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nestin启动子驱动微管蛋白-EGFP载体的构建及其在神经干细胞中的应用
1
作者
卓润
屠琪峰
+3 位作者
马超
林阁
刘梅
董张及
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期172-178,共7页
目的:构建巢蛋白nestin启动子驱动的微管蛋白表达载体,并在斑马鱼及大鼠神经干细胞中正确表达,为实现神经干细胞/神经前体细胞中微管骨架的动态观察和研究提供工具。方法:设计引物扩增斑马鱼基因组DNA中nestin基因上游启动子-952 bp片...
目的:构建巢蛋白nestin启动子驱动的微管蛋白表达载体,并在斑马鱼及大鼠神经干细胞中正确表达,为实现神经干细胞/神经前体细胞中微管骨架的动态观察和研究提供工具。方法:设计引物扩增斑马鱼基因组DNA中nestin基因上游启动子-952 bp片段并克隆测序;通过PCR获得斑马鱼EGFP-α-Tubulin融合蛋白序列,构建pzNestin-EGFP-α-Tubulin重组表达质粒;通过显微注射将目的质粒导入斑马鱼胚胎并在共聚焦显微镜下观察并拍摄;采用电转法将目的质粒导入大鼠神经干细胞,在荧光显微镜下观察。结果:在荧光显微镜下均观察到斑马鱼胚胎和大鼠神经干细胞中的EGFP荧光蛋白信号。结论:成功构建了pzNestin-EGFP-α-Tubulin质粒,在斑马鱼胚胎和大鼠神经干细胞中均能表达。
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关键词
nestin启动子
Α-TUBULIN
斑马鱼胚胎
大鼠神经干细胞
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职称材料
题名
nestin启动子驱动微管蛋白-EGFP载体的构建及其在神经干细胞中的应用
1
作者
卓润
屠琪峰
马超
林阁
刘梅
董张及
机构
南通大学教育部/江苏省神经再生重点实验室
出处
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期172-178,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31701049,32070725)。
文摘
目的:构建巢蛋白nestin启动子驱动的微管蛋白表达载体,并在斑马鱼及大鼠神经干细胞中正确表达,为实现神经干细胞/神经前体细胞中微管骨架的动态观察和研究提供工具。方法:设计引物扩增斑马鱼基因组DNA中nestin基因上游启动子-952 bp片段并克隆测序;通过PCR获得斑马鱼EGFP-α-Tubulin融合蛋白序列,构建pzNestin-EGFP-α-Tubulin重组表达质粒;通过显微注射将目的质粒导入斑马鱼胚胎并在共聚焦显微镜下观察并拍摄;采用电转法将目的质粒导入大鼠神经干细胞,在荧光显微镜下观察。结果:在荧光显微镜下均观察到斑马鱼胚胎和大鼠神经干细胞中的EGFP荧光蛋白信号。结论:成功构建了pzNestin-EGFP-α-Tubulin质粒,在斑马鱼胚胎和大鼠神经干细胞中均能表达。
关键词
nestin启动子
Α-TUBULIN
斑马鱼胚胎
大鼠神经干细胞
Keywords
nestin
promoter
α-Tubulin
zebrafish embryo
rat neural stem cells
分类号
Q189 [生物学—神经生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
nestin启动子驱动微管蛋白-EGFP载体的构建及其在神经干细胞中的应用
卓润
屠琪峰
马超
林阁
刘梅
董张及
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022
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