nifH-gfp表达载体的构建及其在Enterobacter gergoviae 57-7中的表达

采用PCR技术 ,从GFPmut2中扩增得到三位点突变的报告基因gfpS65T、V68L、S72A片段 ,并将它和肺炎克氏杆菌(Klebsiellapneumoniae (Schr eter)Trevisan)M5a1的固氮酶结构基因nifH的启动子和其起始密码子相融合 ,获得nifH_gfp表达载体pMGFP2 ;再在pMGFP2上插入卡那霉素抗性基因 ,获得可在日勾维肠杆菌 (Enterobactergergoviae)5 7_7表达nifH_gfp的表达载体pMGFP2 .1。研究了此表达载体经转化E .gergoviae 5 7_7后 ,NH+ 4和氧对E .gergoviae5 7_7中nifH_gfp表达的影响。