亚砷酸诱导人鼻咽癌细胞中p16基因表达的研究

目的研究亚砷酸(As2O3)诱导鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-2Z细胞株中抑癌基因p16的表达。方法体外培养的CNE-2Z细胞分别加入不同浓度的亚砷酸,并作用于不同时间。用终浓度为2μmol/L、1μmol/L、0.5μmol/L的As2O3加入鼻咽癌CNE-2Z细胞系和不加药物的空白对照组,作用48 h后,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测As2O3处理前后p16基因去甲基化的情况,采用反转录PCR(RT-PCR)检测鼻咽癌CNE-2Z细胞系中p16基因As2O3处理前后mRNA水平的表达情况,采用免疫印迹(Western blot)方法检测As2O3处理前后p16基因蛋白质水平的表达情况。结果 p16经As2O3作用后甲基化随着作用浓度的增高逐渐减弱,而去甲基化随着作用浓度的增高逐渐增强,且As2O3作用后p16在mRNA水平和蛋白质水平表达明显增强。空白对照组和不同浓度As2O3作用CNE-2Z细胞的处理组之间差异均有统计学意义(p<0.05),不同浓度As2O3作用CNE-2Z细胞的处理组之间差异也均有统计学意义(p<0.05)。结论 As2O3可诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞株中p16表达增强,从而阻滞鼻咽癌细胞的增殖分化。