万古霉素治疗药物监测中不同牛血清替代人血清可行性分析

目的分析万古霉素治疗药物监测(TDM)中不同牛血清替代人血清作为空白基质的可行性。方法建立测定万古霉素血药浓度的高效液相色谱(HPLC)法。收集医院2022年1月至2023年1月接受万古霉素治疗患者的血清样本105份(已检测血药浓度),关联人血清和不同厂家(厂家1和厂家2)的不同牛血清(小牛血清、新生牛血清、胎牛血清)作为空白基质的标准曲线,得到相应的血药浓度。采用Passing-Bablok回归分析法和Bland-Altman法考察测定结果的相关性和一致性。结果以人血清和不同牛血清作为空白基质时,万古霉素质量浓度在1~100 mg/L范围内与峰面积线性关系均良好(R^(2)>0.999);日内精密度、日间精密度的RSD均小于15%,相对回收率均在85%~115%范围内。人血清与不同牛血清作为空白基质均有良好的相关性(r>0.999),但均有系统误差和比例误差。厂家1的3种牛血清(小牛血清1、新生牛血清1、胎牛血清1)对比人血清作为空白基质检测值的相对平均偏差和95%一致性界限均小于50%允许总误差(±15%),厂家2的3种牛血清(小牛血清2、新生牛血清2、胎牛血清2)对比人血清作为空白基质检测值的相对平均偏差或95%一致性界限超出±15%。结论使用HPLC法进行万古霉素TDM时,部分厂家生产的牛血清能替代人血清作为空白基质进行检测。

碱性成纤维细胞成长因子、新生小牛血清和肝素对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响

为研究血管平滑肌细胞迁移及其影响因素，建立体外检测血管平滑肌细胞迁移的实验方法，并观察不同浓度的新生小牛血清、碱性成纤维细胞生长因子和肝素作用于血管平滑肌细胞不同时间后对其迁移的影响。结果发现，新生小牛血清和碱性成纤维细胞生长因子均可显著促进血管平滑肌细胞迁移（P＜0.001或P＜0.01）；肝素对新生小牛血清诱导的血管平滑肌细胞迁移产生显著抑制作用（P＜0．001）．三者的作用强度均与浓度呈正相关。提示碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞具有促增殖作用．而肝素具有抑制血管平滑肌细胞迁移的作用。

新生牛血清促牛肾细胞生长试验测定方法的建立

为了建立一种测定新生牛血清促牛肾细胞生长试验的方法,采用测定新生牛血清对原代牛肾细胞培养增殖的克隆率来评价新生牛血清的质量。结果显示,用克隆率大于25%的新生牛血清培养原代牛肾细胞至7～8d时均能形成良好单层,而克隆率小于25%的新生牛血清培养原代牛肾细胞时形成良好单层的时间将延长。由此可得出:对原代牛肾细胞培养增殖的克隆率大于25%的新生牛血清符合口服轮状病毒活疫苗生产的需要,依此结果可进行新生牛血清的筛选。

超高效液相色谱-质谱联用技术分析新生牛和胎牛血清组分

目的探讨超高效液相色谱-质谱联用(UPLC/MS)技术对新生牛和胎牛血清组分中活性成分的分析和鉴别。方法采用UPLC/MS技术分析Gibco公司新生牛血清和Hyclone公司胎牛血清组分中的活性成分。结果特征图谱分析新发现:胎牛血清组分种类多于新生牛血清中组分,其质荷比(m/z)分别为498、273和448的物质。结论 UPLC/MS技术可用于胎牛血清及新生牛血清的区分和鉴别,检测出胎牛血清中的几种成分可能是促进细胞发生增殖分化的主要活性物质。

新生牛血清促细胞生长活性检测方法的建立与应用

牛血清是医药生物技术产品中重要的原辅材料之一,做好牛血清的质量控制是提高生物制品质量的重要环节。本研究通过应用PK15、BHK21和ST三种兽用生物制品研制中常用的细胞作为载体,选用国内同等价位5个不同厂家生产的新生牛血清作为比较对象,采用细胞倍增时间测定法、细胞克隆形成率测定法、细胞三次连续传代培养法、MTT比色法和微量终点稀释法五种血清质量鉴定的方法进行比较,检测新生牛血清的促细胞生长活性,最终确定了MTT比色法作为便捷高效快速筛选新生牛血清的检测方法。

细胞生长促进试验筛选新生牛血清

目的建立适合人二倍体细胞培养血清的筛选方法。方法通过测定细胞倍增时间和进行细胞生长促进试验对15批次的新生牛血清作了筛选,并将筛选出的11批次血清用于大规模细胞培养,观察细胞的生长维持情况。结果发现细胞倍增时间与相对生长率无明显相关性(P>0.05)。在大规模细胞培养中,相对生长率97%以上的血清更适合二倍体细胞生长。结论细胞生长促进试验比细胞倍增时间测定更能客观地反映血清促人二倍体细胞的生长能力。细胞生长促进试验可能是较佳的。

我国新生牛血清的生产现状

文章针对我国新生牛血清的生产现状,从行业规范、原料采集点建设、生产规模、质量管理和存在的问题等进行总结分析.

微量NAG酶释放法鉴定牛血清促进细胞生长的活性

目的 检查牛血清促进细胞生长的活性。方法 微量NAG酶释放法。结果 在同一实验条件下 ,试验血清 (990 5 0 7,990 40 2 )与对照血清 (990 40 5 )对促进K5 6 2细胞生长的活性没有明显差别 ,但血清的促进细胞生长活性随着储存时间的增加而降低 ,如试验血清 (970 6 2 1)。

陶瓷复合膜分离工艺生产新生牛血清的研究

【目的】探索一次性过滤截留新生牛血清中细菌、霉菌、支原体等微生物及免疫球蛋白的工艺技术,为新生牛血清规模生产提供技术支撑。【方法】采用陶瓷复合膜分离生产新生牛血清,经细菌、支原体、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体、细菌内毒素等微生物及免疫球蛋白检测,并进行新生牛血清产品细胞培养试验。【结果】陶瓷复合膜能一次性成功截留新生牛血清中的细菌、支原体、细菌内毒素、BVDV抗体,过滤后细菌内毒素含量低于0.1EU/mL,免疫球蛋白去除率在97.00%以上;以其培养SP2/0细胞的细胞倍增时间、单克隆效率等指标接近于进口Hyclone胎血牛清水平。【结论】采用陶瓷复合膜分离工艺生产新生牛血清,实现了一次性有效过滤截留牛血清中细菌、霉菌、支原体等微生物及免疫球蛋白的目标,且能够满足细胞生长的营养需求,为大批量生产优质新生牛血清产品奠定了基础。

新生牛血清中大肠杆菌噬菌体检测方法的建立

本研究用大肠杆菌标准噬菌体株选择确定的大肠杆菌C-3000作为宿主菌,采用增殖法和噬斑法与双层琼脂平板法,对多个厂家的新生牛血清进行了大肠杆菌噬菌体检测,建立了兽用生物制品细胞培养用新生牛血清中大肠杆菌噬菌体的检测方法。

灭能与未灭能新生牛血清培养细胞效果的比较

目的比较灭能与未灭能新生牛血清培养Vero细胞和MRC-5细胞的效果,为细胞培养的相关研究和生产提供参考。方法分别采用照射剂量为8和16 k Gy的60Coγ-射线及56℃30 min加热灭能新生牛血清,用两种方式灭能的血清及未灭能的新生牛血清培养Vero细胞和MRC-5细胞,显微镜观察细胞的生长情况,计数并计算细胞倍增时间及存活时间。结果未灭能新生牛血清培养的两种细胞增殖更多更快速;热灭能的新生牛血清培养的两种细胞的增殖速度和数量明显低于γ-射线照射灭能及未灭能血清培养的细胞。结论未灭能的新生牛血清比灭能后的血清培养Vero细胞和MRC-5细胞的效果好,其促细胞生长增殖效果最佳。