血清sTWEAK、Netrin-1联合APACHEⅡ评分对重型颅脑损伤患者术后预后不良的预测价值

目的探讨血清可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(sTWEAK)、神经轴突导向因子-1(Netrin-1)联合急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分对重型颅脑损伤患者术后预后不良的预测价值。方法选取2020年6月至2022年6月该院收治的120例重型颅脑损伤患者,根据术后30 d预后情况分为预后良好组和预后不良组。对比两组血清sTWEAK、Netrin-1水平及APACHEⅡ评分。采用单因素和多因素Logistic回归分析重型颅脑损伤患者术后预后不良的影响因素,并据以构建血清sTWEAK、Netrin-1及APACHEⅡ评分联合应用的预测模型,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sTWEAK、Netrin-1水平及APACHEⅡ评分对重型颅脑损伤患者术后预后不良的预测价值。结果预后不良组的重症监护室居住时间长于预后良好组,白蛋白水平、入院时格拉斯哥昏迷评分法评分和血清Netrin-1水平低于预后良好组,多发脑挫裂伤占比、机械通气占比、入院时APACHEⅡ评分和血清sTWEAK、血清肌酐、血尿素氮水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,多发脑挫裂伤、Netrin-1水平降低、入院时APACHEⅡ评分升高、sTWEAK水平升高为重型颅脑损伤患者术后预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sTWEAK、Netrin-1及APACHEⅡ评分3个指标单独及联合应用时曲线下面积及其95%CI分别为0.742(0.552~0.925)、0.731(0.488~0.963)、0.714(0.502~0.911)、0.882(0.795~0.947)。结论血清sTWEAK、Netrin-1联合APACHEⅡ评分对重型颅脑损伤患者术后预后不良具有较好的预测价值,可为临床治疗方案的制订提供参考。

星蒌通络饮联合氯吡格雷对老年急性缺血性脑卒中患者认知功能、脑血循环及血清Netrin-1水平的影响

目的 探究星蒌通络饮联合氯吡格雷对老年急性缺血性脑卒中患者认知功能、脑血循环及Netrin-1水平的影响。方法 选取2022年1月—2023年5月邯郸市中心医院收治的80例老年急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为观察组(40例)和对照组(40例)。对照组接受氯吡格雷治疗,观察组给予星蒌通络饮联合氯吡格雷治疗,比较两组的临床疗效、脑血循环指标[血流阻力指数(RI)、平均血流速度(Vm)和血管搏动指数(PI)]、血清学指标[Netrin-1和基质金属蛋白酶(MMP)-9]、神经功能[美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分]和认知功能[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分]。结果 观察组的临床总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后两组RI和PI均下降,Vm上升,且观察组的RI、PI低于对照组,Vm高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后两组Netrin-1均上升,MMP-9均下降,且观察组Netrin-1高于对照组、MMP-9低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后两组NIHSS评分均下降,MoCA评分均上升,且观察组的NIHSS评分低于对照组,MoCA评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 星蒌通络饮联合氯吡格雷能够有效改善老年急性缺血性脑卒中患者的脑血循环和血清Netrin-1水平,提高认知功能。

中重度颅脑创伤患者血清STC1 S100B和NETRIN-1的表达及对预后的预测价值

目的探讨斯钙素抗体-1(STC1)、S100钙结合蛋白B(S100B)、轴突生长诱向因子-1(NETRIN-1)在中重度创伤性颅脑损伤(TBI)术后患者血清中的表达水平及预测预后的价值。方法收集74例TBI患者及40名健康者的血清样本,使用q RT-PCR检测健康者与TBI患者术前及术后第1天、第3天、第5天、第7天的血清STC1、S100B、NETRIN-1表达水平。收集TBI患者的一般临床资料,使用扩展版格拉斯哥结局量表(EGOS)评估患者预后,根据EGOS评分将患者分为预后良好组(EGOS≥5分,n=40)及预后不良组(EGOS<5分,n=34)。分析TBI患者术后血清STC1、S100B、NETRIN-1表达水平与预后的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析STC1、S100B、NETRIN-1表达水平对患者预后的预测价值,多因素Logistic分析评估引起TBI患者预后不良的因素。结果q RT-PCR分析显示,与健康者相比,TBI患者术前血清STC1、S100B水平升高,NETRIN-1水平降低,术后血清STC1、S100B水平降低,NETRIN-1水平升高(P<0.05)。TBI患者术后第1、3、5、7天血清STC1、S100B水平逐渐降低,NETRIN-1水平逐渐升高,术后第5天最显著(P<0.05)。与术后第5天预后良好组患者相比,预后不良组患者血清STC1、S100B水平显著升高,NETRIN-1水平显著降低(P<0.05)。皮尔逊相关性分析显示术后第5天TBI患者血清STC1、S100B水平与APACHEⅡ评分呈正比,NETRIN-1水平与APACHEⅡ评分呈反比(P<0.05)。ROC曲线分析发现术后第5天血清STC1、S100B、NETRIN-1水平对TBI患者预后具有预测价值,多因素Logistic回归分析显示仅STC1水平与患者预后相关(P<0.05)。结论STC1、S100B、NETRIN-1在TBI患者血清中表达水平异常,对TBI患者预后分析具有较高价值。

腹腔镜下单侧输卵管切除术对输卵管妊娠患者血清β-hCG、Netrin-1及术后妊娠影响

目的:探讨腹腔镜下单侧输卵管切除术对输卵管妊娠患者血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、神经轴突导向因子-1(Netrin-1)水平及对术后妊娠的影响。方法:选取2021年1月-2022年11月本院行腹腔镜下单侧输卵管切除术患者40例(观察组)、腹腔镜下单侧输卵管开窗取胚术患者40例(对照组),统计手术相关指标、并发症,手术前后血清β-hCG、Netrin-1水平以及术后卵巢储备功能指标,随访术后1年内妊娠情况。结果:观察组术中出血量(72.1±4.8ml)多于对照组(66.1±12.4ml),术后并发症发生率(7.5%)和术后继续异位妊娠率(0)低于对照组(25.0%、17.5%);术后6个月,血清促黄体激素(6.15±1.12mU/ml)高于对照组(5.63±0.95mU/ml),抗缪勒管激素(3.33±0.58ng/ml)低于对照组(3.64±0.79ng/ml)(均P<0.05)。两组术后第3dβ-hCG、Netrin-1水平及术后β-hCG、Netrin-1降低至正常水平时间也无差异(均P>0.05)。结论:腹腔镜下单侧输卵管切除术、输卵管开窗取胚术均能有效清除异位着床组织,但腹腔镜下单侧输卵管切除术术后并发症和再次异位妊娠风险更低,但存在术中出血量多、损伤卵巢储备功能风险。

血清Netrin-1、FGF22、miR-221水平与抑郁症患者认知功能损害的相关性分析

目的:分析血清神经轴突导向因子-1(Netrin-1)、成纤维细胞生长因子22(FGF22)、miR-221水平与抑郁症患者认知功能损害的相关性。方法:选取某院2021年6月—2023年7月收治的120例抑郁症患者为研究组,另选取同期120例健康体检者为对照组。采用智力状态检查量表(MMSE)评估患者认知功能,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)评估患者抑郁程度;比较2组及不同认知状态患者入院时血清Netrin-1、FGF22、miR-221水平,另比较不同抑郁程度患者血清各指标水平及MMSE评分,并分析其相关性,ROC分析入院时血清Netrin-1、FGF22、miR-221联合检测对抑郁症患者认知功能障碍的诊断价值。结果:研究组血清Netrin-1、FGF22水平[(274.56±14.56)pg/mL、(157.46±21.47)ng/mL]低于对照组[(437.93±13.71)pg/mL、(217.56±20.66)ng/mL],血清miR-221水平(3.67±1.26)高于对照组(1.06±1.39),差异均有统计学意义(P<0.05);认知障碍患者血清Netrin-1、FGF22水平[(177.46±37.16)pg/mL、(131.71±21.47)ng/mL]低于认知正常患者[(330.78±36.44)pg/mL、(172.37±19.56)ng/mL],血清miR-221水平(4.14±1.14)高于认知正常患者(3.24±1.26),差异均有统计学意义(P<0.05);轻度抑郁患者血清Netrin-1、FGF22水平及MMSE评分均高于中度及重度抑郁患者,血清miR-221水平均低于中度及重度抑郁患者,差异均有统计学意义(P<0.05);血清Netrin-1、FGF22与MMSE评分呈正相关(r=0.694、0.677,P值均<0.001),miR-221与MMSE评分呈负相关(r=-0.715,P<0.001),差异有统计学意义(P<0.05);入院时血清Netrin-1、FGF22、miR-221水平诊断抑郁症患者发生认知功能障碍的AUC分别为0.749、0.814、0.766,三者联合检测AUC为0.926。结论:在抑郁症认知功能损害患者中血清Netrin-1、FGF22水平升高,miR-221水平降低,均与认知功能障碍密切相关,三者联合检测对抑郁症患者认知功能障碍具有较高的诊断价值。

蛛网膜下腔出血患者血清netrin-1早期变化及其对动脉瘤夹闭术的预后价值

目的:探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)患者血清神经轴突导向因子-1(netrin-1)早期变化及其对动脉瘤夹闭术的预后价值。方法:选取2018年10月至2021年12月期间首次在黄冈市中心医院神经外科接受动脉瘤夹闭术治疗的168例自发性aSAH患者作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测入院时、入院后各时间点(24 h、48 h、72 h)血清netrin-1水平。出院时、术后30 d和90 d时通过改良Rankin评分(m RS)评估预后,mRS≥3分定义为预后不良。采用二分类多因素Logistic回归模型分析动脉瘤夹闭术后预后的影响因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清netrin-1水平对a SAH诊断和预后的效能,根据最佳截断阈值分为低netrin-1亚组和高netrin-1亚组。结果:aSAH患者入院后72 h内血清netrin-1水平持续高于健康对照组(P<0.001)。随着发病时间的延长,aSAH患者血清netrin-1水平有降低趋势(P<0.001)。入院时血清netrin-1水平诊断aSAH的ROC曲线下面积为0.776(95%CI:0.723~0.829),在最佳截断阈值下(321.13 pg/mL),灵敏度和特异性分别为80.40%和61.30%。入院时低netrin-1亚组术后90 d内中位死亡时间短于高netrin-1亚组(P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,低血清netrin-1水平是aSAH患者术后90 d预后不良的独立危险因素(P<0.05)。联合检测入院时netrin-1水平可提高格拉斯哥昏迷评分(GCS)对动脉瘤夹闭术后90 d预后不良的预测效能(P<0.001)。结论:入院时低血清netrin-1水平可作为aSAH患者动脉瘤夹闭术后90 d预后的候选生物标志物,并且可以提高GCS评分对预后不良的预测效能。

基于Netrin-1介导神经萌发探讨温经活血外治法对膝骨关节炎大鼠疼痛的影响

目的研究Netrin-1介导感觉神经萌发对膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)大鼠疼痛行为的影响及温经活血外治法的干预作用。方法随机将30只大鼠平均分为空白组、KOA组及外治法组。KOA模型通过前交叉韧带横断术构建,造模成功后,外治法组使用温经活血外治法代表方——“易层”贴敷28 d。给药完成后各大鼠腹主动脉采血并提取各组滑膜组织和背根神经节(Dorasal root ganglion,DRG)组织,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察滑膜炎症,神经镀银染色滑膜观察神经萌发;ELISA检测血清中促炎因子白介素-6(Interleukin 6,IL-6)和疼痛介质P物质(Substance p,SP)、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)含量;Western blot和qPCR检测滑膜组织Netrin-1、CGRP和DRG组织神经元表面受体结直肠癌缺失基因(Deleted in colorectal cancer,DCC)、非协调同源-5(Uncoordinated-5,UNC5)蛋白和基因表达量。结果HE染色显示外治法组炎性细胞浸润较KOA组明显减少,神经镀银显示外治法组较KOA组神经纤维数量明显减少;KOA组较空白组IL-6和SP含量明显升高,外治法组较KOA组IL-6和SP含量明显减少;KOA组较空白组Netrin-1、CGRP、DCC蛋白和基因表达明显升高,UNC5则明显降低,外治法组较KOA组Netrin-1、CGRP、DCC蛋白和基因表达明显降低,UNC5则明显升高。结论温经活血外治法能够缓解KOA疼痛,其作用机制可能与抑制Netrin-1、影响神经萌发和抑制疼痛因子有关。

netrin-1及其受体在非神经系统中的作用

轴突生长导向因子-1(netrin-1)是netrins家族中研究最广泛的成员。netrin-1最初被认为是胎儿发育过程中轴突引导的调节因子,与其经典受体非协调5(uncoordinated-5,UNC5)与结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)共同介导轴突的吸引或排斥。随着更多netrin-1受体的发现,如唐氏综合征细胞粘附分子(down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)、整合素α6β4(integrinα6β4,Inα6β4)和整合素α3β1(integrinα3β1,Inα3β1)、腺苷A2B受体(A2B adenosine receptor,A2BAR)和CD146等的发现,扩展了netrin-1在非神经系统的功能,如调控血管生长,肿瘤生长,细胞凋亡,炎症发展。本文就netrin–1及其受体在非神经系统中的作用的研究进展进行概述。

Netrin-1对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的:研究netrin-1对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法:用高糖培养人肾小管上皮HK-2细胞,real-time PCR和Western blot测定细胞中netrin-1的表达水平。用过表达netrin-1慢病毒感染HK-2细胞,检测其对高糖环境下HK-2细胞中netrin-1表达的影响。流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定cleavedcaspase-3蛋白水平,2,4-二硝基苯肼法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法检测培养液中丙二醛(MDA)含量,ELISA法测定培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果:高糖处理后的HK-2细胞中netrin-1的mRNA和蛋白水平均明显下调(P <0.05)。过表达netrin-1慢病毒能够上调高糖环境下HK-2细胞中netrin-1的表达水平(P <0.05)。高糖可促进肾小管上皮细胞分泌IL-1β和TNF-α,提高细胞培养液中LDH和MDA的水平(P <0.05),使肾小管上皮细胞的caspase-3活化并诱导细胞凋亡;上调netrin-1的HK-2细胞经高糖诱导后,细胞分泌的IL-1β和TNF-α减少,细胞中活化的caspase-3蛋白水平降低,培养液中LDH和MDA水平降低,细胞凋亡减少(P <0.05)。结论:上调netrin-1减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞氧化损伤和炎性损伤,减少细胞凋亡。

Netrin-1及VEGF在食管鳞癌组织中的表达水平及其相关性研究

目的检测食管鳞癌组织中神经轴突导向因子-1(Netrin-1)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达水平,探讨Ne-trin-1和VEGF的相关性。方法应用免疫组织化学SP法和原位杂交方法检测50例食管鳞癌组织及其相应的19例癌旁不典型增生组织和20例正常食管黏膜组织中VEGF、Netrin-1蛋白及mRNA的表达水平。结果 (1)食管鳞癌组织中Netrin-1、VEGF蛋白及mRNA阳性表达率均高于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织(P<0.05);(2)有淋巴结转移组食管鳞癌组织中Netrin-1、VEGF蛋白及mRNA阳性表达率均高于无淋巴结转移者(P<0.05);(3)食管鳞癌组织中VEGF和Netrin-1阳性表达率间呈正相关(r=0.941 3,P<0.01),VEGF mRNA和Netrin-1mRNA阳性表达率间呈正相关(r=0.584 7,P<0.01)。结论人食管鳞癌组织中VEGF、Netrin-1蛋白及mRNA均呈高表达;Netrin-1、VEGF的表达在食管癌的淋巴结转移过程中起一定的作用;且二者存在正相关,可能共同参与食管癌的发生、发展。

Netrin-1对大鼠实验性脑梗死后同侧丘脑血脑屏障保护作用

目的观察脑梗死后同侧丘脑是否出现血脑屏障破坏,Netrin-1对血脑屏障破坏是否具有保护作用及其能否促进神经功能恢复。方法 Sprague-Dawley大鼠36只,建立右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,假手术(sham)组仅暴露右侧大脑中动脉,分为sham组、MCAO+PBS组及MCAO+netrin-1组,每组6只。通过改良大鼠神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,m NSS)评价神经功能,造模后第8天及第14天取材,HE染色观察梗死灶,免疫荧光检测occludin及albumin表达与分布,Western blot检测occludin及ZO-1表达水平。结果m NSS评分见予以Netrin-1后于梗死后第8天及第14天评分降低(P<0.05)。HE染色见右侧皮层梗死灶。Western blot见梗死后第8天开始出现occludin减少(P<0.05),第14天occludin及ZO-1均明显减少(P<0.05),免疫荧光见梗死后第8天及第14天occludin减少伴albumin血管外渗出;予以Netrin-1后,western blot及免疫荧光见梗死后第14天occludin增多(P<0.05),伴albumin渗出增多,ZO-1无明显变化。结论Netrin-1对大鼠实验性脑梗死后同侧丘脑血脑屏障破坏具有保护作用,并可促进梗死后神经功能恢复。

多中心研究尿液Netrin-1在早期诊断造影剂所致急性肾损伤中的价值

目的 观察造影剂所致急性肾损伤（CI-AKI）进程中患者尿液Netrin-1水平的变化,探讨其对CI-AKI早期诊断的价值。方法 多中心前瞻性收集197例行冠状动脉造影术（CAG）患者的临床资料,其中发生急性肾损伤（AKI）患者17例（CI-AKI组）,另选取17例与CI-AKI患者临床资料匹配的非CI-AKI患者（非CI-AKI组）,检测两组患者在CAG前后多个时间点的尿液Netrin-1、尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、血清肌酐（sCr）、血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）水平,评价尿液Netrin-1作为CI-AKI早期诊断标志物的价值。结果 CI-AKI组患者除CAG持续时间显著长于非CI-AKI组（P〈0.05）外,两组间患者的一般资料、基础疾病构成、基础肾功能、实验室检查结果、术前用药情况,以及其他CAG和经皮冠状动脉介入治疗（PCI）情况的差异均无统计学意义（P值均〉0.05）。CI-AKI组在CAG后2、6、12h的尿液Netrin-1水平均显著高于同组基础值（P值均〈0.05）,非CI-AKI组仅在CAG后6h时的尿液Netrin-1水平显著高于同组基础值（P〈0.05）。CAG后2h,CI-AKI组的尿液Netrin-1水平显著高于非CI-AKI组同时间点（P〈0.05）,此时尿液Netrin-1水平诊断CI-AKI的ROC曲线的AUC为0.706（95%CI为0.531~0.880,P=0.040）。CI-AKI组在CAG后48、72h的sCr水平,在CAG后2、6h的尿液NAG水平均显著高于同组基础值（P值分别〈0.01、0.05）;非CI-AKI组在CAG后2、6、12、24h的尿液NAG水平均显著高于同组基础值（P值分别〈0.01、0.05）。CI-AKI组在CAG后72h的血清CysC水平显著高于非CI-AKI组同时间点（P〈0.05）。结论尿液Netrin-1水平对早期诊断CI-AKI有一定价值,sCr、尿液NAG、血清CysC水平并不适用于CI-AKI的早期诊断。

脂肪干细胞移植促进脑缺血大鼠脑组织轴突生长诱向因子1(netrin-1)的表达

目的观察脑缺血损伤大鼠脑组织中轴突生长诱向因子1(netrin-1)的表达及脂肪干细胞(ADSC)移植对其表达的影响。方法健康雄性SD大鼠分为正常组、模型组和ADSC组。复制大鼠大脑中动脉栓塞模型,分离培养ADSC,ADSC组大鼠经侧脑室注射30μL含1×106个细胞的ADSC悬液,模型组注射等剂量PBS。各组大鼠分别在术后4、7、14 d处死6只并取脑组织,采用反转录PCR检测脑组织中netrin-1 mRNA的表达、Western blot法和免疫组织化学法检测脑组织中netrin-1蛋白的表达和定位。结果与正常组相比,模型组脑缺血后脑组织中netrin-1的表达增加,4 d时达高峰,在各观察时间点的表达均显著高于正常组。与模型组相比,ADSC组脑组织中netrin-1的表达进一步上升,7 d时达高峰,在各观察时间点的表达均显著高于模型组。结论脑缺血损伤后进行ADSC移植可提高脑组织中netrin-1的表达,可促进轴突的再生与修复。

Netrin-1在多发性骨髓瘤患者骨髓细胞中的表达水平和临床意义

目的探讨轴突导向因子1(Netrin-1)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及其与患者临床病理特征的相关性。方法回顾性研究选取MM患者的骨髓标本40例作为研究组(MM组),另选同期骨髓象正常的门诊患者10例作为对照组。取患者治疗前、治疗后以及健康对照组的骨髓液,使用Ficoll密度梯度离心法从骨髓抽吸物中分离出单核细胞(MC),培养48 h后,应用免疫细胞化学检测细胞中Netrin-1的表达情况,应用蛋白免疫印迹检测细胞中Netrin-1、DCC、UNC5H蛋白表达情况。比较治疗无效与治疗有效组Netrin-1表达水平,分析Netrin-1蛋白表达水平临床特征的相关性,以及Netrin-1表达水平与结肠癌缺失蛋白(DCC)、UNC5同源蛋白(UNC5H)蛋白的相关性分析。结果与对照组患者MC相比,MM组患者MC免疫细胞染色显示Netrin-1表达增加。蛋白免疫印迹结果显示,与对照组相比,MM组患者MC中Netrin-1蛋白表达水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前MM患者相比,治疗有效组MM患者Netrin-1蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。MM患者中Netrin-1蛋白表达水平与性别、年龄、免疫分型等临床特征无明显相关性(P>0.05),而与ISS分期、D-S分期等显著相关(P<0.05)。与对照组相比,MM组患者DCC、UNC5H蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,Netrin-1与DCC呈显著负相关(r=-0.4058,P=0.0094),而与UNC5H无显著相关性(r=0.0055,P=0.0893)。结论Netrin-1的表达与MM的发生发展密切相关,可能成为肿瘤生物治疗中潜在的治疗靶点。

电针对坐骨神经损伤大鼠神经生长导向因子Netrin-1的影响

目的探讨电针对大鼠坐骨神经损伤后神经导向因子Netrin-1及其mRNA表达的影响。方法健康SD大鼠72只,随机分为空白对照组、模型对照组和电针治疗组,每组24只。后两组大鼠右坐骨神经横断后即刻端对端缝合。电针治疗组取"环跳"、"足三里"进行电针治疗,1次/d,7天1个疗程,连续治疗3个疗程。每疗程结束后应用免疫组化法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测坐骨神经和相应脊髓段Netrin-1及其mRNA的表达变化。结果电针组与模型组比较,大鼠损伤的坐骨神经和相应脊髓段中Netrin-1及其mRNA在第一疗程后达到高峰,之后逐渐降低,且都高于模型组,有非常显著性差异(P<0.01),而且两组始终都高于空白对照组,也有非常显著性差异(P<0.01)。结论电针治疗能明显增强损伤的坐骨神经和相应脊髓段中Netrin-1及其mRNA的表达。

血清IL-33和netrin-1对动脉瘤性蛛网膜下腔出血手术治疗患者短期预后的临床价值

目的探讨血清白介素-33(IL-33)和神经轴突导向因子-1(netrin-1)对动脉瘤蛛网膜下腔出血(aSAH)手术治疗患者短期预后的临床价值。方法选取河北北方学院附属第一医院神经外科收治的aSAH患者226例作为研究对象,根据其治疗90 d死亡情况分为生存组(175例)和死亡组(51例)。比较两组IL-33和netrin-1水平,分析IL-33和netrin-1与aSAH病情严重程度相关性;Logistics回归分析aSAH手术治疗患者短期预后的影响因素,ROC曲线分析IL-33和netrin-1对aSAH手术治疗患者短期预后的临床价值。结果生存组血清IL-33水平低于死亡组(P<0.05),而netrin-1水平高于死亡组(P<0.05)。血清IL-33水平与Hunt-Hess分级和Fisher分级呈正相关(P<0.01);netrin-1水平与Hunt-Hess分级和Fisher分级呈负相关(P<0.01)。经多因素Logistics回归分析显示,动脉瘤直径≥5 mm、Hunt-Hess分级(Ⅳ~Ⅴ级)、Fisher分级(3~4级)、IL-33水平升高和netrin-1水平降低是aSAH手术治疗患者短期预后的影响因素。血清IL-33和netrin-1预测aSAH手术治疗患者短期预后的曲线下面积(AUC)分别为0.739、0.885,当截断值为659.46 pg/mL、223.62 pg/mL时,灵敏度分别为72.73%、82.61%,特异度为71.20%、81.82%;两者联合预测aSAH患者短期预后的AUC为0.897,灵敏度为83.15%,特异度为85.45%。结论血清IL-33和netrin-1与aSAH手术治疗患者短期预后密切相关,可作为aSAH手术治疗患者短期预后的标志物,且两者联合的预测价值优于单独应用。

Netrin-1在免疫炎症相关性疾病中的作用

最近研究发现,神经突起导向因子Netrin-1作为一种新型抑炎因子能够抑制免疫炎症细胞向炎症部位的迁移,从而避免了过度的免疫炎症反应,其抗炎作用在大脑、肺脏、肾脏等多脏器中已有初步研究,相关研究提示,Netrin-1的抗炎作用主要通过与受体结合来实现。本文对Netrin-1在多种免疫炎症相关疾病模型中的作用进行总结,进而为多种免疫炎症性疾病的治疗提供新的思路。

Netrin-1对脐静脉内皮细胞增殖及迁移的影响

目的:研究神经轴突导向因子Netrin-1对血管内皮细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分别用CCK-8和迁移实验检测Netrin-1对HUVECs增殖、迁移的作用。检测HUVECs上各Netrin-1受体的表达,用siRNA沉默HUVECs上该受体,观察增殖、迁移能力的改变。结果:Netrin-1对HUVECs的增殖和迁移有促进和抑制的双重导向作用。沉默受体UNC5B后,Netrin-1对于HUVECs的增殖和迁移的促进作用增强,而抑制作用消失。结论:Netrin-1对HUVECs的增殖和迁移具有浓度依赖性双重导向作用,其中抑制作用由UNC5B受体介导。

Netrin-1对活体大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的研究Netrin-1对活体大鼠心肌缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,I/R)的影响及机制。为临床上提供体外循环(Cardiopulmonary bypass,CPB)下心肌保护新的策略。方法雄性Spraghe-Dawley(SD)大鼠20只,体重450-500g,随机分成2组,体外循环预充液中添加Netrin-1(10只)[I/R+Netrin-1组],体外循环预充液中不添加Netrin-1(10只)[I/R组]。建立无血预充大鼠深低温停循环(Deep hypothermic circulatory arrest,DHCA)的心肌缺血再灌注的模型。实验结束2h后处死大鼠留取心脏标本。在CPB前、CPB75min(复温后15min),CPB后2h留取大鼠动脉血测定心肌损伤指标[心肌肌钙蛋白I(c Tn I)和心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)]。实验结束取大鼠心脏标本用TUNEL法检测心肌细胞凋亡;用Western-blot法测定局部心肌组织直肠癌结肠癌缺失基因(Delete in colorectal carcinoma gene,DCC)蛋白指标。大体光镜下观察心脏组织病理形态学改变;大鼠CPB前、CPB 15min、CPB 45min(停循环15min)以及CPB 90min(复温30min)监测血气分析。结果 I/R+Netrin-1组较I/R组:血清中心肌肌钙蛋白I(c Tn I)和心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)含量明显减少;心肌缺血再灌注后心肌凋亡明显减少27.5%(P<0.05);DCC表达增加(P<0.05)。HE染色镜下观察发现I/R+Netrin-1组心肌细胞损伤程度明显减轻。结论Netrin-1对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与DCC有关。

Netrin-1对心肌细胞H9c2缺氧复氧损伤中的保护作用研究

目的研究Netrin-1在心肌细胞H9c2缺氧复氧损伤中的作用,并探讨其机制。方法建立心肌细胞H9c2缺氧复氧损伤模型;将A/R+Netrin-1组(转染pcDNA 3.1-Netrin-1)、A/R+Ctrl组(转染pcDNA 3.1)、A/R+Netrin-1+LY294002组(转染pcDNA 3.1-Netrin-1与抑制剂LY294002共处理)、A/R+Netrin-1+DMSO组(转染pcDNA 3.1-Netrin-1与DMSO共处理)均用脂质体法转染H9c2细胞;ELISA检测细胞中LDH、MDA、SOD的含量;MTT法检测细胞活力;WB检测细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、Netrin-1、p-AKT的蛋白表达;流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果与A/R+Ctrl组相比,A/R+Netrin-1组细胞中LDH、MDA含量明显降低,SOD含量明显升高,细胞活力显著升高,Bax、Cleaved caspase-3的蛋白表达量均显著降低,Bcl-2蛋白表达量显著升高,Netrin-1、p-AKT蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与A/R+Netrin-1+DMSO组相比,A/R+Netrin-1+LY294002组细胞中LDH、MDA含量明显升高,SOD含量明显降低,细胞活力显著降低,Bax、Cleaved caspase-3的蛋白表达量均显著升高,Bcl-2蛋白表达量显著降低,Netrin-1、p-AKT蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论 Netrin-1可通过激活Akt通路促进缺氧复氧心肌细胞活力,抑制凋亡,发挥保护作用,将可为心肌损伤的治疗提供理论依据。