亚麻籽(油)n-3型脂肪酸功能及在畜禽饲料中的应用

本文简要介绍了亚麻纤维用、油用、油纤两用及景观用的功能以及亚麻抗旱、耐瘠、适应性强的特性;阐明了亚麻在世界和中国分布情况,并以中国2017年统计数据为证,说明了中国油用亚麻和纤用亚麻详实播种面积及年产量情况;综述了亚麻纤维的工业用途及亚麻籽(油)油用、药用外,亚麻副产物亚麻籽饼粕的饲用价值;重点论述了亚麻籽(油)n-3型脂肪酸的作用机理及对人类的保健功能(亚麻籽(油)富含α-亚麻酸)、抗营养因子和人类适宜摄入量,并对亚麻籽(油)作为优质蛋白质饲料及n-3脂肪酸功能在国内外畜禽饲料中的应用研究进行了详细阐述,旨在为进一步开发亚麻籽(油)饲料资源、提高畜产品营养及产品附加值从而补充人类n-3型脂肪酸的需要提供一定的理论参考。

N-3型脂肪酸在母猪日粮中的应用

近年来,omega-3型脂肪酸在人类和宠物营养中受到了相当大的重视,给婴儿提供omega-3型脂肪酸有助于促进其大脑的发育。宠物食品中含有大量的omega-3型脂肪酸和omega-6型脂肪酸,它们和其它有关物质一道有助于维持宠物体内有一个健康的免疫系统。

人体的必要脂肪酸n－3型多烯脂肪酸（n－3PuFAs）

最近２０多年的大理流行病学。临床及实验性研究证明，ｎ－３型多烯脂肪酸是人体必需的脂肪酸。ｎ－３型多烯酸（ｎ－３ＰｕＦＡｓ），特别是二十碳五烯酸（ＥＰＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）不仅用于心血管疾病的防治，也涉及了炎症、神经系统、免疫性病症和恶性肿瘤的控制。对ｎ－３型Ｐｕ－ＦＡｓ的进一步研究和开发，是必要的。

食物中n—3型脂肪酸的结构与功能

目的：讨论n-3型脂肪酸的结构与功能,旨在为护理人员的饮食护理提供营养学的理论基本知识。方法：对爱斯基摩人长期食用的冷水性鱼肉中富含的n-3型脂肪酸进行结构分析,并探讨其保健功能。结果：n-3型脂肪酸为不饱和脂肪酸,在植物体内由亚油酸转化而成,机体不能自行合成。其中,EPA（20∶5n-3）和DPA（22∶6n-3）为冷水性鱼肉及含α-亚麻酸的植物油中所富有。前者是合成Ⅲ类前列素（PGH3）的母体,具有强烈抗凝血与降血压功能,以及破坏n-6型脂肪酸对胰岛的抑制作用。因此,其对心脑血管及糖尿病患者具有保健作用。结论：n-3型脂肪酸是人体必需脂肪酸。为减少人群中目前多发的心脑血管疾病,应在膳食中增加人们缺乏的n-3型脂肪酸,即富含α-亚麻酸的天然植物油（亚麻油、豆油、菜籽油）的供给量。

3-O-C_(12)-HSL通过抑制lncRNA CD48-AS和CD48的表达而阻碍Mo-DCs成熟

目的筛选并阐明长链非编码RNA(lncRNA)CD48-AS与其反义互补分子CD48 m RNA在N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)阻碍人单核细胞诱导的树突状细胞(Mo-DCs)成熟过程中发挥作用的机制。方法从健康人外周血中分离Mo-DCs,将未成熟的Mo-DCs细胞分为阴性对照组(0.1%DMSO)、脂多糖(LPS)阳性对照组(100μg/L的LPS)和实验组(100μg/L LPS+40μmol/L 3-O-C_(12)-HSL)进行lncRNA芯片检测。筛选lncRNA表达谱中差异表达5倍以上的自然反义lncRNA进行聚类分析,从中筛选差异具有统计学意义的自然反义lncRNA CD48-AS。未成熟的Mo-DCs分为阴性对照组、LPS阳性对照组以及LPS+C5、C10、C25实验组(分别加入5、10、25μmol/L的3-O-C_(12)-HSL)。利用荧光定量PCR检测lncRNA CD48-AS和反义分子CD48 mRNA在实验体系中的表达水平;通过生物信息学分析lncRNA CD48-AS与CD48反义互补区及其蛋白编码功能;通过核糖核酸酶保护实验(RPA)验证lncRNA CD48-AS是否与CD48形成二聚体,从而通过影响靶CD48的表达来发挥调控作用。最后检测lncRNA CD48-AS在细胞内的定位。结果 3-O-C_(12)-HSL处理Mo-DCs后lncRNA表达谱出现了特异性改变。3-O-C_(12)-HSL可下调由LPS诱导的Mo-DCs中lncRNA CD48-AS及其反义靶分子CD48的表达。生物信息学分析lncRNA CD48-AS不具备蛋白编码功能,为非编码RNA;lncRNA CD48-AS与CD48形成RNA二聚体从而减少RNA酶对CD48 mRNA的降解,使得CD48 mRNA表达增加;lncRNA CD48-AS在Mo-DCs中主要定位在细胞核中,细胞质中表达量较少。结论 3-O-C_(12)-HSL可通过下调lncRNA CD48-AS,进而影响CD48的表达来阻碍Mo-DCs的成熟。

miR-155在3-oxo-C12-HSL阻碍人单核细胞源性树突状细胞成熟过程中的表达变化

目的探讨miR-155在N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-oxo-C12-HSL)阻碍人单核细胞源性树突状细胞(Mo-DCs)成熟过程中的表达变化。方法分离正常人外周血CD14+单核细胞,经重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人IL-4诱导分化为Mo-DCs。将不成熟Mo-DCs分为阴性对照组、模型组、实验组1、实验组2,阴性对照组加入同体积PBS,模型组加入终浓度为1μg/m L的LPS,实验组1和实验组2分别加入终浓度为1μg/m L的LPS后分别加入终浓度为50μmol/L和100μmol/L的3-oxo-C12-HSL,处理48 h。采用流式细胞术检测各组Mo-DCs表型(CD80、CD40、CD11c和HLA-DR),酶联免疫吸附法检测细胞培养上清细胞因子(IL-12、IL-10)水平,荧光定量PCR检测miR-155表达。结果与阴性对照组相比,模型组CD80、CD40、HLA-DR表达高,IL-10水平低,IL-12水平高,miR-155表达高(P均<0.05)。实验组1、实验组2与模型组相比,实验组2与实验组1相比,CD80、CD40、HLA-DR表达低,IL-10水平高,IL-12水平低,miR-155表达低(P均<0.05)。结论 miR-155在3-oxo-C12-HSL阻碍人Mo-DCs成熟过程中表达降低,3-oxo-C12-HSL可能通过降低miR-155表达阻碍Mo-DCs成熟。

南极磷虾油的营养特性及其改善骨质疏松症的研究进展

南极磷虾油(AKO)是一种新型的海洋功能性油脂。为了促进AKO的临床应用,在综述AKO营养组成的基础上,对AKO改善骨质疏松症的作用机制进行了阐述,并对未来的重点工作进行了展望。AKO富含磷脂、n-3型多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)、虾青素、α-生育酚等多种活性因子。AKO改善骨质疏松症的作用机制有3种,即抑制破骨细胞产生、促进骨细胞形成和调控骨髓间充质干细胞。在AKO未来的深入研究中,应聚焦于大规模临床研究、标准剂量和长期效果验证等方面。

3-O-C_(12)-HSL阻碍Mo-DCs成熟过程中lncRNA表达谱的变化

目的:观察铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerltginosa,PA)分泌的信号分子N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(N-3-oxododecanoy1-L-homoserine lactone,3-O-C12-HSL)阻碍单核细胞来源的树突细胞(monocytes derived-dendritic cells,Mo-DCs)成熟过程中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)表达谱的变化情况。方法:采用免疫磁珠法分选人外周血CD14+单核细胞,经重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导分化为Mo-DCs。不同因素处理Mo-DCs,实验组加入终浓度0.1μg/m L的LPS和终浓度为40μmol/L的3-O-C12-HSL,对照组加入相应体积的含0.1%DMSO的PBS,模型组加入终浓度0.1μg/m L的LPS。利用lnc RNA芯片技术检测对照组、模型组和实验组间lnc RNA表达谱的差异。对筛选数据进行分析处理,利用散点图分析2倍以上差异lnc RNA在各处理因素间的总体变异情况,利用聚类分析研究表达差异5倍以上lnc RNA的聚类情况。结果:与对照组和模型组相比较,实验组筛选出2倍以上表达差异的lnc RNA为1 386条,其中上调表达的548条,下调表达的838条。筛选出具有5倍以上表达差异的lnc RNA共153条,占2倍表达差异lnc RNA的11.04%,其中上调表达的22条,下调表达的131条。散点图发现2倍表达差异的lnc RNA总体分布呈集中趋势,存在特征性改变。聚类分析发现5倍表达差异的lnc RNA能根据处理因素进行有效的分层聚类。结合GO分析和m RNA通路分析,差异lnc RNA的相关基因可富集至PPAR信号通路、钙信号通路和NF-κB信号通路中。结论:3-O-C12-HSL作用于Mo-DCs后,lnc RNA表达谱发生了特征性变化,表达差异的lnc RNA可能参与了3-O-C12-HSL阻碍Mo-DCs成熟过程。

3-O-C12-HSL通过PPARγ拮抗树突状细胞表达RP11-367F23.2

目的 研究N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C 12 -HSL)是否抑制单核细胞来源树突状细胞(Mo-DCs)表达RP11-367F23.2,该抑制作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法 采用密度梯度离心法分离单核细胞来源的Mo-DCs;将Mo-DCs细胞分为4组:脂多糖(LPS)组、3-O-C 12 -HSL组、GW9662组和PBS组,18 h后收集细胞;荧光定量PCR检测4组中RP11-367F23.2表达情况。结果 Mo- DCs经3-O-C 12 -HSL刺激后,RP11-367F23.2表达量降低,3-O-C 12 -HSL组和LPS组RP11-367F23.2表达量比较,差异有统计学意义( P <0.05);Mo-DCs经GW9662处理后,细胞中的RP11-367F23.2表达量升高,3-O-C 12 -HSL组和GW9662组RP11-367F23.2表达量比较,差异有统计学意义( P <0.05)。结论 3-O-C 12 -HSL通过PPARγ拮抗Mo-DCs表达RP11-367F23.2。

3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ介导Mo-DCs表面CD1d的表达

目的研究N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)是否促进人单核细胞衍生树突状细胞(Mo-DCs)表达CD1d,该作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法取健康人外周血80 m L,密度梯度离心法获得单个核细胞,免疫磁珠法分选CD14+单核细胞,重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导5 d,使其分化为Mo-DCs。将Mo-DCs细胞分为4组,阳性对照组加入终浓度为0.1μg/m L的脂多糖(LPS);阴性对照组加入相应体积的含0.1%DMSO的PBS;3-O-C_(12)-HSL实验组分3个浓度水平,在加入LPS的基础上分别加入终浓度为10、20和40μmol/L的3-O-C_(12)-HSL;GW9662实验组为GW9662预处理1 h后分别加入LPS和浓度为10、20、40μmol/L的3-O-C_(12)-HSL。流式细胞术检测Mo-DCs表面CD1d的表达量;使用PPARγ的抑制剂GW9662处理Mo-DCs后,再经LPS和(或)3-O-C_(12)-HSL刺激,流式细胞术检测Mo-DCs表面CD1d的表达量。结果 Mo-DCs经3-O-C_(12)-HSL刺激后,表面分子CD1d表达水平增加,与阴性对照组及阳性对照组差异有统计学意义(P<0.05);Mo-DCs经GW9662处理1 h后,再加入3-O-C_(12)-HSL,Mo-DCs表面CD1d表达量明显降低(P<0.05)。结论 3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ促进Mo-DCs表面CD1d的表达。

3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ介导Mo-DCs表达CD40

目的研究铜绿假单胞菌信号分子N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)是否促进人单核细胞衍生树突细胞(Mo-DCs)表达CD40,该作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法取健康人外周血,密度梯度离心法获得单个核细胞,免疫磁珠法分选CD14^+单核细胞,经重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4(IL-4)诱导,使其分化为Mo-DCs,MoDCs经脂多糖(LPS)和(或)3-O-C_(12)-HSL刺激后,流式细胞术检测Mo-DCs表面CD40的表达量。使用PPARγ的抑制剂GW9662处理Mo-DCs后,再经LPS和(或)3-O-C_(12)-HSL刺激,流式细胞术检测MoDCs表面CD40的表达量。结果 Mo-DCs经3-O-C_(12)-HSL刺激后,表面分子CD40表达水平降低,与PBS组及LPS组差异有统计学意义(P<0.05);Mo-DCs经GW9662处理后,再加入3-O-C_(12)-HSL,MoDCs表面CD40表达量明显增加(P<0.05)。结论 3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ降低Mo-DCs表面CD40表达。

铜绿假单胞菌信号分子3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD的结合特性研究

目的制备纯化的人过氧化物酶体增殖物激活受体-配体结合域(PPARγ-LBD)肽段并观察铜绿假单胞菌信号分子N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)与PPARγ-LBD的结合强度。方法采用分子对接的方式预测3-O-C_(12)-HSL与PPARγ的结合位点。合成PPARγ-LBD基因序列并插入pET28b质粒,鉴定后通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组肽段,进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析。表面等离子体共振技术检测3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD的结合动力学参数。结果分子对接结果显示3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD区的Tyr473和Tyr327形成氢键,3-O-C_(12)-HSL末端柔性碳链与PPARγ-LBD区的Met329、Leu330等残基形成疏水结合。制备获得人PPARγ-LBD肽段,经SDS-PAGE及Western blot检测在25~35 ku有一条蛋白的印迹,与PPARγ-LBD分子质量一致。3-O-C_(12)-HSL与PPARγ结合的亲和力常数为1.65×10^(-4) mol/L,结合速率常数为1.06×10^(2)/ms,解离速率常数为1.75×10^(-2)/s。结论3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD功能区结合能力强于PPARγ特异性拮抗剂GW9662,为制备针对3-O-C_(12)-HSL的特异性靶向药物提供了实验依据。

血清LncRNA-ENST00000420480在铜绿假单胞菌感染中诊断价值

目的探讨长链非编码RNAENST00000420480作为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)感染诊断标志物的临床价值。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,免疫磁珠分选人CD14+单核细胞、hIL?4和hGM?CSF诱导分化为单核细胞衍生树突细胞(monocytes derived dendritic cells,Mo?DCs),分PBS组、LPS组和LPS+3?O?C12?HSL组。实时荧光定量PCR检测lncRNA?ENST00000420480表达量。收集临床PA感染患者血清21例,体检表观健康人血清32例,提取血清RNA,逆转录获得cDNA,荧光定量PCR检测lncRNA?ENST00000420480表达量,受试者工作特征曲线评价血清中lncRNA?ENST00000420480对PA感染的诊断效能,计算约登指数(YI)明确PA感染诊断截点(cut?off)。结果与PBS组相比,LPS下调Mo?DCs中lncRNA?ENST00000420480表达水平。与LPS组相比,3?O?C12?HSL上调Mo?DCs中lncRNA?ENST00000420480表达水平。PA感染组血清中lncRNA?ENST00000420480相对表达量为(3.85±4.18),正常人组血清中lncRNA?ENST00000420480相对表达量为(1.30±1.06),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线中AUC为0.708(P=0.01),YI为0.429,诊断截点值为4.13。结论lncRNA?ENST00000420480可作为PA感染的血清学标志物。

3-O-C_(12)-HSL作用下Mo-DCs的circRNA表达谱与功能富集分析

目的探讨单核细胞来源树突状细胞(Mo‐DCs)在N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3‐O‐C_(12)‐HSL)作用下其环状RNA(circRNA)表达谱的影响及功能富集。方法取健康志愿者新鲜外周血,经Fi‐coll密度梯度离心及免疫磁珠分选获得CD14+单核细胞,重组人白细胞介素-4(hIL‐4)、重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM‐CSF)细胞因子诱导分化为Mo‐DCs,将细胞用0.1μg/mL脂多糖(LPS)(LPS组、阳性对照)、0.1%二甲基亚砜(DMSO)(DMSO组、阴性对照)或25μmol/L 3‐O‐C_(12)‐HSL和0.1μg/mL LPS(3‐O‐C_(12)‐HSL组)分别处理。采用Arraystar CircRNA芯片筛选三组差异表达的circRNA,并对差异表达circRNA靶基因作功能富集分析。结果circRNA微阵列分析检测到12967个circRNA在Mo‐DCs中表达,根据P<0.05和FC≥1.2的标准进行筛选,与LPS组相比,3‐O‐C_(12)‐HSL组有122个circRNA显著上调,77个显著下调;与DMSO组相比,3‐O‐C_(12)‐HSL组有64个circRNA显著上调,122个显著下调。GO和KEGG富集分析表明,差异表达的circRNA亲本基因主要富集于转化生长因子-β、趋化因子、ErbB等信号通路上,主要参与树突状细胞分化、Fcγ受体介导的吞噬作用及淋巴细胞分化调节等过程。通过ENCORI数据库预测大量miRNA与circRNA存在结合位点,并构建了ceRNA网络图。结论3‐O‐C_(12)‐HSL影响了Mo‐DCs成熟过程中circRNA的表达。

3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ抑制Mo-DCs表达IL-6

目的研究铜绿假单胞菌分泌的N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(N-3-oxododecanoyl-L-homoserine lactone,3-O-C12-HSL)是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferater-activated receptorγ,PPARγ)调节单核细胞来源的树突细胞(monocytes derived-dendritic cells,Mo-DCs)表达白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)。方法 PPARγ配体筛选实验体外检测3-O-C12-HSL是否与PPARγ结合。免疫磁珠法分选人CD14+单核细胞,人白细胞介素4(human Interleukin 4,h IL-4)及人粒单核细胞集落刺激因子(human granulocyte monocyte colony stimulating factor,h GM-CSF)诱导分化为Mo-DCs,不同浓度的3-O-C12-HSL处理Mo-DCs;PPARγ拮抗剂GW9662处理Mo-DCs后,3-O-C12-HSL处理Mo-DCs,电化学发光法检测Mo-DCs培养上清IL-6浓度。结果配体筛选实验显示3-O-C12-HSL>4.60μmol/L时可竞争性结合PPARγ配体结合区。3-O-C12-HSL下调脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Mo-DCs表达IL-6水平(P<0.05),PPARγ特异性拮抗剂GW9662能部分逆转3-O-C12-HSL介导的IL-6表达下调(P<0.05)。结论 3-O-C12-HSL可与PPARγ相结合,并通过PPARγ调节Mo-DCs分泌表达IL-6。