清远麻鸡NALP3基因部分cDNA序列克隆及组织表达差异分析

为了克隆NALP3基因的部分序列及检测其在鸡体内各组织中的表达情况,本试验选择12周龄的公、母清远麻鸡各3只,分别采集其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊、小肠、输卵管、卵巢、睾丸和脑12种器官,通过RT-PCR(Reverse transcription PCR)技术克隆NALP3部分cDNA序列,并采用Real time-PCR方法检测NALP3 mRNA的表达水平。结果显示,获得了清远麻鸡NALP3部分cDNA序列,序列长度为210 bp。在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊、小肠、输卵管、卵巢、睾丸和脑中均有NALP3 mRNA表达,其中在心脏中表达量最高,在小肠中表达量最低。

我国脑膜炎奈瑟菌中nalP基因的分布特征

目的了解我国脑膜炎奈瑟菌(Nm)菌株的nal P基因分布特征,为其功能和作用机制研究提供依据。方法采用多位点序列分型方法对187株分离自我国的Nm菌株进行分子分型。利用菌株全基因组框架图获得nal P基因及其两侧序列,对基因序列进行同源性比对及聚类分析。结果 178株Nm携带nal P基因;Nm中nal P基因与淋病奈瑟菌(Ng)中nal P基因的同源性为95%~96%,但系统进化分析明显分为两支,两侧间隔区同源性>85%。9株无nal P基因菌株中6株为?nal P2型,新发现3种排布方式。C群患者和健康携带者来源phase on菌株数差异有统计学意义。结论 Nm中nal P基因可能由Ng获得后各自独立进化,无nal P基因菌株可能是nal P基因丢失,能够表达Nal P的C群患者来源菌株可能缺失Nal P的补偿机制。

NALP1基因与骨肉瘤细胞的相关研究

目的:探讨NALP1基因在骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的表达,以及高表达NALP1基因对于骨肉瘤细胞体外凋亡的影响。方法:使用RT-PCR、Western-blot法检测骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的mRNA及蛋白表达水平并与人成骨细胞株hFOB1.19比较。将NALP1基因转染质粒PcDNA3.1,将重组质粒转染骨肉瘤细胞,分成高表达基因组、空质粒组及对照组,加入抗肿瘤药物顺铂及甲氨蝶呤促使肿瘤细胞凋亡,使用流式细胞仪测定各组肿瘤细胞凋亡率。结果:通过统计分析,骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的mRNA及蛋白表达水平均低于人成骨细胞株hFOB1.19(P<0.05),NALP1高表达组的肿瘤细胞凋亡率明显高于空白质粒组及对照组。结论:上调骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的NALP1的表达量可以促进肿瘤细胞凋亡。