一测多评法同时测定土茯苓配方颗粒中5种成分的含量

目的 建立一测多评法同时测定土茯苓配方颗粒中5种化学成分的质量分数。方法 采用UPLC法,以乙腈-0.2%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为291 nm;流速为0.4 mL/min。以落新妇苷为内标物,分别建立其与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷的相对校正因子和相对保留值,并计算各成分的质量分数,同时与外标法测定结果对比,验证所建立方法的可行性和准确性。结果 土茯苓配方颗粒中5种成分在各自规定的质量浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.999),平均加样回收率范围为93.44%~106.45%,RSD范围为0.96%~2.00%。新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷的相对校正因子分别为0.988、0.869、0.965、0.946,相对保留时间分别为0.92、1.21、1.28、1.37,耐用性较好,4种成分的一测多评法与外标法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 建立的一测多评法准确稳定,可用于土茯苓配方颗粒中5种成分的含量测定。

土茯苓中8个成分的含量测定及化学计量学分析

目的 为土茯苓药材的质量控制提供依据。方法 采用超高效液相色谱法同时测定不同产地20批(编号S1~S20)土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇、异黄杞苷的含量。采用化学计量学方法对20批土茯苓样品进行评价,并筛选影响土茯苓质量的差异标志物。结果 所测8个成分在各自检测质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 6);精密度、重复性和稳定性(24 h)试验的RSD均小于2.00%(n=6);平均加样回收率为97.60%~106.40%,RSD均小于2.00%(n=6)。聚类分析结果显示,浙江产(S1~S5)和江西产(S6~S10)样品聚为一类,湖南产(S11~S15)样品聚为一类,云南产(S16~S20)样品聚为一类;主成分分析结果显示,前2个主成分可反映土茯苓中8个成分85.60%的信息量;偏最小二乘-判别分析结果显示,5-O-咖啡酰基莽草酸、落新妇苷、异落新妇苷和新落新妇苷的变量重要性投影值均大于1。结论 不同产地土茯苓中上述8个成分含量存在差异,5-O-咖啡酰基莽草酸、落新妇苷、异落新妇苷和新落新妇苷可能是影响土茯苓质量的差异标志物。

基于提取温度控制的土茯苓配方颗粒溶化性改善策略研究

目的通过降低提取温度改善土茯苓Smilacis Glabrae Rhizoma提取物及其配方颗粒的溶化性。方法分别采用回流提取、煮开后80℃水浴浸提、直接80℃水浴浸提、煮开后70℃水浴浸提、直接70℃水浴浸提5种方法制备土茯苓提取物并对各提取物的溶化性进行分析,同时考察5种提取方法对土茯苓提取物的特征图谱、多糖与淀粉含量、出膏率、落新妇苷含量及转移率的影响。结果上述5种方法制备的提取物中不溶物含量分别为34.93%、26.67%、24.48%、29.65%、4.03%,与回流提取相比其余4种提取方法均能改善土茯苓提取物的溶化性,其中直接70℃水浴浸提对溶化性改善最明显。不同提取方法制备的土茯苓提取物的特征图谱无明显差异,表明其质量稳定。相比于回流提取,直接70℃水浴浸提的土茯苓提取物的淀粉含量降低了11.74%;落新妇苷含量(38.6 mg/g)及其转移率最高(60.95%)。结论采用70℃水浴浸提法可显著改善土茯苓配方颗粒的溶化性。

基于响应面和G1-熵权法优选彝药痛风颗粒提取工艺及其药效评价

目的 优选彝药痛风颗粒(Yi Medicine Tongfeng Granules,YMTG)的提取工艺,并探索其对痛风性肾病的作用,为其新药的开发与利用提供科学依据。方法 采用主客观组合赋权和响应面法设计,以加水倍数、浸泡时间、提取时间、提取次数为考察因素,新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、虎杖苷、新落新妇苷、落新妇苷、异落新妇苷8种指标成分提取率及出膏率为评价指标,优选YMTG的最佳水提工艺,并以痛风性肾病模型进行药效评价。结果 优选YMTG最佳提取工艺为加12倍水、浸泡60 min、煎煮3次,每次煎煮80 min;药效结果表明,YMTG可降低痛风性肾病模型大鼠血液中尿酸质量浓度、增加尿酸排出量和尿酸清除率,降低血液中血清肌酐、尿素氮水平,减轻肾脏损伤。结论 优选的YMTG提取工艺稳定可行,其对痛风性肾病有良好的作用。

土茯苓解重金属铅毒性物质基础的初步研究

目的探究土茯苓解重金属铅毒性的活性物质。方法以"总提取物-有效萃取部位-有效部位及有效成分"顺序逐一追踪解毒活性成分的研究思路,以急/慢性铅致小鼠毒性为动物模型,以铅含量、生化指标及组织形态学检测结果为指标,确认土茯苓解铅毒的活性部位。依据文献及前期化学研究基础,采用高效液相色谱(HPLC)法对活性部位进行主要成分分析。结果急性铅中毒实验结果显示,与模型组相比,土茯苓总提物组和醋酸乙酯组小鼠血液、肝和肾脏中铅含量显著降低(P<0.05);血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量有所降低(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性有不同程度提高(P<0.05);小鼠肝和肾损伤程度均有改善。慢性铅中毒实验结果显示,与模型组相比,土茯苓总黄酮低、中、高剂量组小鼠血液、肝和肾脏铅含量均有下降(P<0.05),且呈剂量相关性;小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性和肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均有不同程度地降低(P<0.05),并以土茯苓总黄酮高剂量组最为显著;小鼠肝和肾损伤程度均有所改善,且土茯苓总黄酮高剂量组组织结构趋近正常。新落新妇苷、落新妇苷、花旗松素、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷6个黄酮类化合物为总黄酮部位的主要成分,占总黄酮的58.89%。结论土茯苓醋酸乙酯部位对铅致小鼠急性毒性有显著解毒作用,且醋酸乙酯部位优于总提物,提示醋酸乙酯部位为土茯苓解铅毒的有效萃取部位;土茯苓总黄酮具有较好的排铅作用,对铅诱导的肝、肾功能损伤具有一定的保护作用,且呈剂量相关性,提示总黄酮为土茯苓解重金属铅毒的活性部位。土茯苓总黄酮主要由新落新妇苷、落新妇苷、花旗松素、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷6个黄酮类化合物组成,提示上述化合物可能为土茯苓解铅毒的活性成分。

基于双波长融合HPLC图谱的银屑病外用方中7种活性成分定量分析

目的:测定银屑病外用方中7个主要活性成分(新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷、柠檬苦素)含量。方法:采用Waters Xbrige BEH C;色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,17%B;5~10 min,17%B→20%B;10~15 min,20%B;15~25 min,20%B→100%B),流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量5μL,检测波长为292 nm(0~19 min,新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷)、210 nm(19~25 min,柠檬苦素),使用MATLAB软件编程,对CSV格式数据进行双波长融合。结果:新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和柠檬苦素线性范围分别为39.06~1250μg·mL^(-1)(r=0.9999)、26.25~840μg·mL^(-1)(r=0.9997)、18.64~596.4μg·mL^(-1)(r=0.9998)、6.31~202μg·mL^(-1)(r=0.9996)、2.53~80.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)、1.33~42.6μg·mL^(-1)(r=0.9997)和5.08~162.4μg·mL^(-1)(r=0.9996),平均加样回收率(n=6)为96.1%~102.2%,RSD为0.48%~1.7%。银屑病外用方自制及医院提供的样品中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和柠檬苦素的含量分别为1.06、1.21、0.87、0.30、0.09、0.07、0.22 mg·mL^(-1)和0.35、0.32、0.17、0.08、0.04、0.03、0.21 mg·mL^(-1)。结论:该方法能够快速、准确地测定银屑病外用方中7个活性成分含量,可用于银屑病外用方的质量控制。

土茯苓黄酮类成分一测多评方法的建立及含量变化规律研究

目的建立土茯苓Smilax glabra中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的一测多评测定方法(QAMS)并研究不同生长年限土茯苓中各成分含量的动态变化规律。方法采用高效液相色谱法,以土茯苓中的落新妇苷为内参物,计算该成分与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算各指标成分的含量并与外标法的测定结果进行对比,考察方法的准确性和可行性。采用建立的QAMS法测定不同生长年限土茯苓中各指标成分的含量,研究其动态变化规律。结果共测定不同生长年限样品5批23份,各指标成分一测多评法与外标法计算结果偏差均小于1.0%。各指标成分含量与生长年限具有一定相关性,落新妇苷的含量与生长年限呈负相关,新落新妇苷、新异落新妇苷和异落新妇苷的含量与生长年限呈正相关,两者的变化趋势相反。结论建立的QAMS法准确、可靠,可用于土茯苓中5个成分的定量分析。生长年限对土茯苓中4种落新妇苷类成分含量均具一定影响。