多叶棘豆种子休眠原因及破除休眠方法的研究

本研究以多叶棘豆种子为材料,通过观察种子形态特征,研究种子生活力、种子吸水率、种子破除硬实、种子萌发等指标,分析多叶棘豆种子休眠的原因。用不同的方式处理种子,探索种子休眠的解除方法。结果表明,多叶棘豆种子生活力达77.80%,但不处理种皮的完整种子发芽率极低。用砂纸打磨能破除种子硬实,硬实率降低至7%,发芽率为86%。砂纸破除种子硬实后,50 mg/L IBA对种子发芽的促进作用表现最为明显,发芽率高达97%,平均发芽天数短于对照。综合比较,先用砂纸打磨种皮,再用50 mg/L的IBA溶液处理后多叶棘豆种子的发芽效果最好。

多叶棘豆的叶绿体全基因组

多叶棘豆(Oxytropis myriophylla)隶属豆科蝶形花亚科棘豆属,全草可入药,为中等饲用植物。利用Illumina双末端测序平台,对多叶棘豆基因组进行高通量测序,通过组装和注释获得多叶棘豆的叶绿体全基因组信息。结果表明:多叶棘豆的叶绿体基因组总长度为122252 bp,总GC含量为34.2%,缺失一个IR区域;多叶棘豆叶绿体基因组共编码110个基因,包括76个蛋白质编码基因,30个tRNA基因,4个rRNA基因,其中15个基因含有一个内含子,ycf3基因含有两个内含子。系统发育分析表明棘豆属为单系类群,棘豆属和Coluteoid分支聚为一支并与黄芪属构成姐妹类群。

不同地区、采收期及部位多叶棘豆中槲皮素与山奈素含量研究

该研究以测定内蒙古不同地区、采收期及部位多叶棘豆中槲皮素与山奈素的含量为目标。采用高效液相色谱法(HPLC)作为研究方法,并对其科学性进行评估。研究结果显示,内蒙古不同地区的多叶棘豆药材中槲皮素含量介于0.19~0.65 mg/g之间,山奈素含量则在0.04~0.14 mg/g之间。不同采收期中,花期的山奈素含量高于果期,而果期的槲皮素含量高于花期。不同部位中叶子的2种成分含量最高。该研究所建立的槲皮素和山奈素含量测定方法具有操作简便、准确度高、重复性和稳定性优良等特点,适用于多叶棘豆药材中槲皮素和山奈素的含量测定。

蒙药材多叶棘豆不同采收期的槲皮素含量动态变化研究

目的:检测不同采收期的人工种植的多叶棘豆中有效成分的含量,确定最佳采收期。方法:采用高效液相色谱法测定多叶棘豆质量标准物质槲皮素的含量。色谱柱为syncronis-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%的磷酸溶液(50∶50);流速为1.0 mL/mim;检测波长为370 nm;柱温为25℃。结果:槲皮素在30.156μg~904.684μg范围内具有良好的线性关系(R^(2)=1),含量动态变化区间3.34 mg/g~5.80 mg/g,槲皮素含量随时间变化趋势有一定规律,在6月初到6月中旬采收的含量相对较高,6月中旬至9月初槲皮素含量逐渐下降。结论:6~9月采收的多叶棘豆槲皮素含量高于标准规定的1.00 mg/g,尤其是6月中旬采收的含量达到了5.80 mg/g,质量最佳,符合蒙医药古籍文献中记载的6月中旬夏季和8月中旬秋季为采收最佳时间,为生产加工优质多叶棘豆原材料提供科学依据。

多叶棘豆体外抗菌作用部位的筛选研究

目的对比研究多叶棘豆不同提取物对临床常见6种致病菌体外抗菌作用,筛选抗菌活性部位,初步判断药效物质种类。方法以多叶棘豆不同溶剂(石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇)提取物为试验药物,采用微孔板二倍稀释TTC法和琼脂平板稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),液体转染法测定最小杀菌浓度(MBC)。采用分光光度法测定总黄酮含量。结果多叶棘豆5种提取物均有体外抗菌作用,其中乙酸乙酯提取物抗菌作用最强,对最敏感菌(金黄色葡萄球菌)的MIC和MBC分别为0.02 mg/m L和1.25 mg/m L;其次为正丁醇提取物和石油醚提取物;剩余物的作用最弱。各提取物的总黄酮含量大小与抗菌活性强弱顺序一致,即乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>石油醚提取物>二氯甲烷提取物>剩余物。结论多叶棘豆体外抗菌作用与黄酮类成分密切相关。

蒙药多叶棘豆中的黄酮类化学成分

为了进一步研究多叶棘豆的化学成分,本文采用正相硅胶柱、Sephadex LH-20柱色谱法及制备高效液相色谱法,从蒙药多叶棘豆中分离纯化10个黄酮类化合物。经各种波谱分析法鉴定其结构分别为：4,4＇-二甲氧基-2＇-羟基查尔酮（1）、2＇,4＇-二羟基-4-甲氧基查尔酮（2）、7,8-二羟基二氢黄酮（3）、4,2＇,4＇-三羟基查尔酮（4）、2＇,4＇-二羟基二氢查尔酮（5）、4＇-羟基二氢黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（6）、2＇,4＇-二羟基查尔酮（7）、芹菜素（8）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（9）和3＇,7-二羟基-2＇,4＇-二甲氧基异黄烷（10）。其中,化合物1~9均为首次从该植物中分离。

多叶棘豆组织培养及快速繁殖研究

目的:由于多叶棘豆的种子为短寿型,本文通过组织培养来确定多叶棘豆快速繁殖的人工繁殖方法。方法:将种子接种于诱导培养基上,待其长成小苗后用不定芽作为外植体,在MS培养基上添加不同种类及不同浓度的激素,对多叶棘豆进行丛生芽诱导及根的培养。结果:丛生芽诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;生根壮苗的适宜培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L。结论:采用组织培养方式可进行多叶棘豆的快速繁殖。

野生多叶棘豆中芦丁的动态积累规律

目的:为确定野生多叶棘豆的最佳采收期提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法对不同采收期野生多叶棘豆中芦丁含量进行测定,考察其指标成分芦丁的含量变化趋势。结果:多叶棘豆中芦丁的动态积累有一定规律。在7月末8月初以前其芦丁含量有上升趋势,8月初以后其芦丁含量逐渐下降。结论:为保证药材的质量,根据多叶棘豆中有效成分的动态积累规律,有必要在其最佳采收期采集药材。

蒙药材多叶棘豆中五种微量元素的形态分析(英文)

本文采用水煎法对蒙药材多叶棘豆中微量元素进行提取,并分别用微孔滤膜分离技术、大孔吸附树脂柱分离法、萃取法等分离方法对水煎液中元素各形态进行分离。利用FAAS法测定了原药材以及水煎液各形态中Cu、Zn、Mn、Fe和Ca五种微量元素含量并进行了形态分析。分析结果表明,水煎液中五种元素的总提取率在41.7%～87.0%,残留率在9.1%～26.4%,可溶态百分率在16.6%～80.0%,可溶态中五种元素的有机态与无机态的比例为36.9%～250%;该测定方法对各元素的加标回收率在90.3%～113.7%。多叶棘豆水煎液可溶态中Zn、Mn、Fe、Ca元素是以亲水性有机结合形态为主,Cu元素以无机离子型为主,多种形态共存的复杂体系。

分光光度法测定蒙药材多叶棘豆中槲皮素的含量

采用回流和超声两种方法对蒙药材多叶棘豆中槲皮素进行提取,并用催化动力学光度法测定槲皮素的含量,检测波长517 nm,回归方程为:Y=0.1652+548.0392X(mg/L)r=0.99992,槲皮素浓度在0.00～0.05mg/L范围内与吸光度呈线性关系.回流法和超声法测得槲皮素含量分别为0.1372 mg/g和0.1994 mg/g,平均回收率分别为96.63%和100.42%,相对标准偏差分别为1.73%和6.39%.实验结果表明,超声提取法较回流提取法提取率高.

两种蒙药用棘豆属植物的化学成分分析

目的:采用系统预试法对两种蒙药用棘豆属植物进行研究,探究二者间的成分差异。方法:通过化学反应鉴别的方法,多种指示剂和显色剂的颜色反应或沉淀反应,对两种植物的水提取液、石油醚提取液、乙醇提取液和酸性乙醇提取液进行检测,对其化学成分进行探究。结果:两种蒙药用棘豆属植物均含有氨基酸、多肽、蛋白质、多糖、苷类、有机酸、酚类、鞣质类、甾体、三萜类、黄酮类、内酯类、油脂类等化学成分;毛泡棘豆中还含有强心苷类、蒽醌类和生物碱类等成分。结论:通过系统化学成分预试,确定了两种蒙药用植物化学成分类别,为后续质量标准的制定和活性成分的研究提供了理论依据。

HPLC法测定多叶棘豆中槲皮素的含量

目的：探索建立测定多叶棘豆中槲皮素含量的方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法。应用VP—ODS（150L×4．6mm，5μm）色谱柱；以甲醇-0．1％磷酸水溶液（60：40）为流动相；流速为1．0ml·min^-1；检测波长为365nm；柱温为30℃。结果：槲皮素在0．048pg-0．144pg范围内，与峰面积具有良好的线性关系，r=0．9997；平均回收率为98．59％、RSD为4．31％（n=6）。结论：该方法简便、快捷、准确、重复性好，可用于多叶棘豆中槲皮素的含量测定。

呼伦贝尔草甸草原豆科植物非结构性碳水化合物含量动态

非结构性碳水化合物(non-structural carbohydrates, NSC)对植物代谢、返青和再生等生命活动具有重要作用,其在植物体内的动态变化,可指导草地放牧、刈割及退化草地修复等草地管理实践。本研究于2015年7月–2016年9月以内蒙古呼伦贝尔草甸草原5种豆科植物[扁蓿豆(Mellissitus ruthenica)、斜茎黄芪(Astragalus adsurgens)、多叶棘豆(Oxytropis myriophylla)、山野豌豆(Vicia amoena)和狭叶野豌豆(V.sepium)]为研究对象,测定植物地上部、茎基部和根部的非结构性碳水化合物可溶性糖和还原糖含量,探讨年度、季节和物种对植物碳水化物合物的影响。结果显示,不同物种在不同年度间贮藏可溶性糖和还原糖含量差异较大,极度干旱条件下植物根部可溶性糖含量显著降低(P<0.05)。2016年4–9月,山野豌豆地上部可溶性糖和还原糖含量分别为1.01%～7.04%和0.54%～6.73%,高于其他植物;狭叶野豌豆茎基部可溶性糖和还原糖含量大于其他植物,分别为1.12%～10.06%和0.52%～2.69%;多叶棘豆根部可溶性糖含量和狭叶野豌豆根部还原糖含量高于其他植物,分别为1.68%～7.62%和0.46%～2.98%。植物增加根部的贮藏碳水化合物,可提高耐牧性,呼伦贝尔草甸草原放牧期应在6月底至9月初,干旱年份利用草地时,应采取降低载畜率、延迟放牧及提前休牧等管理措施,8月收获干草有利于草地的可持续利用。

多叶棘豆提取总黄酮的微型实验

采用微型实验方法从多叶棘豆中提取总黄酮,用分光光度法测定含量,总黄酮含量为1.912%、回收率为100.1%.通过微型法与常规法比较,微型实验具有试剂用量少,时间短,效率高等优点,是一种值得推广的实验方法.

赤霉素和生长素浸种对多叶棘豆种子萌发的影响

为了探明多叶棘豆种子在植物激素处理下的萌发特性,采用不同浓度赤霉素(GA 3)和生长素(IAA)溶液,以及不同浸种时间处理多叶棘豆种子,并对其发芽率、发芽势、发芽指数和胚根长指标进行测定并分析。结果表明,多叶棘豆种子的发芽率、发芽势、发芽指数和胚根长随着GA 3和IAA浓度的增加,呈先上升后下降的趋势,GA 3最适浓度400 mg·L^-1浸种7 h,种子发芽率为24.67%;IAA最适浓度10 mg·L^-1浸种21 h,种子发芽率为13.33%,较对照增加了近4倍。本研究可为多叶棘豆种子萌发提供新的方法。

紫外分光光度法测定蒙药材多叶棘豆中总黄酮含量

目的:建立蒙药材多叶棘豆中总黄酮含量的测定方法。方法:采用紫外分光光度法对多叶棘豆中总黄酮含量进行测定,并对其方法学进行考察。结果:对照品芦丁在0.01~0.08mg/mL范围内具有良好的线性关系(r=0.9995),平均加样回收率为94.66%(RSD=2.46%),多叶棘豆总黄酮平均含量为0.3328mg/g。结论:建立了蒙药材多叶棘豆中总黄酮含量的测定方法,所建立的方法简便、可靠、重复性好,可用于多叶棘豆药材的质量控制。

多叶棘豆化学成分的研究

目的研究多叶棘豆Oxytropis myriophylla(Pall)DC.的化学成分。方法多叶棘豆乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH⁃20、HP⁃20型大孔吸附树脂、MCI等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到15个化合物,分别鉴定为槲皮素⁃7⁃O⁃α⁃鼠李糖⁃3⁃O⁃(6″⁃反式咖啡酰)⁃β⁃D⁃吡喃葡萄糖基⁃(1→2)⁃β⁃吡喃葡萄糖苷(1)、brainoside B(2)、蒙花苷(3)、香叶木苷(4)、山柰酚⁃7⁃O⁃α⁃L⁃吡喃鼠李糖苷(5)、檞皮素⁃7⁃O⁃α⁃L⁃吡喃鼠李糖苷(6)、山柰酚(7)、槲皮素(8)、blumenol C glucoside(9)、D⁃3⁃O⁃甲基肌醇(10)、水杨酸(11)、原儿茶酸(12)、没食子酸(13)、β⁃谷甾醇(14)、胡萝卜苷(15)。结论化合物1~2、4~6、9~13为首次从该植物中分离得到。

基于网络药理学的多叶棘豆总黄酮抗炎作用机制研究

目的:通过网络药理学探讨多叶棘豆总黄酮抗炎作用机制。方法:通过Pub Chem及Swiss Target Prediction数据库对蒙药多叶棘豆中24个黄酮类成分的潜在靶点进行预测,利用Gene Cards数据库检索炎症相关靶点,将以上两个靶点结果取交集,利用String数据库构建PPI网络,在DAVID平台进行GO功能富集和KEGG通路富集分析,利用Cytoscape软件构建化学成分-靶点-疾病网络图。结果:多叶棘豆24个黄酮类成分共得到350个靶点,与炎症有关的靶点取交集后共得到18个共有靶点,GO分析共得到59个条目,KEGG分析得到9条信号通路,化学成分-靶点-疾病网络显示多叶棘豆总黄酮抗炎核心成分有5种,包括5,4’-dihydroxy-7,3’-dimethoxyflavone、5,7-dihydroxy-6,4’-dimethoxyflavone、apigenin、luteolin、kaempferol等;核心靶点有5个,包括ABCB1、PTGS2、ALOX5、SYK、NOS2等。结论:网络药理学直观地反映了多叶棘豆总黄酮可能通过多成分、多靶点和多通路来治疗炎症性疾病,为深入研究多叶棘豆总黄酮抗炎作用机制提供了科学依据。

不同产地蒙药材多叶棘豆总黄酮的含量测定

目的:测定产自内蒙古地区的16批多叶棘豆蒙药材中总黄酮的含量。方法:建立了以芦丁为对照品,三氯化铝显色后测定吸光度,计算总黄酮含量的方法。采用单因素实验优选提取条件。结果:取药材粉末0.5 g,以25 mL 50%甲醇溶液作为提取溶剂,超声提取30 min为多叶棘豆最佳提取条件。在此条件下,测得16批多叶棘豆总黄酮的含量为8.60~36.01 mg/g。结论:本实验所建立的方法稳定可靠,可为多叶棘豆的后续研究奠定良好的基础。

不同育苗容器对蒙药多叶棘豆幼苗生长的影响

通过对比不同容器规格条件下一年生多叶棘豆幼苗生长及根系发育状况,选出适宜的容器规格,为蒙药材多叶棘豆幼苗保苗率和移栽成活提供科学依据。以蒙药多叶棘豆种子为对象,配置好的育苗土装进3种不同规格聚乙烯塑料容器,将多叶棘豆种子进行播种,播种后40 d开始随机取样,分别测量其幼苗生长的形态指标,探明不同育苗容器下多叶棘豆幼苗生长及根系发育差异,并筛选最佳的容器规格。不同容器对多叶棘豆株高、叶片数、主茎粗(地径)、主根粗、主根长、侧根长和侧根数7个生长指标的影响均有显著差异,大容器对幼苗生长具有促进效应,并且有利于多叶棘豆幼苗根系发育生长。不同育苗容器对多叶棘豆幼苗生长及根系发育均有显著差异,最佳的育苗容器为6 cm×12 cm聚乙烯塑料容器,有底,底部打孔育苗盘。