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锌指蛋白297B协同Myocardin调节平滑肌细胞的分化 被引量:4
1
作者 孙璇 卢光琇 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期85-90,共6页
目的探讨锌指蛋白297B在平滑肌细胞分化过程中的表达及相关机制。方法用定量实时多聚酶链反应检测锌指蛋白297B在人、大鼠和小鼠平滑肌细胞中体内/体外的表达量及在平滑肌细胞体内和体外分化或增殖过程中的表达变化;构建锌指蛋白297B-My... 目的探讨锌指蛋白297B在平滑肌细胞分化过程中的表达及相关机制。方法用定量实时多聚酶链反应检测锌指蛋白297B在人、大鼠和小鼠平滑肌细胞中体内/体外的表达量及在平滑肌细胞体内和体外分化或增殖过程中的表达变化;构建锌指蛋白297B-Myc表达质粒,免疫荧光检测锌指蛋白297B-Myc在大鼠平滑肌细胞中的表达分布;用荧光素酶活性检测及免疫共沉淀实验检测锌指蛋白297B与Myocardin的结合及相互作用。结果锌指蛋白297B在平滑肌细胞中特异性高表达,在小鼠胚胎干细胞向平滑肌细胞分化过程中表达上调,在血小板源性生长因子BB刺激的平滑肌细胞增殖过程中下调,在大鼠颈动脉球囊损伤内膜修复过程中表达先上调后下降。锌指蛋白297B主要分布于细胞核及核周的细胞质。锌指蛋白297B能与Myocardin蛋白结合,荧光素酶活性检测显示锌指蛋白297B的表达受Myocardin的调控。结论锌指蛋白297B可能在平滑肌细胞分化过程中起到重要正向调控作用,这一作用很可能是通过锌指蛋白297B与Myocardin的协同作用来完成。 展开更多
关键词 锌指蛋白297B myocardin 平滑肌细胞 分化
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Myocardin表达载体的构建 被引量:1
2
作者 邓黎 谭虎 梁志清 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第16期1590-1591,共2页
目的构建表达载体pEGFP-Myoc1,为转染人脐血间充质干细胞,实现其成平滑肌分化提供条件。方法通过聚合酶链反应(PCR)以pAdApt.myoc1为模板制备Myocardin目的基因,通过pEGFP-N1载体线性化以及连接、转化等方法构建真核表达载体pEGFP-Myoc1... 目的构建表达载体pEGFP-Myoc1,为转染人脐血间充质干细胞,实现其成平滑肌分化提供条件。方法通过聚合酶链反应(PCR)以pAdApt.myoc1为模板制备Myocardin目的基因,通过pEGFP-N1载体线性化以及连接、转化等方法构建真核表达载体pEGFP-Myoc1,并通过酶切和测序对其序列进行鉴定。结果正确构建了真核重组表达质粒pEGFP-Myoc1,基因测序结果表明,与GeneBank公布的已知序列完全一致。结论成功构建的真核重组表达载体pEGFP-Myoc1,为后续实验提供了基础。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 myocardin 基因克隆
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子宫肌瘤及子宫平滑肌中myocardin的表达及意义 被引量:7
3
作者 朱颖军 李洋 +2 位作者 王悦冰 石岩蓉 林琬君 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期678-681,共4页
目的:检测心肌素(myocardin)在子宫肌瘤及子宫平滑肌中的表达,探讨其与子宫肌瘤的关系,及在子宫平滑肌中的表达规律,从而进一步指导临床诊疗工作。方法:收集30例患者的子宫肌瘤和子宫平滑肌组织,并进行原代培养;采用western blot方法检... 目的:检测心肌素(myocardin)在子宫肌瘤及子宫平滑肌中的表达,探讨其与子宫肌瘤的关系,及在子宫平滑肌中的表达规律,从而进一步指导临床诊疗工作。方法:收集30例患者的子宫肌瘤和子宫平滑肌组织,并进行原代培养;采用western blot方法检测子宫肌瘤和子宫平滑肌组织中的myocardin的蛋白表达情况,同时采用real-time PCR方法检测相应的mRNA表达情况。结果:myocardin在子宫肌瘤中的表达较子宫平滑肌中明显降低。在雌激素E2浓度梯度下,子宫平滑肌myocardin在1 nmol/L E2作用下表达明显增加,并且E2的这种促进作用能够被其抑制剂所减弱。结论:myocardin对子宫肌瘤的发生可能存在抑制作用,E2可进一步促进子宫平滑肌中myocardin的表达。 展开更多
关键词 心肌素 子宫平滑肌 子宫肌瘤 雌激素
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Myocardin在大鼠血管平滑肌细胞表型转化中的作用机制 被引量:5
4
作者 许丽辉 何强 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期2483-2486,共4页
目的探讨Myocardin在血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用机制。方法采用细胞转染的方法使外源性Myocardin和SRF在培养的VSMC中过表达,应用RT-PCR、Western印迹及改良考马斯亮蓝染色法等方法检测转染后VSMC收缩型特异性标志基因的表... 目的探讨Myocardin在血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用机制。方法采用细胞转染的方法使外源性Myocardin和SRF在培养的VSMC中过表达,应用RT-PCR、Western印迹及改良考马斯亮蓝染色法等方法检测转染后VSMC收缩型特异性标志基因的表达及细胞骨架的结构变化。结果当含有SRF和Myocardin编码基因的表达质粒共同转染培养的VSMC时,收缩型VSMC的标志基因SM22α和SM-α-actin的mR-NA和蛋白表达显著上调,而且促进VSMC细胞骨架的重构。而培养的VSMC单独转染SRF或Myocardin的表达质粒后,相关指标并无明显改变。结论外源性Myocardin和SRF的强制表达可以促进VSMC特异性标志基因的表达以及细胞骨架的重构,从而诱导处于增殖状态的VSMC进入静止期,并向收缩型转变。 展开更多
关键词 myocardin 血清应答因子 血管平滑肌细胞 表型转化
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Myocardin相关转录因子-A对缺氧缺血诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响 被引量:1
5
作者 钟泽 胡家庆 +3 位作者 胡新央 蒋峻 吴新东 相鹏 《浙江医学》 CAS 2015年第7期539-543,I0002,共6页
目的研究Myocardin相关转录因子-A(MRTF-A)对缺氧缺血诱导的心肌细胞凋亡的影响及机制。方法 20只大鼠采用随机数字表分为假手术组和缺血再灌注组。假手术组大鼠实行开胸手术但不构建缺血再灌注模型,缺血再灌注组结扎冠状动脉30min再松... 目的研究Myocardin相关转录因子-A(MRTF-A)对缺氧缺血诱导的心肌细胞凋亡的影响及机制。方法 20只大鼠采用随机数字表分为假手术组和缺血再灌注组。假手术组大鼠实行开胸手术但不构建缺血再灌注模型,缺血再灌注组结扎冠状动脉30min再松开2h建立在体心肌缺血再灌注损伤模型。采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测MRTF-A表达;体外培养大鼠原代心肌细胞,转染MRTF-A及小分子mRNA表达质粒并构建缺氧缺血模型。通过流式细胞术检测细胞凋亡率,以Western blot法分析凋亡相关基因bcl-2蛋白表达;采用荧光素酶检测bcl-2转录活性。结果假手术组和缺血再灌注组的心肌凋亡细胞分别为(8.14±2.33)%和(82.35±7.93)%,缺血再灌注组高于假手术组(P<0.05)。假手术组有少量MRTF-A蛋白表达,缺血再灌注组胞浆中有大量MRTF-A蛋白表达。在体外培养的原代心肌细胞中,对照组、模型组、MRTF-A处理组与MRTF-A抑制组的凋亡率分别为(4.63+2 33)%、(79.97+9.09)%、(43.63+3.52)%和(72.16+5.37)%;bcl-2的蛋白表达分别为0.313+0.014、0.186+0.019、0.254+0 013与0.175+0.017。模型组凋亡率高于对照组(P<0.01),MRTF-A处理组的凋亡率低于模型组(P<0.01);MRTF-A抑制组的凋亡率高于MR:TF-A处理组(P<0.05);模型组bcl-2的蛋白低于对照组(P<0.01),MRTF-A处理组的bcl-2的蛋白高于模型组(P<0.01);MRTF-A抑制组的bcl-2的蛋白低于MRTF-A处理组(P)<0.05);MRTF-A对bcl-2的转录活性的调控与对照组相比明显升高(P<0.01),而MRTF-A对突变后的bcl-2的转录活性与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血再灌注损伤诱导了大鼠心肌细胞凋亡,上调了心肌组织中MRTF-A的蛋白表达;MRTF-A通过上调bcl-2的转录活性表达起到对缺氧缺血诱导的大鼠原代心肌细胞凋亡损伤的保护作用。 展开更多
关键词 myocardin相关转录因子-A 缺血再灌注 心肌凋亡
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Myocardin/MRTFs家族的研究进展 被引量:1
6
作者 许丽辉 韩梅 温进坤 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1435-1437,共3页
关键词 myocardin myocardin相关转录因子 血清应答因子
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抑制Rho/ROCK通路对气道平滑肌细胞增殖与迁移的影响及相关机制
7
作者 崔云斐 卢清华 +3 位作者 黄晓 林炜南 黄婷 杨琴 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期974-981,共8页
目的研究抑制Ras同源基因(Ras homolog gene,Rho)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(Rhoassociated coiled-coil forming protein kinase,ROCK)通路对心肌素(myocardin,MYOCD)参与的气道平滑肌细胞增殖与迁移的影响及分子机制。方法体外构... 目的研究抑制Ras同源基因(Ras homolog gene,Rho)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(Rhoassociated coiled-coil forming protein kinase,ROCK)通路对心肌素(myocardin,MYOCD)参与的气道平滑肌细胞增殖与迁移的影响及分子机制。方法体外构建腺病毒载体Ad-ZsGreen-shRNA-hROCK1感染人气道平滑肌细胞,将细胞随机分为4组:ROCK1基因沉默对照(shNC)组、shNC+花生四烯酸(arachidonic acid,AA;Rho/ROCK通路激活剂)组、ROCK1基因沉默(shROCK1)组、shROCK1+AA组(各组n=3)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法、Western blot法检测ROCK1、MYOCD mRNA和蛋白表达水平,ELISA法检测球状肌动蛋白和丝状肌动蛋白水平,免疫荧光染色法及细胞划痕实验检测细胞增殖及迁移情况。结果与shNC+AA组相比,shROCK1+AA组ROCK1、MYOCD mRNA和蛋白表达水平降低,球状肌动蛋白、丝状肌动蛋白表达降低,细胞增殖、细胞迁移能力降低(P<0.05)。结论抑制Rho/ROCK通路致气道平滑肌细胞增殖及迁移能力受抑,其机制可能与MYOCD的下调有关. 展开更多
关键词 哮喘 Rho/ROCK通路 心肌素 增殖 气道平滑肌细胞
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云南白药对血管平滑肌增殖基因Myocardin的影响研究 被引量:1
8
作者 刘兰 王峰 +1 位作者 杨丽娟 华海蓉 《内蒙古中医药》 2017年第20期130-131,共2页
目的:研究云南白药对活性氧诱导的SM-Myocd细胞增殖的影响。方法:采用不同浓度过氧化氢(H_2O_2)作为外源性活性氧刺激SM-Myocd细胞增殖,应用MTT、Western blot测定等方法观察给予不同浓度云南白药干预处理,观察云南白药对H_2O_2作用后SM... 目的:研究云南白药对活性氧诱导的SM-Myocd细胞增殖的影响。方法:采用不同浓度过氧化氢(H_2O_2)作为外源性活性氧刺激SM-Myocd细胞增殖,应用MTT、Western blot测定等方法观察给予不同浓度云南白药干预处理,观察云南白药对H_2O_2作用后SM-Myocd细胞增殖的影响。结果:H_2O_2具有促进SM-Myocd细胞增殖的作用,其浓度为50um时增殖作用最为显著(P<0.05);云南白药能够抑制H_2O_2促SM-Myocd细胞的增殖作用,其浓度为10ug/ml时抑制作用最为显著(P<0.05)。结论:云南白药具有减轻H_2O_2对SM-Myocd细胞的损伤作用,对动脉粥样硬化斑块形成、血管成形术后再狭窄等心血管疾病的防治具有应用前景,可望成为新的干预靶点。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 云南白药 myocardin 增殖
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WWP1与Myocardin结合调节血管平滑肌细胞的分化研究
9
作者 孙璇 唐奕 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第8期1-6,共6页
【目的】探讨含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)在平滑肌细胞分化过程中的表达情况及其作用机制。【方法】用实时定量PCR,检测WWP1在人、小鼠主动脉血管平滑肌细胞中以及小鼠胚胎干细胞向平滑肌细胞体外分化过程中表达量的变化情... 【目的】探讨含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)在平滑肌细胞分化过程中的表达情况及其作用机制。【方法】用实时定量PCR,检测WWP1在人、小鼠主动脉血管平滑肌细胞中以及小鼠胚胎干细胞向平滑肌细胞体外分化过程中表达量的变化情况。用萤光素酶活性试验及免疫共沉淀试验检测WWP1与Myocardin的结合情况。【结果】WWP1在人和小鼠的血管平滑肌细胞中高表达,在全反式维甲酸诱导小鼠胚胎干细胞向平滑肌细胞分化过程中的表达水平明显上调。WWP1能与Myocardin蛋白结合,WWP1的表达水平受Myocardin调控。【结论】WWP1很可能通过与Myocardin结合参与血管平滑肌细胞分化的调节。 展开更多
关键词 含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1 myocardin 平滑肌细胞 分化 免疫共沉淀
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SRF和Myocardin在血管平滑肌细胞表型转化中的相互作用
10
作者 许丽辉 何强 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期3325-3326,共2页
目的探讨SRF和Myocardin在血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中相互作用的机制。方法采用免疫共沉淀和凝胶迁滞分析(EMSA)的方法检测不同表型的VSMC中SRF和Myocardin的相互作用以及SRF与其顺式元件相互结合的能力。结果 与传代培养处于去... 目的探讨SRF和Myocardin在血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中相互作用的机制。方法采用免疫共沉淀和凝胶迁滞分析(EMSA)的方法检测不同表型的VSMC中SRF和Myocardin的相互作用以及SRF与其顺式元件相互结合的能力。结果 与传代培养处于去分化状态的VSMC相比,原代培养处于分化状态的VSMC中SRF和Myocardin的相互作用明显增强,而且SRF与其顺式元件结合的能力显著提高。结论 SRF通过与Myocardin相互作用形成多蛋白复合体,即可有效地提高SRF与DNA调控元件即CArG-box的结合能力,启动肌特异性基因的表达,从而调控VSMC的表型转化。 展开更多
关键词 myocardin 血清应答因子 血管平滑肌细胞 表型转化
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miR-145与MyoCD调控VSMCs脂质蓄积的研究
11
作者 龚勇珍 贺卫和 +2 位作者 钱荣华 谭峰 黄小龙 《吉林医学》 CAS 2022年第7期1741-1744,共4页
目的:研究miR-145与心肌素(MyoCD)对人主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)脂质蓄积的影响。方法:ox-LDL孵育细胞,油红O染色观察细胞成脂,ELISA检测细胞内胆固醇含量;miR-145 siRNA及MyoCD过表达观察miR-145和MyoCD对血管平滑肌细胞脂质蓄积的... 目的:研究miR-145与心肌素(MyoCD)对人主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)脂质蓄积的影响。方法:ox-LDL孵育细胞,油红O染色观察细胞成脂,ELISA检测细胞内胆固醇含量;miR-145 siRNA及MyoCD过表达观察miR-145和MyoCD对血管平滑肌细胞脂质蓄积的影响,荧光定量PCR检测三磷酸腺苷结合盒转运体(ABCA)1的表达。结果:与对照组相比,MyoCD过表达组MyoCD蛋白及mRNA表达量均明显升高(P<0.05),miR-145 inhibitor组miR-145表达量下调(P<0.05)。ELISA检测结果表明,与空载+miR-145 inhibitor组相比,miR-145通过MyoCD过表达降低胆固醇含量。油红O染色结果显示,与空载组相比,抑制miR-145以及MyoCD+miR-145 inhibitor组均可使细胞内脂滴数量较少。PCR结果显示,抑制miR-145对ABCA1水平无显著影响。结论:miR-145低表达和MyoCD过表达可抑制VSMC细胞脂质蓄积。 展开更多
关键词 心肌素 MIR-145 人主动脉血管平滑肌细胞 脂质蓄积
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Myocardin与核因子-κB在子宫平滑肌瘤中的表达及关系 被引量:3
12
作者 王佩 薛菊香 +6 位作者 梁建芳 肖虹 武丽娜 李宁 程彩霞 王宏坤 郑绘霞 《中国药物与临床》 CAS 2012年第1期29-31,I0002,共4页
目的研究myocardin和核因子(NF)-κB在子宫平滑肌瘤与正常子宫肌层表达的差异,探讨二者在子宫平滑肌瘤发病中的作用机制。方法应用免疫组织化学方法检测myocardin与NF-κB在81例子宫平滑肌瘤组织和81名正常子宫肌层组织中的表达情况。... 目的研究myocardin和核因子(NF)-κB在子宫平滑肌瘤与正常子宫肌层表达的差异,探讨二者在子宫平滑肌瘤发病中的作用机制。方法应用免疫组织化学方法检测myocardin与NF-κB在81例子宫平滑肌瘤组织和81名正常子宫肌层组织中的表达情况。结果与正常肌层组织相比,子宫平滑肌瘤组织中myo-cardin的表达降低(P<0.05),NF-κB的表达增高(P<0.05),两者表达呈相关性(P<0.05)。两者的表达与患者的年龄、肌瘤个数、有无变性无关。结论 Myocardin与NF-κB可能在子宫平滑肌瘤的发生发展过程中发挥重要作用,NF-κB可能下调myocardin蛋白表达参与子宫平滑肌瘤的发生。 展开更多
关键词 NF-ΚB 平滑肌瘤 myocardin
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小鼠骨髓间充质干细胞体外诱导向平滑肌样细胞分化过程中myocardin的表达 被引量:1
13
作者 孟寒 阮秋蓉 +2 位作者 瞿智玲 黄冠 余俊 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第1期13-16,共4页
目地探讨血小板源性生长因子BB联合高浓度胎牛血清体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化为平滑肌细胞的可行性及myocardin在此过程中的表达变化。方法采用全骨髓贴壁法分离骨髓间充质干细胞,血小板源性生长因子BB(50μg/L)联合高浓度胎牛... 目地探讨血小板源性生长因子BB联合高浓度胎牛血清体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化为平滑肌细胞的可行性及myocardin在此过程中的表达变化。方法采用全骨髓贴壁法分离骨髓间充质干细胞,血小板源性生长因子BB(50μg/L)联合高浓度胎牛血清诱导骨髓间充质干细胞,分别于诱导前,及诱导4d和8d后用免疫细胞化学法检测细胞平滑肌肌动蛋白、平滑肌肌球蛋白重链和myocardin的表达。结果免疫组织化学显示,诱导前及诱导4d和8d时,平滑肌肌动蛋白、平滑肌肌球蛋白重链和myocardin三种蛋白的表达逐渐增强,平均灰度值逐渐降低,不同时间点之间比较差异有显著性(P<0.05)。结论血小板源性生长因子BB联合高浓度胎牛血清可有效诱导骨髓间充质干细胞向平滑肌样细胞分化。Myocardin在此分化过程中可能起了重要作用。 展开更多
关键词 病理学 骨髓间充质干细胞 平滑肌样细胞 血小板源性生长因子BB 胎牛血清 分化 myocardin
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myocardin通过激活miR-93-5p促进人主动脉血管平滑肌细胞分化 被引量:1
14
作者 史丹阳 刘美玲 +3 位作者 刘翔 张建 张同存 王楠 《天津科技大学学报》 CAS 2019年第2期19-24,共6页
myocardin是促进平滑肌细胞分化的重要转录因子.微小RNA(microRNAs,miRNA)在近年来已经证实参与多种生物学过程,包括平滑肌的表型转化.然而在平滑肌分化过程中myocardin与哪些microRNA具有相关性仍有待于阐明.通过将外源性myocardin转... myocardin是促进平滑肌细胞分化的重要转录因子.微小RNA(microRNAs,miRNA)在近年来已经证实参与多种生物学过程,包括平滑肌的表型转化.然而在平滑肌分化过程中myocardin与哪些microRNA具有相关性仍有待于阐明.通过将外源性myocardin转入人主动脉血管平滑肌细胞(human aortal vascular smooth muscle cells,HA-VSMCs)中,利用免疫印迹(Western blot)检测分化标志基因肌动蛋白α2(actin alpha2,ACTA2)和肌动蛋白相关蛋白(smooth muscle 22 alpha,SM22α)的表达;利用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测过表达或敲低myocardin对miR-93-5p水平的影响;构建miR-93-5p启动子的荧光素酶报告质粒,利用荧光素酶报告分析证实myocardin对mi R-93-5p启动子的转录激活作用.上述结果证实myocardin可能通过激活miR-93-5p的转录,上调其表达,进而促进血管平滑肌细胞的分化. 展开更多
关键词 myocardin 人主动脉血管平滑肌细胞 表型转化 miR-93-5p
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Myocardin协同维甲酸受体调节骨髓间充质干细胞向神经细胞分化 被引量:1
15
作者 侯士芳 廖兴华 +2 位作者 王楠 张同存 韩俊领 《生物技术通讯》 CAS 2011年第1期24-27,共4页
目的:探讨Myocardin在维甲酸(RA)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)向神经细胞(NC)分化过程中的作用及与维甲酸X受体α(RXRa)的相互作用。方法:免疫细胞荧光检测RA诱导BMSC向NC分化;RT-PCR检测My-ocardin及RXRa在RA诱导BMSC分化为神经细胞过... 目的:探讨Myocardin在维甲酸(RA)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)向神经细胞(NC)分化过程中的作用及与维甲酸X受体α(RXRa)的相互作用。方法:免疫细胞荧光检测RA诱导BMSC向NC分化;RT-PCR检测My-ocardin及RXRa在RA诱导BMSC分化为神经细胞过程中的表达;萤光素酶活性实验分析Myocardin和RXRa对EGR-4-luc的影响。结果:RA可有效诱导BMSC向NC分化;在mRNA水平上,RA能显著增加RXRa、Myocardin的表达,且在一定范围内呈剂量依赖;Myocardin与RXRa协同促进EGR-4-luc的表达。结论:Myocardin在BMSC向NC分化过程中起重要的正向调控作用,这一作用是与RXRa协同完成的。 展开更多
关键词 myocardin 维甲酸 维甲酸X受体α 骨髓间充质干细胞 神经细胞
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低氧刺激通过HIF-1α直接调节Myocardin表达促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化 被引量:2
16
作者 哈艳平 刘晓晓 +5 位作者 邵钟铭 邹园 伍彩霞 郭峻莉 申志华 揭伟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1038-1043,共6页
目的探讨低氧刺激在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)向心肌细胞谱系分化过程中对心肌素(Myocardin)表达的影响及机制。方法分离Sprague Dawley大鼠股骨BMSC,磁激活细胞分选法获得c-Kit^(+)细胞亚群。分别用H... 目的探讨低氧刺激在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)向心肌细胞谱系分化过程中对心肌素(Myocardin)表达的影响及机制。方法分离Sprague Dawley大鼠股骨BMSC,磁激活细胞分选法获得c-Kit^(+)细胞亚群。分别用HIF-1α过表达慢病毒感染或物理性低氧(2%O2)刺激c-Kit^(+)BMSC,定量RT-PCR检测HIF-1α、Myocardin和心肌细胞分化基因(Nkx2.5、cTnT)的mRNA水平,免疫荧光检测Myocardin和cTnT蛋白表达,双荧光素酶报告基因法检测HIF-1α对Myocardin启动子活性的影响。结果HIF-1α过表达慢病毒感染和物理性低氧刺激均诱导c-Kit^(+)BMSC中Myocardin和心肌细胞分化标志基因Nkx2.5、cTnT的表达水平明显增高。shRNA抑制Myocardin后一定程度上减弱低氧诱导的c-Kit^(+)BMSC心肌细胞样分化。HIF-1α可直接上调Myocardin启动子活性。结论低氧刺激可通过HIF-1α直接上调Myocardin表达,进而促进c-Kit^(+)BMSC向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 心肌样细胞分化 低氧 HIF-1Α myocardin
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myocardin、NF-κB及SRC-3在子宫平滑肌瘤中的表达及其临床意义 被引量:1
17
作者 张晶晶 郑绘霞 +6 位作者 肖虹 高建忠 武丽娜 李宁 梁钢 阴琰 梁建芳 《中国医药指南》 2012年第10期186-187,共2页
目的探讨心肌素(myocardin)、核转录因子(NF-κB)及类固醇激素受体共活化因子3(SRC-3)在子宫平滑肌瘤形成中的作用机制。方法采用荧光定量PCR技术检测22例子宫平滑肌瘤患者肌瘤组织与对应正常肌层组织中myocardin、NF-κB及SRC-3 mRNA... 目的探讨心肌素(myocardin)、核转录因子(NF-κB)及类固醇激素受体共活化因子3(SRC-3)在子宫平滑肌瘤形成中的作用机制。方法采用荧光定量PCR技术检测22例子宫平滑肌瘤患者肌瘤组织与对应正常肌层组织中myocardin、NF-κB及SRC-3 mRNA的表达情况。结果肌瘤与对应正常肌层均有myocardin、NF-κB及SRC-3 mRNA表达。与正常肌层组织相比,肌瘤组织中myocardin的相对表达量降低(P<0.05),而NF-κB与SRC-3的相对表达量增高(P<0.05)。这三个基因的表达与患者的年龄、肌瘤的病理学类型、数量及是否变性无显著差异(P>0.05)。结论 myocardin对子宫平滑肌瘤的发生有一定抑制作用,而NF-κB与SRC-3可能协同促进子宫平滑肌瘤的发生。 展开更多
关键词 myocardin NF-ΚB SRC-3 子宫平滑肌瘤
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MYOCARDIN的表达和在平滑肌细胞分化中的作用 被引量:1
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作者 王珊珊 阮秋蓉 +4 位作者 孟寒 余俊 许梅 黄冠 陈雪 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期401-406,共6页
目的在用血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)联合20%胎牛血清(FBS)诱导骨髓间充质干细胞(BM-SC)向平滑肌细胞(SMC)分化过程中,通过对促血管SMC分化因子myocardin和平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等表达的研究,探讨myocardin在促血管SM... 目的在用血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)联合20%胎牛血清(FBS)诱导骨髓间充质干细胞(BM-SC)向平滑肌细胞(SMC)分化过程中,通过对促血管SMC分化因子myocardin和平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等表达的研究,探讨myocardin在促血管SMC分化中的重要作用。方法采用骨髓干细胞培养基和贴壁法从小鼠骨髓中分离BMSC,然后细胞分为两组,诱导其向SMC分化:(1)20%FBS单独诱导;(2)PDGF-BB(50ng/ml)联合20%FBS诱导BMSC。分别于诱导0d,4d,8d,12d后用逆转录-聚合酶链反应法(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组化法检测细胞myocardin,α-actin,SM-22的mRNA表达和蛋白表达情况.结果RT-PCR和免疫组化结果显示在对小鼠BMSC的诱导过程中,检测出了myocardin,同时还有平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等的表达。0d,4d,8d两诱导组细胞的myocardin,α-actin,SM-22的mRNA和蛋白表达水平随着诱导时间延长而增强(P<0.05),而诱导8d及12d时表达基本趋于稳定,与SMC相比无明显统计学差异(P>0.05);并且各项指标的表达水平在PDGF-BB与20%FBS联合诱导时比20%FBS单独诱导表达增强。不同诱导组之间统计学比较有差异(P<0.05)。结论PDGF-BB联合20%FBS可有效诱导BMSC向SMC分化,myocardin在此过程中起着关键性作用,且PDGF-BB,20%FBS两者联合诱导比20%FBS单独诱导作用要强。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 平滑肌样细胞 分化 促血管平滑肌细胞分化因子 平滑肌分化标志物基因
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GSNO通过亚硝酰化抑制Myocardin诱导的心肌肥厚
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作者 郑德亮 廖兴华 +3 位作者 魏兆强 杜福 周浩 张同存 《天津科技大学学报》 CAS 北大核心 2017年第4期30-35,共6页
Myocardin可以诱导心肌肥厚,而一氧化氮(NO)对于心肌具有一定保护作用,但在心肌肥厚发生的过程中,NO的作用尚未报道.本文首先用NO荧光探针检测亚硝基谷胱甘肽(S-Nitrosoglutathione,GSNO)处理能够引起H9c2细胞中NO总含量的上升.随后利用... Myocardin可以诱导心肌肥厚,而一氧化氮(NO)对于心肌具有一定保护作用,但在心肌肥厚发生的过程中,NO的作用尚未报道.本文首先用NO荧光探针检测亚硝基谷胱甘肽(S-Nitrosoglutathione,GSNO)处理能够引起H9c2细胞中NO总含量的上升.随后利用200,μmol/L GSNO处理细胞,检测发现Myocardin可以发生亚硝酰化修饰,同时心肌肥厚标志基因α-MHC在mRNA水平和蛋白水平的表达均下调.最后通过荧光素酶报告分析、RT-PCR以及Western blot分析表明,过表达Myocardin可以激活GSNO还原酶(GSNO reductase,GSNOR)的表达,并且降低细胞内NO总量.以上结果表明,亚硝酰化可以抑制由Myocardin诱导的心肌肥厚的发生,同时Myocardin可以激活GSNOR的转录,间接抑制GSNO对Myocardin的作用. 展开更多
关键词 亚硝酰化 myocardin GSNO GSNOR
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Myocardin in biology and disease 被引量:7
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作者 Joseph M.Miano 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2015年第1期3-19,共17页
Myocardin (MYOCD) is a potent transcriptional coactivator that functions primarily in cardiac muscle and smooth muscle through direct contacts with serum response factor (SRF) over cis elements known as CArG boxes... Myocardin (MYOCD) is a potent transcriptional coactivator that functions primarily in cardiac muscle and smooth muscle through direct contacts with serum response factor (SRF) over cis elements known as CArG boxes found near a number of genes encoding for contractile, ion channel, cytoskeletal, and calcium handling proteins. Since its discovery more than 10 years ago, new insights have been obtained regarding the diverse isoforms of MYOCD expressed in cells as well as the regulation of MYOCD expression and activity through transcriptional, post-transcriptional, and post-translational processes. Curiously, there are a number of functions associated with MYOCD that appear to be independent of contractile gene expression and the CArG-SRF nucleoprotein complex. Further, perturbations in MYOCD gene expression are associated with an increasing number of diseases including heart failure, cancer, acute vessel disease, and diabetes. This review summarizes the various biological and patho- logical processes associated with MYOCD and offers perspectives to several challenges and future directions for further study of this formidable transcriptional coactivator. 展开更多
关键词 GENE myocardin in biology and disease SRF
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