Neuromedin U及其受体的研究进展

NeuromedinU作为一种脑肠多肽 ,其外周生物活性包括刺激平滑肌、增加血压、增加血流、改变小肠离子传输、控制局部血流、调节肾上腺皮质素等功能 ,已发现neuromedinU在中枢神经系统的作用为减少食物摄取和体重。该文就neuromedinU及其受体的结构、组织分布和生理学功能等研究进行综述。

中枢NMU抑制食欲作用受黑皮质激素受体途径部分介导

研究中枢神经介素U(NMU)受体2(NMU2R)与黑皮质激素(MC)受体途径(MCR3/4)在调节摄食行为和能量平衡方面的相互作用关系。对禁食或不禁食大鼠脑室注射NMU2R内源性配体NMU和MCR3/4信号途径高亲和力拮抗剂SHU9119,通过测定不同时间点大鼠摄食量和体重变化,探讨中枢NMU2R和黑皮质素受体途径在调节动物摄食行为上的作用及其相互关系。脑室注射NMU对大鼠食欲有显著抑制作用;在同时注射NMU和SHU9119的情况下, NMU2R对大鼠的这种食欲抑制作用会部分受到MCR3/4信号途径变化的影响;同样,对SHU9119前处理大鼠脑内注射NMU,NMU2R抑制食欲的作用也会明显降低,其在摄食方面的作用被部分抑制。结果提示,NMU能够有效的调节摄食行为,而且这种在摄食行为上的调控作用可能部分受MC受体途径介导。

携带NMU2R shRNA重组腺相关病毒载体的构建及其评价

构建稳定表达 NMU2R shRNA的重组腺相关病毒载体,制备并纯化靶向性沉默 NMU2R 表达的高滴度重组腺相关病毒。首先设计合成 NMU2R shRNA,退火形成双链与pAAV-ZsGreen-shRNA质粒 Bam H I和 Hin d III双酶切产物相连接构建形成质粒pAAV-ZsGreen-r NMU2R shRNA,经双酶切和测序鉴定证实,重组质粒克隆正确,将重组质粒转染到AAV-293包装细胞中包装成腺相关病毒载体,成功制备重组腺相关病毒rAAV5-ZsGreen-r NMU2R shRNA,经测定纯化所得rAAV5病毒滴度为1×10^12 vg/mL。最后将rAAV5-ZsGreen-r NMU2R shRNA感染大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12,检测 NMU2R shRNA基因沉默效果,利用空病毒载体pAAV-ZsGreen-shRNA作对照,Real-time PCR及Western Blot方法测得 NMU2R mRNA及蛋白表达水平与对照组相比显著下降。综上,成功构建了高滴度携带 NMU2R shRNA重组腺相关病毒载体rAAV5-ZsGreen-r NMU2R shRNA。

基于SurvivalMeth数据库分析NMUR1在乳腺癌中的甲基化状态及其对预后的作用

为研究神经介素U受体1(NMUR1)在乳腺癌(BRCA)中的甲基化状态及其对预后的作用,通过UALCAN数据库中癌症基因组图谱(TCGA)数据分析NMUR1在组织中的表达水平,并利用人类蛋白质图谱(HPA)数据库对其进行进一步验证;采用SurvivalMeth数据库分析NMUR1在BRCA中的甲基化状态,并通过比例风险(COX)回归分析、Kaplan-Meier生存分析研究NMUR1甲基化状态与BRCA患者预后的相关性。共纳入分析UALCAN数据库中TCGA-BRCA肿瘤组织样本1097例和正常乳腺组织样本114例,结果发现,NMUR1在BRCA组织中的表达显著下调(P<0.001)。甲基化分析显示,NMUR1在BRCA组织中的cg00143376、cg01649597、cg02204630、cg10042319、cg16297948、cg17207690、cg18250832、cg18877969、cg19077400、cg21424120、cg26913833位点上的甲基化水平有显著差异(P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析结果表明,NMUR1在BRCA组织中胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(CpG)岛甲基化高风险组(n=320)患者的生存率显著低于低风险组(n=461)[风险比(HR)=2.140300,95%CI(1.3054,3.5091),P=0.001]。与低风险组相比,高风险组在cg18877969(P=0.015)、cg16297948(P=0.028)、cg19077400(P=0.011)、cg26913833(P=0.035)位点的CpG岛甲基化水平较高。NMUR1在BRCA组织中呈高甲基化状态,且NMUR1 CpG岛甲基化与BRCA患者的预后相关,这为NMUR1作为BRCA预后和(或)治疗的新靶点提供了依据。

葛根素对肥胖相关基因NPY、POMC和NMU表达的影响

研究葛根素对肥胖相关基因NPY、POMC和NMU表达的影响。选取体重250 g左右的SD雄性大鼠40只,随机分为4组:正常对照组、模型对照组、低剂量葛根素组、高剂量葛根素组,试验期42天。荧光定量PCR检测下丘脑NMU2R基因表达量,半定量PCR检测下丘脑NMU、NPY及POMC基因表达量。高剂量葛根素组NMU2R基因表达量显著高于正常对照组和模型对照组(P<0.05),低剂量葛根素组的NMU2R基因表达量高于高剂量葛根素组(P<0.05)。NPY基因表达在葛根素的诱导下减弱(P<0.05);POMC和NMU基因表达在葛根素的诱导下增加(P<0.05)。试验结果说明,葛根素的减肥机制与NPY、POMC的表达调控存在一定关联性。

神经介素U蛋白在人甲状腺乳头状癌中表达的意义及作用机制

目的:探讨神经介素U(NMU)蛋白在人甲状腺乳头状癌组织中的表达、临床意义及对细胞增殖的影响。方法:生物信息学分析GEPIA数据库中NMU在甲状腺乳头状癌组织及正常组织中的mRNA水平,并分析其表达与患者无病生存期的关系。进一步回顾性分析了来自河南省第二人民医院2016年3月—2022年3月接受手术治疗的71例患者的临床病理资料。采用免疫组化法检测甲状腺乳头状癌组织和正常组织中NMU蛋白表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系。培养TPC-1和KTC-1细胞,通过NMU的shRNA质粒转染下调NMU表达,通过集落形成实验及噻唑蓝(MTT)实验检测对甲状腺乳头状癌细胞增殖的影响。结果:生物信息学分析揭示在GEPIA数据库中NMU的mRNA显著高表达,并与患者无病生存期显著相关。免疫组化揭示NMU在癌组织中显著高表达,而在正常组织中则为阴性或无表达,表达水平与肿瘤分期(高级别者42例,χ^(2)=8.184,P=0.004)及多灶(33例,χ^(2)=7.469,P=0.006)显著相关,而与患者的年龄、性别、淋巴结转移无关(均P>0.05)。MTT实验(t=7.33,P=0.0052;t=8.08,P=0.0040)及集落形成实验(t=12.43,P=0.0011;t=16.46,P=0.0005)证实,NMU在甲状腺乳头状癌细胞中的下调抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖。结论:甲状腺乳头状癌组织中NMU显著高表达,且与患者侵袭性临床病理特征及无病生存有关,NMU蛋白促进甲状腺乳头状癌细胞增殖。

基于多参数MRI影像组学模型预测乳腺癌NMUR1甲基化状态的研究

目的探究基于多参数磁共振成像(MRI)影像组学特征构建的预测模型在预测乳腺癌神经调节素U受体1(NMUR1)基因甲基化状态中的临床价值。方法回顾性分析2018年1月至2023年1月于达州市中西医结合医院就诊的乳腺癌患者258例,根据2∶1的比例分配,训练集患者172例,验证集患者86例。利用磁分离技术获取乳腺癌细胞,采用甲基化特异性PCR方法检测NMUR1甲基化状态,根据检测结果将训练集患者分为乳腺癌NMUR1甲基化阳性组(n=93)和乳腺癌NMUR1甲基化阴性组(n=79)。利用MRI行T2WI-FS、DWI、DCE多参数扫描获取患者乳腺癌病灶信息。多因素Logistic回归分析临床资料中乳腺癌NMUR1甲基化状态独立影响因素;单因素方差分析和最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归降维多参数MRI影像组学特征,构建单一序列影像组学标签;多因素回归分析影像组学特征并构建合并序列影像组学评分模型;合并序列影像组学特征结合临床资料构建联合模型;采用受试者工作特征曲线(ROC)、Hosmer-Lemeshow检验和校准曲线评价模型预测能力,采用临床决策曲线(DCA)评估影像组学联合模型临床意义。结果临床资料中乳腺癌家族史、肿瘤分期晚期、淋巴结转移、三阴型乳腺癌是乳腺癌NMUR1甲基化状态的独立影响因素(P<0.05);单因素方差分析和LASSO回归降维后最终获得58个影像组学特征,其中DCE 17个,T2WI-FS 13个,DWI 28个;影像组学特征中ClusterProminence_angle135_offset4.1、DifferenceEntropy.1、GLCMEntropy_angle0_offset1.2、DifferenceEntropy.1、ADC.Quantile95、ADC.Minlntensity为乳腺癌NMUR1甲基化状态的独立影响因素(P<0.05);相较于单一序列影像组学标签,合并序列影像组学评分模型区分度更高(P<0.05);联合模型区分度和准确度较高,预测效果较好,具有较高的临床价值。结论乳腺癌家族史、肿瘤分期晚期、淋巴结转移、三阴型乳腺癌是乳腺癌NMUR1甲基化状态的独立影响因素,由合并序列影像组学特征联合临床资料构建的联合模型在预测乳腺癌NMUR1基因甲基化状态中具有较高的临床价值。

神经介素U及其受体生理功能研究进展

神经介素U(neuromedin U,NMU)属于平滑肌收缩多肽,广泛分布于外周器官及中枢神经系统。不同种动物的NMU在长期的进化压力下仍具有高度的保守结构,表明NMU具有重要的生理功能。NMU的两个特异性的内源受体NMU1R和NMU2R广泛分布于动物体内,并具有不同的分布模式,显示出NMU生理功能的多样性。已证实NMU在调节平滑肌收缩、血压与局部血流、肠胃离子转运、应激、能量代谢、摄食行为、胃酸分泌与胃排空、痛觉、癌症及免疫等方面具有重要的生理功能。本文主要概述了NMU及其受体近年来生理功能的研究进展。

麻黄细辛附子汤对过敏性鼻炎小鼠神经通路的影响

目的:探索麻黄细辛附子汤(MXFD)及其拆方对过敏性鼻炎(AR)的作用机制,明确其是否通过2型固有淋巴样细胞(ILC2s)上的神经通路神经调节肽U(NMU)/神经调节肽U受体1(NMUR1)发挥抗过敏作用。方法:C57BL/6J小鼠分别按单味药、两味药、三味药组合给药分为7组,使用鸡卵清蛋白(OVA)制备AR模型,造模成功后给予不同组合的中药灌胃治疗14 d。过敏反应行为学评分法评价模型是否成功;免疫荧光双染法检测肺组织中活化T细胞核因子2(NFAT2)的含量;逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肺组织中神经调节肽U受体1(NMUR1)的基因表达水平。结果:小鼠造模成功,各组NFAT2、NMUR1基因的表达水平均升高(均P<0.01)。中药治疗后,给药各组过敏反应行为学评分均降低(均P<0.01);NFAT2表达均降低(均P<0.01),麻黄组抑制效果最显著;除辛附组,其他组NMUR1的基因表达水平均降低(均P<0.01),麻附组、细辛组抑制效果最显著。结论:麻黄细辛附子汤可影响NMU/NMUR1通路抑制过敏性鼻炎,麻黄单用在抑制NFAT2环节效果最优,麻黄和附子合用、细辛单用抑制NMUR1表达效果最优。

神经介素U在体外对猪淋巴细胞活性及自然杀伤细胞活性的影响

[目的]本文旨在研究神经介素U(NMU)对猪外周血淋巴细胞(PBL)的免疫调节作用。[方法]以小梅山猪为研究对象,用半定量RT-PCR方法研究了猪PBL中NMU及其受体(NMUR1和NMUR^2)基因的表达,用免疫组织化学染色方法检测了猪PBL中NMU及其受体蛋白的分布,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞计数法研究了NMU对猪PBL细胞和NK细胞活性的影响。[结果]NMUR1 mRNA在猪PBL中表达,NMU和NMUR1蛋白在猪PBL的胞膜及胞浆均有分布。用不同浓度(0.01、0.1、1、10、100和1 000 nmol·L^(-1))NMU处理体外培养的PBL,与对照组相比,0.1、1和10 nmol·L^(-1)NMU极显著提高猪PBL的细胞活性(P<0.01),且当NMU浓度为10 nmol·L^(-1)时,PBL活性的水平达到峰值(179.4±3.0)%。用不同浓度(0.01、0.1、1、10、100和1 000 nmol·L^(-1))NMU处理体外培养的PBL细胞作为效应细胞,以K562细胞作为靶细胞。与对照组相比,在效靶比为15∶1时,0.1、1和10 nmol·L^(-1)的NMU均能显著提高NK细胞的细胞活性(P<0.01);效靶比为30∶1时,1和10 nmol·L^(-1)的NMU均能显著提高NK细胞的细胞活性(P<0.01);在效靶比为60∶1时,10 nmol·L^(-1)NMU能显著提高NK细胞的细胞活性(P<0.01)。[结论]NMU及NMUR1在猪PBL中均有表达,且NMU在一定浓度范围内能提高猪NK细胞对K562细胞的杀伤能力。

神经介素U及其受体2在正常发育与性早熟雌性大鼠中枢神经系统中表达的变化及意义

目的研究神经介素U(NMU)及其受体2(NMUR2)在正常发育与性早熟雌性SD大鼠中枢神经系统中的表达,分析其在真性性早熟发生中可能的作用。方法正常5日龄SD雌性大鼠60只,随机分成6组:实验1组(性早熟青春期前组)、实验2组(性早熟青春期组)、实验3组(性早熟成年期组)和对照1组(正常青春期前组)、对照2组(正常青春期组)、对照3组(正常成年期组),每组10只。实验组一次性皮下注射达那唑300μg,建立性早熟模型。利用RT-PCR方法检测各组下丘脑NMUR2 mRNA及垂体NMU mRNA的表达水平。结果1.对照与实验1组NMU mRNA表达均显著高于实验2、3组和对照2、3组(Pa<0.01),而实验2与3组、对照2与3组表达均无显著性差异(Pa>0.05)。2.实验2组NMU mRNA表达明显低于对照1组(相同日龄)(P<0.01)。3.对照与实验2组NMU mRNA的表达无显著性差异(P>0.05)。4.NMUR2 mRNA的表达与NMU mRNA的表达呈现相同的变化趋势。结论NMU及其受体NMUR2可能在真性性早熟的发生中起重要作用。

神经介素U在体外对猪树突细胞活性及功能的影响

[目的]本文旨在探讨不同浓度神经介素U(NMU)对外周血单核源树突细胞(DC)刺激T淋巴细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响。[方法]采集小梅山猪外周血,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导外周血单核细胞形成未成熟树突细胞,再加入脂多糖(LPS)刺激获得成熟的树突细胞,同时观察DC形态。加入不同浓度(0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L^(-1))NMU并分别培养2、4、8和12 h后,收集细胞上清液,用ELISA法测定IL-4、IL-5和IL^(-1)3的浓度。加入不同浓度(0.1、1、10、100、1 000 nmol·L^(-1))NMU培养24 h后,收集细胞,用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒分别检测DC刺激混合淋巴细胞时细胞的增殖和DC凋亡率。[结果]NMU(0.1~100 nmol·L^(-1))能够抑制未成熟树突细胞(i DC)的细胞凋亡(P<0.01),且NMU与NMU+LPS作用效果相一致,10 nmol·L^(-1)NMU组与10 nmol·L^(-1)NMU+LPS组都能降低i DC凋亡,凋亡率分别为2.383%和2.360%,与LPS组相比,NMU+LPS组抑制i DC细胞凋亡效果极显著(P<0.01),说明NMU与LPS协同发挥抑制i DC细胞凋亡作用;与对照组相比,0.1~100 nmol·L^(-1)NMU能极显著促进m DC分泌IL-5(P<0.01)和抑制IL-4分泌(P<0.01)。NMU对IL^(-1)3的影响呈现多样性,低剂量(0.01~0.1 nmol·L^(-1))NMU在2、4 h抑制m DC细胞分泌IL^(-1)3(P<0.05),中剂量(1~10 nmol·L^(-1))NMU在2 h先抑制m DC分泌IL^(-1)3(P<0.05),4 h后又促进其分泌(P<0.05),高剂量(100~1 000 nmol·L^(-1))NMU则促进m DC分泌IL^(-1)3(P<0.05)。经NMU诱导后,i DC和m DC均能促进T淋巴细胞增殖(P<0.01)。[结论]在一定浓度范围内,NMU能够抑制猪树突细胞的凋亡,并提高其细胞活性和促进树突细胞刺激淋巴细胞增殖的功能,并能影响树突细胞细胞因子分泌,提示神经介素U参与了对猪免疫功能的调节。

神经调节肽U的研究进展

神经调节肽U(neurom ed in U,NMU)是一种结构上高度保守的神经肽,广泛分布在下丘脑、垂体、胃肠道以及泌尿生殖系统,具有刺激平滑肌收缩、抑制摄食、调节能量平衡、抑制胃酸分泌、延缓胃排空和参与下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节等多种功能,对肠道离子转运、局部血流和血压的调节甚至对疼痛和免疫调控等都有作用。作者就其主要功能和部分作用机制的研究进展作一综述。

神经介素U调控动物摄食的研究进展

神经介素U(NMU)是一种能抑制动物摄食的神经肽,其广泛分布于中枢神经系统和外周组织中,具有调节摄食、能量平衡、免疫和繁殖等多种生物学功能。本文综述了NMU的发现、结构、组织分布及其调控摄食的作用和机制,以期为动物摄食和生长的调控提供理论依据。

神经调节肽U在喉癌淋巴结转移中的表达及意义

目的研究神经调节肽U(neuromedin U,NMU)在喉癌淋巴结转移中的作用,为淋巴结转移的早期诊断提供新的分子标志物。方法收集锦州医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科2013年1月~2015年12月间共120例喉癌患者标本,免疫组化方法分析原发灶及淋巴结组织中NMU的表达,组织芯片技术分析NMU在喉癌组织中的表达。结果 NMU在转移组喉癌原发灶和淋巴结中的表达明显高于非转移组,与肿瘤的N分级相关而与T分级无明显相关性。结论 NMU在伴转移的喉癌组织中表达明显增高,可能成为预测淋巴结转移的分子标志物。

青春发育启动及其调控分子机制研究新进展

青春发育启动是重要的生理过程,其调控的确切机制仍不明确。下丘脑GnRH神经元被激活是青春期启动的关键。营养状况、遗传因素、神经生物机制及其分泌的激素在不同程度上影响GnRH神经元的激活和GnRH的释放。近年研究发现,kisspeptin、瘦素、神经介素U、ghrelin等均可影响青春期的发育,甚至影响性腺的功能。

血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠IL-25、NMU以及ILC2调控作用初步研究

目的通过注射卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型并用血吸虫多肽SJMHE1干预,研究SJMHE1对白细胞介素-25(IL-25)、神经介素U(NMU)和2型细胞因子表达水平,以及2型固有淋巴细胞(ILC2)和2型辅助性T细胞(Th2细胞)的调控作用。方法将6~8周BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组和多肽组,每组6只。正常组小鼠未给予任何干预;哮喘组和多肽组小鼠在第0、7、14天给予腹腔注射抗原混合溶液0.2 m L(含OVA 50μg、10%氢氧化铝,溶于PBS),在第21~28天给予2.5%OVA溶液(溶于PBS)雾化,每次至少40 min,进行哮喘激发;多肽组小鼠第0、7、14天皮下注射多肽乳化液(SJMHE1)100μL;第28天,安乐死法处死所有小鼠。HE染色观察小鼠肺部病理变化,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清IgE水平,用流式细胞术检测小鼠肺脏ILC2和Th2细胞比例,用荧光定量PCR检测小鼠肺组织IL-25、NMU、IL-4、IL-5、IL-13 mRNA水平。结果哮喘模型成功建立,SJMHE1能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症反应。哮喘组和多肽组小鼠血清IgE水平较正常组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,哮喘组小鼠Th2和ILC2细胞比例显著增高,IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量增高,IL-25和NMU表达量均增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与哮喘组比较,多肽组小鼠Th2和ILC2细胞比例显著减低,IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量减低,NMU表达量减低,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,IL-25和NMU呈显著正相关(r=0.874,P=0.002)。结论SJMHE1下调NMU的表达量,抑制ILC2和Th2细胞的活化和增殖,减轻哮喘小鼠炎症反应。

喉癌中神经介素U过表达与区域淋巴结转移相关性研究

目的:神经介素U(NMU)在多种组织和器官具有免疫调节作用,本研究拟探讨其与喉癌局部转移的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测240例喉癌患者原发灶组织中NMU的表达差异,随后采用组织芯片(TMA)扩大样本量进一步分析NMU蛋白表达与喉癌患者T、N、M分期的相关性。结果:240例喉癌患者中51.4%的患者出现颈部淋巴结转移。出现局部转移的患者中原发灶中NMU的表达显著高于无转移患者,且随着肿瘤分期进展,NMU表达显著增加。结论:NMU在喉癌中的表达与喉癌局部转移及喉癌TNM分期显著相关,提示NMU可能参与喉癌的进展及转移过程。

神经介素U与摄食调控的研究

神经介素U首次是从锗脊髓中分离得到并提纯的，在体内分布广泛，主要分布在胃肠道和中枢，其受体为G蛋白祸联受体的配体FM-3和FM-4，即神经介素U受体1和神经介素U受体2。最近研究发现,神经介素U为内源性抑食肽，具有抑制摄食、增加自主活动、促进机体代射、调节能量平衡的作用。本文主要介绍神经介素U及其受体在摄食调控方面的研究。