NO及其合酶在大鼠视神经夹持模型上的表达变化及其作用

目的探讨大鼠视神经夹持后视网膜上一氧化氮含量的变化及其合酶i NOS、e NOS、n NOS表达变化以及它们所发挥的作用.方法建立大鼠视神经夹挫动物模型,采用TUNEL法检测视网膜RGCs在相应时间点的凋亡情况;采用硝酸还原酶法检测视网膜上NO含量的变化;采用Real-time PCR方法检测i NOS、e NOS、n NOS在损伤后6 h、12 h、24 h、3 d、5 d、7 d和14 d的m RNA表达情况;并运用免疫组化法对i NOS和n NOS进行检测,观察它们在视网膜上的蛋白定位情况.结果手术组与对照组相比,RGCs凋亡率在3 d明显增高,5d达峰值,7 d平稳下降,14 d已基本无变化.Real-time PCR检测结果显示视神经夹持后24 h时,视网膜i NOS m RNA表达量的显著增高,且差异与对照组相比有统计学意义(P<0.05),3 d时表达量即恢复至正常水平(P>0.05).视神经夹持后5 d时,视网膜n NOS m RNA表达量的显著增高,且差异与对照组相比有统计学意义(P<0.05),7 d以后稍有下降但和对照组相比也有统计学意义(P<0.05),14 d时表达量即恢复至正常水平(P>0.05);e NOS m RNA表达量随时间并无明显变化(P>0.05).结论推测i NOS与n NOS相互交织变化是造成视神经损伤后视网膜内NO含量变化的主要原因,i NOS与n NOS活性的变化对TON的损伤具有关键性的调控作用.