观察心肌超微结构。结果预处理组和灌注组MDA含量较对照组显著减少(P<0.01);预处理组凋亡与对照组和灌注组相比显著减少(P<0.01),灌注组凋亡较对照组显著减少(P<0.01);预处理组心肌细胞Bcl-2含量显著高于对照组和灌注组(P<0.01),而Bax含量显著低于对照组和灌注组(P<0.01),灌注组和对照组心肌细胞Bcl-2和Bax含量差异无显著性(P>0.1);电镜示:对照组、灌注组和预处理组心肌肿胀程度,线粒体及肌丝等超微结构损伤依次小。结论rHuEPO改变Bcl-2/Bax平衡减少细胞凋亡、抑制氧自由基生成是其对离体心肌缺血再灌损伤保护的重要机制;rHuEPO预处理优于缺血前短时灌注,这可能与前者使抗凋亡蛋白充分表达有关。

定量组织速度成像评价左旋精氨酸预适应对缺血-再灌注心肌收缩功能的影响

目的评价一氧化氮前体左旋精氨酸(Larginine,Larg)预适应对急性缺血再灌注后局部心肌收缩功能的影响。方法制作犬左前降支(LAD)急性闭塞60min后再灌注120min实验模型。19只健康杂种犬随机分为无干预组(ishcemiareperfusion,IR组,n=12只)与Larg组(缺血前预先经外周静脉注入Larg溶液300mg/kg10min,n=7只)。应用定量组织速度成像技术(QTVI)分别记录两组于基础状态(Bas)、缺血60min(IS60)、再灌后R0、R60、R120时点左室前壁、下壁心肌的等容收缩期峰值速度(VIC)、收缩期峰值速度(VS)和异常收缩后收缩(PSS)的节段数。实验完成后,电镜观察危险区心肌组织的超微结构。结果①LAD急性闭塞后,IR组和Larg组缺血节段的等容收缩波、收缩波明显低矮,畸变。IS60,左室前壁VIC,VS测值与基础值比较,明显降低(P<0.05～0.01);下壁VIC,VS测值则稍高于基础值(P>0.05)。IR组和Larg组的各项观察指标间均无显著性差异(P>0.05);②恢复灌注即刻R0,二组犬的前壁VIC,VS测值较IS60稍高,但仍明显低于基础值(P<0.05～0.01);R60、R120,IR组前壁的VIC,VS测值持续减低,R120VIC,VS测值均稍低于R60(P>0.05);Larg组前壁的VIC,VS测值则于R60,R120时点均无显著性差异;其异常PSS节段数亦少于IR组。③电镜观察结果显示Larg组的线粒体和血管内皮损伤程度稍轻。结论QTVI技术可准确反映心肌缺血再灌注过程中局部心肌功能的动态变化。缺血前给予Larg能有效改善再灌后心肌的收缩顿抑。

实验性顿抑心肌的微循环障碍

为了探讨顿抑心肌微循环改变及机制 ,制备左前降支冠状动脉不同阻断时间 (15min和 6 0min)后再灌注犬心肌顿抑模型 ,在不同观察时间点静脉注射含全氟丙烷声振白蛋白微泡造影剂 ,采用二次谐波成像和间歇发射技术行心肌声学造影 ,计算心肌声学造影图像上心肌视频密度峰值、心肌声学造影曲线上升斜率和曲线早期下降斜率 ,测定相应时间点冠状静脉窦血乳酸浓度。结果发现 ,心肌顿抑早期心肌视频密度峰值显著增高 ,1h后恢复至结扎前水平 ;再灌注期顿抑区与正常区视频密度峰值比值、心肌声学造影曲线上升斜率比值、心肌声学造影曲线早期下降斜率比值显著高于左前降支冠状动脉结扎前 ,随着再灌注时间的延长比值逐渐回降 ;再灌注期冠状静脉窦血乳酸浓度明显增高。以上结果提示 ,心肌顿抑早期心肌微循环处于“高动力”状态 ,血流灌注增加与排空加快并存 ;顿抑心肌缺氧代谢加强 ;

顿抑心肌的微循环障碍机制研究

目的 :探讨顿抑心肌微循环改变及机制。方法 :制备左前降支冠脉(LAD)阻断不同时间 ( 15和 60min)后再灌注 2h犬心肌顿抑模型 ,在不同观察时间点行静脉心肌声学造影 (MCE) ,计算心肌视频密度峰值(PVI)、MCE曲线上升斜率 (α)和曲线早期下降斜率 ( β) ,分别代表心肌血流灌注量、灌注速度和排空速度。测定相应时间点冠状静脉窦血乳酸浓度。结果 :⑴心肌顿抑早期PVI显著增高 ,1h后恢复至结扎前水平 ;⑵再灌注期顿抑区与正常区PVI比值、α比值、β比值显著高于LAD结扎前 ,随着再灌注时间的延长比值逐渐回降 ;⑶再灌注期冠状静脉窦血乳酸浓度明显增高。结论 :心肌顿抑早期心肌微循环处于“高动力”状态 ,血流灌注增加与排空加快并存 ;顿抑心肌缺氧代谢加强 ;心肌内微循环短路可能是心肌顿抑微循环障碍的机制。

芪丹通脉片对缺血/再灌注犬心肌微血管功能的影响

目的评价中药复方芪丹通脉片对急性缺血再灌注致心肌微血管功能的影响。方法应用12只健康犬,随机分为对照组(control)和芪丹通脉片治疗组(QDTMT treatment group),对照组经十二指肠给予生理盐水(1.5ml/kg),给药后30min分离冠状动脉左前降支,放置电磁流量计探头测定血流量,在其下缘左前降支1/2处结扎90min,松开后再灌注180min观察,分别于灌胃前、缺血90min和再灌注180min静脉快速均匀推入微泡声学造影剂SONOVUE,FLASH模式进行静脉声学造影,实时连续记录心肌声学造影前后的图像采用,采用Echopac图象工作站软件包进行分析心肌声学造影的图像视频密度,根据时间-视频密度曲线计算曲线下面积(area under curve,AUC)以评价心肌微血管的血流灌注状态,根据图像分析缺血心肌范围的影响。芪丹通脉片组则经十二指肠给予芪丹通脉片浸膏混悬液(1g/ml,1.5ml/kg),其余实验过程同对照组。并在不同时间点从冠状静脉窦采血,检测血清中NO和血浆中ET-1的含量。结果在基础状态、缺血前和缺血90min,对照组和芪丹通脉片干预组的时间-视频密度曲线计算曲线下面积(AUC)以及缺血后出现的灌注缺损所占左心室的百分比没有显著差异。然而再灌注180min两组的AUC存在显著差异(14.09±2.31 vs 11.47±1.55,P<0.05),左心室心肌灌流均没有完全恢复,但芪丹通脉片能够显著促进再灌注后心肌微循环灌流的恢复(92.10±2.2)%,与对照组(87.49±4.12)%比较,存在显著差异(P<0.05)。在缺血90min和再灌注180min,芪丹通脉片处理组血清中NO和血浆中ET-1分别为(68.98±10.01)μmol/L、(67.55±9.81)μmol/L和(114.73±11.89)μg/L,(139.97±12.36)μg/L,与对照组存在显著差异(56.38±8.27)μmol/L,(53.55±6.03)μmol/L和(137.40±13.48)μg/L,(161.90±19.14)μg/L,(P<0.05)。结论芪丹通脉片能够促进心肌缺血/再灌注后微循环血流的恢复,调节循环血中的NO和ET含量,改善微循环功能,抑制缺血/再灌注所致的心肌损伤。

nmhaFGF对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

目的:研究非促分裂型酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:大鼠冠脉左前降支闭塞30min后再灌注3h,再灌注前10min尾静脉注射不同剂量nmhaFGF。测定各组大鼠室性心动过速(VT)和心室颤动(VF)的潜伏期、持续时间和发生率,评定心律失常分数;再灌注24h后,测定血清AST、LDH、CK-MB含量,并计算大鼠心肌梗死面积。结果:静脉注射nmhaFGF(20,40,80μg/kg)能明显抑制缺血再灌注引起的心肌损伤。和模型组相比,nmhaFGF各组大鼠的VT和VF发生率减少,出现心律失常的潜伏期延迟,持续时间缩短;另外心肌梗死区占左室面积的百分比及梗死区占危险区百分比均有所降低;此外,血清心肌酶含量AST、LDH、CK-MB显著降低;以80μg/kgnmhaFGF作用较明显,其作用强度与8mg/kg普萘洛尔相当。结论:nmhaFGF对大鼠缺血再灌损伤心肌具有保护作用。

人urotensin Ⅱ对大鼠心肌缺血缺氧性损伤的保护作用机制

目的:探讨人urotensinⅡ(h UⅡ)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法:在大鼠冠状动脉左前降支结扎再灌注模型上,观察心电图变化,测定心肌梗死体积及心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible NO synthesis,i NOS)mRNA表达。结果:0.47、1.4和4.2μg/kg h UⅡ可明显抑制缺血再灌注损伤大鼠心电图ST段抬高和心肌梗死体积;4.2μg/kg h UⅡ显著地改善冠状动脉结扎再灌注大鼠心肌细胞超微结构的变化,并增强大鼠心肌组织中i NOS mRNA表达;urotensinⅡ受体(UT)拮抗剂urantide 10 nmol/kg可明显地拮抗1.4和4.2μg/kg h UII对缺血再灌注大鼠心电图ST段抬高和心肌梗死的抑制作用。结论:HUII抗大鼠心肌缺血性损伤作用可能与激动UT及促进NO合成有关。

自制经静脉心肌声学造影剂FCT-188的初步应用

目的 :应用自制对比造影剂 FCT- 188无创性评估犬心肌缺血 /再灌注模型心肌危险面积 (RA)和梗死面积(IA) ;观察经静脉注射后人心肌显像效果。方法 :制作犬心肌缺血 -再灌注模型 ,经外周静脉注射 FCT- 188(0 .0 2 5ml· kg- 1 )。MCE测量结果与大体标本测量结果进行比较。12名志愿者接受了经浅静脉注射 FCT- 188(0 .5 m l)。结果 :1结扎冠脉前 ,静注 FCT- 188后 7只犬全部达到肉眼可分辨的心肌显影。结扎冠脉 2 0 m in及 4h后 ,相应支配区出现肉眼可见的充盈缺损 ,分别为 RA和 IA。MCE和病理测定结果呈良好相关。注射前后各项血流动力学指标无显著性改变。 2静脉注射 FCT- 188后 12人均产生了视觉可辨的心肌显影。受检查者在注射前后无任何不适 ,心率和血压无明显改变。结论 :FCT- 188可较准确地评估犬缺血心肌危险面积和梗死范围 。

缺血预适应对冠脉血流影响的实验研究——多普勒血流显像技术与电镜检查的对照

目的 本文应用冠脉血流显像技术评价缺血再灌注及预适应对冠脉血流的影响。方法 将 2 5条杂种犬分为三组 :缺血再灌注组 (IR组 )、持续缺血再灌注前先行反复三次短暂性缺血预处理组 (IP +IR组 )及在预处理之前静脉注射NOS抑制剂L -NAME组 (简称L -NAME组 )。计算左室射血分数 (LVEF)及再灌后LVEF恢复值 (再灌注 1h值-缺血 1h值 )。应用冠脉血流显像程序观察各组犬前降支结扎前和持续缺血再灌注 1h后其远端内血流改变 ,测量减速度、减速时间以及舒张期血流充盈时间 ,并应用R -R间距对其中时间指标进行校正。处死犬后 ,经冠状动脉口加压注射Evan’s蓝 ,然后将切成的心肌短轴层片放入 2 %TTC中染色 ,观察颜色变化 ,判断坏死区 (NA)和危险区 (RA)心肌。从危险区中采集心肌标本放置于固定液中 ,进行电镜检查。结果 两预处理组的射血分数恢复值高于IR组 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。IR组减速时间和舒张期充盈时间的校正值均低于预处理的其他两组 ,有极其显著性差异 (P <0 .0 1)。IR组NA :RA值明显高于预处理的其他两组 (P <0 .0 0 1)。电镜显示 ,IR组毛细血管基膜明显受损 ,而IP +IR组和L -NAME组损伤程度较IR组明显减轻。结论 应用冠脉血流显像技术可以发现缺血再灌注后血流形式改变为减速度增快、减?

重组人EPO通过减少自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的研究重组人促红细胞生成素(rh EPO)在大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤中的保护作用及其与自噬的关系。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、rh EPO处理组(rh EPO组)、rh EPO+自噬激活剂雷帕霉素(Rap)处理组(rh EPO+Rap组)和雷帕霉素处理组(Rap组)。构建大鼠心肌I/R模型,术中监测血流动力学指标(LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax);于再灌注结束后检测血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用伊文氏蓝-TTC法检测心肌梗死面积;采用Western blot法检测自噬相关基因LC3、Beclin1的蛋白表达。结果 I/R组心功能明显减弱,血清CK、LDH含量增高,可见明显心肌梗死,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达上升(P<0.01)。rh EPO处理后,心功能明显改善,CK、LDH含量减少,心肌梗死面积缩小,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达下降(P<0.01)。自噬激活剂雷帕霉素能削弱rh EPO的作用。结论 rh EPO减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能通过减少心肌自噬而完成。

超声心动图观察经皮冠状动脉介入术后心肌缺血再灌注损伤

目的应用常规超声心动图及二维斑点追踪(2D-STE)技术对经皮冠状动脉介入(PCI)术后心肌缺血再灌注损伤(MIRI)进行观察和评价。方法收集32例拟接受急诊PCI术的心肌梗死患者,其中15例血管开通后发生临床MIRI(MIRI组),17例未发生MIRI(对照组)。采用常规超声心动图及2D-STE,于术前8 h内及术后2 h内对左心结构、舒张及收缩功能和长轴应变(GLS)进行评价,对比组间及组内术前、术后各超声指标。结果PCI术前、术后,2组左心内径及室壁厚度差异均无统计学意义(P均>0.05)。术后MIRI组E峰较术前显著降低(P=0.032),E/A显著低于术前(P=0.021),二尖瓣瓣环舒张早期运动速度e显著低于术前(P=0.018),E/e高于术前(P=0.047);对照组舒张功能无显著变化(P>0.05)。MIRI组术后射血分数(ET)无明显变化,GLS显著减低(P<0.05),对照组术后EF及GLS显著升高。结论PCI术后发生临床MIRI者舒张功能及GLS减低,联合常规超声心动图及2D-STE可对PCI术后MIRI进行评价。

缺血时间对大鼠心肌缺血再灌注损伤及基质金属蛋白酶表达的影响

目的观察不同缺血时间对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠24只,采用完全随机法分为心肌缺血30 min后再灌注组(A组,8只),心肌缺血10 min后再灌注组(B组,8只),假手术组(C组,8只)。采用组织病理学检查和超声心动图检测评价3组大鼠心肌损伤、心脏功能及心室重构情况,并采用RT-PCR和Western blot法检测3组大鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的表达。结果与C组比较,A组、B组大鼠心肌损伤后7、14 d LVEF、左心室短轴缩短率明显降低,收缩末室间隔厚度明显减小(P<0.05);A组、B组大鼠心肌组织中MMP-2和MMP-9表达明显增加,TIMP-1表达明显减少,且A组较B组变化更明显(P<0.05)。结论延长缺血时间会促使再灌注心肌MMP-2、MMP-9表达增加,TIMP-1表达减少,继而导致心肌缺血再灌注损伤的加重。

人脐带间充质干细胞外泌体携带微小RNA-204对心肌缺血再灌注小鼠模型巨噬细胞极化的影响及机制探究

目的探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)外泌体携带微小RNA-204(miR-204)对心肌缺血再灌注(I/R)小鼠模型巨噬细胞极化的影响及作用机制。方法hUC-MSC分离、培养并鉴定,检测成脂、成骨分化能力;超速离心法分离hUC-MSC外泌体,纳米颗粒跟踪分析软件、透射电镜、Western blot实验鉴定外泌体中CD81、CD63、肿瘤易感基因101(Tsg101)及钙联蛋白(Calnexin)的表达;将hUC-MSC分为hUC-MSC组、miR-204模拟物组及阴性对照组,qRT-PCR法检测各组细胞及其外泌体中miR-204的表达;将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、I/R组、hUC-MSC外泌体组、阴性对照组和miR-204模拟物组,除假手术组外均通过结扎左前降支动脉构建I/R模型,超声心电图检测小鼠心功能,HE染色观察小鼠心肌组织病理学情况,ELISA检测心肌组织中白细胞介素(IL)1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶1(Arg-1)及IL-10水平;分离小鼠心肌组织巨噬细胞,流式细胞术检测巨噬细胞CD11c和CD206蛋白表达情况,ELISA检测巨噬细胞IL-1β、TNF-α、Arg-1及IL-10水平。结果hUC-MSC具有成脂、成骨分化能力,外泌体鉴定成功;与阴性对照组比较,miR-204模拟物组hUC-MSC及其外泌体中miR-204表达水平显著增加(P<0.001,P<0.001);与假手术组比较,I/R组小鼠左心室舒张末期直径(LVEDD)(P<0.001)、左心室收缩末期直径(LVESD)(P<0.001)、心肌损伤评分(P<0.001)、IL-1β(P<0.001)、TNF-α(P<0.001)、CD11c(P<0.001)水平显著增加,左心室射血分数(LVEF)(P<0.001)、左心室缩短分数(LVFS)(P<0.001)、Arg-1(P<0.001)、IL-10(P<0.001)、CD206(P<0.001)水平显著降低;与I/R组比较,hUC-MSC外泌体组LVEDD(P<0.001)、LVESD(P<0.001)、心肌损伤评分(P<0.001)、IL-1β(P<0.001)、TNF-α(P=0.010)、CD11c(P<0.001)水平显著降低,LVEF(P<0.001)、LVFS(P<0.001)、Arg-1(P<0.001)、IL-10(P=0.028)、CD206(P=0.022)水平显著性增加;与阴性对照组比较,miR-204模拟物组LVEDD(P<0.001)、LVESD(P<0.001)、心肌损伤评分(P=0.001)、IL-1β(P=0.048)、TNF-α(P<0.001)、CD11c(P=0.007)水平显著降低,LVEF(P<0.001)、LVFS(P<0.001)、Arg-1(P<0.001)、IL-10(P=0.001)、CD206(P=0.001)水平显著增加。结论miR-204过表达的hUC-MSC外泌体可抑制I/R小鼠模型巨噬细胞向M1型极化,促进其向M2型极化。