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Antibacterial Activity and Mechanisms of Ethanol Extracts from Scutellaria baicalensis Georgi and Magnolia officinalis against Phytophthora nicotianae
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作者 Xu Gao Ziqi Shen +2 位作者 Jinliang Xu Min Fan Qiang Li 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2023年第7期1987-1999,共13页
Phytophthora nicotianae causes substantial economic losses in most countries where tobacco is produced.At present,the control of P.nicotianae mainly depends on chemical methods,with considerable environmental and heal... Phytophthora nicotianae causes substantial economic losses in most countries where tobacco is produced.At present,the control of P.nicotianae mainly depends on chemical methods,with considerable environmental and health issues.We investigated the effects of ethanol extracts from Scutellaria baicalensis Georgi(SBG)and Magnolia officinalis(MO).On mycelial growth,sporangium formation,and zoospore release of P.nicotianae.Both extracts inhibited the growth of P.nicotianae,with mycelial growth inhibition rates of 88.92%and 93.92%,respectively,at 40 mg/mL,and EC50 values of 5.39 and 5.74 mg/mL,respectively.The underlying mechanisms were the inhibition of sporangium formation,the reduction of zoospore number,and the destruction of the mycelium structure.At an SBG extract concentration of 16.17 mg/mL,the inhibition rates for sporangia and zoospores were 98.66%and 99.39%,respectively.At an MO extract concentration of 2.87 mg/mL,the production of sporangia and zoospores was completely inhibited.The hyphae treated with the two plant extracts showed different degrees of deformation and damage.Hyphae treated with SBG extract showed adhesion and local swelling,whereas treatment with MO extract resulted in broken hyphae.Mixture of the extracts resulted in a good synergistic effect. 展开更多
关键词 Phytophthora nicotianae bacteriostatic activity Scutellaria baicalensis Georgi Magnolia officinalis
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过表达NtH202烟草叶片响应烟蚜侵袭转录组分析
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作者 孙计平 王亚乐 +2 位作者 李雪君 孙焕 平文丽 《种子》 北大核心 2024年第6期44-54,共11页
为了筛选烟草受到蚜虫胁迫的差异表达基因,对野生型和过表达NtH202株系烟草幼苗接蚜虫,并在接虫前和接虫6 h采集叶片,提取总RNA后,进行转录组测序,对差异表达基因进行GO和KEGG分析,挖掘相关转录因子,并利用qRT-PCR方法验证。结果表明,... 为了筛选烟草受到蚜虫胁迫的差异表达基因,对野生型和过表达NtH202株系烟草幼苗接蚜虫,并在接虫前和接虫6 h采集叶片,提取总RNA后,进行转录组测序,对差异表达基因进行GO和KEGG分析,挖掘相关转录因子,并利用qRT-PCR方法验证。结果表明,受到烟蚜侵袭后,WT共有8694个基因表达量变化,OE共有6795个基因表达量变化,WT上调和下调差异基因数目更多,二者共同变化的差异基因有2663个。GO分类表明,烟蚜侵袭后OE富集到免疫系统进程(GO:0002376)的基因数目明显高于WT。OE和WT富集差异基因数量最多的均是植物-病原体互作途径,其次是植物激素信号转导、淀粉和蔗糖代谢通路和MAPK信号通路-植物通路。与WT相比,NtH202过表达株系共有1342个基因上调在4倍以上;GO分析表明,差异表达基因的功能主要集中在生物学过程、细胞组分和分子功能;KEGG分类显示,与WT相比较,烟蚜侵袭前后,OE均是参与植物病原体互作途径的基因最多。蚜虫侵袭后,WT和OE共同变化的基因中有9个WRKY基因上调表达、5个下调表达,NtWRKY6、NtWRKY11、NtWRKY51、NtWRKY68、NtWRKY70基因RNA测序结果与qRT-PCR结果表现一致,均为上调表达,预测WRKY转录因子在抗蚜反应中起着重要作用。受到蚜虫侵袭后,WT和OE共同变化的基因中有8个MYB上调表达、8个下调表达,MYB转录因子ODO1基因RNA测序结果与qRT-PCR结果表现一致,预测转录因子ODO1在烟草抗蚜反应中起着重要作用。 展开更多
关键词 NtH202基因 转录组 蚜虫 抗蚜性 烟草
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枯草芽胞杆菌GXHZ16抑制烟草疫霉病菌的表达谱分析
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作者 胡亚杰 范啟铃 +4 位作者 李群岭 周效峰 丁婷 汪章勋 吴峰 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期608-619,共12页
烟草黑胫病由烟草疫霉菌Phytophthora nicotianae侵染引起,是烟草生产上一种分布广泛、为害严重的土传病害。本实验室前期从广西贺州富川烟区健康烟株根际土壤中分离筛选获得一株枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis GXHZ16,对峙培养发现该... 烟草黑胫病由烟草疫霉菌Phytophthora nicotianae侵染引起,是烟草生产上一种分布广泛、为害严重的土传病害。本实验室前期从广西贺州富川烟区健康烟株根际土壤中分离筛选获得一株枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis GXHZ16,对峙培养发现该菌株对烟草疫霉菌具有良好的拮抗活性(抑制率65.79%)。为探究菌株GXHZ16对烟草疫霉菌的可能抑制分子机理,本研究分别针对枯草芽胞杆菌GXHZ16与烟草疫霉菌对峙培养36h(处理组)和0h(对照组)的混合样品,采用高通量转录组测序(RNA-Seq)技术结合生物信息学分析对峙培养36 h后枯草芽胞杆菌的基因差异表达谱及所涉及的信号通路变化。结果发现:对峙培养36 h后枯草芽胞杆菌GXHZ16有1607个基因发生了显著差异表达,包括810个上调表达基因和797个下调表达基因;其中筛选获得的显著表达基因特别是上调表达的基因(包括鞭毛装配、细菌趋化性相关基因以及与表面活性素、丰原素和制磷脂菌素合成相关的10个相关基因)可能均涉及枯草芽胞杆菌对烟草疫霉菌的抑制作用。进一步的GO富集分析显示,共有1343个差异表达基因被注释到不同的功能亚类中,涉及差异基因最多的为细胞组分类别中的细胞解剖实体。特别地,KEGG富集分析显示,共有551个差异表达基因归到数百个Pathway中,其中涉及差异表达基因最多的是微生物在不同环境中的代谢途径;其他主要代谢途径有鞭毛装配和淀粉蔗糖代谢等;此外,细菌趋化性通路和单环菌素生物合成通路也高度富集。总之,本研究从转录组水平分析获得了枯草芽胞杆菌(与烟草疫霉对峙培养后)的基因差异表达图谱及相关调控代谢途径;为进一步阐明芽胞杆菌抑制植物病原真菌的生防机制并提高枯草芽胞杆菌的生防效果奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 烟草疫霉菌 转录组分析 差异表达基因
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烤烟黑胫病抗性评价及生理响应特性分析
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作者 代先强 刘念 +3 位作者 梁颖涛 杨昌全 邓可宣 陈少鹏 《中国农学通报》 2024年第13期102-108,共7页
本研究旨在揭示不同烤烟品种对烟草黑胫病的抗性机理。通过对抗病性的鉴定,从24个烤烟品种(系)中鉴定出4个高抗品种、8个中抗品种、8个中感品种和4个高感品种。对这些品种在烟草疫霉(Phytophthora parasitica var.nicotianae)侵染后,从... 本研究旨在揭示不同烤烟品种对烟草黑胫病的抗性机理。通过对抗病性的鉴定,从24个烤烟品种(系)中鉴定出4个高抗品种、8个中抗品种、8个中感品种和4个高感品种。对这些品种在烟草疫霉(Phytophthora parasitica var.nicotianae)侵染后,从中选取2个高抗品种和2个高感品种测定其抗氧化酶系活性、水杨酸含量以及抗病相关基因的表达情况。结果表明,在受到病原菌侵染时,高抗品种的抗氧化酶活性显著高于高感品种,暗示着更强的氧化应激防御能力。此外,高抗品种中的内源水杨酸合成以及抗病相关基因的诱导表达均显著高于高感品种,表明这些品种能够更有效地激活其防御系统以应对烟草黑胫病菌的侵染。本研究结果为理解烤烟对黑胫病的抗性机制提供了重要信息,并为烟草抗病育种提供了理论依据。 展开更多
关键词 烤烟 黑胫病 烟草疫霉 抗病性 抗氧化酶 水杨酸 基因表达
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2株有效抑制剑麻斑马纹病菌的生防细菌鉴定 被引量:1
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作者 侯会霞 郑肖兰 +4 位作者 易克贤 习金根 李慧 吴伟怀 陈河龙 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期205-214,共10页
剑麻斑马纹病是一种由烟草疫霉(Phytophthoranicotianae)引起的传染性病害,导致剑麻出现叶斑、茎腐和轴腐的症状,对剑麻纤维的产量和质量造成严重影响。目前,剑麻斑马纹病的防治主要采取以农业栽培措施为主,抗病育种和化学药剂防治相结... 剑麻斑马纹病是一种由烟草疫霉(Phytophthoranicotianae)引起的传染性病害,导致剑麻出现叶斑、茎腐和轴腐的症状,对剑麻纤维的产量和质量造成严重影响。目前,剑麻斑马纹病的防治主要采取以农业栽培措施为主,抗病育种和化学药剂防治相结合的综合防治策略,但是农业防治人工成本高,工人操作技术参差不齐;抗病育种难度大,周期长;化学防治受剑麻叶片表面带有蜡质层的影响,存在药液不易吸附的问题,而且大量施药也容易造成病原抗药性提高和环境污染。因此,开发防治剑麻斑马纹病的生防菌资源,探索综合防控新途径显得尤为重要。本研究以烟草疫霉菌为靶标菌,通过五点对峙法筛选,获得2株生防菌PpHyHNCJ2和PpHyHNCJ5,其菌丝生长抑制率分别为85.92%和83.10%。通过对烟草疫霉菌菌丝显微结构进行观察发现,菌株PpHyHNCJ2和PpHyHNCJ5均抑制了烟草疫霉菌菌丝的生长,生防菌对峙的烟草疫霉菌出现菌丝体膨大增粗、分枝畸形、缠绕等现象。基于细胞形态、生理生化反应以及16S rDNA基因序列比对分析,菌株PpHyHNCJ2和PpHyHNCJ5鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。进一步研究显示菌株PpHyHNCJ2和PpHyHNCJ5均具有广谱拮抗作用,能够很好地抑制辣椒疫霉菌(Phytophthora capsica)、大豆疫霉菌(P.sojae)、瓜疫霉菌(P.melonis)、棕榈疫霉菌(P.palmivora)、豇豆疫霉菌(P.vignae)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、黑曲霉菌(Aspergillus niger)、暹罗刺盘孢菌(Colletotrichum siamense)等11种病原菌的生长。此外,菌株PpHyHNCJ2和PpHyHNCJ5具有解有机磷能力、解无机磷能力、解钾能力、固氮能力和产铁能力,可为作物的良好生长提供条件。结果表明,菌株PpHyHNCJ2和PpHyHNCJ5对剑麻斑马纹病的防治具有良好的潜力,可为剑麻斑马纹病的生物防治提供基础材料。 展开更多
关键词 剑麻斑马纹病 烟草疫霉菌 生防菌 促生特性
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基于电子鼻技术的烟丝受虫害前后挥发性成分差异分析
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作者 史姜维 王潇洒 +4 位作者 刘普明 匡映 杨苡晨 刘梦龙 张楚安 《湖北农业科学》 2024年第7期165-170,共6页
针对烟草(Nicotiana tabacum L.)中烟草甲(Lasioderma serricorne)检测技术不完善,检测结果不可靠等问题,以电子鼻检测结果为基础,通过主成分分析法(PCA)和Loading分析法对数据结果进行分析。结果表明,4种烟丝的主要挥发物质为硫类物质... 针对烟草(Nicotiana tabacum L.)中烟草甲(Lasioderma serricorne)检测技术不完善,检测结果不可靠等问题,以电子鼻检测结果为基础,通过主成分分析法(PCA)和Loading分析法对数据结果进行分析。结果表明,4种烟丝的主要挥发物质为硫类物质、短链烷烃、醇醚醛酮、小分子氮氧化合物等,虫样及性激素的主要挥发性物质是小分子氮氧化合物、硫化物。受虫害后烟丝中硫类化合物明显降低,在对无机硫化物敏感的传感器(W1W)中浓香虫害烟丝的响应值比浓香烟丝下降48.33%,清香虫害烟丝比清香烟丝下降59.48%;在对有机硫化物敏感的传感器(W2W)中浓香虫害烟丝的响应值比浓香烟丝下降35.72%,清香虫害烟丝比清香烟丝下降48.55%。PCA结果显示,4种烟丝样品表现出非常好的区分度,雌虫、雄虫样品在占比高达99.70%的主成分1上几乎没有差别。Loading分析结果显示,烟丝样品中气味主要成分为硫类物质,烟草甲虫样气味主要成分是小分子氮氧化物,其次为硫类物质。 展开更多
关键词 烟草(Nicotiana tabacum L.) 烟丝 虫害 烟草甲(Lasioderma serricorne) 电子鼻 挥发性成分
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基于WOS和CNKI计量学分析中国烟草研究热点与前沿
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作者 张玉婵 韩丹 +4 位作者 张仲文 史久长 张力 王卫民 郑宏斌 《中南农业科技》 2024年第9期237-243,共7页
以Web of Science核心数据库中2013—2022年中国烟草(Nicotiana tabacum L.)研究相关学术论文为研究对象,运用文献计量可视化软件CiteSpace对其进行作者、机构合作分析,关键词共现分析和文献共被引分析。结果表明,检索范围内2013—2022... 以Web of Science核心数据库中2013—2022年中国烟草(Nicotiana tabacum L.)研究相关学术论文为研究对象,运用文献计量可视化软件CiteSpace对其进行作者、机构合作分析,关键词共现分析和文献共被引分析。结果表明,检索范围内2013—2022年中国关于烟草的研究论文共10391篇,发文量总体呈上升趋势,研究领域广泛。对原始数据除重后获得9891条文献信息。研究机构以中国科学院及中国农业科学院为主,研究学者以胡秋芬、胡德禹及其所在团队群体较为突出。中国烟草研究热点涉及烟草基因细胞、烟草生长发育、烟草制品等对人类的影响,涵盖了烟草基因研究、抗性研究和相关调查等方面。其中,关于烟草的各种调查研究的相关文献影响力最强。科研人员对中国烟草展开了多方面的研究,研究多关注与烟草相关的民生问题。 展开更多
关键词 烟草(Nicotiana tabacum L.) 研究热点 前沿 WOS CNKI 计量学分析 CITESPACE 中国
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烟草黑胫病原菌(Phytophthora parasitica Var·nicotianae)生理生化特性的研究 被引量:3
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作者 王智发 林景柱 马德岭 《中国烟草科学》 CSCD 1989年第2期1-4,共4页
本文主要介绍了用人工合成培养基测定烟草黑胫病原菌的致死温度、最适生长的pH值和能够生长的pH值范围的方法及结果。对黄河等“适宜于马铃薯晚疫病菌的一种液体合成培养基”,在配方和实验方法上做了一些改进。通过实验,进一步证实了该... 本文主要介绍了用人工合成培养基测定烟草黑胫病原菌的致死温度、最适生长的pH值和能够生长的pH值范围的方法及结果。对黄河等“适宜于马铃薯晚疫病菌的一种液体合成培养基”,在配方和实验方法上做了一些改进。通过实验,进一步证实了该菌在营养生长过程中钙素的重要性和三羧酸循环(TCA)中有机酸的重要性;该菌的营养生长并不需要较复杂的营养条件。 展开更多
关键词 烟草黑胫病 nicotianae PHYTOPHTHORA 马铃薯晚疫病菌 生化特性 合成培养基 钙素 三羧酸循环 实验方法 致死温度
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百香果响应烟草疫霉侵染的分子机制及基因挖掘
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作者 孙嘉曼 陈格 +4 位作者 罗海玲 黄永才 刘增亮 杨柳 张进忠 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期589-600,共12页
【目的】在转录水平上分析百香果响应烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)侵染的表达模式,挖掘抗性相关基因并解析其作用机制,为利用分子手段进行百香果抗病性状筛选和抗病品种选育打下基础。【方法】以百香果主栽品种钦果9号为试材,对... 【目的】在转录水平上分析百香果响应烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)侵染的表达模式,挖掘抗性相关基因并解析其作用机制,为利用分子手段进行百香果抗病性状筛选和抗病品种选育打下基础。【方法】以百香果主栽品种钦果9号为试材,对烟草疫霉侵染12、24、48、72和96 hpi钦果9号进行组织表型观察和生理指标测定;采用转录组测序(RNA-Seq)构建钦果9号响应烟草疫霉侵染的转录组,使用DESeq分析基因表达差异,以P<0.005、错误发现率(FDR)≤0.001和|log2 Ratio|≥1为标准筛选差异表达基因(DEGs);通过BLAST2GO和KOBAS2等进行DEGs的GO功能注释分析和KEGG信号通路富集分析,明确钦果9号响应烟草疫霉侵染的主要通路和代谢途径;挖掘与植物抗病相关代谢通路的DEGs并利用MeV软件绘制基因表达热图,分析其在烟草疫霉侵染钦果9号过程中的动态变化趋势;实时荧光定量PCR验证基因表达量差异与转录组数据的一致性。【结果】烟草疫霉侵染钦果9号初期叶片无明显症状,侵染48hpi叶片出现褪绿,随着侵染时间不断延长,病斑颜色变深并不断扩大呈明显棕色枯斑;从侵染12hpi开始所有处理组钦果9号叶片中时超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P<0.05),在24 hpi时SOD活性达最高值,表明侵染初期烟草疫霉已开始从伤口侵入钦果9号叶片。转录组分析共筛选获得7163个DEGs,KEGG信号通路富集分析发现,DEGs主要在植物激素信号转导、植物—病原菌互作、苯丙烷类生物合成、MAPK信号途径及类黄酮生物合成等与植物抗病相关的通路显著富集,表明这些通路在转录水平上是百香果响应烟草疫霉侵染的主要代谢途径。植物—病原菌互作通路中的PR1、CERK1、RPM1、CDPK和CML等基因,茉莉酸(JA)/乙烯(ET)信号途径中的JAR1、JAZ2、ERF1、EBF1和ERS等基因,以及次生代谢相关的CAD6、4CL、POD、CHS和LDOX等基因均在感染烟草疫霉的钦果9号植株中大幅上调表达,推测这些基因参与了百香果对烟草疫霉的抗性反应过程。实时荧光定量PCR结果验证了RNA-Seq数据的可靠性。【结论】植物激素信号转导、植物—病原菌互作、苯丙烷类生物合成、MAPK信号途径及类黄酮生物合成是百香果响应烟草疫霉侵染的主要信号通路和代谢途径。不同代谢途径中的关键基因以复杂方式参与了百香果对烟草疫霉的抗性反应过程。 展开更多
关键词 百香果 烟草疫霉 转录组分析 分子机制 基因挖掘
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铜绿假单胞菌PaHNHK01的鉴定及其对剑麻烟草疫霉的生防效果研究
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作者 李慧 郑肖兰 +5 位作者 侯会霞 吴伟怀 谭施北 罗磊 吴昊 易克贤 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期2171-2182,共12页
H.11648因高产的优点成为我国目前主要的剑麻栽培品种,但极易受到烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)的侵染,生产上防治剑麻斑马纹病主要以农业防治措施为主,抗病育种和化学药剂防治相结合的综合防治策略。但农业防治费时费力,长期化学... H.11648因高产的优点成为我国目前主要的剑麻栽培品种,但极易受到烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)的侵染,生产上防治剑麻斑马纹病主要以农业防治措施为主,抗病育种和化学药剂防治相结合的综合防治策略。但农业防治费时费力,长期化学防治可能会使植物产生抗药性,甚至污染环境,抗病育种难度大且周期长,因此开辟新的防治方法非常重要。为防治剑麻斑马纹病,本研究以烟草疫霉为病原靶标菌,成功分离到1株拮抗细菌PaHNHK01,根据形态学、生理生化特征及分子生物学鉴定确定PaHNHK01为假单胞菌属的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。对该菌株的抑菌活性和离体叶片防效进行测定,研究结果表明,该菌株具有解有机磷能力、解无机磷能力、固氮能力和产铁能力等,对烟草疫霉菌的抑制率为89.79%。该菌能够有效抑制烟草疫霉菌的菌丝生长,使病原菌出现产孢能力下降、菌丝膨大畸形、分支增多的现象;在离体叶片防效试验中PaHNHK01对剑麻斑马纹病的防治效果达到88.62%。该菌株的无菌发酵液对病原菌有明显的抑菌效果,其EC50值为20.3679μL/mL,当PaHNHK01粗提物浓度为80μg/mL时,其抑菌率达89.36%,PaHNHK01粗提物的EC50值为11.9456μg/mL。此外,菌株PaHNHK01对12种不同植物病原菌均有拮抗效果,表明菌株PaHNHK01具有良好的生防潜力,有望开发成为生防产品,为植物病害生物防治提供一定的研究基础。 展开更多
关键词 剑麻斑马纹病 烟草疫霉 铜绿假单胞菌 生物防治
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烟草磷转运蛋白基因NtPHT2;1克隆和表达分析
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作者 湛佳伟 朱紫童 +3 位作者 李晨依 温海洋 贺帆 贾宏昉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期34-42,共9页
【目的】植物对磷酸盐的吸收与利用主要依靠磷转运蛋白,其中PHT2家族编码的低亲和磷转运蛋白主要负责植物在正常供磷条件下磷酸盐的吸收、转运与再利用,为了探究低亲和磷转运蛋白基因NtPHT2;1在烟草转运磷酸盐中的作用和表达模式,通过Nt... 【目的】植物对磷酸盐的吸收与利用主要依靠磷转运蛋白,其中PHT2家族编码的低亲和磷转运蛋白主要负责植物在正常供磷条件下磷酸盐的吸收、转运与再利用,为了探究低亲和磷转运蛋白基因NtPHT2;1在烟草转运磷酸盐中的作用和表达模式,通过NtPHT2;1培育烟草磷素高效利用新品种。【方法】以普通烟草K326的cDNA为模板,克隆得到NtPHT2;1,对该基因进行生物信息学分析和蛋白质的亚细胞定位,并通过荧光定量PCR技术对该基因在低磷等非生物胁迫下的基因表达模式进行分析。【结果】(1)NtPHT2;1基因全长1764 bp,编码587个氨基酸;(2)亚细胞定位结果显示,NtPHT2;1蛋白定位于叶绿体上;(3)同源性比对发现,NtPHT2;1蛋白与辣椒CaPHT2;1蛋白的同源性最高达到91.00%;(4)NtPHT2;1启动子含有参与调控植物衰老、逆境胁迫相关的顺式作用元件;(5)NtPHT2;1在叶片表达量最高,新叶中的表达量比老叶中高;在低磷诱导条件下,该基因表达量与正常条件相比差异不显著;(6)非生物胁迫下的表达模式分析显示,NtPHT2;1基因表达量在盐胁迫和干旱胁迫下显著降低。【结论】NtPHT2;1基因主要是负责烟株正常生长发育条件下磷酸盐的转运与利用。 展开更多
关键词 烟草 基因克隆 NtPHT2 1 表达模式 非生物胁迫
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烟草BTB/POZ蛋白家族的鉴定及其在抗马铃薯Y病毒中的作用
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作者 张劭文 赵天伦 +2 位作者 肖钦之 祝水金 陈进红 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期295-307,共13页
马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)侵染烟草(Nicotiana tabacum)会引起烟草脉带病,造成烟叶品质下降。broad complex,tramtrack,and bric-à-brac/pox virus and zinc finger(BTB/POZ)是动植物体内广泛存在的蛋白质家族,在植物生长... 马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)侵染烟草(Nicotiana tabacum)会引起烟草脉带病,造成烟叶品质下降。broad complex,tramtrack,and bric-à-brac/pox virus and zinc finger(BTB/POZ)是动植物体内广泛存在的蛋白质家族,在植物生长和发育的各个环节都起着非常重要的作用。本研究鉴定到90个烟草BTB/POZ家族蛋白,对应71个基因。在这些蛋白质的序列中,识别到9种保守基序(motif),并根据其出现顺序将BTB/POZ家族成员划分至6个亚家族。结构域分析表明,BTB/POZ同一亚家族成员的结构域具有一致性。对BTB/POZ蛋白的三维构象进行预测发现,所有亚家族成员结构都以α螺旋为主,同一亚家族成员的三维构象相似。烟草品种K326和突变体M867(抗PVY)的BTB/POZ家族基因表达模式分析显示,叶片接种PVY后,NtBTB2M、NtBTB2K、NtBTB2L、NtBTB6E基因的表达丰度显著增加,这可能与烟草M867对PVY的抗性较强有关。顺式作用元件分析显示,NtBTB2K、NtBTB2L、NtBTB2M和NtBTB6E基因的上游2000 bp区域内含有若干逆境响应相关元件,包括水杨酸响应元件、MYB结合位点等,可能和这些基因的上调表达有关。本研究为BTB/POZ蛋白的功能研究提供了理论依据,为烟草抗病育种提供了一定参考。 展开更多
关键词 烟草 BTB/POZ家族 保守基序 顺式作用元件
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小麦miRNA靶基因的体外实验验证
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作者 房春豪 陈志浩 +6 位作者 王开 汪晓璐 徐文竞 祁广 马朋涛 韩冉 刘成 《山东农业科学》 北大核心 2024年第2期1-7,共7页
miRNA是一类内源非编码单链小RNA,广泛存在于动植物中,主要通过切割靶基因或者抑制靶基因表达参与细胞分化、生长和发育等多种生物学调控。目前缺少一种快速简便验证miRNA靶基因的方法。本研究基于前期筛选到的小麦特有的miRNA——Tae-m... miRNA是一类内源非编码单链小RNA,广泛存在于动植物中,主要通过切割靶基因或者抑制靶基因表达参与细胞分化、生长和发育等多种生物学调控。目前缺少一种快速简便验证miRNA靶基因的方法。本研究基于前期筛选到的小麦特有的miRNA——Tae-miR9666a,合成其前体及前体突变体,并连接到表达载体上,构建含有GFP(绿色荧光蛋白)标记的靶基因过表达载体,共转化烟草,通过观察GFP的荧光亮度判断靶基因的切割情况,以此来验证miRNA与靶基因的相互作用。结果发现,共转miRNA前体的烟草叶片的荧光亮度较低,表明靶基因被miRNA切割,其后的GFP无法正常表达;共转miRNA前体突变体的烟草叶片的荧光亮度与单转靶基因的相当,表明miRNA前体突变体未切割靶基因,导致GFP正常表达。本实验有效证明了miRNA的靶基因切割情况,也表明利用烟草验证miRNA与靶基因相互作用是可行的。 展开更多
关键词 小麦miRNA 靶基因 Tae-miR9666a GFP 本氏烟草
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烟草NtPRR37基因克隆及功能分析
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作者 李亦君 杨小贝 +5 位作者 夏琳 罗朝鹏 徐馨 杨军 宁黔冀 武明珠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期221-231,共11页
【目的】伪答应基因家族(pseudo response regulators,PRRs)是高等植物调控开花途径的重要基因。克隆烟草NtPRR37基因并分析其对不同光周期的应答及对开花的影响,为烟草开花调控提供靶标基因。【方法】利用同源克隆方法从普通烟草(Nicot... 【目的】伪答应基因家族(pseudo response regulators,PRRs)是高等植物调控开花途径的重要基因。克隆烟草NtPRR37基因并分析其对不同光周期的应答及对开花的影响,为烟草开花调控提供靶标基因。【方法】利用同源克隆方法从普通烟草(Nicotiana tabacum L.)中克隆得到NtPRR37基因,并对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析其在不同组织中的表达及不同光照时长处理的表达模式。同时利用病毒诱导基因沉默(virus induced gene silence,VIGS)技术降低NtPRR37表达水平并观察表型变化及检测开花相关基因表达变化。【结果】NtPRR37基因全长2472 bp,编码823个氨基酸,相对分子质量90.16 kD,含有PRRs基因家族的典型保守结构域(REC和CCT结构域)。通过同源进化分析发现,烟草NtPRR37与绒毛烟草(Nicotiana tomentosiformis)、林烟草(Nicotiana sylvestris)及本氏烟草(Nicotiana benthamiana)的PRR37在进化上属于同一分支。采用RT-qPCR分析发现,该基因在盛花期烟草各个组织的表达特征存在差异性,在雌蕊中的表达量最高,在侧根的表达量最低;在不同光照时长处理下,NtPRR37随着光照时间的增加表达量呈上升趋势,全黑暗处理下表达量最低,且具有生物节律性;NtPRR37沉默植株中NtPRR37表达量明显下调且沉默植株开花期提前,这可能与诱导开花相关基因(NtFT4、NtAP1、NtCO、NtSOC1)表达量显著上调有关。【结论】NtPRR37的表达受到光周期的调控,且在烟草开花过程中NtPRR37作为开花抑制因子存在。 展开更多
关键词 烟草 伪答应调控蛋白 NtPRR37 序列分析 表达分析 基因沉默 开花
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黄花烟传入中国问题再研究
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作者 宋娟 陈青松 《农业考古》 北大核心 2024年第1期166-174,共9页
烟草传入问题,一直是史学界烟草史研究的重点,但以往研究主要围绕红花烟展开,黄花烟探讨存在明显不足。事实上,黄花烟亦是人们种植吸用的烟草品种之一,它的传入对当时乃至后世社会产生了深远影响。本文基于对方志、文集等文献的搜集与整... 烟草传入问题,一直是史学界烟草史研究的重点,但以往研究主要围绕红花烟展开,黄花烟探讨存在明显不足。事实上,黄花烟亦是人们种植吸用的烟草品种之一,它的传入对当时乃至后世社会产生了深远影响。本文基于对方志、文集等文献的搜集与整理,说明崇祯年间黄花烟即已传入的可能性很大,最晚不会晚于康熙年间。传入中国主要通过走私、正常贸易及使团携传等方式,其中中亚商人、俄国私商及使团、蒙古诸部等都发挥了不同程度的积极作用。 展开更多
关键词 黄花烟 传入 影响
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磷脂酶Dα1在TuMV激活叶绿素降解相关基因表达中的功能分析
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作者 林佳宇 张世杰 +3 位作者 徐传涛 杜林林 孙炳剑 孙航军 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期783-790,共8页
【目的】研究磷脂酶Dα1(phospholipase Dα1)及其产物磷脂酸(phosphatidic acid,PA)在芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)促进植物叶绿素降解相关基因表达过程中的作用。【方法】通过UV-2800紫外分光光度计检测TuMV对本氏烟叶绿... 【目的】研究磷脂酶Dα1(phospholipase Dα1)及其产物磷脂酸(phosphatidic acid,PA)在芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)促进植物叶绿素降解相关基因表达过程中的作用。【方法】通过UV-2800紫外分光光度计检测TuMV对本氏烟叶绿素含量的影响。利用Real-time qPCR检测TuMV侵染或瞬时表达6K2蛋白对本氏烟叶绿素降解相关基因NbNYE1(Nicotiana benthamiana NON-YELLOWING1)、NbNYE2(Nicotiana benthamiana NON-YELLOWING2)和NbPAO(Nicotiana benthamiana pheide a oxygense)mRNA相对表达水平的影响。敲除NbPLDα1(Nicotiana benthamiana phospholipase D alpha 1)或正丁醇降低磷脂酶D产生的磷脂酸含量,检测对TuMV诱导的NbNYE1、NbNYE2和NbPAO mRNA相对表达水平的影响。体外喷施磷脂酸对NbNYE1、NbNYE2和NbPAO mRNA相对表达水平的影响。【结果】TuMV侵染导致野生型本氏烟叶片叶绿素含量下降48%。TuMV侵染的野生型本氏烟中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为健康野生型本氏烟的7.61、15.80和5.19倍。TuMV侵染的NbPLDα1敲除突变体本氏烟中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为健康野生型本氏烟的2.35、7.83和1.29倍。正丁醇处理后,TuMV侵染的野生型本氏烟NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量与健康野生型本氏烟无明显差异。喷施磷脂酸的叶片中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为清水处理野生型本氏烟的12.39、3.64和8.26倍。此外,瞬时表达6K2蛋白叶片中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为瞬时表达GFP野生型本氏烟的5.64、4.67和3.45倍。【结论】TuMV促进叶绿素降解相关基因表达依赖磷脂酶Dα1及其产物磷脂酸,病毒编码的6K2蛋白是促进叶绿素降解相关基因的关键致病因子。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 本氏烟 叶绿素降解 6K2蛋白 磷脂酸 磷脂酶D
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Insight into Function and Subcellular Localization of a Type III-Secreted Effector in Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000
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作者 Jianzhong Huang Kai Chen +4 位作者 Zhuojun Li Hongbin Zhang Xiuying Guan Xiaoju Zhong Peng Jia 《American Journal of Plant Sciences》 CAS 2024年第10期835-846,共12页
Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 (Pst DC3000) is a bacterial pathogen of tomato and of the model plants Arabidopsis and Nicotiana benthamiana (N. benthamiana). Like numerous Gram-negative bacterial pathogens of ... Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 (Pst DC3000) is a bacterial pathogen of tomato and of the model plants Arabidopsis and Nicotiana benthamiana (N. benthamiana). Like numerous Gram-negative bacterial pathogens of animals and plants, Pst DC3000 exploits the conserved type III secretion system (TTSS) to deliver multiple virulence effectors directly into the host cells. Type III effectors (T3Es) collectively participate in causing disease, by mechanisms that are not well clarity. Elucidating the virulence function of individual effector is fundamental for understanding bacterial infection of plants. Here, we focused on studying one of these effectors, HopAA1-1, and analyzed its potential function and subcellular localization in N. benthamiana. Using an Agrobacterium-mediated transient expression system, we found that HopAA1-1 can trigger domain-dependent cell death in N. benthamiana. The observation using confocal microscopy showed that the YFP-tagged HopAA1-1 localizes to diverse cellular components containing nucleus, cytoplasm and cell membrane, which was demonstrated through immunoblot analysis of membrane fractionation and nuclear separation. Enforced HopAA1-1 subcellular localization, by tagging with a nuclear localization sequence (NLS) or a nuclear export sequence (NES), shows that HopAA1-1-induced cell death in N. benthamiana is suppressed in the nucleus but enhanced in the cytoplasm. Our research is lay a foundation for revealed the molecular pathogenesis of Pseudomonas syringae pv. tomato. 展开更多
关键词 Cell Death HopAA1-1 Nicotiana benthamiana Pst DC3000
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The Application of Nicotiana benthamiana as a Transient Expression Host to Clone the Coding Sequences of Plant Genes
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作者 Jianzhong Huang Peng Jia +3 位作者 Xiaoju Zhong Xiuying Guan Hongbin Zhang Honglei Ruan 《American Journal of Molecular Biology》 CAS 2024年第2期54-65,共12页
Coding sequences (CDS) are commonly used for transient gene expression, in yeast two-hybrid screening, to verify protein interactions and in prokaryotic gene expression studies. CDS are most commonly obtained using co... Coding sequences (CDS) are commonly used for transient gene expression, in yeast two-hybrid screening, to verify protein interactions and in prokaryotic gene expression studies. CDS are most commonly obtained using complementary DNA (cDNA) derived from messenger RNA (mRNA) extracted from plant tissues and generated by reverse transcription. However, some CDS are difficult to acquire through this process as they are expressed at extremely low levels or have specific spatial and/or temporal expression patterns in vivo. These challenges require the development of alternative CDS cloning technologies. In this study, we found that the genomic intron-containing gene coding sequences (gDNA) from Arabidopsis thaliana, Oryza sativa, Brassica napus, and Glycine max can be correctly transcribed and spliced into mRNA in Nicotiana benthamiana. In contrast, gDNAs from Triticum aestivum and Sorghum bicolor did not function correctly. In transient expression experiments, the target DNA sequence is driven by a constitutive promoter. Theoretically, a sufficient amount of mRNA can be extracted from the N. benthamiana leaves, making it conducive to the cloning of CDS target genes. Our data demonstrate that N. benthamiana can be used as an effective host for the cloning CDS of plant genes. 展开更多
关键词 Coding Sequence Genomic Sequence Nicotiana benthamiana Plant Genes
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Structural and Functional Insights into an Arabidopsis NBS-LRR Receptor in Nicotiana benthamiana
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作者 Jianzhong Huang Xiuying Guan +3 位作者 Xiaoju Zhong Peng Jia Hongbin Zhang Honglei Ruan 《American Journal of Molecular Biology》 CAS 2024年第2期84-96,共13页
Nucleotide-binding site leucine-rich repeat receptors (NBS-LRR/NLRs) are crucial intracellular immune proteins in plants. Previous article reported a novel NLR protein SUT1 (SUPPRESSORS OF TOPP4-1, 1), which is involv... Nucleotide-binding site leucine-rich repeat receptors (NBS-LRR/NLRs) are crucial intracellular immune proteins in plants. Previous article reported a novel NLR protein SUT1 (SUPPRESSORS OF TOPP4-1, 1), which is involved in autoimmunity initiated by type one protein phosphatase 4 mutation (topp4-1) in Arabidopsis, however, its role in planta is still unclear. This study employed Nicotiana benthamiana, a model platform, to conduct an overall structural and functional analysis of SUT1 protein. The transient expression results revealed that SUT1 is a typical CNL (CC-NBS-LRR) receptor, both fluorescence data and biochemical results showed the protein is mainly anchored on the plasma membrane due to its N-terminal acylation site. Further truncation experiments announced that its CC (coiled-coil) domain possessed cell-death-inducing activity. The outcomes of point mutations analysis revealed that not only the CC domain, but also the full-length SUT1 protein, whose function and subcellular localization are influenced by highly conserved hydrophobic residues. These research outcomes provided favorable clues for elucidating the activation mechanism of SUT1. 展开更多
关键词 CC-NBS-LRR Hypersensitive Response Nicotiana benthamiana Plasma Membrane Localization
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烟草叶片响应镉胁迫的差异表达基因鉴定及分析
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作者 张慧 张欣雨 +2 位作者 袁旭 陈伟达 杨婷 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期944-956,共13页
烟草具有超富集镉的能力,严重降低烟叶品质,影响其经济价值。为了阐释烟草响应镉胁迫的分子机制,本研究采集了镉浓度为0和500μmol L^(–1)培养条件下的烟草叶片进行转录组测序。共获得76.94 Gb有效数据(Clean data),Q30碱基百分比均达... 烟草具有超富集镉的能力,严重降低烟叶品质,影响其经济价值。为了阐释烟草响应镉胁迫的分子机制,本研究采集了镉浓度为0和500μmol L^(–1)培养条件下的烟草叶片进行转录组测序。共获得76.94 Gb有效数据(Clean data),Q30碱基百分比均达到95.43%以上;在镉胁迫的烟草叶片中,共筛选出7735个差异表达基因,其中4833个基因表达上调,2902个基因表达下调,并通过qRT-PCR分析验证了转录组数据的可靠性。对差异转录本进行GO和KEGG富集分析,GO注释表明差异基因涉及代谢过程、应激反应、细胞结构体、催化活性和转录调节活性等;KEGG富集分析表明上调差异基因主要富集在氨基酸的生物合成、碳代谢、氧化磷酸化和柠檬酸循环等通路,下调差异基因则主要富集在光合作用、次生代谢产物的生物合成、代谢途径和植物激素信号转导途径。进一步分析植物激素信号转导通路发现,共有8条植物激素途径以不同的表达方式参与烟草对镉胁迫的响应。激素喷施烟草的实验结果表明,叶片通过调控赤霉素、油菜素内酯和茉莉酸途径以应对镉胁迫;拟南芥激素信号缺失突变体验证实验表明赤霉素、油菜素内酯、茉莉酸和乙烯途径均响应镉胁迫。综上所述,本文以转录组分析探究了烟草叶片响应镉胁迫的调控网络,以期为提高作物抗逆性的遗传改良提供理论依据。 展开更多
关键词 普通烟 镉胁迫 转录组分析 调控机制 植物激素
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