特应性皮炎患者嗜酸性粒细胞富集群中P物质及其受体NK1R的表达变化

目的检测特应性皮炎(AD)患者外周血嗜酸性粒细胞富集群中P物质(SP)和NK1受体(NK1R)的表达,并分析其在AD中的可能作用。方法采集健康对照组(HC)及AD患者的外周静脉血,用尘螨、蒿草花粉和梧桐花粉过敏原粗提液刺激1h后,流式细胞术检测嗜酸性粒细胞富集群中SP和NK1R的表达。结果与HC组比较,静息状态下AD患者嗜酸性粒细胞富集群中NK1R^+细胞的比例升高了41%(P=0.001),SP^+细胞的比例减少了1.17倍(P<0.001),SP^+细胞的MFI降低了55%(P<0.001)。过敏原对HC和AD患者嗜酸性粒细胞富集群中SP及NK1R表达的影响无统计学差异。结论 AD患者嗜酸性粒细胞富集群中NK1R表达上调,提示嗜酸性粒细胞表面的NK1R可能在特应性皮炎中起重要作用;NK1R拮抗剂或阻断剂可能是治疗AD的有效制剂。

慢性自发性荨麻疹患者血液嗜酸性粒细胞NK1R水平增加

目的检测慢性自发性荨麻疹(CSU)患者外周血嗜酸性粒细胞富集群中P物质(SP)和神经激肽/速激肽受体1(NK1R)的表达。方法收集CSU患者和健康人外周血,用(0.1、1)μg/m L蒿草花粉、尘螨和梧桐花粉过敏原粗提液刺激,流式细胞术检测嗜酸性粒细胞富集群中SP及NK1R的表达。结果与健康人相比,CSU患者嗜酸性粒细胞比例增加1.2倍,NK1R+嗜酸性粒细胞上调66%,而SP+嗜酸性粒细胞的比例下调40%。0.1μg/m L尘螨过敏原可诱导CSU患者NK1R的表达上调1.11倍。结论 CSU患者嗜酸性粒细胞NK1R表达上调,阻断NK1R可用于CSU的治疗。

Neurokinin 1受体对脊髓后角疼痛传递和调控作用的研究进展

脊髓后角在伤害性刺激传递中起着重要的作用,将初级传入含有的疼痛信息传递到大脑。伤害性疼痛的初级传入主要终止于Ⅰ层和Ⅱ层,其中一些初级传入包含P物质。许多Ⅰ层的投射神经元发出纤维到大脑的不同区域,包括延髓腹外侧区,导水管周围灰质,丘脑。Neurokinin 1受体(NK1R)在脊髓后角的许多神经元表达,这些神经元接受含有P物质的初级传入。80%的Ⅰ层投射神经元表达NK1R阳性。在Ⅲ层和Ⅳ层,同样存在着NK1R阳性神经元,它们不但发出纤维投射到延髓腹外侧区,而且发出纤维调控Ⅰ层的投射神经元。脊髓后角的NK1R阳性神经元既受到局部抑制性神经元的调控,又受到下行调控系统的控制。

电针对佐剂性关节炎大鼠踝关节周围皮肤及皮下组织NK-1受体与IL-1β荧光双标免疫反应性的影响

目的探讨电针治疗佐剂性关节炎的外周神经免疫机制。方法用佐剂性关节炎模型,采用免疫荧光双标技术,观察了致炎后第3d佐剂性关节炎大鼠踝关节周围皮肤及皮下组织NK1受体与IL1β荧光双标免疫反应性,及电针胆经环跳穴、阳陵泉穴(刺激参数为05～15V,4～16Hz,30min)对其是否具有调控作用。结果(1)各组大鼠炎症侧外踝关节周围皮肤及皮下组织均可见IL1β/NK1受体阳性双标细胞。(2)致炎后第3d,炎症组大鼠外踝关节周围皮肤及皮下组织IL1β/NK1受体阳性双标细胞数目较生理盐水组显著升高(P<001)。电针组大鼠双标细胞数目较生理盐水组、炎症组显著降低(P<001)。(3)电针组双标细胞占NK1受体阳性细胞百分比显著低于生理盐水组、炎症组(P<005,P<001)。(4)电针组双标细胞占IL1β阳性细胞百分比较生理盐水组、炎症组显著降低(P<005)。结论电针可抑制炎症侧外踝关节周围皮肤及皮下组织NK1受体阳性的免疫细胞中IL1β的合成,并下调IL1β阳性的免疫细胞中NK1受体表达,提示电针可能通过阻断炎症灶局部炎症因子、致痛物质相互促生的恶性循环,从而起到消炎镇痛的作用。

组织化学染色与免疫电镜双标记方法在检测大鼠脑干前包钦格复合体细胞色素氧化酶活性中的应用

目的研究脑干前包钦格复合体(pre-B9t C)细胞色素氧化酶(COX)的活性变化。方法采用COX的组织化学染色与pre-B9t C的标记物神经激肽1受体(NK1R)纳米金-银加强免疫组织化学染色双标法,进行pre-B9t C特定神经核团尤其是不同亚细胞结构的COX活性检测,并进行COX活性的半定量分析。结果光镜下NK1R免疫反应性(NK1R-ir)产物主要分布于pre-B9t C神经细胞膜,清晰勾勒神经元轮廓,COX组织化学染色呈棕色,弥漫表达于NK1R-ir神经元胞质及突起内。电镜下NK1R-ir金颗粒主要分布于pre-B9t C神经元胞体和树突膜内表面,胞质内也可见金颗粒标记。pre-B9t C神经元不同亚细胞结构(胞体、轴突终末、树突)线粒体的形状和分布均有不同,在胞体和轴突终末线粒体多为圆形和椭圆形,在树突则以长杆状线粒体多见,胞体线粒体多为管泡状嵴,而板层嵴线粒体以轴突终末和树突多见。轴突终末内线粒体多聚集分布,树突内线粒体多近胞膜散在分布,但在突触部位,线粒体分布密集,且局部膨大接近突触后膜,这与突触的信息传递功能需要大量ATP产生密切相关。COX活性反应产物分布于线粒体嵴上,线粒体嵴电子密度不同表明COX活性不同。轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体。结论 pre-B9t C神经元不同亚细胞结构能量代谢不同,其中轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体,尤其突触部位线粒体分布密集,且表达高COX活性。将COX组织化学技术和免疫电镜技术相结合,为检测区域性COX活性,尤其是区域内不同亚细胞结构的COX活性提供了新方法。

T罗拉匹坦关键中间体的合成

合成一种罗拉匹坦关键中间体(S)-1-((R)-1-(3,5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-氧-2-苯基丙烷-2-基)氨基甲酸苄酯(1)。以N-Cbz-L-苯甘氨酸(2)与苯甲醛二甲缩醛(3)为原料,在三氟化硼乙醚体系中经缩合反应制得(2R,4S)-2,4-二苯基噁唑烷酮-3-甲酸苄酯(4),收率为92%;4与(S)-1-(3,5-二(三氟甲基)苯基)乙醇(5)经溴甲基化产物6在低温下发生取代反应,得到中间体7,收率为72%;7经四氢铝锂还原与碳酸氢钠水解,制得罗拉匹坦关键中间体1,两步收率为75%,反应总收率为50%。中间体及产物的结构经核磁共振和质谱确证。该法反应时间短,条件温和,操作简便,具有工业化应用前景。

银屑病患者嗜酸性粒细胞P物质及受体神经激肽/速激肽受体1水平升高

目的研究银屑病患者外周血嗜酸性粒细胞P物质(SP)及其受体神经激肽/速激肽受体1(NK1R)的表达。方法流式细胞术检测银屑病患者和健康人外周血SP和NK1R的水平;用(0.1、1)μg/m L的蒿草花粉、梧桐花粉和尘螨过敏源粗提液刺激后,流式细胞术检测银屑病患者外周血嗜酸性粒细胞SP和NK1R的水平。结果银屑病患者SP+和NK1R+嗜酸性粒细胞的比例分别升高2.7倍和0.5倍,平均荧光强度分别增加1.5倍和0.2倍。此外,1μg/m L梧桐花粉过敏源粗提液刺激后,SP+嗜酸性粒细胞的百分比下调60%,而0.1μg/m L梧桐花粉过敏源粗提液刺激后NK1R+嗜酸性粒细胞的比例升高0.6倍。结论银屑病患者血液嗜酸性粒细胞SP和NK1R水平升高。

雪莲注射液对切口痛大鼠痛觉及致痛物质水平的影响

目的研究腹腔内注射雪莲注射液对足底切口痛模型大鼠的镇痛作用,及对致痛物质P物质(SP)、神经激肽1-受体(NK-1R)水平的影响。方法成年雄性SD大鼠96只随机分成3组:曲马多注射液组(T组)、雪莲注射液组(S组)、模型组(C组),每组32只,制作足底切口痛大鼠模型。手术完成后行腹腔给药,T组:曲马多10 mg/kg,S组:雪莲注射液0.72 mL/kg,C组:等容量生理盐水。检测手术前1 d(T0)及手术后1 h(T1)、2 h(T2)、4 h(T3)、8 h(T4)不同时点大鼠机械痛阈的变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清P物质(SP)及神经激肽-1受体(NK-1R)的变化,采用Western blot法检测大鼠脊髓SP及NK-1R蛋白表达。结果手术前各组之间机械痛阈无差异,手术后3组大鼠机械痛阈均较手术前降低(P<0.05);其中,S组和T组相比无统计学差异(P>0.05);C组较S组和T组痛阈降低(P<0.05);血清SP、NK-1R含量与脊髓SP、NK-1R表达在S组和T组相比差异无统计学意义(P>0.05),两组均较C组降低(P<0.05)。结论雪莲注射液与曲马多注射液均对切口痛模型大鼠镇痛有效,镇痛效果无统计学差异,雪莲注射液可替代曲马多作为中重度疼痛的镇痛选择。

P物质与受体nk-1在结肠癌中的表达及定位(英文)

目的:了解P物质及其受体神经激肽1(NK-1)在结肠癌中的表达及定位,探讨其在结肠癌发病及临床诊断的意义。方法:应用免疫组化方法检测正常结肠、结肠癌组织及癌旁组织中SP及NK-1的表达。采用jmtjfx10[1].31统计学软件处理数据,所得数据进行Q检验。结果:①在结肠癌组织中P物质阳性着色于胞浆,呈巢状或弥漫分布。②NK-1受体主要着色于细胞浆内,呈巢状或弥漫分布;少数为于细胞膜。③p物质与其受体NK-1在正常结肠粘膜组织及癌旁组织也有表达,位于细胞浆内,形态多呈圆形、椭圆形或不规则形。④二者在绝大多数结肠组织中呈强阳性表达,显著高于正常结肠粘膜组织和癌旁组织(p<0.01).结论:p物质与其受体NK-1在结肠癌组织中高度表达,提示神经内分泌参与了结肠癌的发生有关,说明P物质及NK-1受体可能参与了结肠癌的发病过程。

(2R,3S)-2-[(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉盐酸盐的合成

对甲氧基苯甲醛(3)和2-氨基乙醇进行还原胺化反应得2-(4-甲氧基苄胺基)乙醇(4),4和乙醛酸经成环反应得2-羟基-4-对甲氧基苄基吗啉-3-酮(5),5和三氟乙酐反应得6后与(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇(7)缩合,再经结晶诱导不对称转化、格氏反应、氢化脱保护及成盐反应制得阿瑞吡坦关键中间体(2R,3S)-2-[(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉盐酸盐,总收率约18%(以3计)。