Silencing Neuropilin 1 gene reverses TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition in HGC-27 gastric cancer cell line

Objective The aim of this study was to determine Neuropilin 1(NRP1)contribution to transforming growth factorβ1(TGF-β1)-induced epithelial mesenchymal transition(EMT)of HGC-27 gastric cancer cells and study its mechanism.Methods In this study,TGF-β1 was used to induce EMT in HGC-27 cells.Further,these cells were stably transfected with siRNA targeting NRP1.Wound healing and transwell assays were used to measure cell migration and invasion,respectively.NRP1 and EMT markers were measured using quantitative real time reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting.Results Exposure of TGF-β1 conferred a fibroblastic-like shape to cancer cells and significantly increased the expression of NRP1 in HGC-27 cells.TGF-β1 subsequently promoted migration and invasion of HGC-27 cells.Furthermore,silencing NRP1 inhibited the invasion and migration of TGF-β1-induced cells undergoing EMT.Conclusion Silencing NRP1 can inhibit cell migration,invasion,and metastasis and reverse the TGF-β1-induced EMT process of gastric cancer.

Sema 3A/NRP-1信号通路与骨代谢的研究进展

信号素3A(semaphorin 3A,Sema 3A)是信号素家族一员,参与轴突引导、心血管发育、肿瘤形成、免疫细胞的调节,以及骨稳态,神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)作为其辅助受体发挥作用。近年来研究发现,Sema 3A/NRP-1通路能够促进骨形成、抑制骨吸收从而调节骨代谢。具体通过经典Wnt/β-catenin信号通路、sGC-cGMP信号通路、神经调节、RANK-RANKL通路、炎症反应调节等途径调节骨代谢。笔者对近年来国内外相关文献进行综述,旨在为防治骨质疏松提供参考。

基于CiteSpace的神经纤毛蛋白-1研究的可视化分析

目的运用CiteSpace分析神经纤毛蛋白-1(NRP1)的研究现状、热点和趋势。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网及Web of Science核心合集数据库从建库至2022年9月NRP1的相关文献,利用CiteSpace对年份、作者、机构及关键词进行可视化分析。结果共纳入中文文献536篇和英文文献2444篇,年发文量呈现波动上升趋势。中文文献发文量最多的作者是颜江华和韩正祥,英文作者是Ruhrberg,Christiana。厦门大学和哈佛大学分别是中英文文献发文量最多的机构。胃癌、血管生成、乳腺癌是中文研究热点,表达、受体、内皮生长因子是英文研究热点。结论NRP1的研究仍处于发展阶段,研究热点和趋势是机制和临床研究。团队间应加强合作,使研究更为系统。

大肠癌组织中Neuropilin-1的表达及其与肿瘤血管生成的相关性研究

目的:检测大肠癌组织中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)mRNA的表达情况及微血管密度(MVD)值,探讨NRP-1mRNA的表达与MVD间的相关性,以期了解NRP-1与肿瘤血管生成的关系。方法:取45例大肠癌组织及相应正常大肠组织,采用半定量RT-PCR方法检测其NRP-1mRNA的表达情况,采用免疫组化染色法检测CD105标记的新生肿瘤血管,计数MVD值。结果:45例大肠癌组织中39例可见NRP-1mRNA的表达,阳性率为87.0%;相应正常大肠组织仅3例表达,阳性率为6.7%。大肠癌组织中NRP-1mRNA的表达程度与肿瘤的大小、浸润的深度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与肿瘤部位、组织学类型、分化程度、患者的性别及年龄无关(P>0.05)。大肠癌组织中NRP-1mRNA的表达程度随MVD值的增加而升高(r=0.38,P=0.01)。结论:NRP-1可能与大肠癌的肿瘤血管生成相关,NRP-1mRNA高表达代表着大肠癌不良的生物学行为趋向。

Neuropilin-1 mRNA在不同动情周期及周龄阶段小鼠卵巢中的表达

目的:探讨Neuropilin-1(NRP-1)mRNA在繁殖适龄期小鼠动情周期间以及不同周龄阶段小鼠卵巢中的表达。方法:选用繁殖适龄期不同动情周期小鼠以及不同周龄阶段小鼠,通过实时定量聚合酶链反应检测其卵巢中NRP-1 mRNA的表达。结果:NRP-1在小鼠不同动情周期卵巢中的表达在mRNA水平差异无显著性(P>0.05)。比较其mRNA在不同周龄阶段小鼠卵巢的中表达显示,近绝育期32周组表达水平显著高于其他组:为3周组的2.94倍(P<0.01),6周组的4.92倍(P<0.01),11周组的2.29倍(P<0.01)。而其他各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NRP-1 mRNA在小鼠卵巢中的表达不随动情周期而改变,且随着卵巢生理功能的下降而显著升高,提示NRP-1与卵巢衰老进程有关。

Neuropilin-1^＋ T细胞与CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的比较

目的:分析Neuropilin-1+T细胞(Nrp-1+T细胞)与经典CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的关系并比较二者的免疫调节作用。方法:流式细胞术分析BALB/c小鼠脾脏T细胞上Nrp-1与CD4、CD25的表达关系并分选Nrp-1+T细胞及CD4+CD25+Treg,通过B16-F10-luc-G5黑色素肿瘤细胞体外培养实验并利用萤光成像系统,观察比较两种细胞对NK细胞杀伤B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的影响。结果:CD4+CD25+Treg中表达Nrp-1的比例为(27.28±1.17)%,明显高于CD4+CD25-T细胞的(1.63±0.08)%(P<0.01);在体外实验中,Nrp-1+T细胞与CD4+CD25+Treg均能抑制NK细胞杀伤B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞,Nrp-1+T细胞组的肿瘤细胞数目在6、24、48、72h分别为984±15、1015±14、1261±21、1323±38,高于CD4+CD25+Treg组的931±4、983±8、1201±18、1256±18,两组肿瘤细胞数目在各时间点均有统计学意义(P<0.01)。结论:经典CD4+CD25+Treg中表达Nrp-1的细胞比例较高,Nrp-1+T细胞有负性免疫调节作用,抑制功能比CD4+CD25+Treg更强,可以作为一类新的Treg亚群。

Neuropilin-1对急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞生物学特征的影响

目的:探究神经菌毛素-1(NRP-1)对急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞的生物学特征的影响。方法:分别采用以下两种方法(构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株或使用NRP-1单克隆抗体)抑制NRP-1功能,通过对比抑制NRP-1功能后CCRF-CEM细胞株与正常CCRF-CEM细胞株,确定NRP-1对CCRF-CEM细胞的生物学特性的影响。结果:成功构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株(NRP-1-shRNA)。两种方法抑制NRP-1功能后,细胞的增殖、迁移能力均显著降低,而细胞凋亡及对化疗药物的敏感性增加。结论:NRP-1可促进急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞增殖和细胞迁移能力,抑制细胞的凋亡和降低细胞的化疗敏感性。

Neuropilin-1及VEGF在胃癌组织中的表达与微血管生成的关系

目的:探讨胃癌组织中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与微血管生成及胃癌生物学行为的关系和意义。方法:应用RT-PCR法检测自2011年5月至2013年5月天津医科大学肿瘤医院72例手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中NRP-1 mRNA和VEGF mRNA的表达,免疫组织化学SP法检测组织中CD105标记的新生血管内皮细胞并测定微血管密度(MVD),统计分析胃癌组织中NRP-1 mRNA、VEGF mRNA的表达与临床病理因素及MVD之间的关系。结果:胃癌组织中NRP-1 mRNA、VEGF mRNA的表达及MVD计数均高于正常组织(P<0.05),且与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05);胃癌组织中NRP-1 mRNA表达和VEGF mRNA表达呈正相关(r=0.58,P<0.01),NRP-1 mRNA的表达与MVD呈正相关(r=0.52,P<0.01),VEGF mRNA的表达与MVD呈正相关(r=0.74,P<0.01)。结论:Neuropilin-1及VEGF的高表达促进了肿瘤微血管生成且与胃癌的进展密切相关,表达存在协同作用,两者的联合检测可在一定程度上判断胃癌侵袭性及进展,并对指导肿瘤抗血管治疗具有一定的价值。

胃癌患者血清IGFBP3和Neuropilin-1的表达水平及其临床意义

目的探讨胃癌患者血清胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)和神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1)水平及其与临床病理参数间的相关性。方法选取胃癌患者98例,同期收集体检者50例为健康对照组。检测2组研究对象血清IGFBP3和Neuropilin-1水平;分析胃癌组患者血清IGFBP3和Neuropilin-1水平与胃癌临床病理参数间的相关性;比较随访期间存活组与死亡组患者间血清IGFBP3和Neuropilin-1表达。结果与对照组比较,胃癌组患者血清IGFBP3水平明显减少而Neuropilin-1水平明显升高(P<0.01)。血清IGFBP3和Neuropilin-1的表达与胃癌患者的年龄、性别、大小、肿瘤位置无显著性相关(P>0.05),而与TNM分期、分化程度以及淋巴结转移呈显著性相关(P<0.01)。所有患者1年期随访结果:33例死亡,65例存活;死亡组患者入院时血清IGFBP3水平明显低于存活组,而Neuropilin-1表达明显高于存活组,比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌患者血清IGFBP3水平明显降低而Neuropilin-1的水平明显增高,与胃癌的恶性程度关系密切,也可能是临床评价胃癌患者预后的重要指标。

Semaphorin 3A及其受体Neuropilin-1在舌癌组织及Tca8113中的表达

目的:观察Semaphorin 3A(SEMA3A)及其受体Neuropilin-1(Nrp-1)在舌癌组织及舌癌细胞系Tca8113中的表达,探讨其对舌癌中血管生成的意义。方法:应用免疫组织化学方法检测舌癌组织和癌旁组织中SEMA3A及Nrp-1的表达,应用免疫细胞化学检测SEMA3A及Nrp-1在Tca8113中的表达,并用Western印迹检测舌癌组织、癌旁组织及舌癌细胞系Tca8113中SEMA3A及其受体Nrp-1的表达情况。采用SPSS11.0软件包对数据进行χ2检验。结果:免疫组织化学显示,17/20例舌癌组织SEMA3A呈阴性表达,18例Nrp-1呈阳性表达。19/20例癌旁组织中SEMA3A阳性表达,而Nrp-1均呈阴性表达。免疫细胞化学显示,SEMA3A在舌癌细胞中检测不到,而Nrp-1均呈阳性表达。Western印迹检测与此结果完全相符。SEMA3A及Nrp-1在舌癌及癌旁组织中的表达有显著差异(P<0.001)。结论:SEMA3A及其受体Nrp-1在舌癌组织及细胞系中表达异常,提示其可能与肿瘤血管生成相关。

大鼠弥漫性轴索损伤后突起坍塌蛋白Sema3A及其受体neuropilin-1的表达

目的研究突起坍塌蛋白(semaphorin 3A,Sema3A)及其受体神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)在弥漫性轴索损伤(DAI)大鼠脑组织中的表达,探讨二者在DAI后脑损伤及神经修复中的可能作用及分子机制。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为4组:对照组、DAI后6h、24h、7d组,每组各12只。采用大鼠头颅瞬间旋转损伤装置,制作大鼠颅脑DAI模型,改良NSS法评估大鼠神经功能的改变。按预定时间点灌注取脑进行HE及镀银染色,免疫荧光染色检测Sema3A和NRP-1的表达定位。RT-PCR与Western blot分别检测皮质、海马、脑干Sema3A和NRP-1的mRNA及蛋白表达。结果 DAI造模后在脑干、皮髓交界区、胼胝体等部位观察到神经轴突有不同程度的肿胀、迂曲、断裂、轴索球形成等病理征象,并有不同程度的神经细胞变性、核固缩等改变,伤后24h最明显。免疫荧光显示Sema3A主要表达于各脑区神经元,NRP-1表达于神经元、星形胶质细胞及微血管内皮细胞。对照组Sema3A和NRP-1mRNA及蛋白表达水平较低,DAI后6h其表达显著升高,24h达高峰,并持续到7d。结论 Sema3A及其受体NRP-1在DAI大鼠脑组织内表达升高,参与神经损伤及修复的病理生理过程。

Neuropilin-1在子宫内膜癌细胞系中的表达及17β雌二醇对其表达的调控及意义

目的:探讨神经纤毛蛋白(NRP-1)在子宫内膜癌细胞系中的表达及17β雌二醇(17β-E2)对其表达的调控。方法:采用RT-PCR法及Western blot法检测NRP-1在子宫内膜癌HEC-1A及Ishikawa细胞系中的表达;荧光定量PCR法检测17β-E2对HEC-1A及Ishikawa细胞系中NRP-1 mRNA表达的调控;Western blot法检测Ishikawa细胞中NRP-1表达的变化。结果:HEC-1A及Ishikawa细胞中NRP-1 mRNA及蛋白水平均为阳性表达。17β-E2对Ishikawa细胞系中NRP-1 mRNA表达的影响显著强于HEC-1A,且17β-E2浓度为2×10-7mol/L,作用时间48h时对NRP-1 mRNA表达的促进作用最明显。17β-E2对Ishikawa细胞中NRP-1蛋白表达呈时间依赖性。结论:NRP-1表达于高表达雌激素受体(ER)细胞系Ishikawa及低表达ER细胞系HEC-1A中,且2×10-7mol/l E2作用48h能明显促进Ishikawa细胞系中NRP-1的表达,提示NRP-1可能与子宫内膜癌的发生发展密切相关。

Neuropilin-1在小鼠黑色素瘤细胞增殖中的作用

目的:探讨Neuropilin-1(Nrp-1,神经菌毛素)在小鼠黑色素瘤细胞体外增殖中的作用。方法:用活细胞荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE)标记小鼠B16-F10黑色素瘤细胞后,将肿瘤细胞分别用Nrp-1阻断抗体及Nrp-1配体血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor165,VEGF165)阻断抗体预孵育,体外培养72小时后流式细胞术结合Modfit软件分析肿瘤细胞增殖情况。结果:CFDA-SE标记黑色素瘤细胞生长良好,非抗体阻断组的肿瘤细胞增殖指数显著高于Nrp-1抗体阻断组[(20.67±1.16)%vs(12.67±0.28)%,P<0.01]及VEGF-165抗体阻断组[(20.67±1.16)%vs(15.15±0.83)%,P<0.01],两个抗体阻断组的增殖指数差异也非常显著(P<0.01)。结论:Nrp-1及其配体VDGF-165对小鼠黑色素瘤细胞的增殖有显著地促进作用,阻断Nrp-1产生的抑制肿瘤细胞增殖作用比阻断VEGF165更强;VEGF165/Nrp1直接作用及Nrp-1/Nrp-1直接作用也可能是肿瘤细胞增殖的重要机制。

Neuropilin-1在消化道恶性肿瘤发生发展中的生物学作用

消化道肿瘤是最常见的恶性肿瘤,发病率高,死亡率亦高。神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1)在消化道恶性肿瘤发生发展中的作用成为近年来研究的热点,其调控恶性肿瘤血管生成过程,介导肿瘤细胞的增殖与侵袭,从而促进肿瘤进展与转移。本文就Neuropilin-1在肿瘤血管生成、肿瘤增殖与侵袭、转移及肿瘤治疗靶标中的作用作一综述。

Neuropilin-1的结构、功能及其在口腔癌中的研究进展

神经纤毛蛋白-1（Neuropilin-1,NRP-1）是一个大小120~130 ku的非酪氨酸激酶跨膜蛋白,具有独特的分子结构,可作为Ⅲ型信号素家族（Semaphorin3A,Sema3A）、血管内皮生长因子165（vascular endothelial growth factor165,VEGF165）、胎盘生长因子（placenta growth factor,PIGF）等细胞因子的多功能受体,并受miR-9、miR-124、miR-181b、miR-320等的靶向调节,参与上述细胞因子的信号通路,与肿瘤血管新生和转移密切相关。近年来,对NRP-1的研究已从最初的神经轴突导向扩展至血管生成、肿瘤增殖和转移、调节免疫等多方面。该文就NRP-1的结构、功能及在口腔癌中的研究进展作一简要综述。

Neuropilin-1在结肠癌中的表达及其与预后的关系

目的研究结肠癌中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)的表达,并探讨其与预后的关系。方法收集我院具有随访资料结肠癌石蜡标本58例,采用免疫组化法检测结肠癌及癌旁组织中NRP-1的表达,并采用KaplanMeier方法分析NRP-1表达的高低与患者预后的关系。结果免疫组化结果显示,结肠癌组织中NRP-1表达明显高于癌旁组织(t=2.464,P=0.017);NRP-1阳性表达患者32月生存率显著低于阴性表达患者(χ~2=6.832,P=0.009)。结论NRP-1的高表达参与结肠癌的发生及发展,并导致患者预后不佳。

Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响。方法:将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组12只;假手术组只行颅骨开窗手术,其余各组均建立胶质细胞瘤模型。模型组腹腔注射0.9%氯化钠,治疗组腹腔注射NRP-1 MAb,均每日1次。干预14天后取材。对肿瘤组织称重,免疫组化检测Bax和Bcl-2表达,Western blot检测NRP-1蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达量,qPCR检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达情况,TUNEL检测细胞凋亡情况。结果:假手术组无肿瘤,治疗组肿瘤组织重量显著小于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示:与假手术组比较,模型组和治疗组Bax表达显著下降,Bcl-2表达显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组Bax表达上升,Bcl-2表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组NRP-1蛋白和Bcl-2蛋白表达量显著上升,Bax蛋白表达量显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组NRP-1蛋白和Bcl-2蛋白表达量显著下降,Bax蛋白表达量显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。qPCR检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组Bax mRNA表达显著下降,Bcl-2mRNA表达显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组Bax mRNA表达上升,Bcl-2mRNA表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。TUNEL检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组的细胞凋亡率显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组的细胞凋亡率显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:NRP-1MAb可通过抑制NRP-1表达而上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达促进胶质细胞瘤凋亡。

射波刀治疗对复发胶质瘤患者外周血CD4^+CD25^+Neuropilin-1^+调节性T细胞与近期疗效的影响

背景与目的:观察复发胶质瘤患者接受射波刀治疗后外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+调节性T细胞(Treg)的变化,分析患者的近期疗效,旨在探讨射波刀对复发胶质瘤可能的治疗机制。方法:以12名健康成年人作为对照组,用流式细胞仪检测53例手术后复发的胶质瘤患者(分为A、B两组,A组为射波刀治疗组,n=25;B组为非射波刀治疗组,仅给予保守对症治疗而未进行任何放化疗,n=28)外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg水平,并进行30月的生存随访,观察两组的近期疗效。结果:治疗前A、B两组患者外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg分别为(13.44±2.76)%和(12.91±2.87)%,明显高于对照组(2.78±1.07)%(P<0.01)。A组经射波刀治疗3月后外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg水平为(3.13±1.09)%,较治疗前明显下降(P<0.01)。B组CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg为(16.12±2.98)%,较3月前升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。A组缓解率为76.0%,无进展率为12.0%,进展率为12.0%;B组缓解率为10.7%,无进展率为17.9%,进展率为71.4%。A组死亡5例(20%),中位生存时间13个月(3~31月)。B组随访死亡15例(53.6%),中位生存时间7个月(1~13月)。其中两组缓解率、进展率、死亡率及中位生存时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复发胶质瘤患者体内CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg升高,外周血CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg检测有助于监测胶质瘤复发和预后的评估;射波刀可以降低复发胶质瘤患者的CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg水平,近期疗效优于保守治疗;射波刀治疗复发胶质瘤的机理可能与解除瘤负荷、降低CD4+CD25+Neuropilin-1+Treg、纠正机体免疫功能紊乱有关。

Neuropilin-1 mRNA在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达

目的:探讨Neuropilin-1(NRP-1)mRNA在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达。方法:选用C57BL/6j小鼠新生及促性腺激素预处理不同时间点卵巢,通过实时定量聚合酶链反应检测NRP-1mRNA表达。结果:NRP-1mRNA在新生第3天小鼠卵巢中的表达是第5天的1.7倍(P<0.05),是第14天的1.5倍(P<0.05);相对于对照生理盐水注射组(对照组),在孕马血清处理后4、8、12、24h,NRP-1mRNA表达显著降低(P<0.05),至24h最低,而48h显著增高为对照组的1.5倍(P<0.05);给予人绒毛膜促性腺激素后与0h相比NRP-1mRNA表达于第4小时下降至最低(P<0.05),后于第12小时升至最高(P<0.05)。结论:NRP-1在始基卵泡募集和卵泡发育、成熟及排卵过程中发挥重要作用。

Neuropilin-1在胰腺癌组织及细胞系中的表达

目的了解Neuropilin1在胰腺癌组织、癌旁组织及胰腺癌细胞系中的表达情况。方法运用免疫组化法和RTPCR法分别检测Neuropilin1及其mRNA在胰腺癌组织、癌旁组织及细胞系中的表达。结果免疫组化检测发现18例胰腺癌组织标本中Neuropilin1均呈高表达,而癌旁组织中无一例表达;RTPCR检测mRNA的表达结果显示14例胰腺癌组织中有9例表达,癌旁组织中无一例表达,Panc1、Aspc1、Bxpc3细胞系中均表达。结论Neuropilin1表达于大多数胰腺癌组织及细胞系中,而在癌旁组织中不表达,提示Neuropilin1的表达可能与胰腺癌的发生发展密切相关。