偃松PpSS和PpSE基因过表达载体构建

【目的】构建偃松甾醇代谢途径关键基因SS和SE过表达载体,为促进偃松甾醇高效合成奠定基础,为药用偃松遗传改良提供重要基因资源。【方法】以偃松的cDNA为模板,将SS和SE基因克隆至pNC-Cam1304-35s载体;重组质粒通过PCR及测序鉴定正确后,三亲杂交转入根瘤农杆菌LBA4404。【结果】抗性农杆菌PCR产物长度与预期一致,阳性菌液测序结果与目标基因序列相同。【结论】成功构建SS和SE过表达载体,重组载体的获得为进一步挖掘其在偃松甾醇代谢中的调控机制研究奠定了基础。

偃松PpSS和PpSE基因克隆及序列分析

【目的】克隆偃松甾醇代谢途径关键基因SS和SE,为促进偃松甾醇高效合成奠定基础,为药用偃松遗传改良提供重要基因资源。【方法】利用偃松RNA-Seq数据筛选偃松SS和SE基因并克隆,通过生物信息网站及软件对其进行序列分析。【结果】从偃松中克隆2个甾醇代谢途径关键基因SS和SE,分别属于SS和SE基因家族,命名为PpSS和PpSE。二者均具有完整的开放读码框(ORF),分别长1230bp和1647bp,编码409和548个氨基酸。PpSS编码的氨基酸序列与马尾松SS家族蛋白(GenBankID:AHI96421.11)相似度最高,为95.11%,PpSE编码的氨基酸序列与银杏SE家族蛋白(GenBankID:AVG44184.1)相似度最高,为80.98%。PpSS蛋白存一个异戊二烯合成酶C1超家族位点,PpSE蛋白存在一个鲨烯单加氧酶超家族位点。【结论】PpSS和PpSE分别为偃松SS和SE基因家族中的新基因,两个基因的获得为进一步挖掘其在偃松甾醇代谢中的调控机制研究奠定了基础。

不同硒源和水平对蛋鸡脾硒含量及免疫功能的影响

将富硒益生菌(Se-enriched probiotics,SP)和亚硒酸钠(Sodium selenite,SS)2种硒源分别以3个硒水平0.2、0.5和1.0 mg/kg添加到蛋鸡基础日粮,进行为期35 d的饲养试验。结果表明,日粮添加SP或SS均能显著提高脾硒含量,随着硒添加水平的升高,脾硒含量也显著升高,且添加SP较SS能显著提高脾硒含量;在试验的第14天,添加SS或SP均能显著促进蛋鸡外周血T淋巴细胞转化,且随着硒添加水平的升高,T淋巴细胞的转化增加;在试验的第14和第28天,添加SS或SP均能显著提高蛋鸡血浆IL-2的水平,随着硒添加水平的升高和试验时间的延长,血浆IL-2均升高,且在试验的第28天,添加SP较添加SS能显著提高蛋鸡血浆IL-2的水平。结论:日粮添加SS或SP均能提高蛋鸡的免疫能力,且随硒添加水平的升高效果愈好;随着试验时间的延长,添加SP的效果优于SS。

基于相似度的直扩信号盲解扩方法

针对传统方法对直扩(direct sequence spread spectrum,DS-SS)信号进行盲解扩时,需要在估计出扩频序列后,才能完成信号盲解扩的问题,提出了一种基于相似度的DS-SS信号盲解扩方法。该方法首先在扩频码的码片速率和周期已知的条件下,以单倍扩频码周期的窗长对接收信号进行数据分段,然后对任意两段数据求相似度函数值,构造相似度函数值的特征信息矩阵,最后通过对构造的特征信息矩阵进行特征值分解就可以实现对信息序列及扩频码序列的盲估计。理论推导和仿真实验结果表明,该方法具有精度高、稳定性好,在信噪比容限值为-22dB的条件下也能够有效的盲估计DS-SS信号的信息序列及扩频码序列。

流域居民水幸福指标体系构建原理与实证研究——以钱塘江为例

幸福是水资源管理的终极价值目标。本文将幸福目标引入钱塘江水资源管理研究,依据水幸福感的概念,结合幸福影响因子圈理论建立了流域水幸福感指标体系并对钱塘江流域进行调查与实证分析。结果表明:钱塘江流域居民水幸福感处于中等偏上水平,其中,衢州市情况最好,金华市、绍兴市次之,杭州市最差;在钱塘江流域水幸福感影响因子层面,居民用水与健康状况对水幸福感影响最为显著,其次为水与亲情、水相关费用、节水技术与制度设计、用水公平与供给保障、水生态环境等。以上结论为改善钱塘江流域水资源管理提供了政策方向。在制定具体水资源管理制度时,钱塘江流域应突出水质治理为核心的流域管理理念并根据不同流域段的水环境特征有针对性地改善管理水平,提升居民的用水健康和水生态环境状况。

壳寡糖模板法合成纳米硒化镍及其性质研究

采用壳寡糖为软模板,通过低温水热法合成了球状纳米Ni0.85Se晶体,在500℃下灼烧50 min,转化为空心球状NiSe2晶体。通过透射电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、紫外-可见光谱(UV-vis)和荧光光谱(PL)等手段对产物进行了分析和表征,讨论了复合物的形成机理及反应条件对产物的影响。研究了产物的电化学性质。

基于服务器的IPTV快速频道切换技术

IPTV网络中的直播频道通常采用多播方式进行发送,STB通过加入多播组的方式来进行频道切换,这样使得IPTV频道切换往往比传统电视时间更长,在用户体验方面成为制约IPTV业务发展的硬伤。以CDN技术架构为基础,较详细地论述了基于服务器的FCC技术,该理论在实践中已得到应用,有较高的理论参考价值和实用价值。

刺五加鲨烯合酶和鲨烯环氧酶基因单核苷酸多态性及其与总皂苷量的相关性研究

目的筛选刺五加鲨烯合酶(SS)和鲨烯环氧酶(SE)基因存在的单核苷酸多态性(SNP)位点,分析各SNP位点与刺五加总皂苷量的相关性。方法采用分光光度法测定刺五加总皂苷的量,并划分为具有显著差异(P<0.01)的高、低量组;RT-PCR法扩增刺五加SS、SE基因,根据测序结果筛选SNP位点,利用R×C表的χ2检验分析相关关系。结果刺五加SS基因存在6处SNP,其中704 bp位点为错义突变,其他位点为同义突变,各位点均不与刺五加总皂苷量显著相关。SE基因存在9处SNP,其中导致错义突变的164、199、227、232 bp位点及同义突变的279、285 bp位点与刺五加总皂苷量显著相关(P<0.05),其他位点为同义突变,与刺五加总皂苷量间无显著相关性。结论刺五加SS和SE基因存在SNP,SE基因164～285 bp位点的AGAACG与刺五加总皂苷高量组显著相关,TAGTTC与低量组显著相关。

基于关键酶靶点基因研究内生青霉P116-1a提高刺五加皂苷含量的机制

为了探明刺五加鲨烯合酶(squalene synthase,SS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)和β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因家族各成员中靶点基因在内生青霉P116-1a提高皂苷含量的作用机制,我们利用Real time PCR法检测了回接P116-1a对刺五加SS、SE和β-AS基因家族各成员表达的影响;应用分光光度法测定总皂苷含量变化,并以SPPS17.0软件进行相关性分析。结果表明,回接菌株P116-1a后,SS1的表达量显著降低(p<0.05),SS2呈先高后低的变化趋势。SE1的表达量显著提高(p<0.05)。回接的早期,P116-1a显著抑制了SE2的表达(pAS2<0.05),之后回复正常。β-AS1呈现先高后低的变化趋势与SS1的变化趋势相似;β-基因的表达量显著提高(p<0.05)。菌株P116-1a显著提高了刺五加的皂苷含量(p<0.05)。SS2、SE1和β-AS2的表达量变化与刺五加的皂苷含量变化呈显著的正相关关系。我们初步判断,SS2、SE1和β-AS2是P116-1a提高刺五加皂苷含量的作用靶点基因。

茉莉酸甲酯结合高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响

目的研究茉莉酸甲酯(Me JA)和高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响。方法利用不同浓度(25、50、100、150μmol/L)Me JA和高温(50℃处理2 h)处理白桦细胞,进行生长量、细胞活力、抗逆酶活性、丙二醛和总三萜量及其合成关键酶基因相对表达量分析。结果高温和Me JA的复合处理对白桦细胞三萜合成的诱导作用比单独的Me JA和高温处理更强。高温胁迫1 d后加入150μmol/L的Me JA处理,细胞总三萜量最高,为76.6 mg/g,分别比空白对照、单独的Me JA和高温处理增加81.3%、159.9%和13.1%;三萜合成关键酶鲨烯合酶(SS)、鲨烯环氧酶(SE)、羽扇醇合酶(BPW)和β-香树酯醇合酶(BPY)基因的相对表达量也分别比空白对照增加297.1%、83.7%、1 032.6%和282.4%。高温胁迫1 d后加入Me JA处理,超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性高于空白对照;生长量和细胞活力被抑制。结论在高温胁迫后加入Me JA的复合处理可能通过影响白桦细胞生长量、细胞活力、丙二醛量和防御酶活性变化,调节三萜合成关键酶基因的表达,最终促进三萜物质的高效合成与积累。