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抑制lncRNA TUG1下调核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1炎症小体在延缓阿尔茨海默病进展的作用 被引量:1
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作者 马婷婷 陈建红 +1 位作者 刘爱翠 李海宁 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第1期32-42,共11页
目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎症小体在缓解阿尔茨海默病进展中的作用。方法选取9~10周龄遗传背景为C57/BL6的野生型小鼠(WT组,10只)或淀粉样前体蛋白(APP)/早... 目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎症小体在缓解阿尔茨海默病进展中的作用。方法选取9~10周龄遗传背景为C57/BL6的野生型小鼠(WT组,10只)或淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)转基因小鼠(30只)。APP/PS1转基因小鼠随机分为模型(model)组,模型+敲低lncRNA TUG1组[model+lncRNA TUG1短发夹RNA(shRNA)组]和model+shRNA非靶标(NT)组,每组10只。分别采集12周龄第1天(3月龄)和32周龄第1天(8月龄)小鼠外周血和脑皮质组织,并分离皮质中的原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞,每个时间点每组5只小鼠。Real-time PCR分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)mRNA的水平,以及原代星形胶质细胞中补体蛋白C1r和C1s mRNA的水平。ELISA法测定其外周血浆中MIF含量。对3月龄和8月龄小鼠脑皮质原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞共培养。CCK-8法测定上述2种细胞的增殖能力。Western blotting分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织中MIF、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1及NLRP3蛋白的表达水平。采用免疫荧光染色法测定8月龄各分组小鼠脑皮质组织中β淀粉样蛋白(Aβ)表达。结果3月龄和8月龄时,与WT组小鼠相比,model组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF相对表达水平显著上调,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF的相对表达水平显著降低,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力降低(P<0.05)。与WT组相比,model组小鼠外周血浆中MIF含量显著升高;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1以及NLRP3的蛋白表达水平显著升高;Aβ免疫荧光强度明显增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠外周血浆中MIF含量显著降低;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)和NLRP1的蛋白表达水平显著降低,Aβ免疫荧光强度明显降低(P<0.05),而NLRP3蛋白质的表达水平无明显变化(P>0.05)。与model组相比,model+shRNA NT组小鼠上述所有检测指标差异均无显著性(P>0.05)。结论APP/PS1转基因小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF因子表达上调与脑皮质内NLRP1炎症小体激活成正相关,敲低lncRNA TUG1可缓解阿尔茨海默病的进展。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 长链非编码RNA 牛磺酸上调基因1 巨噬细胞移动抑制因子 核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1 免疫印迹法 小鼠
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IN VITRO AND IN VIVO CHEMOTACTIC EFFECT OF MIP-1a GENE TRANSFECTED TUMOR VACCINE ON IMMUNE EFFECTOR CELLS 被引量:1
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作者 陈国友 曹雪涛 +2 位作者 雷虹 何龙 周正芳 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期13-17,共5页
Vaccination with chemokine genetransfected tumor cells may be a new apporach to cancer treatment. Macrohage inflammatory protein1α (MIP1α) is a new type of chemokines which has chemotactic activity on effector cells... Vaccination with chemokine genetransfected tumor cells may be a new apporach to cancer treatment. Macrohage inflammatory protein1α (MIP1α) is a new type of chemokines which has chemotactic activity on effector cells. In the present study, the B16 melanoma cells were transfected with recombinant adenovirus harboring murine MIP1α gene. The biological characteristics of the MIP1α gene transfected B16 melanoma cells were investigated. The level of MIP1α in the supernatant of genetransfected melanoma cells was 368±24 ng/ml/106/24hr. This supernatant showed strong chematactic activity for NK cells, CD4+ T cells, CD8+ T cells or the freshly isolated peritoneal macrophages. Though the in vitro growth were not altered, the tumorigenicity of the genetransfected B16 melanoma cells decreased signicantly. The infiltration of inflammatory cells into the tumor mass formed by MIP1α genetransfected B16 cells were much more obvious than that by wildtype B16 cells or B16 cells transfected with the control gene. However, the survival time of the mice bearing B16 melanoma cells transfected with MIP1α gene was not prolonged and the NK, CTL activity remianed unchanged. We suggested that the in vivo phenomenon may be related to the high toxicity of the MIP1 α as a strong nonspecific inflammatory mediator. 展开更多
关键词 macrophage i nflammatory protein1α gene transfer Cancer vaccine Effector cell Chemotaxis.
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发育型内皮基因座-1作用下氧化型低密度脂蛋白对巨噬细胞分泌TNF-α、MIP-1α及MIP-2的影响
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作者 路艳林 李方琴 +6 位作者 周明 彭进 万昌武 梁静伟 陈灿 王杰 夏冰 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第8期888-894,共7页
目的探讨发育型内皮基因座-1(DEL-1)作用下氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对巨噬细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)表达的影响。方法体外培养人单核-巨噬细胞系THP-1细胞株至对数生长... 目的探讨发育型内皮基因座-1(DEL-1)作用下氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对巨噬细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)表达的影响。方法体外培养人单核-巨噬细胞系THP-1细胞株至对数生长期,分为佛波脂(PMA)组(PMA诱导为贴壁的巨噬细胞)、OX-LDL组(OX-LDL诱导为泡沫细胞)、si-NC组(50 nmol/L siRNA-NC的小干扰转染细胞)及小干扰RNA-DEL-1(siRNA-DEL-1)组(50 nmol/L siRNA-DEL-1转染细胞),采用油红O染色鉴定泡沫细模型、并检测各组细胞中脂质积累,采用免疫荧光技术检测各组细胞中DEL-1的表达,采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测各组细胞中DEL-1、MIP-1α、MIP-2及TNF-α信使RNA(mRNA)和蛋白的表达;采用Pearson相关系数分析DEL-1蛋白表达与上述炎性因子的相关性。结果油红O染色结果显示,靶向敲低DEL-1泡沫细胞胞质内脂质积累减少;免疫荧光、Western blot及RT-PCR结果显示,OX-LDL组、siRNA-NC组细胞中DEL-1及下游炎性因子MIP-1α、MIP-2及TNF-α的蛋白及mRNA表达较PMA组上调(P<0.05),siRNADEL-1组细胞中上述因子表达较OX-LDL组及siRNANC组下调(P<0.05)。结论DEL-1介导了OX-LDL源性泡沫细胞分泌MIP-1α、MIP-2及TNF-α,可能参与了动脉粥样硬化(AS)的病变过程。 展开更多
关键词 泡沫细胞 动脉粥样硬化 肿瘤坏死因子α 发育型内皮基因座-1基因 巨噬细胞炎性蛋白1Α 巨噬细胞炎性蛋白2
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大鼠脊髓损伤后单核细胞趋化蛋白-1、巨噬细胞炎症蛋白-2α基因表达的变化 被引量:14
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作者 陈宣维 贾连顺 +2 位作者 孙海燕 桂斌捷 陈长青 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第1期77-79,共3页
目的 :探讨大鼠脊髓损伤后单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)、巨噬细胞炎症蛋白 1α (MIP 1α)mRNA表达的变化规律。方法 :SD大鼠 42只 ,随机分为 7组 ,采用改良Allen’s脊髓损伤打击模型 ,以逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)法测定伤段脊髓MC... 目的 :探讨大鼠脊髓损伤后单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)、巨噬细胞炎症蛋白 1α (MIP 1α)mRNA表达的变化规律。方法 :SD大鼠 42只 ,随机分为 7组 ,采用改良Allen’s脊髓损伤打击模型 ,以逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)法测定伤段脊髓MCP 1、MIP 1αmRNA表达情况。结果 :正常脊髓组织内存在MCP 1、MIP 1αmR NA的表达 ,脊髓损伤后MCP 1、MIP 1αmRNA表达逐渐增强 ,MCP 1在伤后 2 4h达到高峰 ,MIP 1α伤后 6h达到高峰。结论 :MCP 1、MIP 1α存在于正常的脊髓组织内 ,脊髓损伤后MCP 1、MIP 1α表达迅速增强 ,提示参与了继发性脊髓损伤过程 ,并可能是损伤因素。 展开更多
关键词 脊髓损伤 单核细胞趋化蛋白-1 巨噬细胞炎症蛋白-1Α 基因表达 聚合酶链式反应 大鼠
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单核细胞趋化蛋白1反义寡核苷酸抑制大鼠腹主动脉瘤的形成 被引量:1
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作者 杨军 胡新华 张强 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2004年第2期131-134,共4页
为了观察单核细胞趋化蛋白 1对腹主动脉瘤形成的影响 ,建立大鼠腹主动脉瘤模型 ,局部转染单核细胞趋化蛋白 1基因的反义寡核苷酸。结果表明 :动脉灌注 3d ,苏木素—伊红染色即可见明显的炎性细胞浸润 ,逆转录聚合酶链反应提示单核细胞... 为了观察单核细胞趋化蛋白 1对腹主动脉瘤形成的影响 ,建立大鼠腹主动脉瘤模型 ,局部转染单核细胞趋化蛋白 1基因的反义寡核苷酸。结果表明 :动脉灌注 3d ,苏木素—伊红染色即可见明显的炎性细胞浸润 ,逆转录聚合酶链反应提示单核细胞趋化蛋白 1的mRNA表达在灌注 14d达高峰 ,蛋白印迹及免疫组织化学染色提示蛋白产物均在 14d达到高峰 ,并且与动脉瘤的形成呈平行关系。反义寡核苷酸可以抑制单核细胞趋化蛋白 1基因的mRNA及蛋白产物表达 (P <0 .0 1) ,延缓腹主动脉瘤形成 ,抑制率为 92 %~ 12 5 % ,并存在一定的量效关系。本研究提示单核细胞趋化蛋白 1参与腹主动脉瘤的形成 ,反义技术可以减少单核巨噬细胞浸润并抑制腹主动脉瘤的形成和发展。 展开更多
关键词 外科学 单核细胞趋化蛋白1能抑制腹主动脉瘤 基因转染 反义寡核苷酸 巨噬细胞 动物模型
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痤疮丙酸杆菌诱导人单核细胞iNOS、NO及Nramp1表达的研究 被引量:1
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作者 高剑 齐显龙 +2 位作者 孙东杰 刘玲 高天文 《中国麻风皮肤病杂志》 2007年第1期15-18,共4页
目的:观察人源性单核细胞系THP-1在痤疮丙酸杆菌(P.acnes)活菌刺激后,不同时段诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(Nramp1)的表达水平和细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量,初步探讨天然免疫过程中单... 目的:观察人源性单核细胞系THP-1在痤疮丙酸杆菌(P.acnes)活菌刺激后,不同时段诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(Nramp1)的表达水平和细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量,初步探讨天然免疫过程中单核-巨噬细胞反应氮中间产物(RNI)系统对PP.acnes感染的反应机制。方法:使用实时荧光定量PCR技术检测iNOS、Nramp1表达量,Griess法检测培养液上清NO含量。结果:P.acnes活菌可以有效诱导人源性单核细胞系THP-1 iNOS、NO和Nramp1的显著表达,表达量在刺激后6~24h达到高峰。结论:天然免疫中的RNI系统在P.acnes感染的初期即参加免疫反应,同时Nramp1也开始表达,对RNI系统起到辅助作用。 展开更多
关键词 痤疮丙酸杆菌 单核细胞 诱导型一氧化氮合成酶 一氧化氮 NRAMP 1基因
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山羊天然抗性Nramp1基因荧光定量PCR方法的建立及组织表达分布研究
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作者 刘海燕 侯巍 +1 位作者 张安云 杨发龙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期99-102,285,共5页
为了研究拟建立山羊不同组织中巨噬细胞蛋白1(Natural resistance associated macrophage protein,Nramp 1)基因荧光定量PCR方法,并应用该方法检测Nramp 1基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、脑组织、肠道、骨髓、淋巴结... 为了研究拟建立山羊不同组织中巨噬细胞蛋白1(Natural resistance associated macrophage protein,Nramp 1)基因荧光定量PCR方法,并应用该方法检测Nramp 1基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、脑组织、肠道、骨髓、淋巴结以及肌肉等组织器官表达分布情况。结果表明:试验成功建立山羊Nramp 1基因的荧光定量PCR方法,该方法的扩增效率为101.80%,相对定量标准曲线的Ct值线性范围为16.03~33.45,相关系数(r)为0.999。Nramp 1基因在心脏中的表达量最低,在脾脏中的相对表达量最高,是心脏的50倍;在肺脏中的表达量次之,是心脏的32倍;在其他组织器官中的表达量很少,是心脏的2~5倍。 展开更多
关键词 山羊 巨噬细胞蛋白1(Nramp 1)基因 荧光定量PCR 组织表达 分布
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新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织中趋化因子gro、MIP1-βmRNA的表达及意义
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作者 邓美玉 王航雁 +1 位作者 张成岗 刘勇谋 《中国儿童保健杂志》 CAS 2003年第2期111-113,共3页
【目的】 观察新生鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)后脑组织中趋化因子生长相关基因 (gro)、巨噬细胞炎性蛋白 1 β(MIP1 β)mRNA表达的变化与炎症细胞反应的关系。  【方法】 采用 7d龄SD大鼠缺氧缺血性脑损伤模型 ,用逆转录 聚合酶链反... 【目的】 观察新生鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)后脑组织中趋化因子生长相关基因 (gro)、巨噬细胞炎性蛋白 1 β(MIP1 β)mRNA表达的变化与炎症细胞反应的关系。  【方法】 采用 7d龄SD大鼠缺氧缺血性脑损伤模型 ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法 ,动态观察脑组织中趋化因子gro、MIP1 βmRNA水平变化 ,同时制备石蜡切片H&E染色观察中性粒细胞、淋巴细胞反应 ,研究二者在时间上的关系。 【结果】 α 趋化因子 gromRNA的诱导先于缺血区中性粒细胞的浸润 ,β 趋化因子MIP1 βmRNA的表达先于淋巴细胞等的出现。  【结论】 趋化因子在HIBD免疫炎症细胞反应的激活过程中可能起重要作用。 展开更多
关键词 生长相关基因 巨噬细胞炎性蛋白1 缺氧缺血性脑损伤
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滇陆猪Nramp1基因多态性对其在组织中表达的影响 被引量:3
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作者 张斌 韩敏 +5 位作者 相德才 刘韶娜 沙茜 张桂生 赵智勇 赵彦光 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期202-208,共7页
【目的】明确自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因(Nramp1)多态性对其在滇陆猪群体各组织中表达的影响,从分子遗传学角度阐述滇陆猪不同基因型个体对疫病免疫的遗传差异,为其抗病育种选育提供参考依据。【方法】采用PCR对27头滇陆猪Nramp1基... 【目的】明确自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因(Nramp1)多态性对其在滇陆猪群体各组织中表达的影响,从分子遗传学角度阐述滇陆猪不同基因型个体对疫病免疫的遗传差异,为其抗病育种选育提供参考依据。【方法】采用PCR对27头滇陆猪Nramp1基因进行扩增,以DNASTAR 5.0进行序列比对分析及多态性(SNP)位点检测;同时利用实时荧光定量PCR检测Nramp1基因在滇陆猪各组织中的相对表达量,并运用SPSS 19.0分析Nramp1基因多态性对其在滇陆猪群体各组织中表达的影响。【结果】在滇陆猪Nramp1基因第5外显子、第5内含子和第6外显子上分别发现SNP1(T→C)、SNP2(A→G)和SNP3(G→A)等3个SNPs位点,都只存在2种基因型,且SNP1位点和SNP3位点在试验猪群体中属于低度多态[多态信息含量(PIC)/杂合度(He)<0.25)],SNP2位点属于中度多态(0.25肝脏>脾脏>心脏;此外,Nramp1基因在不同基因型滇陆猪群体中表现出的组织差异表达也不同,尤其是Nramp1基因在SNP2位点纯合群体肝脏中的相对表达量显著低于在杂合群体肝脏中的相对表达量,说明Nramp1基因多态性变异对其在滇陆猪组织中的表达有显著影响。【结论】Nramp1基因SNP位点变异能影响Nramp1基因在滇陆猪各组织中的表达变化,从而影响机体的免疫应答反应,其中SNP2位点可作为滇陆猪抗病育种的分子标记。 展开更多
关键词 滇陆猪 自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因(Nramp1) 多态性位点(SNPs) 基因型 组织差异表达
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硒结合蛋白1基因沉默对巨噬细胞硒蛋白表达水平的影响
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作者 贾义 代杰 +2 位作者 杨洁 张亮亮 曾柱 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第10期1140-1144,共5页
目的研究硒结合蛋白1(SBP1)对巨噬细胞中硒蛋白表达水平的影响。方法用50μg/L佛波酯(PMA)诱导单核细胞株THP-1培养48 h分化为M0型巨噬细胞,设置空白对照组(C组,含转染试剂)、阴性对照组(NC组,含转染试剂和阴性对照引物)及沉默组(Si组,... 目的研究硒结合蛋白1(SBP1)对巨噬细胞中硒蛋白表达水平的影响。方法用50μg/L佛波酯(PMA)诱导单核细胞株THP-1培养48 h分化为M0型巨噬细胞,设置空白对照组(C组,含转染试剂)、阴性对照组(NC组,含转染试剂和阴性对照引物)及沉默组(Si组,含转染试剂和SBP1 siRNA引物);细胞转染24 h后提取总RNA、48 h后提取总蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测SBP1和硒蛋白基因SEPHS2、SELENOH、TXNRD3、GPX1、SELENOK、SELENOS、MSRB1、SELENOT、SELENOW及SELENOV mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测SBP1蛋白表达。结果THP-1细胞经PMA诱导培养48 h后获得M0型巨噬细胞,siRNA转染后,与对照组相比,SBP1 mRNA及蛋白表达水平分别下调76%(P<0.001)和50%(P<0.05);SBP 1基因沉默后的巨噬细胞中,硒蛋白SEPHS2、SELENOH、TXNRD3、GPX1、SELENOK和SELENOS mRNA表达上调(P<0.001),硒蛋白MSRB1、SELENOT和SELENOW mRNA表达下调(P<0.01);硒蛋白SELENOV mRNA表达不变。结论SBP 1基因沉默可以调节巨噬细胞中硒蛋白的表达。 展开更多
关键词 巨噬细胞 硒结合蛋白1 基因沉默 硒蛋白 谷胱甘肽过氧化物酶1
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自然抗性相关巨噬细胞蛋白1基因与云南汉族人肺结核易感性的相关性研究
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作者 高学祯 孙凯琳 +2 位作者 陆霓虹 沈莉 王毅鹏 《蚌埠医学院学报》 CAS 2019年第10期1301-1304,共4页
目的:探究自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(NRAMP1)基因D543N、INT4位点多态性与肺结核易感的相关性。方法:采用病例-对照研究,挑选122例痰涂片阳性的云南汉族活动性肺结核病人为病例组,另选同期101名与病例组民族、年龄、性别相匹配的健康... 目的:探究自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(NRAMP1)基因D543N、INT4位点多态性与肺结核易感的相关性。方法:采用病例-对照研究,挑选122例痰涂片阳性的云南汉族活动性肺结核病人为病例组,另选同期101名与病例组民族、年龄、性别相匹配的健康体检者为对照组。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对2组入选者NRAMP1基因D543N、INT4位点多态性进行分型。结果:INT4位点野生纯合子(G/G)、杂合子(G/C)、突变纯合子(C/C)在病例组和对照组的分布频率分别为66.4%、32.0%、1.6%和86.1%、12.9%、1.0%,2组差异有统计学意义(P<0.01),其中杂合型(G/C)携带者肺结核的患病风险为野生纯合型(G/G)的3.22倍(95%CI:1.61~6.47)。而D543N位点野生纯合子(G/G)、杂合子(G/A)、突变纯合子(A/A)在病例组和对照组的分布频率分别为61.5%、36.9%、1.6%和70.3%、29.7%、0%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:基因INT4位点多态性可能影响云南汉族人群对肺结核的易感性。 展开更多
关键词 肺结核 自然抗性相关巨噬细胞蛋白1基因 多态性
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柯萨奇B3病毒性心肌炎的免疫抗炎症研究 被引量:4
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作者 蔡悦 康永波 张宏 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第2期174-178,188,共6页
病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)属感染性心肌疾病,可由多种病毒诱导,其中以柯萨奇B组3型病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)最为常见。由CVB3引起的VMC典型表现为心肌细胞炎症反应所导致的心肌损伤和坏死,并最终发展为慢性炎症或扩张... 病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)属感染性心肌疾病,可由多种病毒诱导,其中以柯萨奇B组3型病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)最为常见。由CVB3引起的VMC典型表现为心肌细胞炎症反应所导致的心肌损伤和坏死,并最终发展为慢性炎症或扩张性心肌病,在人类有很高的发病率和致死率。目前,柯萨奇B3病毒性心肌炎抗炎症治疗措施仍不完善,且相关免疫抗炎症治疗机理未完全阐明,因此探索其免疫抗炎症治疗机理和作用可能成为治疗柯萨奇B3病毒性心肌炎的重要靶点。现主要从Wnt11基因、巨噬细胞、半乳糖凝集素3、锌指抗病毒蛋白、蜂毒素和丙戊酸6个免疫抗炎症相关方面,对柯萨奇B3病毒性心肌炎的最新免疫抗炎症研究予以综述。 展开更多
关键词 柯萨奇B3病毒性心肌炎 Wnt11基因 巨噬细胞 半乳糖凝集素3(Gal-3) 锌指抗病毒蛋白(ZAP) 蜂毒素 丙戊酸(VPA)
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NRAMP1基因INT4和3’UTR位点多态性与肺结核易感性的研究 被引量:19
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作者 安雅臣 冯福民 +7 位作者 袁聚祥 纪春梅 王育华 郭梅 邓小娟 高宝霞 王东 刘茜 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期37-40,共4页
目的 探讨人类自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1(NRAMP1)基因INT4和3'UTR位点多态性与中国北方汉族成人肺结核发病的关系.方法 采用1:1配对的病例对照研究设计,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法检测NRAMP1基因中INT4和3'UT... 目的 探讨人类自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1(NRAMP1)基因INT4和3'UTR位点多态性与中国北方汉族成人肺结核发病的关系.方法 采用1:1配对的病例对照研究设计,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法检测NRAMP1基因中INT4和3'UTR两个多态性位点,对与肺结核相关的危险因素进行问卷调查,进行单因素和多因素条件logistic回归分析,同时对基因型与肺结核病变的性质和程度进行研究.结果 对124对研究对象进行了INT4和3'UTR两个多态性位点的基因分型,3'UTR TGTG+/del基因型病例组频率显著高于对照组,粗OR值(95%CI)为2.923(1.557~5.487).病例组和对照组INT4各基因型频率比较差异均无统计学意义.对17个环境危险因素进行了单因素分析,在多因素分析中调整卡痕、体重指数、人均居住面积、家族史4个因素后,3'UTR TGTG+/del基因型仍与肺结核显著相关,调整OR值(95%CI)为2.955(1.369~6.381).在INT4不同基因型中,病例组和对照组肺结核病变性质差异具有统计学意义(x2=9.634,P<0.05).结论 NRAMP1基因3'UTR位点多态性可能是中国北方汉族成人肺结核的易感因素,而INT4多态性可能与肺结核的病变性质有关系. 展开更多
关键词 肺结核 自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因 基因多态性 病例对照研究
原文传递
小鼠FGFR1/MIP3a-Fc融合基因真核表达载体的构建及表达 被引量:1
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作者 黄用豪 和永壮 +5 位作者 张晓钿 方丹丹 陈艳 刘思汝 许仙花 郑少江 《中国热带医学》 CAS 2017年第4期340-343,共4页
目的构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达。方法设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a基因片段,用内切酶消化后插入pc DNA3.... 目的构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达。方法设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a基因片段,用内切酶消化后插入pc DNA3.1(+)/Fc(Mouse Ig G2a)质粒中,构建FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒;经PCR鉴定、酶切鉴定以及测序鉴定后,将该融合基因表达质粒瞬时转染293T细胞,用ELISA法检测其在293T细胞的表达。结果经PCR、酶切鉴定以及测序证实,FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功;ELISA检测FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒能够在293T细胞中表达。结论 FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功,该质粒能够在293T细胞中表达。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体1 巨噬细胞炎性蛋白3a FC融合蛋白 真核表达质粒 基因表达
原文传递
人巨噬细胞炎性蛋白-1β基因修饰肿瘤细胞的体内致瘤性和瘤苗效果
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作者 罗小玲 谢裕安 +2 位作者 匡志鹏 吴继宁 梁安民 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期97-102,共6页
目的探讨人巨噬细胞炎性蛋白-1β(hMIP-1β)基因修饰小鼠结肠腺癌CT26细胞的致瘤性和瘤苗免疫效果。方法通过重组腺病毒载体介导,将hMIP-1β基因导入CT26细胞中,X-gal染色法检测基因转染效率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测h... 目的探讨人巨噬细胞炎性蛋白-1β(hMIP-1β)基因修饰小鼠结肠腺癌CT26细胞的致瘤性和瘤苗免疫效果。方法通过重组腺病毒载体介导,将hMIP-1β基因导入CT26细胞中,X-gal染色法检测基因转染效率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测hMIP-1β基因修饰CT26细胞培养上清中hMIP-1β的含量;采用Boyden趋化小室法检测培养上清对CD4^+细胞、CD8^+T细胞、NK细胞和未成熟树突状细胞(imDC)的趋化作用。BALB/c小鼠皮下接种hMIP-1β基因修饰的CT26细胞,观察其体内致瘤性的改变和对免疫细胞的趋化作用;制备hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗并免疫BALB/c小鼠,观察其诱导免疫细胞的杀伤活性和保护性免疫反应。结果腺病毒载体可介导hMIP-1β基因转染CT26细胞和表达,X-gal染色的阳性率可达95.0%以上。在培养上清中hMIP-1β水平为980pg/ml细胞,并对CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、NK细胞和imDC有显著的趋化作用,与转染对照基因LacZ的CT26细胞及野生型CT26细胞比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。体内致瘤实验显示,hMIP-1β基因修饰的T26细胞皮下接种后,成瘤率降低,肿瘤生长速度减慢,肿瘤内可见明显坏死灶,坏死灶内和周围可见较多淋巴细胞浸润。hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗免疫小鼠能有效诱导肿瘤特异性CTL活性和非特异性NK活性,产生明显的免疫保护作用,可抵抗肿瘤细胞的再攻击。结论hMIP-1β基因修饰的CT26细胞致瘤性显著下降,其瘤苗可诱导强烈的抗肿瘤免疫反应,提示hMIP-1β基因修饰瘤苗有望成为更有效的抗肿瘤免疫治疗手段。 展开更多
关键词 人巨噬细胞炎性蛋白-1β 基因修饰 结肠腺癌CT26细胞 抗肿瘤免疫 致瘤性
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自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因多态性与结核病易感性的关系研究进展 被引量:2
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作者 许洪 张宏其 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期1964-1967,共4页
结核病是由结核分枝杆菌引起的感染性疾病。结核病的发生发展受多种因素影响,其中自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1(natural resistance-associated macrophage protein 1,NRAMP1)基因多态性与结核易感性密切相关。目前,自然抵抗相关巨噬细胞... 结核病是由结核分枝杆菌引起的感染性疾病。结核病的发生发展受多种因素影响,其中自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1(natural resistance-associated macrophage protein 1,NRAMP1)基因多态性与结核易感性密切相关。目前,自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因主要有4个单核苷酸位点多态性与结核病有关:5'(GT)n、INT4、D543N和3'UTR。本文就自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1基因与结核病的关系予以综述。 展开更多
关键词 自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1 结核 基因多态性 易感性
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NRAMP1基因多态性与云南汉族人群耐多药肺结核的关联 被引量:3
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作者 刘幸 欧阳兵 +2 位作者 杜映荣 陈洁 孙辉 《中国热带医学》 CAS 2020年第1期13-17,22,共6页
目的探讨云南地区汉族人群NRAMP1基因3′UTR位点单核苷酸多态性与耐多药肺结核发生的关系,并寻找基因型的影响因素。方法应用聚合酶链式反应检测NRAMP1基因3′UTR位点的多态性,比较感染组(耐多药肺结核患者)与对照组(健康体检人群)基因... 目的探讨云南地区汉族人群NRAMP1基因3′UTR位点单核苷酸多态性与耐多药肺结核发生的关系,并寻找基因型的影响因素。方法应用聚合酶链式反应检测NRAMP1基因3′UTR位点的多态性,比较感染组(耐多药肺结核患者)与对照组(健康体检人群)基因型的分布频率和等位基因的频率差异,并对感染组基因型的影响因素进行二分类logistic回归分析。结果300例感染组与300例对照组NRAMP1基因3′UTR位点的基因型TGTG+/+分布频率为60.7%/71.3%,基因型TGTG+/-分布频率为33.0%/24.7%,基因型TGTG-/-分布频率6.3%/4.0%,两组比较χ2=7.779,P=0.020。基因型TGTG+/-增加了耐多药肺结核的易感性(OR:1.573,95%CI:1.097~2.255),等位基因TGTG-亦增加了其的易感性(OR:1.516,95%CI:1.136~2.022)。在影响因素分析中,患者的依从性(OR=3.919,95%CI=1.071~14.343)、药物的不良反应(OR=0.212,95%CI=0.062~0.728)、合并结核性胸膜炎(OR=0.159,95%CI=0.049~0.523)是等位基因TGTG缺失的影响因素。结论云南汉族人群耐多药肺结核的发生与NRAMP1基因3′UTR位点的TGTG缺失有关,而TGTG缺失又与患者的依从性、药物不良反应、合并结核性胸膜炎有关。 展开更多
关键词 NRAMP1 基因多态性 结核病 多因素分析
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中国汉族人群肺结核易感基因的病例对照研究 被引量:15
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作者 刘玮 张翠英 +7 位作者 田磊 李春芝 吴晓明 赵秋敏 张泮河 杨淑梅 杨红 曹务春 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2003年第6期409-412,451,共5页
目的 :探讨VDR ,NRAMP1基因多态性与中国汉族人群肺结核发病间的关联。方法 :采用病例对照研究设计 ,用聚合酶链反应_限制性片段长度多态性分析 (PCR_RFLP)法检测VDR基因FoKⅠ和TaqⅠ位点 ,NRAMP1基因中INT4 ,D5 4 3N及 3'UTR位点... 目的 :探讨VDR ,NRAMP1基因多态性与中国汉族人群肺结核发病间的关联。方法 :采用病例对照研究设计 ,用聚合酶链反应_限制性片段长度多态性分析 (PCR_RFLP)法检测VDR基因FoKⅠ和TaqⅠ位点 ,NRAMP1基因中INT4 ,D5 4 3N及 3'UTR位点的基因型别 ,并对肺结核相关危险因素进行问卷调查 ,应用SPSS软件进行单因素和多因素非条件Logistic回归分析。结果 :2 0 0 1年 4月到 2 0 0 2年 6月 ,共有 110名肺结核病例 [平均年龄 (2 7.6 5± 12 .72 )岁 ]和 180名对照 [平均年龄 (2 7.2 6± 9.2 1)岁 ]纳入本研究 ,单因素分析表明病例组中FoKⅠ_ff,D5 4 3NG A及 3′UTRTGTG + del基因型频率显著高于对照组 ,OR值 (95 %CI)分别为 3.36 (1.4 3~ 7.89) ,2 .2 2 (1.0 3~ 4 .78)和 1.93(1.14~ 3.2 6 ) ,TaqⅠ与INT4位点各基因型在病例和对照中的分布无显著性差异。多因素分析中调整了接触史和卡介苗接种史两个因素后 ,FoKⅠ_ff,D5 4 3NG A及 3′UTRTGTG + del基因型仍与肺结核发病显著性相关 ,调整OR值 (95 %CI)分别为 3.15 (1.0 6~ 9.33) ,3.0 4 (1.12~ 8.2 7)和 2 .36 (1.2 0~ 4 .6 4 ) ,而TaqⅠ和INT4位点多态性与肺结核发病仍无显著关联。结论 :中国汉族人群VDR_FoKⅠ ,NRAMP1_D5 4 3N和NRAMP1_3′UTR位点多态性可? 展开更多
关键词 肺结核 维生素D受体基因 自然抗性相关巨噬细胞蛋白1基因 病例对照研究
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腺病毒转染黑色素瘤抗原基因3的树突状细胞疫苗抗胃癌的免疫效应 被引量:2
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作者 何宋兵 汪良 张雁云 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期330-334,共5页
目的研究趋化因子巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)动员的树突状细胞(DC),经黑色素瘤抗原基因3(MAGE-3)腺病毒转染后对胃癌细胞的免疫效应。方法615小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选得到B220^-CD11c^+细胞,加入细胞因子连续培养,检... 目的研究趋化因子巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)动员的树突状细胞(DC),经黑色素瘤抗原基因3(MAGE-3)腺病毒转染后对胃癌细胞的免疫效应。方法615小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选得到B220^-CD11c^+细胞,加入细胞因子连续培养,检测其细胞表面标志和混合淋巴细胞反应(MLR)。收集培养后的B220^-CD11c^+细胞,加入编码MAGE-3的重组腺病毒进行转染,制备表达肿瘤抗原的DC疫苗,以荷载小鼠前胃癌(MFC)全肿瘤细胞抗原制备的DC疫苗作为阳性对照。采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法,检测活化的T淋巴细胞在体外对MFC细胞的杀伤作用。采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测γ干扰素(INF-γ)的分泌情况。DC疫苗皮下注射MFC荷瘤小鼠,观察小鼠瘤体生长情况和存活时间。结果MIP-1α注射后,外周血中B220-CD11c^+细胞明显升高。新鲜分离的B220-CD11c^+细胞在体外经过细胞因子诱导分化后具有典型的DC表面标志,并在MLR中具有极强的刺激T淋巴细胞增殖的能力。腺病毒转染MAGE-3的DC激活的T淋巴细胞表现出对MFC细胞的特异性杀伤作用,产生高水平的INF-γ[(1460.00±16.82)pg/ml]。实验组荷瘤小鼠接受DC疫苗治疗后,肿瘤生长缓慢,观察至MFC细胞接种后的第27天,其肿瘤体积仅为(3.46±1.12)cm^3;实验组小鼠的肿瘤体积与对照组之间的差异有统计学意义(P〈0.01)。实验组小鼠存活时间明显延长,与对照组之间的差异有统计学意义(P〈0.01)。结论注射趋化因子MIP—1α可快速动员并诱导分化为成熟DC。肿瘤抗原基因MAGE-3经腺病毒转染制备的DC疫苗,在体外可以诱导出针对胃癌细胞的特异性杀伤作用,在体内对MFC荷瘤小鼠有明显的免疫治疗作用。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原基因3 树突状细胞 巨噬细胞炎症蛋白-1Α 胃肿瘤
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病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ对293T细胞APOBEC3G表达的影响 被引量:1
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作者 郑国霞 刘如锦 +4 位作者 齐燕 王小波 闫玉涛 谭晓华 杨磊 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期624-630,共7页
目的探讨病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(vMIP-Ⅱ)对载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)表达的影响及其机制。方法转染vMIP-Ⅱ质粒(vMIP-Ⅱ质粒组)、空质粒(空质粒组)至293T细胞。定量PCR和Western 印迹法分析转染vMIP-Ⅱ基因对2... 目的探讨病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(vMIP-Ⅱ)对载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)表达的影响及其机制。方法转染vMIP-Ⅱ质粒(vMIP-Ⅱ质粒组)、空质粒(空质粒组)至293T细胞。定量PCR和Western 印迹法分析转染vMIP-Ⅱ基因对293T细胞APOBEC3G表达的影响。空质粒组、vMIP-Ⅱ质粒组细胞分别加入1 000 IU/ml干扰素α(IFN-α),培养36 h后,Western印迹法检测空质粒组、vMIP-Ⅱ质粒组、空质粒+ IFN-α组、vMIP-Ⅱ质粒+ IFN-α组APOBEC3G的蛋白水平。对转染vMIP-Ⅱ质粒的293T细胞,分别用75 μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂AG490和20 μmol/LERK信号通路抑制剂U0126处理,24 h后收集细胞总蛋白,Western印迹法检测APOBEC3G蛋白水平。构建包含APOBEC3G启动子的荧光素酶报告基因重组质粒,启动子片段包括APOBEC3G全长启动子序列(POS)与长度1 560、960、720、480、420、360、330、240 bp序列及APOBEC3G启动子序列中不含调控元件的区域(NEG),将荧光素酶报告基因重组质粒和vMIP-Ⅱ质粒共转染293T细胞为实验组,以与空质粒共转染的293T细胞为对照,检测APOBEC3G启动子活性,分析vMIP-Ⅱ调控APOBEC3G转录活性的关键启动子作用区域。统计学比较采用t检验、单因素方差分析、LSD-t检验。结果 vMIP-Ⅱ转染组APOBEC3G mRNA、蛋白水平(2.500 ± 0.013、1.472 ± 0.013)均高于对照组(1、0.364 ± 0.030,t值分别为 6.22、6.54,均P < 0.05)。空质粒组、vMIP-Ⅱ质粒组、空质粒+ IFN-α组、vMIP-Ⅱ质粒+ IFN-α组APOBEC3G水平(分别为1、2.030 ± 0.108、2.700 ± 0.081、2.600 ± 0.099)差异有统计学意义(F = 67.026,P < 0.001),vMIP-Ⅱ质粒组与空质粒+ IFN-α组差异无统计学意义(t = 3.46,P > 0.05)。vMIP-Ⅱ质粒组、vMIP-Ⅱ质粒+ AG490组、vMIP-Ⅱ质粒+ U0126组APOBEC3G水平(0.617 ± 0.025、0.179 ± 0.061、0.359 ± 0.012)差异有统计学意义(F = 70.019,P < 0.001),后两组均低于vMIP-Ⅱ质粒组(t值分别为9.66、11.836,P < 0.01)。荧光素酶活性检测显示,转染了POS、1 560、960、720、480、420、360、330、240 bp及NEG序列的vMIP-Ⅱ质粒组启动子活性差异有统计学意义(F = 81.092,P < 0.001),从720 bp片段至480 bp片段,APOBEC3G启动子活性降低幅度巨大。结论 vMIP-Ⅱ上调APOBEC3G的表达,可能是通过JAK/STAT信号通路或作用于APOBEC3G转录活性的关键启动子区域。 展开更多
关键词 HIV-1 肉瘤 卡波西 萤光素酶类 病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ 抗HIV-1基因 载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽3G JAK-STAT信号通路
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