萘普替尼对雄性大鼠睾丸形态结构和附睾精子质量的影响

目的探究萘普替尼对雄性大鼠睾丸形态结构及附睾精子质量的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为30和70 d两组,每组又分为对照组和萘普替尼低、高剂量组(0.75、3.00 mg/kg),ig给药,每天给药1次,给药体积10 mL/kg。每天进行1次症状观察,每周称量一次体质量,大鼠分别于给药35和70 d后次日处死,肉眼检查各脏器有无异常,检测双侧睾丸质量和横径、附睾尾精子数量和活力,睾丸固定进行组织病理学检查。结果萘普替尼高剂量组动物均从给药第14天开始,出现腹泻、脱毛、口鼻眼处有红色分泌物,随着给药天数的增加,症状加重;给药70 d组其中1只动物于给药60 d开始出现血尿症状。给药35 d组大鼠从给药21 d开始,给药70 d组从14 d开始,高剂量大鼠体质量明显低于同期对照组(P<0.01)。与对照组比较,给药组雄鼠的双侧睾丸绝对质量和脏器指数、睾丸横径、附睾尾精子数量和活力及睾丸组织病理学检查并未随给药剂量的增加和给药时间的延长而出现明显变化。结论萘普替尼对雄性大鼠的睾丸组织及精子质量无明显影响。

萘普替尼靶向表皮生长因子受体不同突变亚型的抗肿瘤作用研究

目的研究萘普替尼对表皮生长因子受体(EGFR)不同突变亚型荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法建立野生型EGFR人表皮鳞癌A431、L858R/T790M双突变EGFR非小细胞肺癌H1975、Del19突变型EGFR非小细胞肺癌HCC827及HER2高表达的胃癌N87的裸鼠移植瘤模型,待肿瘤长至100 mm^3左右将小鼠分组,A431荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.29 mg/kg;H1975荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼30 mg/kg和萘普替尼7.00、3.50、1.75 mg/kg;HCC827荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.60、0.29 mg/kg;N87荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼7.00、3.50、1.75、0.87、0.29 mg/kg,每组10只动物。分组后即开始ig给药,对照组给予同体积去离子水,A431、H1975、HCC827、N87荷瘤小鼠分别给药14、21、7、14 d。观察相对肿瘤体积(RTV)、肿瘤增殖率及对肿瘤质量的抑制率,在体考察萘普替尼的抗肿瘤作用。结果 A431荷瘤小鼠:与对照组比较,萘普替尼各剂量组RTV均显著减小(P<0.01),肿瘤增殖率分别为26.6%、32.5%、34.8%、42.2%;瘤质量均显著降低(P<0.01),抑瘤率范围在48.3%～73.9%;0.87 mg/kg为起效剂量,3.5 mg/kg剂量与阿法替尼12 mg/kg效果相当,3.5mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.01)。H1975荷瘤小鼠:与对照组比较,萘普替尼各剂量组RTV均显著降低(P<0.05、0.01),肿瘤增殖率分别为14.5%、38.2%、65.3%;3.5 mg/kg为起效剂量,与阿法替尼30 mg/kg作用相当;7.0、3.5 mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.05、0.01)。HCC827荷瘤小鼠:与对照组比较,萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.60 mg/kg组RTV降低极为显著(P<0.01),肿瘤增殖率均小于40%;瘤质量呈不同程度地降低,抑瘤率范围52.9%～89.7%;0.6 mg/kg为起效剂量,1.75 mg/kg剂量与阿法替尼12 mg/kg作用相当,3.5、1.75 mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.01)。N87荷瘤小鼠:萘普替尼7.00、3.50、1.75 mg/kg组RTV及瘤质量均显著低于对照组(P<0.05、0.01),且肿瘤增殖率均小于40%,抑瘤率范围54.9%～95.00%;1.75 mg/kg为起效剂量,3.5 mg/kg与阿法替尼12 mg/kg作用相当;7.0、3.5 mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.01)。结论萘普替尼具有明显的抗肿瘤作用,其中对EGFR野生型或单突变型荷瘤抗肿瘤作用较好。

基于人源肿瘤组织异种移植模型研究萘普替尼的抗肿瘤药效

目的:以表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor, EGFR)野生型肺腺癌人源肿瘤组织异种移植(patient-derived tumor xenograft,PDX)模型为研究对象,探索萘普替尼的抗肿瘤活性。方法:本研究将临床手术切除的新鲜EGFR野生型肺腺癌组织经无菌条件处理后移植到高免疫缺陷小鼠的皮下。并将第一代PDX模型(F1)肿瘤组织在裸鼠体内传代~第4代(F4),分别将F1~F4代裸鼠的肿瘤组织进行HE染色和免疫组织化学检测,验证人源肿瘤组织在裸鼠体内传代过程中组织结构和生物活性表达的稳定性。将F4代EGFR野生型肺腺PDX模型小鼠随机分为模型组、阿法替尼、萘普替尼-LD、萘普替尼-HD组,分别连续灌胃(ig)给予生理盐水、阿法替尼10 mg·kg^-1、萘普替尼0.7和2.1 mg·kg^-1 28 d,qd。每周2次测量体重、肿瘤体积,计算相对肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线。给药结束后脱颈椎处死各组小鼠,摘取肿瘤组织,称量肿瘤湿重,计算肿瘤湿重抑制率。结果:F1~F4代的肺腺癌PDX模型的肿瘤组织分别进行HE染色及IHC检测,肿瘤组织中细胞异形性明显,并且出现病理性核分裂现象和局部组织的坏死,免疫组化中TTF-1,CK7,NAPsina IHC检测均呈阳性反应,证明了人源肿瘤组织在免疫缺陷小鼠体内稳定遗传,肺腺癌PDX模型建立成功。药效实验结果显示,阿法替尼、萘普替尼-LD、萘普替尼-HD组肿瘤体积生长均显著低于模型组,给药28 d后,阿法替尼、萘普替尼-HD组,萘普替尼-LD组的相对肿瘤增殖率均低于40%,同时连续给药28 d中实验组体重与模型组比较无显著差异。连续给药28 d后摘取肿瘤称重,并计算肿瘤湿重抑制率,阿法替尼、萘普替尼-LD、萘普替尼-HD组分别为(69.26±13.82)%,(38.98±42.64)%,(65.85±20.43)%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:萘普替尼对EGFR野生型肺腺癌PDX模型在2.1 mg·kg^-1给药剂量即可产生与进口药物阿法替尼10 mg·kg^-1剂量相同的抗肿瘤药效,且用药期间未产生对小鼠的毒性作用,具有较好的临床应用前景。