鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2细胞蛋白质的拉曼光谱初步分析

目的以放射敏感性不同的鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2为研究对象,分析经不同剂量X射线照射后鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2蛋白质的拉曼光谱。比较不同剂量X射线对两种鼻咽癌细胞株蛋白质的影响。方法应用细胞集落实验分析CNE-1和CNE-2细胞的放射敏感性;激光共聚焦显微拉曼光谱仪检测分析射线照射后CNE-1和CNE-2细胞蛋白质的变化。结果 CNE-1细胞的放射抗性(存活分数SF2)是CNE-2细胞的1.43倍。拉曼光谱技术分析结果表明,两种细胞株蛋白质的拉曼光谱谱峰基本一致,在归属为L-苯丙氨酸的952cm-1位置,经照射CNE-1和CNE-2细胞株谱峰强度不同;两种细胞株的L-苯丙氨酸在照射后72h的拉曼谱峰强度显著增强,提示此时L-苯丙氨酸的含量有所增加。结论CNE-1和CNE-2细胞放射敏感性存在着差异;探寻放射敏感性的特征拉曼标志,将可作为研究肿瘤放射敏感性预测的手段之一。

双靶向性小分子酪氨酸激酶抑制剂ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2的放射增敏作用

目的研究ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2放射增敏作用。方法采用MTT法测定ZD6474的半数抑制浓度（50％inhibition concentration，IC50），克隆形成实验计算细胞存活率，拟合生存曲线计算放射生物学参数，流式细胞仪检测ZD6474联合放疗的凋亡率及细胞周期分布。结果单纯用药组，CNE2细胞的存活率随ZD6474浓度的增加而降低，其IC50约为2．15μmol·L^-1。ZD6474作用CNE2细胞24h后均见到放射增敏作用，增敏比为1．535±0．134。ZD6474或照射均可增加凋亡率，减少S期细胞比例及增加G2／M期细胞比例（P〈0．01）。结论ZD6474联合照射应用可提高cNE2细胞的放射敏感性并阻碍细胞增殖、促进凋亡和干扰细胞周期分布。ZD6474有望成为EGFR高表达CNE2细胞的放射增敏剂。

盐霉素对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响

目的:体外实验研究盐霉素对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响。方法:通过CCK-8法检测盐霉素作用后鼻咽癌CNE-2细胞的增殖情况。利用克隆集落形成实验观察鼻咽癌细胞成活情况,单击多靶模型拟合剂量存活曲线,计算放射增敏指数(SER);Chou-Talalay数学模型绘制联合指数(CI)曲线,判断盐霉素和放射的作用关系。利用γ-H2AX焦点形成检测DNA分子损伤情况。结果:盐霉素能够抑制鼻咽癌细胞的增殖,并且具有明显的时间和剂量依赖性;盐霉素作用鼻咽癌细胞的IC50值在24 h时为17.81μmol/L,48 h时为3.98μmol/L。根据单击多靶模型拟合细胞的存活曲线,可知在鼻咽癌细胞CNE-2中盐霉素浓度为0.1μmol/L和0.5μmol/L时SER分别为1.19和1.21,均大于1.0,表明盐霉素对鼻咽癌细胞具有明显的放射增敏作用。制作联合指数(CI)曲线,可知在盐霉素浓度为0.1μmol/L时,放射剂量为2 Gy时,CI值≈1,盐霉素和放射对CNE-2的作用接近相加作用,放射剂量为4、6、8 Gy时,CI值均<1,二者为协同作用;在盐霉素浓度为0.5μmol/L时,放射剂量为2、4、6、8 Gy时,CI值均<1,二者均为协同作用。相对于照射组,盐霉素+照射组能增加DNA损伤数目。结论:盐霉素能提高鼻咽癌细胞的放射敏感性,为一种潜在的放射增敏药物。

甘氨双唑钠下调X射线照射诱导鼻咽癌细胞hMSH2的表达

目的：通过甘氨双唑钠（CMNa）对X 射线照射诱导鼻咽癌CNE-1 细胞错配修复基因hMSH2 表达的影响,探讨CMNa放射增敏的分子机制.方法：应用逆转录酶PCR（RT-PCR）和免疫印迹方法,检测空白组（未照射）、对照组（未加入CMNa进行照射）和实验组（加入1 mmol/l CMNa,每次加入60 min后进行照射）细胞中hMSH2 基因mRNA 及蛋白表达.结果：对照组细胞照射后hMSH2 mRNA 和蛋白表达量逐渐增高,且均高于基础表达量（0.11±0.03,10.27±3.96,P〈0.05）.实验组细胞在照射终止后第1 周hMSH2 mRNA和蛋白表达量最高,以后成逐渐降低,且在照射终止后第2~4 周mRNA（0.19±0.07,0.14±0.05,0.06±0.02）和蛋白表达水平（ 12.81±5.24,11.37±4.63,8.76±4.29） 均显著低于对照组（P〈0.05）.结论：CMNa 可以下调X 射线照射诱导鼻咽癌细胞hMSH2 的表达水平,抑制放射损伤后肿瘤细胞DNA 修复,这可能是肿瘤放疗敏感性增高的原因之一.

盐霉素增加鼻咽癌CNE-2细胞放疗敏感性的实验研究

目的:探讨盐霉素(Sal)对鼻咽癌CNE-2细胞的放疗增敏作用及其可能的机制。方法:CCK8测定不同浓度盐霉素、不同剂量放疗及联合应用对CNE-2细胞增殖的抑制作用;平板克隆实验观察盐霉素联合放疗后细胞的克隆形成率;Hoechst33258染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期的变化情况。结果:CCK8结果显示,盐霉素和放疗对鼻咽癌CNE-2细胞的生长有显著的抑制作用,呈浓度和剂量依赖性,且联合组抑制作用强于单纯药物组或放疗组。平板克隆实验显示盐霉素联合放疗后能显著降低细胞的克隆形成率;Hoechst33258染色显示盐霉素联合放疗治疗后细胞凋亡现象更明显;细胞流式术检测显示联合组较单纯药物组或放疗组凋亡率增加,盐霉素对放疗具有增敏作用。药物组和放疗组均能使G_2/M期细胞比例增加,两者联合效果更明显。结论:盐霉素能增加人鼻咽癌CNE-2细胞的放疗敏感性,其作用机制可能与周期阻滞及其凋亡诱导相关。