表达猪流行性腹泻病毒N蛋白Vero细胞系的构建及初步鉴定

【目的】构建表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的Vero细胞系,将有助于PEDV的进一步深入研究。【方法】本研究将N基因克隆到慢病毒载体中,构建重组质粒pLenti-CMV-N,利用慢病毒载体包装系统转染293T细胞,包装表达N蛋白的慢病毒颗粒,将慢病毒颗粒转导至Vero细胞,用潮霉素B初步筛选阳性细胞,采用终点稀释法,筛选表达PEDV N蛋白的Vero细胞系,最后进行鉴定。【结果】RT-PCR结果表明构建的细胞系基因组中存在N基因序列,Western blot和IFA试验验证了N蛋白在细胞系中的表达。【结论】本研究成功构建了表达PEDV N蛋白的Vero细胞系。

C_(4)F_(7)N/CO_(2)/O_(2)混合气体近区故障开断性能研究

六氟化硫(SF_(6))气体因其具有优良的绝缘与灭弧性能,现已广泛应用于电力设备中,但由于其具有强温室效应,随着全球变暖问题的日益严重,急需寻找能够替代SF_(6)的新型环保气体。其中,全氟异丁腈(C_(4)F_(7)N)具有优异的绝缘性能,有良好的工程应用前景,然而目前尚无针对C_(4)F_(7)N/CO_(2)/O_(2)混合气体断路器的近区故障开断特性研究。文中针对126 k V/3 150 A/40 k A柱式C_(4)F_(7)N混合气体断路器的近区故障开断性能进行研究,对比了断路器充入C_(4)F_(7)N/CO_(2)/O_(2)混合气体、CO_(2)/O_(2)混合气体和SF_(6)气体在不同电流过零时电流下降率(di/dt)下的近区故障开断性能。L90近区故障开断实验结果显示,在相同条件下SF_(6)气体表现出最佳的开断性能,能够在较宽的燃弧时间窗口内稳定开断实验电流。0.7 MPa的C_(4)F_(7)N/CO_(2)/O_(2)混合气体和CO_(2)/O_(2)混合气体在di/dt=12 A/μs条件下的开断表现与0.5 MPa的SF_(6)气体在di/dt=20 A/μs条件下的开断表现接近。基于实验结果提出了灭弧室结构的改进方案,并进行了实验验证文中的研究为C_(4)F_(7)N混合气体断路器的开发与设计提供了参考。

地幔上涌对鄂尔多斯西缘岩石圈的改造:来自远震多尺度层析成像的证据

本文利用喜马拉雅二期科学探测台阵的678个地震台站及26个固定台站记录到的9,641个地震共约160000条远震P波走时数据,采用基于稀疏约束的多尺度层析成像方法,获得了鄂尔多斯西缘及邻区上地幔800km深度范围内P波速度结构.结果显示,在东经104°附近阿拉善地块与鄂尔多斯盆地间存在岩石圈深度的构造边界,这表明阿拉善地块与鄂尔多斯可能分别从属于不同的大地构造单元.以北纬38°线为界,鄂尔多斯地块西缘在岩石圈范围内南北存在明显的速度差异,鄂尔多斯南部上地幔200~300km深度范围显示为高速异常,而鄂尔多斯北部上地幔显示大面积的低速异常.这一现象表明,鄂尔多斯地块南北两部分经历了不同的构造演化过程.根据本文的结果可以进一步推断,由于青藏高原、阿拉善地块向东北方向推挤以及岩石圈的拆离引起的上地幔扰动导致了地幔上涌,上涌的热物质改造了鄂尔多斯西北缘地区的岩石圈,并使该区的岩石圈减薄.地幔上涌也可能是东经104°边界带和北纬38°构造带形成的深部动力学因素.

中国西部北纬35°线附近地区7.0级以上强震分析

自1990年以来我国西部及邻近地区先后发生了6次7.0级以上地震,这些地震的震中位于35°N线附近,其纬度界于34.4°-36.2°N之间,平均纬度为35.45°N。美国哈佛大学给出的震源机制表明,这些地震的主压应力轴方位一致性较好,都为NE向,似乎说明这些地震的发生是在统一的应力场作用下的结果,可能与印度板块对我国大陆的推挤作用有关。结合地质构造和余震分布确定了发震断层,计算了它们产生的应力场,根据库仑破裂应力变化,分析了它们之间的相互影响。结果显示,在这些地震中,对后续发生的地震可能具有促震作用。根据引潮力在震源断层面上产生的有效剪切应力,分析了引潮力对这些地震的触发效应,结果没有显示这些地震的发生受到明显的引潮力触发。

二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白

目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱、生物信息学等技术鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证了转录调控肿瘤蛋白(TCTP)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和膜联蛋白A2(annexin A2)在肝永生化及HCC细胞和HCC及癌旁组织中的表达规律,体外侵袭实验检测TCTP沉默后对SNU449的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术共鉴定出42个差异表达的蛋白质分子/异质体(HCC细胞中高、低表达的蛋白/异质体分别为14个、28个),代表32个蛋白质分子,其中的22个蛋白含有至少1个N糖基化位点(Net NGlyc 1.0预测)。这些差异表达的蛋白主要参与氧化还原内稳态维系、碳水化合物/能量代谢、糖酵解、抗凋亡等生物学过程。Western blotting检测表明,TCTP、Ep CAM和annexin A2在6个肝癌细胞系PLC5、Hep G2、SNU449、Huh7、HCC7721和SNU473及肝癌组织中表达显著升高,siRNA介导的TCTP沉默明显抑制了HCC细胞系SNU449的体外侵袭能力。结论 TCTP、Ep CAM和annexin可能参与了HCC发生发展过程,TCTP可能成为HCC靶向治疗的分子靶点之一。

水培营养液硝态氮浓度在线标测系统研究

针对目前氮素浓度检测技术中电极标定过程与离子检测过程分离,难以实现在线检测的问题,设计了一套基于双传感器冗余控制的水培营养液硝态氮浓度在线标测系统。系统的标定过程为利用丝杠滑块线性导轨完成电极清洗和标准液电压获取,并采用最小二乘法,辨识所采集电压与离子浓度对数之间标准曲线的参数。系统的检测过程为基于最大误差原理,采用双传感器冗余控制方法进行数据融合和标定决策,最终实现硝态氮浓度的连续在线检测。验证试验结果表明:双传感器冗余控制方法可靠,在线检测值与离子色谱法获得的实验室检测值平均相对误差仅为5.64%,平均绝对误差只有1.172×10-5,二者呈现极显著线性相关关系(P<0.01)。综合分析得出,该系统能够实现营养液连续消耗情况下硝态氮浓度的在线检测,其结果与实验室检测值具有较好的一致性,解决了人工标定电极费时、费工的问题,提高了检测效率,为营养液的精细化管理提供了新的技术手段。

库车坳陷复杂山地宽线采集技术及应用效果

库车坳陷山地地震勘探受复杂地表和地下条件影响,激发和接收条件差,原始资料信噪比低,构造成像困难,影响地下构造形态认识和油气资源评价。在西秋里塔格构造带进行了宽线采集技术攻关,针对工区复杂的地震地质条件,提出了相应的技术对策。首先对宽线主要采集参数如道距、覆盖次数、最大炮检距、接收线距和激发接收参数等进行了详细论证,然后根据论证结果选择2炮3线、单线480道接收的宽线观测系统进行了资料采集。与常规二维采集相比,宽线采集能较好地解决复杂山体区资料信噪比低,浅层反射弱和中、深层成像难的问题,所获得的剖面品质有较大幅度的改善。

小儿腺样体肥大的X线表现(附136例总结及与132例正常对照)

目的： 总结腺样体肥大的平片表现并介绍两种实用的测量方法。材料与方法： １３６ 例中，男８８ 例，女４８ 例。打鼾１３６ 例，张口呼吸１２６ 例。正常组１３２ 例。均常规摄吸气期鼻咽侧位平片。采用测Ａ／ｎ 比值及平行曲线法阅片。结果： （１） 正常组：Ａ／ｎ 比值均≤０ ．６６ ，鼻咽顶部，后壁软组织边缘不凸过（１０７ 例） 或轻微凸入（２５ 例） 平行曲线；（２） 异常组：鼻咽顶部，后壁软组织增厚，鼻咽腔变窄。Ａ／ｎ 比值均＞ ０ ．７０ ，其中１２８ 例＞ ０ ．８０ ，鼻咽顶部、后壁软组织边缘均凸过平行曲线。结论： （１） 摄吸气时的鼻咽侧位片是观察腺样体肥大的简单而准确的方法；（２） 测定Ａ／ｎ 比值用以观察腺样体的厚度，Ａ／ｎ 比值≤０ ．６６ 为正常，＞ ０ ．７０ 为腺样体肥大，＞ ０ ．８０ 者为腺样体显著肥大；（３） 用划平行曲线法可勾画出腺样体的长径。

计及灵敏度因子的加权电气介数在电网脆弱性线路识别中的应用

基于复杂网络理论,通过引入"发电机-负荷"节点对之间的灵敏度因子,重新定义了计及灵敏度因子的加权电气介数,用于电网的脆弱性线路识别。通过修正发电机、负荷节点在加权电气介数计算过程中的权重值来强化"发电机-负荷"节点对之间的潮流指向性。以IEEE 9节点系统和IEEE 39节点系统作为测试算例,求解各线路的加权电气介数值并以此对脆弱线路进行排序,对排序靠前的脆弱线路分别进行N-1小干扰稳定性校验和静态攻击稳定性校验,校验结果验证了所提方法的正确性。

在线稀释-流动注射法测定水样中的硝酸盐氮

针对本实验室原有测定NO3-N方法的线性范围窄且浓度极低,难以实现对皮革废水等含NO3-N浓度高的水样直接测定的缺点,对其进行改进后,成功建立了在线稀释-流动注射分光光度法,直接测定水样中NO3-N的方法。方法在0.2～10mg·L-1范围内NO3-N浓度与峰高成良好线性关系,相关系数r=0.9991,检出限为0.068mg·L-1,相对标准偏差分别为0.67%(500μg·L-1NO3-N,n=8)。样品测定频率为22个样/h。该法简单、快速,在无需对试样进行稀释前处理的基础上能实现对水样的直接测定,有利于实现废水的在线现场检测。实际水样加标回收率为93.4%～108.9%,结果令人满意。

N-乙酰氨基葡萄糖诱导白血病细胞K562向巨噬细胞分化

目的 :研究N 乙酰氨基葡萄糖对白血病细胞K5 6 2的诱导分化效果 .方法 :利用hexamethylenebisacetamide(HMBA)和N 乙酰氨基葡萄糖 ,分别用不同浓度对白血病K5 6 2细胞进行诱导分化实验 ,通过联苯胺、萘酚AS D氯醋酸酯酶及吉姆萨 瑞氏染色、电镜观察、流式细胞仪证实其分化方向 .结果 :化学诱导剂N 乙酰氨基葡萄糖对K5 6 2细胞在0 .5mmol·L-1浓度作用 2d后有良好的诱导分化效果 ,诱导K5 6 2向巨噬细胞分化 .与HMBA相比 ,N 乙酰氨基葡萄糖在作用浓度和作用时间上都有明显优势 .结论 :N 乙酰氨基葡萄糖可能诱导K5 6

造纸废水中四种耗氧量的在线测定

对某新闻纸厂桉木CTMP浆过氧化氢漂白生产线、废纸脱墨浆二氧化硫脲(FAS)及过氧化氢漂白生产线,进行了漂白废水中COD、BOD、TOC、TOD的在线测定研究。结果表明:桉木CTMP浆过氧化氢漂白废水采用电化学法与生化法结合的手段进行达标处理;废纸脱墨浆二氧化硫脲(FAS)及过氧化氢漂白废水宜用生化法处理;当废水处理中BOD/TOD>0.6、BOD/TOC>1.0时,宜采用生化法处理;BOD/TOD<0.2、BOD/TOC<0.3时,应采用电化学法及生化法相结合的处理方法;对废水BOD/COD<0.3值的范围判断废水可生化性是不可靠的。

N-1网络电压及灵敏度快速算法

快速求取N-1网络下各节点电压和各节点电压对任一节点系统运行参数的灵敏度对于N-1网络下的实时电压稳定监视和分析具有重要意义。通过牛顿潮流计算出N网络的各节点电压及其对系统运行参数的灵敏度;利用已收敛的潮流修正方程式和N网络灵敏度计算方程式分别对线路开断参数多阶求导,从而计算出电压和灵敏度对此线路开断参数的多阶导数值;根据泰勒级数展开式修正N网络的电压和灵敏度值,得到N-1网络的电压和灵敏度值。并以IEEE 118节点标准网络的结果证明了该方法的正确性和实用价值。

氮胁迫条件下中国春-代换系小麦苗期耐低氮特征研究

以一整套中国春背景的单染色体代换系和中国春、供体Synthetic 6x小麦为材料,研究了低氮胁迫条件下苗期氮效率的染色体效应。结果表明,低氮胁迫条件下,依据供试代换系植株干物质积累量可划分为高效组、中效组和低效组,以6D代换系单株干物重最大。不同效率组的株高、叶龄、根条数和单株叶面积等形态学性状及叶绿素含量、Fv/Fm和光合速率表现为随氮效率的降低而减小。单株干物重与单株氮累积量呈显著正相关,也与叶龄、单株叶面积、叶绿素a、叶绿素b含量和光合速率呈显著正相关,与含氮量及氮效率的相关程度较低。用供体Synthet-ic 6x单染色体对中国春相应染色体进行代换,会导致小麦的耐低氮胁迫能力发生明显变化。6D等低氮胁迫下表现为高效组的供体染色体含有耐低氮高效基因。可用叶龄、单株叶面积、叶绿素a含量、叶绿素b含量和光合速率作为鉴定小麦耐低氮能力强弱的形态和生理指标。

草木犀正丁醇提取物对小鼠巨噬细胞促炎介质的影响

目的研究草木犀正丁醇提取物在体外的抗炎作用。方法通过LPS干预RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型,使用1、5和10mg/L3种浓度的草木犀正丁醇提取物对其进行干预。ELISA法检测药物干预前后上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌量,Griess反应测定NO水平;实时荧光定量RT-PCR检测TNF-α、iNOS和COX-2的mRNA表达;Western blot法检测COX-2的蛋白表达水平。结果草木犀正丁醇提取物干预后,上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和NO含量与模型组相比均显著降低(P<0.01),并存在剂量依赖关系;干预后细胞TNF-α,iNOS和COX-2的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),也存在剂量依赖关系;草木犀正丁醇提取物及DM干预后COX-2蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论草木犀正丁醇提取物可以下调TNF-α、IL-1β、IL-6、NO和COX-2等炎症介质的表达,该药物体外抗炎作用可能通过抑制这些炎症介质而产生。

阴极弧离子镀TiAlSiN涂层表面-界面能谱分析与结合强度

采用阴极弧离子镀法在H13钢表面制备Ti Al Si N涂层,通过SEM对Ti Al Si N涂层表面和界面形貌进行了观察,通过EDS和XRD对其化学元素和物相进行了分析,利用划痕法测定了其结合强度,并对其界面结合机理进行了探讨。结果表明:Ti Al Si N涂层表面主要成分为Ti、Al、Si和N元素,各元素分布均匀,未产生富集现象;高硬度的Ti Al N是由Al原子以置换方式取代Ti N中部分Ti原子生成的,且Ti N和Al N晶粒得到细化,形成较为致密的结构,使涂层硬度得到了提高;Ti、Al、Si、N等原子在结合界面处发生相互扩散,是形成冶金结合的主要机制;Ti Al SN涂层/H13钢体系具有较好的结合强度,用划痕法测得涂层界面结合强度为44 N。

关于优化n条线段求交算法的研究

首先分析了n条线段相交算法的不足,然后系统地阐述利用扫视法缩小求交线段的范围、利用点位判别法高效判断两线段是否相交的理论,从而提出了一套较为优化的n条线段求交算法。本文对其算法给出详细的分析和讨论,最后指出此算法的适用范围。

高频交流环节AC/AC变频变换系统基准正弦电路研究

首次提出并深入分析研究了一类全数字化技术、与电网电压n倍频或n分频信号同步的基准正弦电路,并给出了关键电路参数设计准则与试验结果,试验结果与理论分析一致。该基准正弦电路具有输出正弦电压与电网电压n倍频或n分频信号同步、THD小、幅值可调且不受电网电压波动的影响、简单实用、价格低廉等优点,在高频交流环节AC/AC变频变换系统和UPS中具有重要应用价值。

8株人黑色素瘤细胞系的建立及其生物学特性研究

目的 :从人黑色素瘤组织建立一系列黑色素瘤细胞系 ,命名为黑色素瘤细胞系 1- 8号 (HME1- 8) ,并研究鉴定其体外细胞生物学与免疫学特性。方法 :取黑色素瘤组织进行组织块培养法 ,待长满 90 %汇合面后消化传代培养 ,并进行形态学、生长动力学、免疫学及致瘤性等生物学特性研究。结果 :该系列黑色素瘤细胞系已在体外培养生存 1- 2年 ,传 6 0 - 10 0余代 ,其生物学特性显示 :①这些细胞系体外生长的倍增时间为 34. 2 - 5 9. 5h ;②软琼脂集落形成率平均值在 8. 6 % - 2 6 . 2 %之间 ;③接种至裸鼠后具有较高的致瘤性 ;④染色体核型分析为非整倍体 ,众数为 6 4 - 117条 ;⑤透射电镜下可观察到细胞含丰富的核糖体及黑色素颗粒 ;⑥免疫组化分析显示细胞浆内含大量阳性棕色黑色素颗粒 ;⑦肿瘤抗原检测显示 8株黑色素瘤细胞系的Melan -A抗原阳性率为 75 % ,MAGE - 1阳性率为5 0 % ,MAGE - 2阳性率为 37 .5 % ,MAGE - 3阳性率为 6 2 .5 %。结论 :8株黑色素瘤细胞系经体外长期培养后已永生化 ,形成了连续传代细胞系 ,具有明显的黑色素瘤细胞恶性表型特征。

玉米自交系的干物质积累与氮磷钾吸收

以自交系Ｍｏ１７与杂交种丹玉１３为材料，通过对群体全生育期植株干物质与氮、磷、钾积累的较系统分析，建立了群体干物质与氮、磷、钾积累的数学模式，揭示了自交系与杂交种的差异；Ｍｏ１７全生育期干物质积累量为丹玉１３的６０％，氮、磷、钾吸收量为丹玉１３的５３％、５９％和６７％，生产单位子粒Ｍｏ１７较丹玉１３所需氮少１０５％、需钾多１３％。