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EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过TRAF2活化NF-kB
被引量:
14
1
作者
王承兴
李晓艳
+2 位作者
肖绘
邓锡云
曹亚
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2000年第6期517-520,共4页
目的:为了探讨EB病毒(EBV)中LMP1的致瘤机制,对鼻咽癌LMP1激活重要的核转录因子NF-_KB的机制进行了研究。方法:①以LMP1阴性的鼻咽癌细胞系HNE2及表达载体(pSG5)的鼻咽癌细胞系HNE2-pSG...
目的:为了探讨EB病毒(EBV)中LMP1的致瘤机制,对鼻咽癌LMP1激活重要的核转录因子NF-_KB的机制进行了研究。方法:①以LMP1阴性的鼻咽癌细胞系HNE2及表达载体(pSG5)的鼻咽癌细胞系HNE2-pSGS为对照,采用免疫共沉淀-Western-blotting方法在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2-LMP1中证实LMP1与TRAF2是否直接结合形成免疫共沉淀复合物;②在HNE2-LMP1细胞系导入TRAF2表达质粒或不同剂量TRAF2显性负性突变体(TRAF2A6- 86)表达质粒,以 NF-kB报道基因方法确定 LMP1是否通过 TRAF2活化 NF-kB ;③将LMP1(1-231)(CTAR2缺失区)或LMP1△187-351(CTARI缺失区)及不同剂量TRAF2A6-86瞬时导入HNE2中以证实LMP1 CTAR1或CTAR2是否介导了这种效应;④以转染或未转染TRAF26-86的HNE2-LMP1细胞系为材料,应用免疫共沉淀-Western-blotting方法,确定TRAF2△6-86是否竞争性抑制TRAF2与LMP1结合。结果:①在HNE2-LMP1中LMP1与TRAF2形成复合物?
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关键词
鼻咽肿瘤
LMP
1
TRAF2
nf
-K
b
E
b
病毒
下载PDF
职称材料
EB病毒潜伏膜蛋白1通过结合TRAFs调控NF-κB
被引量:
3
2
作者
王承兴
李晓艳
+2 位作者
顾焕华
邓锡云
曹亚
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期240-245,共6页
为了探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)的致瘤机制 ,对鼻咽癌中LMP1激活重要的核转录因子NF κB机制进行了研究 .首先 ,采用免疫共沉淀 蛋白质印迹在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中证实LMP1与TRAF1,2 ,3结合形成免疫共沉淀复合物 ...
为了探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)的致瘤机制 ,对鼻咽癌中LMP1激活重要的核转录因子NF κB机制进行了研究 .首先 ,采用免疫共沉淀 蛋白质印迹在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中证实LMP1与TRAF1,2 ,3结合形成免疫共沉淀复合物 ,进一步以野生型LMP1及其三种突变体的鼻咽癌细胞系LMP1(野生型 ,wt)、HNE2 LMP1del187~ 35 1(CTAR1缺失型 )、HNE2 LMP1(1~ 2 31) (CTAR2缺失型 )、HNE2 LMP1(1~ 187) (羧基端胞浆区缺失型 )、HNE2 pSG5 (空白载体型 )为材料 ,结合NF κB报道基因质粒(pGL2 NF κB luc)的荧光素酶活性表达分析NF κB的活性 ,证实 :较之母细胞 ,野生型LMP1活化NF κB达13 8倍 ,LMP1(1~ 187)几乎不活化NF κB ,LMP1(1~ 2 31)活化NF κB达 4 9倍 ,LMP1(del187~ 35 1)活化NF κB达 9 1倍 ;TRAF1过表达升高LMP1(wt)及LMP1(1~ 2 31)介导的NF κB活性 ,而对LMP1(del187~ 35 1)活化NF κB无影响 ;TRAF3过表达或TRAF3负显性突变体抑制LMP1(wt)及LMP1(1~ 2 31)介导的NF κB活性 ,而不影响LMP1(del 187~ 35 1)活化NF κB ;TRAF2过表达升高LMP1(wt)、LMP1(1~2 31)及LMP1(del 187~ 35 1)介导的NF κB活性 .这些结果表明 :鼻咽癌中LMP1通过TRAF1、TRAF2或TRAF3调控NF κB 。
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关键词
鼻咽癌
潜伏膜蛋白
1
肿瘤坏死因子受体相关因子
nf
-Κ
b
E
b
病毒
下载PDF
职称材料
鼻咽癌中EB病毒LMP1激活TRAFs的初步研究
被引量:
4
3
作者
王承兴
李晓艳
+2 位作者
顾焕华
邓锡云
曹亚
《中国病毒学》
CSCD
2001年第1期6-10,共5页
在EB病毒潜伏膜蛋白LMP1介导的信号传导通路中 ,TRAFs作为LMP1活化的第一位信号分子 ,可能扮演着重要的分子开关角色。令人关注的是 ,在上皮性肿瘤NPC的发生中 ,EB病毒LMP1能否激活重要的TRAFs信号分子 ?究竟激活何种TRAFs信号分子 ,激...
在EB病毒潜伏膜蛋白LMP1介导的信号传导通路中 ,TRAFs作为LMP1活化的第一位信号分子 ,可能扮演着重要的分子开关角色。令人关注的是 ,在上皮性肿瘤NPC的发生中 ,EB病毒LMP1能否激活重要的TRAFs信号分子 ?究竟激活何种TRAFs信号分子 ,激活的机制何在 ?将LMP1cDNA导入LMP1表达阴性的HNE2中 ,建立稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系 :HNE2 LMP1。以此为材料 ,应用差异RT PCR和Westernblotting法证实 ,无论在RNA水平 ,还是蛋白水平上 ,TRAF1在HNE2 LMP1中表达较HNE2强 ,而TRAF2及TRAF3在HNE2 LMP1与HNE2细胞中表达无明显差异 ;进一步用免疫共沉淀 Westernblotting证实LMP1可使TRAF1、TRAF2、TRAF3磷酸化而被活化。这些结果提示在鼻咽癌中 ,LMP1可能诱导TRAF1表达 ,而对TRAF2及TRAF3并不影响 ,但LMP1可磷酸化TRAF1、TRAF2。
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关键词
鼻咽癌
潜伏膜蛋白
1
肿瘤坏死因子受体相关因子
信号传导
巨
b
病毒
下载PDF
职称材料
题名
EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过TRAF2活化NF-kB
被引量:
14
1
作者
王承兴
李晓艳
肖绘
邓锡云
曹亚
机构
湖南医科大学肿瘤研究所
出处
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2000年第6期517-520,共4页
基金
国家自然科学基金杰出青年基金!(39525022)
美国中华医学基金!(CMB96655)
国家自然科学基金!(3983041
文摘
目的:为了探讨EB病毒(EBV)中LMP1的致瘤机制,对鼻咽癌LMP1激活重要的核转录因子NF-_KB的机制进行了研究。方法:①以LMP1阴性的鼻咽癌细胞系HNE2及表达载体(pSG5)的鼻咽癌细胞系HNE2-pSGS为对照,采用免疫共沉淀-Western-blotting方法在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2-LMP1中证实LMP1与TRAF2是否直接结合形成免疫共沉淀复合物;②在HNE2-LMP1细胞系导入TRAF2表达质粒或不同剂量TRAF2显性负性突变体(TRAF2A6- 86)表达质粒,以 NF-kB报道基因方法确定 LMP1是否通过 TRAF2活化 NF-kB ;③将LMP1(1-231)(CTAR2缺失区)或LMP1△187-351(CTARI缺失区)及不同剂量TRAF2A6-86瞬时导入HNE2中以证实LMP1 CTAR1或CTAR2是否介导了这种效应;④以转染或未转染TRAF26-86的HNE2-LMP1细胞系为材料,应用免疫共沉淀-Western-blotting方法,确定TRAF2△6-86是否竞争性抑制TRAF2与LMP1结合。结果:①在HNE2-LMP1中LMP1与TRAF2形成复合物?
关键词
鼻咽肿瘤
LMP
1
TRAF2
nf
-K
b
E
b
病毒
Keywords
nasopharyngeal
neoplasms
latent
membrane
protein
1
tumor necrosis factor receptor associated factors
2
nf
-k
b
分类号
R739.6 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
EB病毒潜伏膜蛋白1通过结合TRAFs调控NF-κB
被引量:
3
2
作者
王承兴
李晓艳
顾焕华
邓锡云
曹亚
机构
湖南医科大学肿瘤研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期240-245,共6页
基金
国家重点基础研究发展规划 (973)"恶性肿瘤发生发展的基础研究"!(G19980 5 12 0 1)
国家自然科学基金!重点项目 (39830 410 )
国
文摘
为了探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)的致瘤机制 ,对鼻咽癌中LMP1激活重要的核转录因子NF κB机制进行了研究 .首先 ,采用免疫共沉淀 蛋白质印迹在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中证实LMP1与TRAF1,2 ,3结合形成免疫共沉淀复合物 ,进一步以野生型LMP1及其三种突变体的鼻咽癌细胞系LMP1(野生型 ,wt)、HNE2 LMP1del187~ 35 1(CTAR1缺失型 )、HNE2 LMP1(1~ 2 31) (CTAR2缺失型 )、HNE2 LMP1(1~ 187) (羧基端胞浆区缺失型 )、HNE2 pSG5 (空白载体型 )为材料 ,结合NF κB报道基因质粒(pGL2 NF κB luc)的荧光素酶活性表达分析NF κB的活性 ,证实 :较之母细胞 ,野生型LMP1活化NF κB达13 8倍 ,LMP1(1~ 187)几乎不活化NF κB ,LMP1(1~ 2 31)活化NF κB达 4 9倍 ,LMP1(del187~ 35 1)活化NF κB达 9 1倍 ;TRAF1过表达升高LMP1(wt)及LMP1(1~ 2 31)介导的NF κB活性 ,而对LMP1(del187~ 35 1)活化NF κB无影响 ;TRAF3过表达或TRAF3负显性突变体抑制LMP1(wt)及LMP1(1~ 2 31)介导的NF κB活性 ,而不影响LMP1(del 187~ 35 1)活化NF κB ;TRAF2过表达升高LMP1(wt)、LMP1(1~2 31)及LMP1(del 187~ 35 1)介导的NF κB活性 .这些结果表明 :鼻咽癌中LMP1通过TRAF1、TRAF2或TRAF3调控NF κB 。
关键词
鼻咽癌
潜伏膜蛋白
1
肿瘤坏死因子受体相关因子
nf
-Κ
b
E
b
病毒
Keywords
nasopharyngeal carcinoma
,
latent membrane protein 1
,
tumor necrosis factor receptor associated factors
,
nf κb
分类号
R739.630.2 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
鼻咽癌中EB病毒LMP1激活TRAFs的初步研究
被引量:
4
3
作者
王承兴
李晓艳
顾焕华
邓锡云
曹亚
机构
湖南医科大学肿瘤研究所
出处
《中国病毒学》
CSCD
2001年第1期6-10,共5页
基金
国家重点基础研究发展规划 !(G19980 5 12 0 1)
国家自然科学基金重点项目 !( 39830 410 )
美国中华医学基金!(GMB96 6 5 5 )
文摘
在EB病毒潜伏膜蛋白LMP1介导的信号传导通路中 ,TRAFs作为LMP1活化的第一位信号分子 ,可能扮演着重要的分子开关角色。令人关注的是 ,在上皮性肿瘤NPC的发生中 ,EB病毒LMP1能否激活重要的TRAFs信号分子 ?究竟激活何种TRAFs信号分子 ,激活的机制何在 ?将LMP1cDNA导入LMP1表达阴性的HNE2中 ,建立稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系 :HNE2 LMP1。以此为材料 ,应用差异RT PCR和Westernblotting法证实 ,无论在RNA水平 ,还是蛋白水平上 ,TRAF1在HNE2 LMP1中表达较HNE2强 ,而TRAF2及TRAF3在HNE2 LMP1与HNE2细胞中表达无明显差异 ;进一步用免疫共沉淀 Westernblotting证实LMP1可使TRAF1、TRAF2、TRAF3磷酸化而被活化。这些结果提示在鼻咽癌中 ,LMP1可能诱导TRAF1表达 ,而对TRAF2及TRAF3并不影响 ,但LMP1可磷酸化TRAF1、TRAF2。
关键词
鼻咽癌
潜伏膜蛋白
1
肿瘤坏死因子受体相关因子
信号传导
巨
b
病毒
Keywords
nasopharyngeal carcinoma
latent membrane protein 1
tumor necrosis factor receptor associated factors
Signal transducation
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过TRAF2活化NF-kB
王承兴
李晓艳
肖绘
邓锡云
曹亚
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2000
14
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职称材料
2
EB病毒潜伏膜蛋白1通过结合TRAFs调控NF-κB
王承兴
李晓艳
顾焕华
邓锡云
曹亚
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001
3
下载PDF
职称材料
3
鼻咽癌中EB病毒LMP1激活TRAFs的初步研究
王承兴
李晓艳
顾焕华
邓锡云
曹亚
《中国病毒学》
CSCD
2001
4
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职称材料
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