杨梅果实发育与糖的积累及其关系研究

以东魁、荸荠种、水梅为试材,研究了杨梅果实发育与糖积累及其关系。根据杨梅果实大小的增加将果实发育大致分为3个阶段,呈双“S型”曲线动态变化:第1阶段(约盛花32d前)果实纵、横径增长最快;第2阶段(32-63d)果核发育硬化,果重增加明显;第3阶段(63d至成熟)果实进入快速增长高峰,果重迅速增加,光合产物在果实中迅速积累。杨梅果实中积累的糖主要是蔗糖,果糖和葡萄糖仅占总糖的1/4,蔗糖含量在发育初期和中期都较低,盛花52d后开始快速积累直至果实成熟,东魁高于水梅、荸荠种;葡萄糖和果糖变化大致保持同步,第1阶段较高,第2阶段降到最低,第3阶段迅速积累达到最高,与蔗糖积累基本保持一致,成熟时东魁与水梅较荸荠种高且相近。杨梅果实中酸性转化酶(Ivr)与中性转化酶(Nvr)活性变化趋势相同,幼果早期最高,中期降低后维持较低活性直至成熟。品种间pH值变幅相似,果实发育第1阶段最高,第2阶段降到最低,转色后上升。相关分析表明:果实发育动态与蔗糖、葡萄糖、果糖的积累存在着极显著的相关关系,其中果实横径的增加与果实糖积累组分中蔗糖的变化2者间相关性最大(r=0.93255**)。

辅色素对杨梅汁色泽短期稳定性的影响

研究了多种辅色素对杨梅汁贮藏中色泽稳定性的影响.将辅色素添加于杨梅汁中并贮藏7d后发现,乙二胺四乙酸(EDTA)、吐温-80、L-脯氨酸、L-赖氨酸、乙酸和丙二酸对杨梅汁色泽的稳定性作用不明显.L-谷氨酸、紫甘薯色素和紫玉米色素有一定的护色作用,十二烷基硫酸钠(SDS)、乙醛和桑椹红色素对杨梅汁贮藏中的色泽有明显的保护作用.

江浙地区杨梅主要品种的ISSR分析

为研究江浙地区杨梅(Myrica rubraS ieb.et Zucc.)的亲缘关系,运用ISSR-PCR分析方法对其主要栽培品种进行了分析。8条引物扩增出58个DNA片段,其中多态性片段42个,占总扩增片段的72.4%。结合遗传距离分析,运用UPGMA法构建了分子系统树。结果表明,所分析的14个品种和1个优良单株以0.14为结合线可分为5组,说明江浙地区的杨梅在广泛基因交流的情况下,存在局部的隔离。‘小叶细蒂’与‘极早熟1号’亲缘关系较近,前者可能是后者的亲本之一。

杨梅果实发育进程中的碳水化合物代谢

以‘乌紫’和‘荸荠’两个杨梅品种为试材,测定了干鲜重、糖含量、可滴定酸含量、蔗糖和己糖代谢相关酶活性的动态变化。结果表明,杨梅果实的干鲜重、含糖量的快速增长和可滴定酸含量的快速下降均发生在果实发育后期。成熟‘乌紫’杨梅果实的蔗糖含量约占总糖的2/3以上,而‘荸荠’杨梅仅为总糖的49%。‘荸荠’杨梅的转化酶和蔗糖合酶分解活性随着果实发育呈上升趋势,‘乌紫’杨梅的则变化不大。两个品种的蔗糖磷酸合酶活性随着果实发育呈上升趋势,但蔗糖合酶合成活性到果实发育中期后下降。两个品种的己糖激酶活性变化相似,但果糖激酶活性的变化趋势不同。

杨梅树皮提取物及杨梅素抗肿瘤活性

目的对杨梅树皮提取物、提取物的大孔吸附树脂各洗脱部位及杨梅素单体化合物进行体外抗肿瘤研究。方法采用MTT法测定细胞死亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;用琼脂糖电泳观察DNA片段化。用Western印迹法分析药物对蛋白质水平的影响。结果杨梅树皮提取物及其大孔吸附树脂洗脱物、杨梅素单体化合物体外对人宫颈癌HeLa细胞、人黑色素瘤A375-S2细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人肝癌HepG2细胞均具有明显的细胞毒作用。杨梅素明显抑制HeLa细胞的增殖,诱导HeLa细胞调亡。Caspase-3、Caspase-9抑制剂可明显抑制50 mg.L-1杨梅素诱导的凋亡。Western印迹结果显示50 mg.L-1杨梅素作用36 h后Caspase-3前体及其底物ICAD和PARP发生降解。结论杨梅树皮提取物及其大孔吸附树脂洗脱物具有明显的细胞毒作用,杨梅素(50 mg.L-1)通过激活Caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。

杨梅组织培养防污染与防褐化研究

[目的]研究杨梅(Myrica rubraSieb et Zucc.)组织培养过程中防污染和防褐化问题。[方法]以东魁杨梅品种茎段作为离体培养材料,研究不同消毒灭菌方法、不同茎段部位和不同防褐化措施对外植体离体培养的影响。[结果]以75%乙醇1min+0.1%HgCl27min对外植体的灭菌效果最好,污染率为30.00%,褐化枯死率为30.00%,茎段诱导成功率为40.00%;在3个茎段部位中,以半木质化茎段诱导效果最好,污染率为30.00%,褐化枯死率为33.33%,诱导成功率为36.67%;在培养基中添加活性炭1.5g/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)2.5g/L对外植体防褐化效果最好,褐化率由对照的60.93%下降到21.88%。[结论]该研究可为杨梅优良品种的扩繁推广和高效遗传转化体系的建立奠定良好的基础。

杨梅新品种黑晶的果实发育与主要品质指标变化规律

以温岭大梅和东魁杨梅为对照,测定了黑晶杨梅果实发育过程中果实纵横径、单果重、糖、酸和花色苷含量的动态变化。结果表明:3个品种的果实生长发育动态变化规律基本一致,生长速率都呈双S型的曲线变化。在6月中旬果实进入快速膨大期,糖含量迅速上升,可滴定酸含量快速下降,花色苷大量积累,此期是黑晶杨梅果实品质形成的关键时期。与温岭大梅和东魁杨梅相比,黑晶杨梅具有高糖低酸、富含花色苷的品质特性,具有较高的生产推广价值。

杨梅酸性转化酶基因cDNA分离及表达分析

杨梅果实富含蔗糖,酸性转化酶是蔗糖代谢关键酶,根据植物酸性转化酶基因保守区序列设计引物,提取杨梅叶片RNA,逆转录获得cDNA,以此为模板通过PCR技术扩增到长度为516bp的基因片段,克隆入pMD18-T载体中,命名为MrIVR1(GenBank:DQ339699)。测序及同源性检索表明,该基因推导氨基酸序列与君子兰、葡萄、草莓、胡萝卜等酸性转化酶基因氨基酸序列同源性为60%～69%。运用ClustalX软件对植物转化酶基因进行了系统树分析,结果显示,MrIVR1编码的蛋白质属于细胞壁酸性转化酶。半定量RT-PCR表达分析显示,MrIVR1基因在杨梅果实发育早期表达量最高,随着果实的发育表达量下降,在成熟果实中表达水平较低。

杨梅不同部位单宁含量与结构研究

对杨梅的叶、枝和树皮的总酚含量与可溶缩合单宁含量进行了测定,并利用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)详细研究了不同部位中缩合单宁的类型、聚合度及聚合物的分布情况。结果表明:树皮的总酚含量最高(43.56%),叶次之(34.69%),枝最低(18.53%);树叶的可溶缩合单宁含量最高(25.67%),皮次之(17.93%),枝最低(8.01%);3组分的缩合单宁都以(表)棓儿茶素-3-O-棓酸酯(EGCG/GCG)为基本结构单元的原翠雀定,且大部分聚合物的结构单元之间存在A型和B型两种连接方式,但其中叶和枝缩合单宁的聚合度要大于树皮。

碱性土壤对杨梅生长结果的影响

试验以晚稻杨梅品种为材料,以山地酸性土壤种植的植株为对照,首次于浙江定海pH>8.1的碱性土壤中进行杨梅的栽培研究。结果表明:与对照相比,碱性土壤种植的杨梅植株明显矮化,4年生树高度降低37.9%,春梢长度缩短47.6%,南北向和东西向树冠直径分别缩小45.4%和42.0%,春梢粗度和树干基部直径分别缩小26.5%和38.9%,叶片长度和宽度分别减少13.5%和26.1%,均达极显著差异。碱性土壤种植的杨梅始果期提早,栽后第3年普遍开始结果,第4年结果树率达80%以上,单株产量3.6 kg,而对照第4年结果树率仅为4.5%,几乎没有产量。碱性土壤种植后果实品质发生明显变化,4年生树龄果实总糖度为15.52%,总酸度为0.83%,比对照分别增加33.4%和10.6%,果实P2O5,K2O,Ca分别比对照增加29.41%,4.80%和24.3%,但碱性土壤杨梅果实和果核重量分别比对照减轻24.3%和20.6%,均达极显著差异。初步研究表明碱性土壤可以种植杨梅,且树体矮化、提早结果,果实品质生理指标有显著提高。

杨梅叶片矿质营养及对土壤重金属的富集效应

以8年生的杨梅叶片为试材,采用微波消解法处理样品,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定杨梅叶片矿质营养及土壤元素含量,探讨杨梅适宜营养指标,为杨梅合理施肥提供科学依据。结果表明,N、Ca和K元素是杨梅叶片中的主要营养元素,含量均高于7.048 g·kg-1;杨梅叶片中B的含量(35.82 mg·kg-1)显著高于土壤中B的含量(18.4 mg·kg-1),为满足杨梅对B的需求,栽培过程中需补充B肥;杨梅叶片中含有丰富的Fe、Mn和Zn等微量元素,B含量与Fe含量呈显著正相关,Mn含量与Fe、Zn含量均呈负相关。杨梅对土壤中Zn、Cu、Cr和Ni等重金属元素有一定的富集效应。

杨梅红色素的提取工艺研究

以新鲜杨梅为原料,以红色素的吸光度值为评价提取率的指标,在单因素实验的基础上,选用L9(34)进行正交实验,考察盐酸含量(%)、浸取温度、浸取时间、浸取物料比四因素对杨梅红色素提取工艺的影响。结果表明,杨梅红色素的较佳提取工艺条件为:盐酸浓度为0.30%,浸取温度为60℃,浸取时间为40min,浸取物料比为1:10。在此工艺条件下,杨梅红色素得率为13.7%。

HPLC法测定杨梅叶中杨梅苷的含量

目的:建立HPLC法测定杨梅叶中杨梅苷含量的方法。方法:采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长358 nm,柱温30℃。结果:杨梅苷在0.088-0.880 mg/mL内与峰面积呈良好线性关系,A=36113C-401.56,r=0.9994;平均回收率为102.4%,RSD=1.9%(n=9)。测得杨梅叶中杨梅苷含量为1.43%。结论:该测定方法准确,可靠,对于杨梅的进一步开发利用具有重要的参考意义。

杨梅树皮中二芳基庚烷类化学成分研究

目的研究湖南产杨梅Myrica rubra(Lour.)Sieb.etZucc.树皮中二芳基庚烷类化学成分。方法采用硅胶柱层析进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果分离并鉴定了5个二芳基庚烷类化合物,分别为:myricanol(1)、11-O-methoxymyricanol(2)、5-deoxymyricanone(3)、myricanone(4)和12-hydroxymyricanone(5)。结论化合物2、5为首次从该植物中分离得到。

杨梅果实黄酮类成分研究

目的:研究杨梅果实的化学成分。方法:采用正反相硅胶、凝胶、微孔树脂柱色谱、薄层色谱等手段分离,波谱法进行结构鉴定。结果:从杨梅果实中分离得到10个黄酮化合物:槲皮素(1)、槲皮苷(2)、异槲皮苷(3)、金丝桃苷(4)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄醛酸(5)、篇蓄苷(6)、杨梅素(7)、杨梅素-3'-O-β-D-吡喃木糖(8)、杨梅素-7-O-β-D-半乳糖(9)、杨梅苷(10)。结论:化合物4～6,8和9为在此植物中首次分离得到。

杨梅的保健功能及其作为食品资源的潜力

杨梅是一种具有较高的食用和药用价值的植物果实，其风味独特，营养丰富，含有多种对人体有益的活性物质，具有抗氧化、抗肿瘤等保健作用，是一种极具潜力的食品资源。文章对杨梅的营养保健、生物学特性、化学成分及其开发利用的研究进展进行了介绍，以推动开发利用我国丰富的杨梅资源。

HPLC法同时测定杨梅叶中杨梅素等3种黄酮类化合物的含量

目的建立同时测定杨梅叶中杨梅素、槲皮素和山奈酚3种黄酮类化合物含量的反相高效液相色谱方法。方法采用Thermo Scientific ODS-2 Hypersil色谱柱（200mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈-体积分数0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.7mL·min^-1;检测波长为360 nm。结果杨梅素、槲皮素和山奈酚的线性范围分别为15.0-150.0mg·L^-1、1.50-15.0mg·L^-1和1.0-10.0mg·L^-1,r≥0.999 4;平均加样回收率分别为100.2%、94.9%和104.2%,RSD分别为1.3%、1.0%和1.7%（n=6）。应用该法测定了3批杨梅叶中3种黄酮类化合物的含量。结论该方法准确、可靠、重复性好,为杨梅叶中黄酮类活性成分的开发利用提供参考。

微波消解-等离子体原子发射光谱法测定杨梅中的微量元素

采用微波消解-电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定杨梅中Fe、Mg、Ba、Cu、Al、Zn、Mn、Co8种微量元素,对样品的前处理条件进行了探讨,通过加标回收实验,验证了分析数据的可靠性,在最佳测定条件下,方法检出限为0.0005—0.0100g/mL,相对标准偏差≤2.8%,加标回收率为95.7%—105.1%。方法快速、简便、准确,适合常规分析。

荸荠杨梅“癌肿病”发生的原因及防治办法

针对雷山县2005年以来荸荠杨梅大面积发病的情况进行调查,根据发病的规律及症状,确诊为杨梅癌肿病,并采用相应的防治对策,疫情得到有效控制。

杨梅红色素提取工艺中波长的确定

研究了在杨梅红色素提取过程中不同溶剂和不同酸度溶剂对最大吸收波长的影响。结果表明:以水、乙醇为溶剂提取杨梅红色素时,酸度不会引起最大吸收波长的改变。但以水或乙醇为溶剂提取杨梅红色素,最大吸收波长不同。以盐酸和乙醇的混合溶剂作提取剂时,最大吸收波长随乙醇在溶剂中所占的体积分数不同而改变。增大乙醇在溶剂中的体积分数,波长红移。以盐酸和95%乙醇按1∶1的体积比作溶剂,杨梅红色素的最大吸收波长在526nm。研究杨梅红色素的提取工艺时,应考虑不同溶剂、酸度对最大吸收波长的影响。