9-顺式维甲酸体外诱导神经母细胞瘤细胞分化的研究

目的 :为设计维甲酸治疗神经母细胞瘤可能的有效方案 ,本文对 9-顺式维甲酸 (9-cisretinoicacid ,9-cisRA)体外诱导分化神经母细胞瘤细胞 (SK -N -SH)作用进行了研究。方法 :SK -N -SH细胞经 9-cisRA处理后 ,采用相差显微镜、神经纤维银染法、透射电镜观察等手段 ,观察 9-cisRA对细胞生长的影响。结果 :9-cisRA作用SK -N -SH细胞 7d后 ,细胞形态发生变化 ;12d时出现神经原性表型 ,多个细胞形成“神经节” ,节间形成粗而长的类神经纤维 ;尼氏小体和银染法亦证明细胞产生显著分化。透射电镜观察结果表明 ,9-cisRA对该细胞有分化作用 ,却无明显凋亡诱导作用。结论 :9-cisRA对神经母细胞瘤细胞体外能产生明显诱导分化作用。

9-顺式维甲酸协同-干扰素下调神经母细胞瘤细胞MYCN和MDR1基因mRNA表达的实验研究

目的测定9-顺式维甲酸(9-cis retinoic acid,9-cis RA)联合γ-干扰素(gamma-interferon,γ-IFN)在体外诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)SK-N-SH细胞分化过程中MYCN和MDR1基因mRNA表达方面的变化,探讨其联合作用的分子生物学机制。方法将NB细胞分为A组(对照组)、B组(9-cis RA用药组)、C组(γ-IFN用药组)和D组(9-cis RA和γ-IFN联合用药组)4组,在处理后5d收集各组细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,FQ-RT-PCR)检测细胞MYCN和MDR1基因mRNA的表达变化并对其进行相关性分析。结果 9-cis RA和γ-IFN体外皆可下调NB细胞MYCN和MDR1基因mRNA的表达,二者联合应用具有协同效应;两基因的表达呈显著的正相关关系。结论 9-cis RA协同?-IFN在体外诱导NB细胞分化、凋亡及生长抑制的作用机制可能为共同下调MYCN和MDR1基因mRNA的表达,一方面抑制了NB细胞原癌基因的生物学表现,另一方面预防了多药耐药(multidrug resistance,MDR),为其联合应用提供分子生物学依据和理论指导。

全反式维甲酸体外诱导神经母细胞瘤细胞分化研究

[目的]观察全反式维甲酸(alltransretinoicacid,ATRA)体外对人神经母细胞瘤细胞系SK N SH细胞生长的影响并对其作用机制进行初步探讨。[方法]SK N SH细胞经ATRA处理后 ,采用相差显微镜、神经纤维银染法、透射电镜观察、逆转录PCRmRNA检测等手段 ,观察ATRA对SK N SH细胞生长的影响。[结果]ATRA作用SK N SH细胞12天后 ,细胞形态发生显著变化 ,表现为明显分化 ;出现神经原性表型 ,多个细胞形成神经节 ,节间形成粗而长的类神经纤维 ;尼氏小体和银染法亦证明SK N SH细胞产生显著分化。透射电镜观察结果表明 ,ATRA对该细胞无明显凋亡诱导作用。ATRA对SK N SH细胞的维甲酸受体 β(RARβ)表达水平有上调作用。[结论]ATRA对神经母细胞瘤细胞体外能产生明显诱导分化作用 ,此作用与ATRA上调细胞的RARβ