40例肉碱缺乏症新生儿的生化和遗传学特征

目的:原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)是一种罕见的可致新生儿死亡的脂肪酸代谢紊乱性疾病。本研究对新生儿足跟血行串联质谱分析筛查出的肉碱缺乏儿,进一步行血肉碱水平分析及SLC22A5基因检测,为PCD的早期诊断提供依据,同时探索血肉碱水平与SLC22A5基因型的关系。方法:收集新生儿血串联质谱筛查游离肉碱(free carnitine,C0)值<10μmol/L的40例患儿为研究对象,用Sanger测序方法对PCD的致病基因SLC22A5基因进行检测,分析肉碱水平、基因检测结果及两者的关系。结果:共检出SLC22A5基因变异15种(42个),包括11种致病或可能致病变异和4种意义不明变异。发现c.288del G(p.G96fs X33),c.744745ins TCG(p.M258L259ins S),c.752A>G(p.Y251C),c.495C>A(p.R165E),c.1298T>C(p.M433T)5种新突变。在40例串联质谱初筛肉碱缺乏的患儿中,14例被确诊为PCD,包括SLC22A5基因纯合突变2例,复合杂合突变12例;14例检出1个SLC22A5基因突变;12例未检出SLC22A5基因突变。确诊为PCD的患儿初筛C0值为(4.95±1.62)μmol/L,复查C0值为(3.90±1.33)μmol/L;未检出突变的患儿初筛C0值为(7.04±2.05)μmol/L,复查C0值为(8.02±2.87)μmol/L,确诊为PCD的患儿与未检出突变患儿的初筛及复查C0值差异均有统计学意义(均P<0.05);检出截短突变的患儿与未检出截短突变的患儿初筛C0值差异有统计学意义(P=0.022)。结论:发现的5种新突变丰富了SLC22A5基因突变谱;新生儿足跟血串联质谱初筛C0值<5μmol/L与SLC22A5基因纯合或复合杂合突变型具有更强的相关性;具有截短突变的患儿较不含截短突变患儿的C0值可能更低。

河南省原发性肉碱缺乏症的家系基因研究

目的 探讨河南省原发性肉碱缺乏症的家系基因变异特点,为家系提供遗传疾病咨询,提高出生人口素质。方法用串联质谱技术检测新生儿血浆游离肉碱水平和多种酰基肉碱水平,对疑似PCD患者用二代测序技术检测SLC22A5基因,对确诊的PCD患儿、致病基因携带者以及家系成员进行基因变异位点分析。结果 PCD确诊5例,致病基因携带者2例。其中有2例母亲出现低血糖、饥饿不耐受、易疲劳等症状;有1例患儿姐弟有运动不耐受、饥饿不耐受等症状。其他无明显临床症状。家系基因检测7例,共有9种变异类型,错义变异6种,无义变异1种,剪接区变异2种。结论 应用串联质谱技术及二代测序技术对6个家系进行PCD诊断,明确了致病变异位点,可为PCD家系提供有效的遗传咨询。经左旋肉碱的补充得到良好的疗效。

海南省黎族新生儿原发性肉碱缺乏症筛查及基因情况分析

背景原发性肉碱缺乏症(PCD)被认为是一种潜在致死性疾病,肉碱转运蛋白功能缺陷会导致脂肪酸β氧化代谢受阻,如果没有及时补充肉碱,PCD患者在生命早期就会出现急性代谢失代偿,或晚期出现骨骼和心肌病或心律失常突然死亡。因此在新生儿期开展PCD筛查,对患儿早期治疗能防范急性能量代谢障碍危象或急性心力衰竭而猝死情况的发生,保证生活质量和生命安全。目的调查海南省黎族新生儿PCD的发病情况,并探究黎族人群PCD基因突变类型。方法借助海南省新生儿筛查网络平台,收集2016-08-01至2019-07-31在海南省出生的黎族新生儿22950例(出生3~28 d)。通过串联质谱技术筛查黎族新生儿游离肉碱(C0)及酰基肉碱(C2、C3、C16、C18等指标)。可疑患儿(C0<10.0μmol/L)需母婴同时召回,复查串联质谱检测,C0仍低者外送血标本进行SLC22A5基因测序。PCD基因确诊依据:检测到SLC22A5基因突变。结果22950例黎族新生儿初筛C0减低14例,初筛异常发生率为1/1639(14/22950),其中男7例(1/1710),女7例(1/1569);不同性别黎族新生儿PCD初筛异常发生率比较,差异无统计学意义(χ2=0.026,P=0.872)。经SLC22A5基因测序,10例黎族新生儿确诊为PCD,黎族新生儿PCD发生率为1/2295(10/22950),其中7例为杂合突变,3例为纯合突变;男5例(1/2394),女5例(1/2196);不同性别黎族新生儿PCD发生率比较,差异无统计学意义(χ2=0.019,P=0.892)。共检出8种基因突变类型:c.51C>G、c.760C>T、c.338G>A、c.428C>T、c.1340A>T、c.825G>A、c.4442C>T、c.1400C>G。结论海南省黎族新生儿PCD发生率较高(1/2295),基因突变类型较为丰富,以c.51C>G和c.760C>T基因突变较为常见。

石家庄地区新生儿原发性肉碱缺乏症串联质谱筛查结果分析

目的明确原发性肉碱缺乏症在石家庄地区新生儿中的患病率,进一步分析其基因突变情况。方法采用串联质谱技术对新生儿进行血游离肉碱及酰基肉碱检测,对疑似患儿进行肉碱转运蛋白基因突变检测。结果160061例新生儿中确诊17例,其中原发性肉碱缺乏症9例,患病率为1/17785;母源性肉碱缺乏症8例。9例原发性肉碱缺乏症患儿血游离肉碱初筛值为4.47(1.77~6.78)μmol/L,召回复查值为4.83(2.80~7.32)μmol/L,均伴有多种酰基肉碱水平下降;8例母源性肉碱缺乏症患儿初筛值为4.52(2.70~7.93)μmol/L,召回复查值为6.09(4.14~10.04)μmol/L。9例原发性肉碱缺乏症患儿中,4例进行了SLC22A5基因检测,其中复合杂合1例、纯合1例、杂合2例,基因突变分析发现了4种突变位点:c.865C>T、c.1400C>G、c.428C>T和c.1462C>T。结论串联质谱技术应用于新生儿疾病筛查可及早发现原发性肉碱缺乏症;石家庄地区原发性肉碱缺乏症的患病率为1/17785;发现了4种SLC22A5基因突变位点。

串联质谱技术筛查结合基因突变分析对赣州市PCD分布特点的研究

目的分析赣州市经串联质谱(MS/MS)技术筛查发现的原发性肉碱缺乏症(PCD)患者基因突变类型,为PCD的早期诊断和治疗提供依据。方法采用MS/MS技术对2018年1月至2021年12月赣南地区出生的新生儿进行PCD筛查,对筛查阳性的患者进行SLC22A5基因检测,收集所有经MS/MS技术筛查后确诊的35例PCD患者作为确诊组,18例携带基因患者作为携带组。分析确诊患者游离肉碱(FC)水平及基因检测结果。结果共筛查235644例新生儿,PCD确诊病例共35例,携带单基因突变18例,赣州市PCD总发病率为0.01%。确诊组FC水平为(5.26±1.99)μmol/L,携带组FC水平为(5.71±2.20)μmol/L,两组FC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。35例PCD患者均经过基因检测确诊,共检测到15种SLC22A5变异体,最常见的变异体为c.51C>G(32.86%),其次为c.1400C>G(22.86%)和c.428C>T(11.43%);检测到的变异体聚集在外显子1占45.71%,聚集在外显子2占14.29%,聚集在外显子8占24.29%。不同性别SLC22A5基因突变类型分布情况比较,差异无统计学意义(χ^(2)=6.436,P>0.05);不同FC水平SLC22A5基因突变类型分布情况比较,差异有统计学意义(P<0.05);确诊病例纯合突变组与杂合突变组FC水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);无义突变/错义突变组和错义突变/错义突变组FC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论赣州市PCD发病率较高,MS/MS技术筛查对PCD早期诊断效果明显,对PCD突变基因类型分析可了解该地区PCD基因分布情况。PCD患者FC水平与基因突变类型可能相关,纯合突变患儿FC水平较杂合突变患儿低。

河南省原发性肉碱缺乏症的新生儿筛查及基因突变分析

目的分析河南省新生儿原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)的患病率、临床特征和基因突变特点,为PCD的早期诊断、治疗以及遗传咨询和产前诊断提供依据.方法采用串联质谱分析技术,对2013年1月至2017年12月河南省的720667例新生儿进行遗传代谢病筛查,对初筛可疑阳性的新生儿母亲进行串联质谱检查,对确诊PCD病例及家系进行肉碱转运蛋白SLC22A5基因突变检测验证,对确诊病例分析其临床、生化改变及基因突变特点,进行补充左旋肉碱及饮食指导,随访观察其生长发育情况.结果共确诊PCD新生儿21例,母亲5例,河南省新生儿PCD患病率为1/34317.共发现SLC22A5基因突变18种,其中14种为已知致病突变,4种新发变异:c.1484T>C、c.431T>C、c.394-1G>T、c.265-266insGGCTCGCCACC;常见突变c.1400C>G、c.760C>T和c.51C>G等位基因频率最高,分别为42.3%(22/52)、11.5%(6/52)和7.7%(4/52).对确诊新生儿补充左旋肉碱50~100mg/(kg·d),随访6~56个月,均未出现临床症状,生长发育正常.结论河南省新生儿PCD患病率为1/34317.筛查发现PCD患儿均无临床症状.c.1400C>G可能为河南省PCD患者的热点突变类型,发现了4种新发变异,丰富了SLC22A5基因的突变谱.

新生儿及母亲原发性肉碱吸收障碍筛查及短期随访观察

目的初步探索新生儿及母亲原发性肉碱吸收障碍发病情况和诊治随访效果。方法采用串联质谱方法，对164245名新生儿进行原发性肉碱吸收障碍筛查，并对初筛可疑阳性的新生儿母亲进行串联质谱检查，对确诊为原发性肉碱吸收障碍的病例进行治疗、随访及临床分析。结果新生儿初筛可疑阳性55例，确诊原发性肉碱吸收障碍新生儿4例，母亲3例。新生儿原发性肉碱吸收障碍发病率为1：40076，经治疗随访，发育正常；母亲原发性肉碱吸收障碍经治疗游离肉碱水平增加。结论串联质谱技术可筛查新生儿及母亲原发性肉碱吸收障碍，早期治疗预后良好。

原发性肉碱缺乏症的筛查、诊断、治疗及基因型研究

目的分析新生儿及母源性原发性肉碱缺乏症(PCD)临床筛查、诊断、治疗及基因型,为PCD的临床诊治提供依据。方法采用串联质谱法(MS/MS)对2009年1月1日—2018年12月31日在浙江省医疗机构出生后3 d的新生儿足跟血进行多种遗传代谢病筛查。游离肉碱(C0)低于本实验室切值的可疑患儿及其母亲同时召回确诊。结果共筛查3040815例新生儿,血C0低于正常参考值(切值<10μmol/L)者4459例,确诊PCD患儿121例(其中男55例,女66例);发病率为1/25131。对确诊后随访资料完整的111例患儿分析显示:初筛C0值为(5.94±2.01)μmol/L、召回复查C0值为(5.70±1.99)μmol/L,差异无统计学意义(t=1.05,P>0.05)。左卡尼汀初始剂量为40~200mg/(kg·d),维持剂量时C0的水平为(24.94±10.26)μmol/L,显著高于治疗前C0水平(t=20.728,P<0.001)。母源性PCD 64例,发病率为1/47513,C0平均为(3.31±1.79)μmol/L。111例PCD患儿共检出SLC22A5基因上42种变异,其中以c.1400C>G(p.S467C)突变最为常见,约占33.33%(74/222);其次为c.51C>G(p.F17L)占14.73%。93.75%的母源性PCD患者母亲进行基因检测(60/64),c.1400C>G(p.S467C)突变约占35.83%(43/120)。除2例患儿不明原因死亡外,其他PCD患儿生长发育正常。结论PCD可通过新生儿疾病筛查早期发现,但需排除母源性肉碱缺乏症。基因检测可明确诊断,SLC22A5 c.1400C>G(p.S467C)变异是浙江省PCD患者最常见的突变类型。左卡尼汀治疗有效,但需要长期规范治疗与随访。

原发性肉碱缺乏症筛查诊断及治疗

原发性肉碱缺乏症是一种由SLC22A5基因突变引起的尿中肉碱排出增加,血液、组织、细胞内肉碱缺乏引起脂肪酸β氧化缺陷的常染色体隐性遗传病,其临床表现具有异质性及非特异性,易误诊或漏诊。未经治疗的患儿具潜在致死性。本病可通过新生儿疾病筛查早期发现,需排除母源性肉碱缺乏症和其他疾病导致的继发性肉碱缺乏,基因检测可明确诊断。避免饥饿以及补充左卡尼汀是治疗的有效方法。

广西地区原发性肉碱缺乏症新生儿筛查代谢谱及基因变异分析

目的分析广西地区原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)新生儿筛查代谢谱和基因变异谱,了解广西地区人群的患病率和基因变异特点。方法采用串联质谱技术(MS/MS)对广西新生儿疾病筛查中心辖区内从2014年1月至2019年12月行新生儿遗传代谢病筛查的400575份样本进行分析,初筛阳性者召回新生儿和其母亲复筛,复筛仍阳性者行SLC22A5基因检测。结果共确诊PCD新生儿22例(患病率为1/18208),母亲9例。对其中22例(18例新生儿和4例母亲)行基因检测,发现SLC22A5基因14种44个变异位点,其中变异频率最高分别为c.51C>G(10/44,22.7%)、c.1195C>T(9/44,20.5%)和c.1400C>G(7/44,15.9%)变异,所有变异均为致病性;同时发现2种未报道的新变异c.1031C>T和c.517delC,根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南,c.517delC(p.Leu173Cysfs*3)变异被评估为致病(PVS1+PM2_supporting+PM3+PP4),c.1031C>T(p.T344I)变异被评估为可能致病(PM1+PM2_supporting+PM3+PP3+PP4)。结论c.51C>G、c.1195C>T和c.1400C>G为广西地区的热点变异。

广州市原发性肉碱缺乏症新生儿筛查评估及SLC22A5基因变异谱特征

目的评估原发性肉碱缺乏症(PCD)新生儿筛查性能、优化筛查指标,并探讨广州地区PCD发病率及SLC22A5基因变异特点。方法广州市新生儿筛查中心采用串联质谱法对辖区内2015至2019年出生的200180名新生儿进行多种遗传代谢病筛查,以游离肉碱(C0)<10μmol/L伴多种酰基肉碱降低为PCD筛查阳性,召回新生儿及其母亲复查,复查仍阳性者进行SLC22A5基因测序确诊。回顾性分析筛查结果,同时以丙酰基肉碱与棕榈酰基肉碱之和(C3+C16)作为多种酰基肉碱的辅助量化指标,并评估其效果。PCD新生儿及PCD母亲所生新生儿血酰基肉碱水平比较采用独立样本t检验。以广州地区2395名健康儿童外显子测序中SLC22A5基因结果计算人群致病变异携带率,推算PCD发病率。结果在200180名新生儿中筛查阳性239例,阳性率0.12%,确诊PCD 37例,其中PCD新生儿15例,PCD母亲22例,新生儿PCD发病率为1/13345,分娩母亲人群PCD发病率约为1/9099,阳性预测值15.5%。初筛C0<10μmol/L共810例,增加量化指标(C3+C16),以C0<8.5μmol/L或C08.5~9.9μmol/L伴(C3+C16)<2μmol/L为阳性切值,则筛查阳性224例,确诊37例,不增加假阴性。PCD新生儿与PCD母亲所生新生儿两组间初筛C0及(C3+C16)水平差异均无统计学意义[分别为(6.2±2.4)比(5.0±1.8)μmol/L,(1.4±0.4)比(1.2±0.5)μmol/L,t=3.826、0.326,P=0.058、0.572]。7例PCD母亲有不同程度的晨起头晕、疲劳,其中1例在妊娠期出现心肌病。SLC22A5基因分析显示,PCD新生儿常见3种变异为p.S467C、p.F17L、p.R254X;PCD母亲及健康儿童常见3种变异均为p.S467C、p.F17L及p.R399W,罕见重型变异p.R254X。健康儿童SLC22A5基因致病变异携带率为1/65,推算人群PCD发病率为1/16500。结论PCD新生儿筛查可同时检出新生儿患者及母亲患者,增加多种酰基肉碱量化指标(C3+C16)<2μmol/L可改善新生儿PCD筛查性能。重型变异p.R254X在PCD新生儿中常见,而在PCD母亲和健康儿童中罕见,提示低估了广州地区PCD患病率,可能漏检部分PCD新生儿。

10例原发性肉碱缺乏症新生儿的基因诊断

目的对新生儿原发性肉碱缺乏症(PCD)基因突变谱进行分析,为PCD早期诊断和治疗以及遗传咨询和产前诊断提供理论依据。方法对进行新生儿串联质谱筛查的34 167份滤纸干血片进行血酰基肉碱谱分析,对其中游离肉碱(C0)低于10μmol/L的新生儿及父母行SLC22A5基因测序。结果酰基肉碱谱筛查C0低于10μmol/L的新生儿10例,患儿母亲游离肉碱均未见降低,10例患儿的SLC22A5基因测序检测到10种20个突变位点,其中c.976C>T、c.919del G、c.517del C、c.338G>A未见报道,生物信息学分析提示高致病风险。结论串联质谱技术结合SLC22A5基因测序有助于PCD早期诊断,新突变的发现丰富了SLC22A5基因突变谱。

东营市115720例新生儿原发性肉碱缺乏症筛查及诊治分析

目的回顾性分析本地区新生儿原发性肉碱缺乏症(PCD)筛查情况,探讨本地区新生儿PCD发病率及诊治情况,以更好地指导筛查工作。方法选取本地区2016年7月—2020年12月出生48 h后经充分哺乳的新生儿115720例,采足跟血片,应用串联质谱技术检测血片游离肉碱和酰基肉碱水平,对可疑阳性新生儿进行尿有机酸分析、母亲串联质谱检测及基因检测等以明确诊断。结果本地区2016年7月—2020年12月共筛查新生儿115720例,确诊PCD新生儿8例,PCD母亲8例;新生儿PCD发病率为1/14465,分娩母亲PCD发病率为1/14465;确诊后给予积极干预治疗,大多预后良好。结论新生儿原发性肉碱缺乏症筛查可以早期诊断、治疗PCD患儿,明显改善预后,降低致死率和致残率,对于降低本地区出生缺陷、提高人口素质具有重要意义。

海南省少数民族地区新生儿原发性肉碱缺乏症筛查及SLC22A5基因突变特点

目的分析海南省少数民族地区新生儿原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)筛查情况及溶质载体家族22A5(solute carrier family 22 member 5,SLC22A5)基因突变特点。方法通过液相(色谱)串联质谱分析技术对2014年6月至2016年6月海南省8个少数民族自治市县52403例新生儿血氨基酸谱、游离肉碱(free carnitine,C0)及酰基肉碱进行检测,召回PCD初筛可疑阳性的新生儿及其母亲复查,分析确诊PCD新生儿及PCD母亲所生新生儿的血酰基肉碱谱动态变化,采用Sanger测序法结合MassArray技术测定确诊病例的SLC22A5基因突变位点,对PCD新生儿补充左卡尼汀治疗,随访,观察患儿发育情况。结果海南省8个少数民族市县2年期间检出PCD新生儿8例,发病率为1/6550;PCD母亲12例,发病率为1/4367;PCD新生儿组初筛时C0、(C3+C16)水平与PCD母亲所生新生儿组相比,差异无统计学意义(P>0.05);PCD新生儿组复筛时C0、(C3+C16)水平均比初筛时降低(P<0.05);PCD母亲所生新生儿组复筛时C0水平比初筛时增高,(C3+C16)水平均比初筛时降低(P<0.05);PCD新生儿检出8种变异,最常见的是c.1400C>G(p.S467C)、c.51C>G(p.F17)、c.760C>T(p.R254X);1种为新发突变,为c.1380C>A(p.N460K)。PCD母亲检出7种变异,最常见的是c.1400C>G(p.S467C)、c.51C>G(p.F17L)、c.1195C>T(p.R399W),1例重型变异c.760C>T(p.R254X);8例PCD均接受左卡尼汀治疗,预后良好,但终止治疗可诱发不良事件。结论海南省8个少数民族市县新生儿PCD发病率较高,液相(色谱)串联质谱分析技术可有效检出PCD,增加多种酰基肉碱量化指标(C3+C16)可提升筛查性能;c.1400C>G(p.S467C)、c.51C>G(p.F17)可能成为海南省少数民族地区新生儿PCD的SLC22A5基因热点突变类型;左卡尼汀治疗效果好,预后良好。

原发性肉碱缺乏症新生儿17例的血液肉碱谱及SLC22A5基因变异分析

目的对福建宁德地区的新生儿进行串联质谱筛查,分析17例疑似原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)新生儿的血游离肉碱(C0)以及SLC22A5基因的变异,了解本地区的发病情况,并探讨C0水平与基因型的相关性。方法选取2016年9月至2021年6月在宁德市9个县(市、区)出生的148043例新生儿为研究对象,进行血游离肉碱和酰基肉碱谱分析,对其中血C0<10μmol/L或C0在10~15μmol/L的新生儿进行SLC22A5基因检测,分析其游离肉碱水平与基因变异之间的相关性。结果共确诊17例PCD,折算新生儿患病率为1/8707。共发现12种SLC22A5基因变异,其中热点变异为c.760C>T、c.1400C>G、c.51C>G。相比于其他位点,携带c.760C>T变异者的C0值显著偏低(P<0.01)。结论宁德地区新生儿PCD的患病率较高,需制定干预措施积极防控。携带c.760C>T变异者C0水平明显偏低,可为临床诊断提供一定的依据。

新生儿筛查发现的游离肉碱降低33例分析及临床随访

目的了解湖北省妇幼保健院游离肉碱降低所致的遗传代谢病病种分布特征、发病率、基因突变特征及确诊病例的临床转归。方法对2017年12月至2022年9月在湖北省妇幼保健院新筛中心应用串联质谱技术进行筛查的新生儿205876例,完善酰基肉碱谱检测,初筛阳性者召回复查,仍阳性者同时检测患儿母亲游离肉碱,行高精准度二代测序技术明确诊断,并对确诊病例进行临床随访。结果在205876例新生儿中,初筛游离肉碱降低33例,其中原发性肉碱缺乏症15例,母源性肉碱缺乏症6例,SLC22A5基因携带者6例,假阳性5例,继发性肉碱缺乏1例,1例失访。检测到16种SLC22A5基因突变,热点突变是c.1400C>G和c.51C>G,首次报道了c.403G>A和c.1540G>C这种新发突变。结论新生儿串联质谱筛查是识别包括原发性肉碱缺乏症在内的遗传代谢病的有效方法,新生儿筛查游离肉碱降低最常见于原发性肉碱缺乏症,但也可以由其他代谢性疾病所继发,结合基因分析有助于明确诊断,并需排除假阳性及假阴性。我们的发现丰富了以游离肉碱降低为生化表现的遗传代谢病病种及基因突变谱,并为家系遗传咨询及产前诊断提供依据。