水溶性紫杉醇两亲性共聚物纳米胶束研究

聚乙二醇聚己内酯聚乙二醇采用三嵌段共聚物为载体包载紫杉醇形成纳米胶束,胶束具有明显的核壳结构,有效地改善了紫杉醇的水溶性。研究表明,采用蒸发溶剂法、透析法和熔融法制备的胶束对紫杉醇都呈现良好的包封效果,其中,以熔融法制得的胶束粒径最小,分布最窄。文中还考察了蒸发溶剂法实验条件对胶束的影响,发现低沸点有机溶剂有利于获得小粒径胶束,胶束平均粒径随着载药量的提高相应增大。体外释药的结果表明,载药量高的胶束释药率却相对较小。

紫杉醇两亲嵌段共聚物纳米囊的研究

目的 探讨负载紫杉醇的聚乙二醇 b 聚 (D ,L 乳酸 )两亲性嵌段共聚物核 壳型纳米囊 (PMT)。方法 采用固相分散法制备PMT ,动态光散射 (DLS)测定PMT的粒径 ,透射电子显微镜 (TEM)和 1HNMR表征PMT的形态 ,研究共聚物相对分子质量和紫杉醇投药量对PMT的影响 ,考察PMT对昆明鼠肝癌H2 2的疗效。结果 PMT呈核 壳结构球形 ,粒径为纳米级 ,随着PEDLLA中疏水嵌段相对分子质量或载药量的增大而增大 ,PMT具有与Taxol类似的抑制肿瘤作用。

紫杉醇两亲性共聚物纳米胶束体外释药动力学

采用低分子量PEG PCL PEG、mPEG PLLA、mPEG PDLLA等两亲性嵌段共聚物作载体包载紫杉醇形成纳米胶束 .研究了不同载药率胶束在磷酸缓冲液中释放的动力学 ,发现紫杉醇PEG PCL PEG胶束和mPEG PLLA胶束的体外释药遵从一级释放动力学 ;紫杉醇mPEG PDLLA纳米胶束的体外释放多呈现出两段零级释放动力学 ;低载药率胶束表现出高释药率 ;体外释药过程中磷酸缓冲液的更新量越大 ,紫杉醇的释放率越高 .

嗜神经病毒衍生肽RVG29介导的靶向纳米载药胶束的合成及抗肿瘤活性

将羧基化的水溶性葡聚糖（Dex）与紫杉醇（PTX）化学偶联,制得载药纳米胶束M（PTX）,再将M（PTX）与嗜神经性病毒衍生肽（RVG29）化学偶联,得到RVG29靶向的载药纳米胶束M（RVG,PTX）.采用核磁共振氢谱（1H NMR）测定了Dex-PTX及RVG-Dex-PTX键合物的分子量,并对2种胶束进行了表征,考察了2种胶束对肿瘤细胞的抑制效果及细胞凋亡情况,观察了C6细胞对荧光标记M（RVG,PTX）和M（PTX）的摄取情况.结果表明,羧基化葡聚糖-紫杉醇键合物的分子量约为16500,紫杉醇的质量约为葡聚糖的20%,RVG29的质量约为葡聚糖的10%.2种胶束的粒径在45～60 nm之间;M（RVG,PTX）胶束对C6细胞的抑制作用具有浓度和时间依赖性,细胞抑制率随着作用时间和药物浓度增加而增加,且M（RVG,PTX）胶束对C6细胞的抑制作用强于M（PTX）胶束.细胞摄取实验结果表明,与M（PTX）相比,C6细胞摄取了更多的M（RVG,PTX）胶束.如果先用游离的RVG29处理C6细胞,再进行细胞实验,则M（RVG,PTX）胶束对C6细胞生长的抑制作用及被C6细胞摄取的比率显著降低,与M（PTX）相当.表明靶向载药胶束M（RVG,PTX）中的RVG29保留了游离RVG29的活性,对C6细胞依然具有靶向效应,从而介导了M（RVG,PTX）被C6细胞的摄取,增强了对C6细胞的生长抑制作用.由于M（RVG,PTX）胶束只使用水溶性葡聚糖作载体,不涉及疏水高分子链段,不需要分别制备载药高分子和靶向高分子然后再共组装,因而制备过程比较简单,同时具有载药和靶向功能.

紫杉类药物温敏纳米胶束的小鼠LD_(50)及其毒性差异

目的研究紫杉醇(Pac)和多希紫杉醇(Doc)温敏纳米胶束的急性毒性作用及其在结合和未结合热疗情况下的毒性差异。方法用不同剂量Doc和Pac温敏纳米胶束对昆明鼠行尾静脉注射,每个剂量分为热疗和非热疗组,观察小鼠用药后的急性毒副反应,计算半数致死量(LD50)。分别以两种药物最大耐受剂量对相应实验组行小鼠尾静脉注射(对照组给予等剂量生理盐水),测定外周血的白细胞和血小板。结果Doc温敏纳米胶束热疗和非热疗时小鼠尾静脉注射的LD50分别为(330.94±23.58)mg/kg和(278.07±19.81)mg/kg,Pac温敏纳米胶束的LD50分别为(104.18±5.85)mg/kg和(95.50±5.10)mg/kg。Pac和Doc均可以引起外周血白细胞和血小板显著降低;而两种药物的温敏纳米胶束对外周血白细胞和血小板的影响较小,且热疗比非热疗时影响更小。结论Pac和Doc温敏纳米胶束的急性毒性和对外周血白细胞和血小板的影响小于临床上常用的Pac和Doc注射液,且热疗时的毒性更小。

紫杉醇温敏纳米胶束对人胃癌裸鼠移植瘤的靶向治疗作用

目的:探讨紫杉醇温敏纳米胶束靶向治疗人胃癌裸鼠移植瘤的疗效。方法:建立裸鼠BGC-823胃腺癌动物模型48只,随机分为紫杉醇热疗和非热疗组、紫杉醇温敏纳米胶束热疗和非热疗组、温敏纳米胶束热疗和非热疗组、单纯热疗组和等渗盐水组,每组6只,采用尾静脉给药方式,并43℃恒温对热疗组肿瘤部位进行热导向化疗,动态观察并测定肿瘤的生长。结果:紫杉醇温敏纳米胶束热疗组对人胃癌的移植瘤有显著抑制作用,肿瘤体积和瘤重抑瘤率分别为83.9%和81.3%,显著高于紫杉醇温敏纳米胶束非热疗组(43.6%和39.5%)和紫杉醇注射液组(49.6%和54.2%)(P<0.05),而且对正常组织的毒副反应明显减轻。结论:温敏纳米胶束具有良好的肿瘤抑制效果,作为一种新型的药物载体,显示出良好的应用前景。

RP-HPLC-凝胶分离法测定紫杉醇纳米微乳的包封率

目的:建立 HPLC 法测定紫杉醇纳米微乳的包封率,并分析凝胶柱层析分离纳米微乳的可行性。方法:通过凝胶色谱法分离纳米粒和游离药物。采用反相高效液相色谱法,色谱柱为 ODS C_(18)柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-乙腈-水(2:9:10),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长227 nm。结果:紫杉醇浓度存5～80μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999);该方法回收率的 RSD 小于2.0%,日内和日间 RSD 均小于4%。凝胶柱对纳米粒的回收率试验,RSD 小于2.0%。结论:本方法简单、快速、准确,凝胶柱 Sephadex G-25分离纳米粒与游离药物所得结果稳定、重现性好,两者合用能准确地测定紫杉醇纳米微乳的包封率并可作为质量控制的手段之一。

叶酸偶联纳米紫杉醇靶向治疗卵巢癌的细胞实验研究

目的:研究叶酸(FA)偶联纳米紫杉醇对卵巢癌的体外治疗效果,并初步探讨其作用机制。方法:共孵育法制备FA偶联纳米紫杉醇,荧光显微镜和流式细胞仪定性和定量测定其对SKOV3细胞的靶向作用,绘制细胞生长曲线;噻唑蓝法、流式细胞术及电子显微镜下观察FA偶联纳米紫杉醇对SKOV3细胞和SKOV3/TAX细胞的体外杀伤效应。结果:(1)FA偶联纳米紫杉醇的粒径为(140.5±10.3)nm,包封率为97%;(2)FA偶联纳米紫杉醇在FA受体(FR)介导下对SKOV3细胞有靶向杀伤作用,并且随时间延长,细胞内药物浓度逐渐增加;(3)FA偶联纳米紫杉醇对SKOV3细胞及SKOV3/TAX细胞的药效显著强于纳米紫杉醇,SKOV3/TAX细胞对FA偶联纳米紫杉醇的耐药指数有下降趋势。结论:FA偶联纳米紫杉醇可能利用FR为作用靶点,将药物主动靶向肿瘤细胞,提高药物在肿瘤细胞内的分布。其抗肿瘤疗效优于传统的紫杉醇。

叶酸偶联纳米紫杉醇靶向治疗耐药卵巢癌的动物实验研究

目的:研究腹腔注射叶酸偶联纳米紫杉醇(FA-N.P.)对耐药卵巢癌裸鼠的体内治疗效果,并探讨其最适给药方式。方法:建立裸鼠耐紫杉醇卵巢癌腹腔种植瘤模型,50只荷瘤鼠分5组,连续4周腹腔内分别注入空白载体(腹腔空白载体组)、紫杉醇(腹腔紫杉醇组)、纳米紫杉醇(腹腔N.P.组)、FA-N.P.(腹腔FA-N.P.组)及静脉注入FA-N.P.(静脉FA-N.P.组),比较其生存期及荷瘤量;电子显微镜及流式细胞仪定性和定量观察该药物对腹腔转移瘤的杀伤效果。结果:腹腔FA-N.P.组与其他4组比较,裸鼠生存期显著升高(P<0.05,P<0.01),瘤体数目(2.9±0.3个)明显降低(P<0.05,P<0.01)。腹腔FA-N.P.组瘤体内肿瘤细胞的凋亡率(44.6%±8.5%)明显高于其他4组(P<0.05)。与腹腔给药组比较,静脉FA-N.P.组肿瘤细胞的凋亡率降低(20.1%±6.2%,P<0.05)。结论:FA-N.P.药物靶向治疗耐药卵巢癌腹腔转移瘤有效,且腹腔给药效果优于静脉给药。

磁性纳米控释紫杉醇对食管癌Eca109细胞株生长的影响

目的:观察不同浓度磁性纳米控释紫杉醇对食管癌细胞Eca109的影响及与不同化疗药物的对比.方法:取对数生长期的食管癌Eca109细胞作细胞增殖抑制实验,实验组分别给予不同浓度的磁性纳米控释紫杉醇和5-氟尿嘧啶、泰素,同时设立二甲基亚砜(DMSO)和RPMI1640液对照,测定24,48,72h三个时间段的吸光度值,计算抑制率.经不同浓度的磁性纳米控释紫杉醇作用72h后,用电镜观察细胞超微结构,同时用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡.结果:MTT实验显示磁性纳米控释紫杉醇可抑制食管癌细胞增殖,与5-氟尿嘧啶,泰素相比,具有缓释性(P<0.01);电镜可发现药物作用组细胞核固缩、解聚以及凋亡小体;流式细胞仪检测显示G1峰前有明显的凋亡峰;细胞周期分析提示磁性纳米控释紫杉醇可将Eca109细胞阻滞于G2-M期,且与浓度相关.结论:磁性纳米控释紫杉醇对人食管癌细胞Eca109的生长有明显的抑制作用,使细胞分裂阻滞于G2-M期,并诱导细胞凋亡,且具有缓释效果.

叶酸偶联纳米紫杉醇的制备

目的制备磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-叶酸(folic acid monomethoxy-polyethylene glycol 2000-distearoyl phosphatidylethanolamine,ESPE-PEG2000-FA)修饰的紫杉醇纳米脂质体并考察其性质。方法采用超声乳化-溶剂挥发法制备DSPE-PEG2000-FA胶束;采用薄膜分散-挤压法制备紫杉醇脂质体;两者共同孵育形成DSPE-PEG2000-FA修饰的紫杉醇纳米脂质体;并测定修饰前后脂质体的粒径,包封率。结果叶酸偶联纳米紫杉醇药物的粒径(140.5±10.3)nm,多分散指数0.263±0.061,与原料药物纳米紫杉醇的粒径[(121.6±12.7)nm]和多分散指数(0.262±0.031)相比,差异无统计学意义。叶酸-紫杉醇纳米脂质体药物的包封率高达97%,与原料药紫杉醇纳米脂质体的包封率99%相比,差异无统计学意义,保证了药物的纯度和有效性。。结论本研究报道了一种靶向叶酸偶联纳米紫杉醇的新剂型及制备方法。该剂型有良好的药物包封率和胶体稳定性。

载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒抑制人肝癌细胞HepG2的作用

背景:临床上应用的紫杉醇注射剂毒性大,过敏反应发生率高。目的:研制载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒,观察其对人肝癌细胞HepG2的抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法:采用MTT法检测0,3.125,6.25,12.5,25,50,100mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子或紫杉醇作用后人肝癌细胞HepG2的生长;观察25mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子或紫杉醇作用后人肝癌细胞HepG2的形态变化,并观察0,12.5,25,50mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子作用后细胞的凋亡情况。结果与结论:在3.125-100mg/L质量浓度范围内,载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子与紫杉醇均能明显抑制HepG2细胞的生长,且载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子显示出明显的缓释作用,随着作用时间的增加其抑制率显著增加,72h时抑制效果最好,但紫杉醇此现象不明显。载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子或紫杉醇作用后,细胞出现典型的凋亡形态,且随着载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子作用时间的增加这一现象更加典型;12.5,25,50mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子可明显诱导细胞凋亡,且有明显的量效和时效关系,质量浓度越高、时间越长效果越明显。

载紫杉醇的聚乳酸-卵磷脂纳米级微泡的制备及其在超声介导下对肝癌细胞生物效应的评价

目的:本文旨在了解在超声介导下载药微泡对肝癌的治疗作用.方法:我们的研究中以聚乳酸(poly lactic acid,PLA)和卵磷脂为药物载体,以紫杉醇为模型药物,通过冷冻干燥技术以及改良的超声复乳-溶剂挥发法制备载紫杉醇的聚乳酸-卵磷脂纳米级微泡,考察主要的制备参数:(1)超声时间对载药微泡理化特性(包括:粒径、形态、载药量、包封率和超声介导下体外释药特性)的影响;(2)卵磷脂含量,优化其制备最佳条件;然后考察其对于人肝癌细胞的细胞毒性,及其在超声介导下对荷瘤小鼠的抑瘤率和治疗效果.结果:在制备初乳和复乳过程中我们发现在超声时间均为100 s、PLA与卵磷脂质量比为250∶50时可以制得较好的聚乳酸-卵磷脂纳米级微泡.其平均粒径为615 nm、内部为空心的纳米级微泡,药物包封率可达90.90%±5.79%,载药率可达到8.26%±0.53%,紫杉醇以无定型状态分布在微泡的壳内;其在体外药物释放具有零级释放、缓释以及在超声介导下加快药物释放的特点.并且在紫杉醇浓度为10μg/mL时HepG2人肝癌细胞的增殖率仅为43.37%±3.23%.结论:相对于单纯的紫杉醇注射剂而言,在超声介导下载药纳米级微泡注射剂可以提高抑瘤率并且还能减少对小鼠的不良反应.

紫杉醇纳米级给药系统研究概述

目的:介绍近年来国内紫杉醇纳米级给药系统的研究进展。方法:查阅近几年国内相关文献并进行整理分析。结果:紫杉醇纳米级给药系统具有控释性、靶向性等优点,并显现出较好的抗动物癌模型效果。结论:紫杉醇纳米级给药系统为癌症的有效治疗带来新的突破。

基于硅质体的紫杉醇抗癌药物释放系统

设计了一种新型药物载体用以提高紫杉醇载体的稳定性和体外药物缓释性能。首先合成一种新型有机/无机复合脂质,采用薄膜水化法制备空白硅质体,并研究其稳定性;将其装载抗癌药物紫杉醇后,形成紫杉醇硅质体并研究体外药物缓释性能。结果表明:利用新型复合脂质制备的硅质体在表面活性剂环境中具有良好的稳定性;成功将紫杉醇包埋于硅质体中制备成紫杉醇硅质体,粒径大小为(170.5±2.9)nm,体外药物释放实验表明,它比传统紫杉醇脂质体具有更好的药物缓释性能,药物包封率达到(69.70±5.17)%,因此新型复合脂质制备的硅质体是一种理想的纳米药物载体材料。

紫杉醇纳米胶束冻干粉针剂的制备工艺研究

目的制备紫杉醇/聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯纳米胶束的冻干粉针剂。方法以胶束粒径、有机溶剂残留量等为评价指标,采用膜透析法制备纳米胶束;以冻干成品的外观形态、体外释药曲线为评价指标,优选冻干粉针剂的制剂处方;研究粉针剂的冻干工艺及该粉针剂对HepG-2肝癌细胞的体外细胞毒性。结果以3%甘露醇为比例,制备获得紫杉醇纳米胶束冻干粉针剂外观良好,其体外释药曲线具有突释与缓释特性,且与新鲜透析所得载药纳米胶束溶液的释药曲线基本相同;当紫杉醇浓度≤10μg·mL-1时,冻干粉针剂对HepG-2肝癌细胞的细胞毒性远低于市售紫杉醇注射剂(P<0.01)。结论采用膜透析结合冷冻干燥法制备紫杉醇纳米胶束冻干粉针剂,避免使用紫杉醇增溶剂(聚氧乙烯蓖麻油)带来的不良过敏反应,并降低对体外肝癌细胞的细胞毒性,具有较好的临床价值与应用前景。

紫杉醇己内酯/碳酸亚乙酯载药纳米涂层制备及其体外实验研究

目的构建紫杉醇己内酯(CL)/碳酸亚乙酯(EC)载药纳米涂层,考察其体外释放情况并评价其对血管内皮细胞和平滑肌细胞存活率的影响。方法结合异步降解技术和静电纺织技术制备紫杉醇Poly(CLco-EC)载药纳米涂层;高压液相色谱法测定载药体系紫杉醇包封率和体外释放曲线;MTT实验测定人血管内皮细胞和平滑肌细胞存活率。结果 CL/EC=6和CL/EC=9的紫杉醇Poly(CL-co-EC)的药物包封率分别为92.1%和79.2%;载药量分别为26.5%和18.1%;紫杉醇在体外缓慢释放,50d后累计释放量分别达到78%和37%。紫杉醇Poly(CL-co-EC)电纺薄膜显著降低血管内皮细胞和平滑肌细胞的存活率。结论紫杉醇Poly(CL-co-EC)载药纳米涂层具有缓慢释放和释放速率可控的特点,具有作为血管内支架的潜在价值。

紫杉醇自组装核壳型纳米胶束的制备与性能

本文合成了聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯（polyethylene glycol-polybenzyl-L-glutamate，PEG-PBLG）两亲嵌段共聚物，并采用超微透析法制备了紫杉醇／PEG-PBLG核壳型纳米胶束。通过高效液相色谱测定了胶束的载药量及药物包封率；采用动态光散射法测定了胶束的粒径及分布；通过体外试验研究了紫杉醇／PEG-PBLG胶束的释药特性；采用四噻唑蓝法考察了紫杉醇／PEG-PBLG胶束的体外细胞毒性；通过裸鼠的抑瘤试验评价了紫杉醇胶束对人肝癌细胞的疗效。结果表明，PEG-PBLG胶束能包埋疏水性药物紫杉醇；紫杉醇／PEG-PBLG胶束的粒径为80—265nm，且随着载体共聚物PBLG嵌段相对分子质量的升高而增大；紫杉醇／PEG-PBLG胶束的体外释放具有缓释特性；当紫杉醇浓度大于20μg·mL^-1时，紫杉醇／PEG-PBLG胶束的细胞毒性低于相应浓度的紫杉醇／聚氧乙烯蓖麻油注射剂（P〈0．05），紫杉醇／PEG-PBLG胶束具有与紫杉醇／聚氧乙烯蓖麻油注射剂相似的抑制肿瘤作用。综上所述，紫杉醇／PEG-PBLG纳米胶束具有较均匀的粒径及粒径分布、缓释特性、低毒和较好的抗肿瘤作用。

纳米紫杉醇在人源肠Caco-2细胞模型的吸收转运研究(英文)

大量的研究已经证明,紫杉醇口服吸收较差,容易引起过敏性反应。为了克服紫杉醇的不足,我们制备了一种新的纳米紫杉醇药物,它由甘露醇与人血清白蛋白包裹紫杉醇颗粒制成,其具有更好的水溶性和较低的毒性。为了进一步研究纳米紫杉醇口服给药后的吸收效果,我们利用Caco-2细胞模型对纳米紫杉醇的跨膜转运量进行了测定,3 h内,纳米紫杉醇在0.5～20μmol.L-1的浓度内的转运量呈线性状态。从膜的顶端到底端的表观渗透系数Papp为(20.9±2.1×10-6cm.s-1;N=3),米氏方程常数KM值为相对较高的14.00μmol.L-1,这些数据表明纳米紫杉醇具有更好的吸收效果。

键合紫杉醇纳米胶束对H22肝癌小鼠的体内疗效评估

以H22肝癌的balb/c荷瘤小鼠为动物模型,考察了紫杉醇纳米胶束、紫杉醇注射液和生理盐水对小鼠肿瘤的抑制效果。紫杉醇注射液组、紫杉醇纳米胶束低剂量组和紫杉醇纳米胶束高剂量组在给药后10 d的肿瘤相对体积抑制率分别为22%、49%和67%,瘤重抑制率分别为29%、45%和47%;蛋白表达检测结果显示,紫杉醇纳米胶束组呈现p53的高表达和bcl-2的低表达,说明紫杉醇纳米胶束对小鼠H22肝癌的抑制作用强于紫杉醇注射液。