7-硝基吲唑对椎基底动脉脑缺血豚鼠ABR及耳蜗核nNOS活性的影响

目的 :探讨脑干耳蜗核缺血后听力损失情况 ,以及神经元型一氧化氮合酶 (neuronalnitricoxidesynthase)及其选择性抑制剂 7 硝基吲唑 (7 nitroindazole,7 NI)在缺血中的作用。方法 :随机将 50只耳廓反射灵敏的健康花色豚鼠分为 4组 :①正常对照组 ,②假手术组 ,③缺血组 ,④用药组。通过结扎一侧颈总动脉 ,阻断基底动脉 ,建立豚鼠椎基底动脉脑缺血的动物模型。用药组动物在缺血前 5min腹腔注射 7 NI,观察每组动物ABR及单位面积耳蜗核内nNOS阳性神经元的变化。结果 :与对照组比较 ,缺血 1 5min ,30min,60min和 1 2 0minABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期均显著延长 ,阈值提高 (P <0 .0 5)。用药组ABR各测试参量在相应缺血时间段内较单纯缺血组明显缩短或降低 (P <0 .0 5)。与对照组比较 ,nNOS阳性神经元数量在缺血后 1 5min即明显升高 ,缺血 30min达到高峰 ,60～ 1 2 0min基本恢复正常 ,而用药组各时间段nNOS阳性神经元数量与对照组比较 ,差异无统计学意义。结论 :nNOS主要参与耳蜗核缺血早期的病理性损伤 ,是造成循环障碍性听力下降的重要因素之一。 7 NI可选择性地抑制nNOS的活性 。

小鼠脑缺血后氧化DNA损伤的早期修复与神经保护的相关性研究

目的建立原位检测C57BL/6小鼠脑缺血所致AP位点和3’-PO_4型氧化DNA损伤的方法,同时采用TUNEL测定神经细胞凋亡,探讨两者的相关性,并观察nNOS在此过程中的作用。方法制作小鼠前脑缺血/再灌注模型(FbIR):夹闭双侧颈总动脉90min后恢复血流,按实验设计的再灌注不同时间点处死动物后制作脑组织冰冻切片。用大肠杆菌核苷酸外切酶Ⅲ敏感位点法(EXOSS)检测AP位点和3’-PO_4末端型两种氧化DNA损伤;采用TUNEL技术观察细胞凋亡,并检测特异性nNOS抑制剂3BR7NI对此氧化DNA损伤及细胞凋亡的影响。结果与假手术对照组相比,EXOSS阳性率在再灌注15min时至少增高20倍(P＜0．01),并在此后的30min内持续增高;EXOSS阳性主要出现在神经元的细胞核内;细胞死亡在再灌注24h组能检测到,并主要发生在神经元细胞内;在一定时间内大脑皮质区神经元细胞内的氧化DNA损伤和细胞凋亡均能被特异性nNOS抑制剂3-bromo-7-ni- troindazole(3BR7NI,30mg/kg,腹腔内注射)所抑制。结论EXOSS是一种原位检测AP位点和3’-PO_1末端型氧化DNA损伤的有效方法,该损伤在一定时间内可以得到修复,nNOS在这一过程中起着重要作用。

急性给锂小鼠大脑皮层一氧化氮合酶阳性神经元的时程变化

目的:为阐明锂对脑发育影响的机理,探讨急性给锂不同时程对小鼠大脑皮层神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的影响。方法:小鼠腹腔注射氯化锂,采用ABC免疫组织化学方法,观察急性给锂后24h内不同时程小鼠大脑皮层nNOS阳性神经元数目的变化。结果:急性给锂即刻小鼠大脑皮层nNOS阳性神经元数目明显增加,1h后达到高峰,6h和12h恢复到正常水平,24h较12h又有所增高,但仍处于正常水平。结论:急性给锂对小鼠大脑皮层nNOS活性有一定影响,这种变化可能是锂神经毒性的机制之一。