大鼠侧脑室注射δ-阿片受体拮抗剂naltrindole或激动剂TAN-67对急性脑缺血的影响

本文旨在探讨δ-阿片受体(δ-opioid receptor,DOR)在急性脑缺血/再灌注损伤中的作用。除假手术组外,其余各组均用大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备大鼠右侧局灶性缺血/再灌注模型,缺血1h再灌注24h。于缺血前30min侧脑室分别注射DOR拮抗剂naltrindole(20nmol,50nmol,100nmol)、激动剂TAN-67(30nmol,60nmol,200nmol)或人工脑脊液,用Longa5分制评分标准对大鼠进行神经功能评分,焦油紫(cresyl violet,CV)染色和图像分析处理系统测量梗死灶大小,Western blot检测纹状体DOR蛋白的表达。结果表明,60nmol TAN-67显著减小梗死体积(P<0.05),提高神经功能缺损评分(P<0.05),约60kDa的DOR蛋白表达也倾向于上升(P>0.05);100nmol的naltrindole加重脑缺血损伤,约60kDa的DOR蛋白表达下降(P<0.05)。上述结果提示,激动DOR对急性缺血/再灌注大鼠的脑损伤有保护作用,而阻断DOR则加重其损伤。

激活δ阿片受体可抑制大鼠心室肌细胞L-型钙电流和瞬时外向钾电流(英文)

本研究采用全细胞膜片钳技术观察了SNC162 (一种选择性δ阿片受体激动剂)对大鼠心室肌细胞L型钙电流(L-type Ca2+current, ICa-L)和瞬时外向钾电流(transient outward K+ current, Ito)的影响。结果显示,SNC162 明显抑制大鼠心室肌细胞 ICa-L 和Ito,对 ICa-L 和 Ito 的最大抑制率分别为(46.13±4.12)% 和(36.53±10.57)%。1×10-4 mol/L SNC162 使 ICa-L 的平均电流密度从(8.98±0.40) pA/pF下降到(4.84±0.44) pA/pF (P<0.01, n=5),Ito 的平均电流密度从(18.69±2.42) pA/pF降低到(11.73±1.67) pA/pF (P<0.01,n=5)。单独应用 naltrindole (一种选择性δ阿片受体拮抗剂)对大鼠心室肌细胞 ICa-L 和 Ito 无显著作用,但预先应用 naltrindole 可以消除SNC162 对ICa-L和Ito 的抑制作用。结果表明,通过δ阿片受体,SNC162 (1×10-6~1×10-4 mol/L)浓度依赖性地抑制大鼠心室肌细胞ICa-L 和 Ito,这可能是激动δ阿片受体产生抗心律失常效应的重要机制。

血清饥饿条件下δ阿片受体激活对心肌细胞存活的影响

目的:研究血清饥饿对心肌造成损伤过程中,δ阿片受体激活是否对心肌细胞的存活起保护作用。方法:体外原代培养乳大鼠心肌细胞。结晶紫法测定心肌细胞活力;流式细胞仪检测细胞周期S+G2+M百分比;流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡指数;Western蛋白印迹法检测心肌细胞胞浆内caspase-3蛋白表达。结果:体外原代培养乳大鼠心肌细胞经无血清培养48小时后,心肌细胞出现明显的凋亡,caspase-3表达增加;当给予不同浓度的δ阿片受体激动剂[D-Ala2,D-Leu5]脑啡肽(DADLE)作用于心肌细胞后,能明显抑制心肌细胞凋亡,并且0.1μmol.L-1DADLE的作用最为显著,表现为,心肌细胞活力增加,心肌细胞的S+G2+M百分比升高;心肌细胞的凋亡指数下降,caspase-3蛋白表达降低;0.1μmol.L-1DADLE对心肌细胞的保护作用能被δ阿片受体拮抗剂naltrindole10μmol.L-1完全阻断,表现为,心肌细胞活力降低,心肌细胞的凋亡指数升高;心肌细胞的S+G2+M百分比降低;caspase-3的蛋白表达明显升高;说明DADLE通过激活δ阿片受体对心肌细胞起保护作用。结论:在血清饥饿条件下,δ阿片受体激活对心肌细胞的存活有保护作用。

阿片受体拮抗剂对移植排斥反应的作用及机制分析

目的 在以往工作基础上进一步观察选择性δ-阿片受体拮抗剂 naltrindole对移植排斥反应的影响及其作用机制。方法 整体实验以小鼠异体异位心肌组织移植为模型 ,离体实验以体外混合淋巴细胞反应作为观察指标。另外 ,取不同培养时间段的混合淋巴细胞 ,以同位素标记 [α-32 P]-PPE c DNA为探针做 Northern blot分析。结果 naltrindole对移植排斥的抑制作用较纳曲酮更强。δ-阿片受体激动剂 D-Ser2 -Lue-脑啡肽可以促进体外混合淋巴细胞反应 ,该作用能够被 naltrindole拮抗。Northern blot结果提示 ,在混合培养一定时间的淋巴细胞中有脑啡肽前体 PPE m RNA的表达。结论 δ-阿片受体拮抗剂 naltrindole能显著抑制移植排斥反应。移植排斥反应中的免疫细胞激活后可能表达有脑啡肽。 naltrindole抑制移植排斥反应的作用是由 δ-受体介导的 。

Aβ42转基因AD果蝇的构建及在药物筛选中的运用

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以β-淀粉样蛋白的形成和沉积为主要特征的神经退行性疾病,Aβ42被认为在AD的发病过程中起着重要的作用。果蝇是一种遗传操作简便的模式动物,利用果蝇中经典的Gal4/UAS系统,作者构建了在中枢神经系统中全神经元或运动神经元表达单拷贝或双拷贝Aβ42的转基因AD果蝇,并检验转基因果蝇在AD治疗药物筛选中的作用。结果显示,转基因AD果蝇寿命明显缩短且运动能力降低,而使用AD临床治疗药物安理申后,可延长AD果蝇寿命,改善AD果蝇的运动障碍。进一步的研究显示,δ阿片受体拮抗剂naltrindole给药后,也能缓解这些症状。该研究为AD治疗药物的初筛提供了一个经济便捷的工具。