低氧增强SY5Y培养细胞内nPKCε的膜转位

目的:通过观察低氧刺激对培养SY5Y神经母细胞瘤细胞内nPKCε和nPKCθ膜转位激活的影响,以探讨两者是否参与细胞低氧预适应的发生。方法:利用本室建立的体外培养SY5Y细胞低氧刺激模型,并应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印记(Western-Blot)等方法,半定量分析SY5Y细胞内nPKCε、nPKCθ的膜转位水平。结果:SY5Y细胞经低氧刺激后,随刺激时间(0.5、2、4、6、8、12和24h)的延长,nPKCε在胞浆内的含量逐渐减少,而胞膜成分中的含量则明显增加,且于低氧刺激2h后的增高水平具有统计学显著意义(P<0.001);然而,nPKCθ在正常情况下只存在于胞膜成分内,且其含量不随低氧刺激时间的增加而改变(P>0.1)。结论:nPKCε可能参与了细胞低氧耐受的发生。

低氧预适应增加小鼠脑组织内nPKCε膜转位

目的 :初步探讨新奇型蛋白激酶C(novelproteinkinasesC ,nPKCs)在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。方法 :利用蛋白电泳 (SDS PAGE)和蛋白印迹 (Westernblot)等生化技术 ,并结合本室已建立的小鼠低氧预适应模型 ,观察低氧预适应对小鼠海马和大脑皮层组织内nPKCs(nPKCε、δ、η、μ和θ亚型 )膜转位 (激活 )的影响。结果 :随低氧次数 (H0 H4 )或低氧耐受时间的增加 ,小鼠海马 (H0 :4 1.6 %± 1.4 %vsH1 H4 :4 6 .9%± 4 .5 % ,5 2 .7±3.9% ,5 8.8%± 2 .7% ,6 1.3%± 3.7% )和大脑皮层 (H0 :38.4 %± 4 .5 %vsH1-H4 :4 2 .4 %± 5 .0 % ,4 8.7%±6 .5 % ,5 5 .3%± 8.9% ,6 1.2 %± 10 .2 % )组织内nPKCε膜转位明显增加 ,且海马和大脑皮层分别在H2、H3、H4和H3、H4具有统计学的显著意义 (P <0 .0 1) ;而nPKCδ、η、μ和θ亚型在海马和大脑皮层组织内的膜转位变化均无统计学意义。结论 :nPKCε可能在脑低氧预适应的发生发展过程中发挥着重要作用 ,但需进一步的研究证实。

低氧预适应减轻脑中动脉阻塞所致小鼠缺血性脑损伤

目的探讨低氧预适应(HPC)对脑中动脉阻塞(MCAO)所致脑缺血性损伤的影响及其可能机制。方法借助已建小鼠整体HPC和脑MCAO模型,应用2,3,5氯-化三苯基四氮唑(TTC)染色、神经行为学评分、SDS-PAGE和W estern b lot等技术方法,观察脑梗死面积、水肿率、行为学,以及脑梗死核心和半影区新奇型蛋白激酶C(nPKC)膜转位的变化。结果MCAO可诱发小鼠脑皮层、海马和丘脑(由于发生率很低,数据未统计)等3种典型缺血模式;在皮层缺血模式中,HPC明显减小脑梗死面积(P<0.05,n=12)、缺血区吸光度值(P<0.05,n=12)和水肿率(P<0.05,n=12);而在海马缺血模式上,HPC只明显降低海马梗死区吸光度值(P<0.05,n=12);HPC可在一定程度上缓解MCAO小鼠的行为学改变;此外,HPC可缓解MCAO所致皮层缺血半影区nPKC膜转位水平的降低。结论HPC降低MCAO所致脑缺血性损伤,且nPKC可能参与了这种保护作用。

大蒜素对乳鼠心肌细胞延迟预处理保护作用及其信号转导机制的研究

目的 :研究大蒜素预处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的延迟保护作用及其部分信号转导机制。方法 :采用细胞存活率、乳酸脱氢酶活性、丙二醛含量作为心肌细胞受损指标 ,观察终浓度为 2 0 μg/ml的大蒜素预处理 2 4h后对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及蛋白激酶抑制剂H 7、丝裂素激活蛋白激酶抑制剂PD 980 5 9对大蒜素预处理作用的影响 ;并通过免疫印迹技术(Westernblotanalysis)测定大蒜素预处理 2 4h后 ,nPKC ε、热休克蛋白 70 (HSP70 )和核因子 κB(NF κB)的表达情况。结果 :大蒜素预处理能显著提高缺氧复氧损伤心肌细胞存活率 ,减少LDH漏出和MDA生成 ,H 7、PD 980 5 9可完全取消这种心肌保护作用。大蒜素预处理可明显增加nPKC ε、HSP70的表达 ,H 7能抑制此作用 ,而PD980 5 9仅对HSP70表达有抑制 ,NF κB在各组间均无明显表达。结论 :大蒜素能够模拟缺血预处理延迟保护作用 ,其机制涉及PKC及MAPKs信号途径 ,可能通过活化nPKC ε ,使下游靶蛋白MAPKs磷酸化而诱导HSP70的高度表达产生延迟预处理心肌保护作用。

非确定的公钥密码及其实现

首先引入非确定的公钥密码和解密成功率的概念,并基于有限域上多变元问题的困难性,给出其实现方案N-HFMS;然后对Fq[M]中非奇异矩阵的数量进行分析,利用Euler-φq函数推导出Fq[M]中非奇异矩阵的精确计数公式.结果表明,该方法不仅可对任意特定N-HFMS实例的解密成功率进行精确估算,还可推导出N-HFMS方案的解密成功率下限,从而在理论上证明N-HFMS的可行性.利用N-HFMS方案,可约定会话密钥,进而实现保密通讯。