HPLC指纹图谱结合化学模式识别评价经验方尿毒康汤剂与配方颗粒的差异

目的建立尿毒康的HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别,比较中药汤剂与配方颗粒的差异,为两者等效性研究提供一定的理论依据。方法采用Thermo5005-254630 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速:0.8 mL·min^(-1),检测波长:254 nm,柱温:22℃,进样量:20μL。建立9批尿毒康颗粒指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”考察色谱图相似度,结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对结果进行分析,并以变量重要性投影(VIP)值大于1为标准,综合评价汤剂、配方颗粒混冲及配方颗粒混煎的差异。结果建立了9批次尿毒康HPLC指纹图谱,相似度在0.754~0.993之间。确定了21个共有峰,并指认了其中8个色谱峰;通过HCA、PCA和OPLS-DA均可明显将样品分为2类,同时筛选出了导致各批次之间产生差异的7个标志物,分别为3号峰、1号峰、5号峰(毛蕊异黄酮苷)、7号峰(女贞子苷)、16号峰(芦荟大黄素)、13号峰(肉桂醛)、2号峰。结论尿毒康传统汤剂和配方颗粒在化学成分上存有一定的差异,配方颗粒混冲与混煎相似度良好,同时筛选出差异成分,可为生产工艺优化及质量评价提供依据。

尿毒康合剂的质量标准研究

目的:建立尿毒康合剂的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法鉴别黄芪、大黄。用高效液相色谱法测定大黄中的大黄酚含量。结果:大黄酚在48～132μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为97.54%,RSD为3.67%。结论:本方法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为尿毒康合剂的质量控制方法。

尿毒康合剂对缺血再灌注损伤大鼠的肾保护作用及其机制研究

目的探究尿毒康合剂对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(RIRI)的保护作用及其机制。方法将73只SD大鼠随机分为模型组、假手术组、尿毒康合剂(低剂量4.95 g/kg、中剂量9.9 g/kg、高剂量19.8 g/kg)组,银杏叶提取物(100 mg/kg)组(阳性药组),每组12只(模型组13只)。除假手术组以外,另外5组SD大鼠建立RIRI模型。建立RIRI模型前,连续7 d给予尿毒康合剂各剂量组及阳性药大鼠相应剂量药物灌胃。24 h后,检测各组大鼠血清中肌酐值(Scr)和尿素氮值(BUN)以及白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)指标;通过TUNEL试剂盒上的方法检测大鼠肾小管上皮细胞的凋亡率;通过免疫组化法及Western blot法检测FAS、FASL、Bax、Bad、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2和VEGF这9种细胞凋亡相关蛋白的表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清中的Scr、BUN、IL-6、TNF-a、IFN-γ水平及肾小管上皮细胞凋亡率均明显升高(P<0.01);模型组大鼠FAS、FASL、Bax、Bad、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达量显著升高,Bcl-2、VEGF蛋白的表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。尿毒康合剂各剂量组及阳性药组大鼠血清中的Scr、BUN、IL-6、TNF-a、IFN-γ及肾小管上皮细胞凋亡率低于模型组(P<0.05);尿毒康合剂各剂量组大鼠FAS、FASL、Bax、Bad、Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9蛋白表达量有降低趋势,Bcl-2、VEGF蛋白表达有升高的趋势。结论尿毒康合剂对RIRI大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能是调节炎症因子,抑制炎症反应,或是通过对细胞凋亡相关蛋白表达进行干预,从而抑制其凋亡。

高效液相色谱法测定尿毒康合剂中黄芪甲苷的含量

目的:建立尿毒康合剂中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:用高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量。结果:黄芪甲苷的平均回收率为97.6%,相对标准偏差RSD=0.55%。结论:本方法准确可靠,灵敏度高,重现性好,可作为尿毒康合剂质量控制的有效方法。

尿毒康灌肠液对慢性肾衰竭治疗作用的机理探析

慢性肾衰竭(CRF)是严重危害人类健康和生命的临床常见病之一,预后极差。我们根据中医学"内病外治"的整体观念及"六腑以通为用,以降为顺"的理论并结合"结肠透析"的原理,采用中药尿毒康灌肠液保留灌肠治疗CRF,通过药液和结肠充分接触,在结肠溶解吸收并经门静脉和下腔静脉进入血液循环,以泻浊排毒,疏通经脉,达到排泄毒素的目的。

中药尿毒康口服液对急性肾小管坏死肾组织自由基影响的实验研究

目的观察中药尿毒康口服液对大鼠急性肾小管坏死自由基的影响。方法64只SPF级健康雄性大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组和对照组,每组16只;后三组复制急性肾小管坏死模型后,治疗组予尿毒康口服液、对照组予异搏定、模型组予等量生理盐水灌胃;监测各组12h和24h肾组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、Ca2+含量,Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性及BUN、Scr水平。结果12、24h时,治疗组、对照组肾组织MDA、SOD、GSH-PX、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、BUN、Scr与模型组比较差异显著,治疗组肾组织BUN、Scr及SOD值、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase与对照组差异显著。结论尿毒康口服液可减轻甘油所致急性肾小管坏死,其机理可能与其减少氧自由基损伤、保护抗氧化酶和ATPase、减轻钙超载有关。

尿毒康合剂对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及TGF-β1表达的影响

目的:本研究主要是探讨我院制剂尿毒康合剂对于腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及TGF-β1表达的影响。方法:将36只大鼠按随机数字表分为4组,每组9只:正常对照组不予任何干预;生理盐水对照组腹腔注射生理盐水;腹膜透析组腹腔注射20ml4.25%葡萄糖透析液;腹膜透析合并用药组在腹腔注射4.25%葡萄糖腹膜透析液20ml,每日用灌胃尿毒康合剂20ml/(kgd)。疗程4周。4周后,测定腹膜超滤功能和腹膜组织厚度,免疫组织化学方法测定TGF-β1的表达,二硫代二硝酸苯甲酸法显色法和黄嘌呤氧化酶法测定血清及透出液中谷胱甘肽(GSH)和超氧化物岐化酶(SOD)水平。结果:①腹膜透析液组、腹膜透析液合并用药组与正常对照组、生理盐水组相比较,超滤量均显著下降、腹膜组织厚度增加(P<0.05);腹膜透析组与腹膜透析合并用药组比较,超滤量明显减少、腹膜组织厚度增加(P<0.05);②腹膜透析组的大鼠腹膜组织TGF-β1表达明显增加(P<0.05),腹膜透析合并用药组TGF-β1表达较腹膜透析组降低(P<0.05);③腹膜透析液组、腹膜透析液合并用药组与正常对照组、生理盐水组相比较,血清及腹透液中GSH和SOD水平水平降低(P<0.05);腹膜透析合并用药组与腹膜透析组比较,血清及腹透液中GSH和SOD水平水平升高(P<0.05)。结论:尿毒康合剂可能具有减轻氧化应激反应和抑制TGF-β1的表达的作用,从而抑制腹膜间皮细胞损伤和腹膜致密层的增厚,达到保护腹膜、延缓腹膜纤维化的作用。

尿毒康通过抑制p38/ERK MAPK通路改善UUO大鼠肾小管细胞上皮-间质转化

[目的]研究尿毒康对肾纤维化大鼠肾功能及肾组织病理改变的影响,初步探讨尿毒康抗纤维化的作用机制。[方法]采用单侧输尿管结扎法(UUO)复制大鼠肾间质纤维化模型。将大鼠按体质量分为假手术组,模型组,阳性药对照组(氯沙坦30 mg/kg,10 mL/kg),尿毒康20 mL/kg、10 mL/kg和5 mL/kg组。手术第2天即开始灌胃给予相应受试药物,1次/d,连续21 d。末次给药后测定24 h尿蛋白含量;检测血清肌酐(SCr)水平;剖取结扎侧肾脏(左肾),苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织的病理改变情况;Masson染色观察纤维化程度并评分;实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾脏重组人转化生长因子-β(TGF-β)与α-平滑肌肌动蛋白(α-SAM)mRNA的表达水平;Western blot检测肾脏p38,细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达水平。[结果]尿毒康能明显降低UUO模型大鼠SCr水平(P<0.01)和24 h尿蛋白定量水平(P<0.01)。尿毒康组病理表现较模型组有不同程度减轻,其中10 mL/kg组改善相对明显,并能明显抑制肾脏p38,ERK1/2蛋白的表达。[结论]尿毒康能明显改善UUO模型大鼠的肾功能,改善结扎侧肾小管细胞上皮-间质转化,且与抑制了p38/ERK丝裂原治化蛋白激酶(MAPK)相关。

尿毒康合剂联合常规治疗对慢性肾脏病患者的临床疗效

目的考察尿毒康合剂联合常规治疗对慢性肾脏病患者的临床疗效。方法58例患者随机分为对照组和观察组,每组29例,对照组给予常规治疗(降压、降脂、抗凝等),观察组在对照组基础上加用尿毒康合剂,疗程8周。检测CR、BUN、eGFR、尿β2微球蛋白、炎症因子(ESR、CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β)、血浆内毒素、中医证候评分、中医证候疗效、安全性指标变化。结果治疗后,观察组尿β2微球蛋白、TNF-α、IL-6、中医证候评分降低(P<0.05),中医证候改善总有效率升高(P<0.05),其中IL-6、中医证候评分低于对照组(P<0.05),中医证候改善总有效率更高(P<0.05)。2组未发现严重不良反应,安全性指标无明显异常。结论尿毒康合剂联合常规治疗可安全有效地降低慢性肾脏病患者TNF-α、IL-6水平及中医证候评分,提高中医证候改善总有效率,改善微炎症状态,减轻临床症状。

中药尿毒康治疗慢性肾衰433例

目的 :应用尿毒康治疗慢性肾衰 (CRF)并以肾安作对照观察临床疗效 .方法 :确定有慢性肾衰的患者 ,随机分为治疗组和对照组 .治疗组口服尿毒康 2 0mL ,3次·d-1;对照组肾安注射液 2 5 0mL ,1次·d-1.所有病例均常规服用潘生丁、碳酸氢钠、碳酸钙 .结果 :尿毒康有改善临床症状 ,使血肌酐(Scr)、尿素 (Urea)降低 ,血红蛋白 (Hb)和二氧化碳结合力(CO2 CP)升高的作用 ,且明显优于肾安组 .结论 :尿毒康可增强患者免疫功能 ,抑制机体代谢 ,从而保护残余肾单位 。

尿毒康合剂联合非布司他治疗湿热瘀阻型痛风性肾病疗效评价

【目的】探讨基于“肠-肾轴”理论,运用尿毒康合剂联合非布司他治疗湿热瘀阻型痛风性肾病的疗效及安全性。【方法】将72例湿热瘀阻型痛风性肾病患者随机分为试验组和对照组,每组各36例。试验组给予尿毒康合剂联合非布司他片治疗,对照组给予非布司他片治疗,疗程均为12周。观察2组患者治疗前后中医证候积分、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分及肾小球滤过率(eGFR)、血尿酸(SUA)、尿β2微球蛋白(Uβ2-MG)等肾功能指标的变化情况,评估2组患者的临床疗效和安全性。【结果】(1)治疗12周后,试验组的总有效率为94.44%(34/36),对照组为77.78%(28/36),试验组的疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的疼痛VAS评分及中医证候积分均较治疗前降低(P<0.05),且试验组对疼痛VAS评分及中医证候积分的降低作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者eGFR水平均较治疗前提高,SUA、Uβ2-MG水平均较治疗前降低(P<0.05),且试验组对eGFR水平的提高作用及对SUA、Uβ2-MG水平的降低作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)观察过程中,2组患者均未发现明显不良反应。【结论】尿毒康合剂联合非布司他片治疗湿热瘀阻型痛风性肾病患者疗效确切,能有效改善肾功能,缓解临床症状,且其不良反应较少,安全性较高。

尿毒康对慢性肾功能衰竭大鼠模型脂质代谢的影响

尿毒康是广州中医药大学第二附属医院治疗慢性肾功能衰竭的有效制剂，该方主要由大黄、何首鸟、黄芪、女贞子等药组成，具有益气温阳，健脾益肾，活血泻浊的功效。为了探讨该药对慢性肾功能衰竭大鼠模型脂质代谢的影响，采用5／6肾切除改良法制作大鼠肾衰模型，模型制作后2周，按一般状态、24h尿蛋白定量配对后，随机分成模型对照组、尿毒康高剂量组、尿毒废低剂量组和包醛氧淀粉组，并与正常对照组比较，观察尿毒康对血清甘油三酯、胆固醇和载脂蛋白的影响。结果：模型对照组的血脂明显高于正常组，经过尿毒康治疗后血脂水平明显降低。表明：尿毒康在改善脂质代谢方面有良好的效果。

腹部手术病人围手术期肾功能的保护

目的 研究天普洛安和尿毒康口服液对腹部手术病人围手术期肾功能的保护作用。方法 以我科收治的腹部手术病人 4 8例 ,分为治疗组 2 4例 ,对照组 2 4例。试验组除常规治疗外 ,术后即予天普洛安静脉点滴 ,术后第 1天起予尿毒康口服液口服 ;7d为一个疗程 ;对照组予以常规治疗。结果 术后尿量比较第3天差异显著 (t=2 .36 6 ,P =0 .0 2 2 )。术后第 3天血Cr差异显著 (t=- 3.35 3,P =0 .0 2 ) ,术后第 5天差异非常显著 (t=- 14 .136 ,P <0 .0 1) ;术后第 3天血BUN差异显著 (t=- 3.2 4 1,P =0 .0 2 )。结论 天普洛安和尿毒康口服液对腹部手术病人围手术期肾功能有保护作用。

UHPLC-ESI-MS/MS同时测定尿毒康合剂中11种成分的含量

目的建立UHPLC-ESI-MS/MS法同时测定尿毒康合剂中没食子酸、毛蕊异黄酮葡萄糖、芦丁、金丝桃苷、丹酚酸B、大黄酸、黄芪甲苷、隐丹参酮、大黄素、丹参酮I、丹参酮IIA的含量。方法采用InertSustain^(R) C_(18)(3.0 mm×100 mm,3.0μm)色谱柱,甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(−1),进样量20μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果尿毒康合剂中11种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,仪器精密度RSD<3.0%,加样回收率为98.44%~103.56%,RSD为2.04%~3.34%。结论本方法高效、稳定、准确、简便,可用于尿毒康合剂中的质量评价与质量控制,并为尿毒康合剂中的临床应用及研究提供依据。

尿毒康合剂改善慢性肾病大鼠肠源性尿毒素蓄积的研究

目的 研究尿毒康合剂改善慢性肾病(CKD)大鼠肠道屏障促进肠源性尿毒素代谢作用。方法 用5/6肾切除法复制CKD大鼠模型,假手术组大鼠分离肾组织但不切除。将CKD大鼠分为模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组10只。假手术组和模型组均给予等体积饮用水;对照组按2.5 g·kg^(-1)剂量给予0.25 g·mL^(-1)浓度尿毒清颗粒;低、中、高剂量实验组分别按5.0,10.0和20.0 mL·kg^(-1)剂量给予尿毒康合剂原液。6组大鼠每天给药1次,连续12周。末次给药后取材,用超高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱法同时测定大鼠血清中尿毒症毒素[氧化三甲胺(TMAO)、硫酸吲哚酚(IS)、硫酸对甲酚(PCS)]的含量,用免疫荧光法检测大鼠回肠组织中闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白1(ZO-1)蛋白的表达水平。结果 高剂量实验组、对照组、模型组和假手术组的血清TMAO分别为(0.48±0.04),(0.52±0.56),(2.06±0.34)和(0.22±0.02)μg·mL^(-1),血清IS分别为(2.23±0.23),(2.18±0.26),(10.51±1.52)和(1.48±0.11)μg·mL^(-1),血清PCS分别为(0.46±0.10),(0.24±0.08),(1.06±0.17)和(0.29±0.11)μg·mL^(-1),回肠组织Occludin表达量分别为0.72±0.04,0.70±0.03,0.34±0.02和1.00±0.00,回肠组织ZO-1表达量分别为0.83±0.06,0.76±0.06,0.40±0.05和1.00±0.00。高剂量组和对照组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 尿毒康合剂能够改善慢性肾病大鼠肠源性尿毒素蓄积的作用。

尿毒康灌肠液治疗慢性肾衰竭56例疗效观察

目的:观察尿毒康灌肠液治疗慢性肾衰竭的临床疗效。方法:将112例慢性肾衰竭病人随机分为治疗组和对照组各56例。对照组单纯爱西特口服;治疗组口服爱西特加用尿毒康灌肠液120ml,每日1次高位保留灌肠。观察治疗4周前后两组肾功能变化情况。结果:治疗组临床显效率及总有效率均明显优于对照组,经统计学处理有显著性差异(P<0.01),肾功能各项指标有明显改善。结论:中药保留灌肠法治疗慢性肾衰竭疗效显著,可作为慢性肾衰竭患者延缓肾衰进展的一线治疗手段。