nm23-H_1和nm23-H_2在人乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 :研究nm2 3基因两个亚型表达与乳腺癌发生转移因素之间的关系。方法 :用半定量RT PCR方法 ,检测 30例乳腺癌组织nm2 3 H1 和nm2 3 H2 mRNA的表达 ,分析其与乳腺癌转移的关系。结果 :淋巴结阳性的原发灶组织nm2 3 H1 mRNA表达明显低于淋巴结阴性的原发灶组织 ,Ⅲ期乳腺癌组织nm2 3 H1 mRNA水平较Ⅰ、Ⅱ期的明显低 ,多因素分析发现淋巴结转移与nm2 3 H1 mRNA的表达有显著性相关。nm2 3 H2 mRNA表达与乳腺癌患者肿瘤大小、淋巴结状况、绝经状况、激素受体状况、TNM分期之间无显著性相关。结论 : nm2 3 H1 mRNA的表达强度与乳腺癌淋巴结转移呈负相关。nm2 3 H1 mRNA较nm2 3 H2 mRNA在乳腺癌转移过程中起更重要的作用。nm2 3 H1

nm23-H2基因抑制卵巢癌细胞侵袭转移及调节网络初探

目的研究上皮性卵巢癌转移相关nm23-H2基因功能及其调控网络,为最终揭示卵巢癌侵袭转移分子机制和晚期卵巢癌基因治疗提供理论依据。方法将nm23-H2重组质粒pCDNA3/nm23-H2转染人卵巢癌细胞系SKOV3.ip1,经G418抗性筛选及RT-PCR鉴定得到稳定转染阳性克隆H2-18,设计体外黏附实验及人工基底膜侵袭实验比较转染前后细胞黏附侵袭特性的改变。应用2 747点人类肿瘤相关Oligo芯片检测转染前后细胞基因表达的改变,寻找与nm23-H2相关下游调控肿瘤相关基因,并探讨其调节网络。结果用重组质粒pCDNA3/nm23-H2转染SKOV3.ip1细胞。转染前后细胞在体外的增殖能力没有显著变化,转染后细胞的黏附与侵袭基底膜能力明显降低。经人类肿瘤相关Oligo芯片检测转染前后细胞发现55个二倍差异表达基因,在上调基因中以转录调节、信号转导、分化发育及细胞凋亡类基因为多;下调基因中以信号传导及黏附运动功能类基因为主。结论nm23-H2基因具有抑制卵巢癌侵袭转移的作用,并且这一作用的实现是通过对一系列下游肿瘤相关基因的调控来完成的。基因芯片技术结合普通分子生物学技术是后基因组时代肿瘤相关基因功能研究及探索基因调控网络的有效手段。

C-erbB-2、nm23在原发性乳腺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的 :探讨原发性乳腺癌组织中C -erbB - 2、nm2 3蛋白表达及其与淋巴结转移的关系。方法 :采用S -P免疫组织化学技术及HE染色 ,对C -erbB - 2、nm2 3蛋白表达进行观察。结果 :5 7例原发性乳腺癌中淋巴结转移 32例 ,转移率为 5 6 .1% ,其中C -erbB - 2阳性表达者 ,淋巴结转移的百分率显著高于阴性表达 (P <0 .0 5 ) ,呈正相关 ,而nm2 3则以阴性表达淋巴结转移的百分率明显高于阳性表达者 (P <0 .0 5 ) ,呈负相关。结论 :C -erbB - 2、nm2 3检测不仅对乳腺癌内分泌治疗有重要的参考价值 ,而且对乳腺癌内分泌治疗有重要的参考价值 ,而且对乳腺癌有无淋巴结转移的判断及预后的估计确有较大的参考价值。

胃癌p53、c-erbB-2、p21、nm23基因表达的分布特点及其临床意义

目的为探讨手术切除胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23联合基因产物表达检测对胃癌诊断治疗及预后判断的价值.方法应用免疫组化技术检测了手术切除胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23基因产物表达.结果p53蛋白表达阳性率为36.4%～46.7%,c-erbB-2为33.3%～56.8%,p21为35.1%～56.7%,nm23为30.0%～70.5%.在非胃癌组织中(胃,十二指肠溃疡,胃息肉,重度不典型增生)未见c-erbB-2、p21、nm23基因表达.p53、c-erbB-2、p21的表达与胃癌的分化程度,肿瘤浸润程度,肿瘤转移程度及临床分期呈正相关.nm23的表达与胃癌的分化程度,肿瘤浸润程度,肿瘤转移程度及临床分期呈负相关.p63、c-erbB-2、p21、nm23四种肿瘤蛋白在胃镜活检标本和手术切除标本中表达无显著性差异,胃镜活检标本和手术切除标本检测阳性符合率分别为90.2%、91.0%、93.7%和89.3%.结论对胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23基因表达检测在胃部良恶性肿瘤鉴别,非手术临床分期的判断及指导临床治疗等方面具有一定价值.多基因表达检测对胃癌预后判断明显优于单基因表达检测.

nm23 H2表达与卵巢癌浸润转移及突变

目的 研究卵巢肿瘤组织中ｎｍ２３Ｈ２ 基因的扩增、表达及其突变并探讨其临床意义。 方法 用免疫组织化学（ＩＨＣ） 、反转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和多聚酶链反应单链构象多态技术（ＰＣＲＳＳＣＰ） 方法检测４１ 例卵巢癌、２０ 例卵巢良性肿瘤和２１ 例正常卵巢组织ｎｍ２３Ｈ２ 基因的表达、扩增和突变。 结果 ①卵巢癌ｎｍ２３Ｈ２ 阳性表达率在６８ ％ 以上，显著地高于良性肿瘤及正常卵巢组织（Ｐ＜ ００１） ；②癌灶ｎｍ２３Ｈ２ 的阳性表达及扩增显著地高于转移灶（ Ｐ＜ ００１） ；③Ⅰ～Ⅱ期患者癌组织中ｎｍ２３Ｈ２ 的阳性表达率显著地高于Ⅲ～Ⅳ期者（ Ｐ＜００１） ；④ｎｍ２３Ｈ２ 的阳性表达和扩增与病理分级及病理分类无显著差异（ Ｐ＞ ００５） ；⑤ｎｍ２３Ｈ２ 阳性表达的患者近期疗效比阴性者好（ Ｐ＜ ００５）。 结论 ｎｍ２３Ｈ２ 阳性表达是卵巢恶性肿瘤的早发事件，其阳性表达的降低预示疗效差。因此，对患者进行ｎｍ２３Ｈ２ 基因的检测有助于预测预后。

NM23-H1和NM23-H2可切割血小板起源的生长因子-A基因启动子中的核酸酶敏感成分

PDGF A基因的转录由几个GC丰富的、高度单链的、非B型结构的增强子和沉寂成分所调节 其中一个沉寂子位于PDGF A启动子远上游 5’端 (- 14 18～ - 1388) ,命名为 5’SHS .重组人NM 2 3 H1和NM 2 3 H2可分别在 3’和 5’端切割单链、双链形式的 5’SHS的两条链 ,表明NM 2 3 H1和NM 2 3 H2在不同位点 ,以不同机制切割 5’SHS .NM 2 3 H1和NM 2 3 H2也可分别在 3’和 5’端切割双链形式的PDGF A启动子中的NHE成分 (- 82～ - 5 0 ) ;此外 ,NM 2 3 H1也可在 3’端切割PDGF ANHE成分的无意义链 (Py链 )

nm23-H2抗体对C6神经胶质瘤细胞MMP-2蛋白表达量及磷酸化的影响

目的探讨nm23-H2抗体对C6胶质瘤细胞MMP-2蛋白表达量及其磷酸化的影响,并探讨其意义。方法将C6细胞常规培养后,按加入nm23-H2抗体的浓度分对照组(0 mg/L)、低浓度组(20 mg/L)和高浓度组(40 mg/L)3组,通过采用免疫组化、Western法检测C6细胞中MMP-2蛋白表达量及磷酸化的变化。结果 Western结果显示,各实验组中,MMP-2表达量及其磷酸化程度随nm23-H2抗体浓度的增高呈降低趋势,表现为剂量依赖性关系,3组相互比较,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示:对照组MMP-2阳性细胞数为(61.60±6.60)%,低浓度组为(31.00±5.94)%,高浓度组为(17.57±6.15)%,3组相互比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 nm23-H2对C6细胞MMP-2蛋白表达量及磷酸化起调节作用,使用特异性抗体对其拮抗后,MMP-2蛋白表达量及磷酸化水平均呈下降趋势。

侵袭性垂体腺瘤nm23-H2和PTTG蛋白表达及其临床意义

目的 探讨nm2 3 H2和PTTG蛋白表达与垂体腺瘤发生、发展、生物学行为及预后的关系。方法 采用免疫组化S P法检测上述两基因蛋白在 6 2例垂体腺瘤中的表达。结果 nm2 3 H2在非侵袭性垂体腺瘤组的阳性表达率显著高于侵袭性垂体腺瘤组 (P <0 0 5 ) ,腺瘤侵袭海绵窦、包绕颈内动脉组、蝶窦斜坡骨质破坏组、腺瘤囊变卒中组、复发组的nm2 3 H2阳性表达率均明显低于对照组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。PTTG在侵袭性垂体腺瘤组与非侵袭性垂体腺瘤组强阳性表达率差异有显著性 (P <0 0 5 )。功能性腺瘤组、海绵窦侵袭组、蝶窦斜坡骨质破坏组的强阳性表达率均与对照组有显著差异 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。nm2 3 H2基因蛋白阴性表达和PTTG基因蛋白阳性表达代表了两基因突变 ,两者之间相关性无统计学意义 ,说明它们在垂体腺瘤发生及生物学行为改变过程中可能不是同时或伴随发生。结论 nm2 3 H2和PTTG基因蛋白的异常表达可作为客观评价垂体腺瘤的生物学行为、预后复发的判断、指导术后个体化治疗的良好指标。

散发性胆囊肿瘤错配修复基因hMLH1、hMSH2和nm23H1基因蛋白表达的研究

目的探讨hMLH1和hMSH22种错配修复基因和抑癌基因nm23H1蛋白在胆囊肿瘤组织中的表达,评估其在胆囊肿瘤发生、发展和预后判断中的临床意义,为揭示肿瘤发生的病理机制提供实验依据。方法采用Envision免疫组织化学方法,检测70例胆囊肿瘤组织和10例胆囊炎症组织hMLH1、hMSH2和nm23H1蛋白表达变化。结果①在胆囊癌、胆囊良性肿瘤和炎症组织中,hMLH1、hMSH2和nm23H1蛋白表达阳性率差异显著(P<0.05);②在胆囊癌组织中,hMLH1、hMSH2蛋白表达阳性率分别为51.06%、42.55%;有淋巴结转移者hMLH1蛋白表达阳性率(25.00%)和NevinⅣ+Ⅴ期表达阳性率(29.17%)分别低于无淋巴结转移者(70.37%)和NevinⅠ+Ⅱ+Ⅲ期(73.91%),P<0.01,伴肝脏浸润者(27.78%)低于无肝脏浸润者(65.51%),P<0.05;但hMSH2蛋白表达阳性率无显著性差异;③在胆囊癌组织中,nm23H1蛋白表达阳性率为46.81%,有淋巴结转移者(25.00%)低于无淋巴结转移者(62.96%),P<0.01;NevinⅣ+Ⅴ期(29.17%)低于Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期(65.22%),P<0.05;④在胆囊癌组织中,hMSH2蛋白表达阳性者中nm23H1蛋白表达阳性率(65.00%)显著高于hMSH2蛋白表达阴性者(33.33%),P<0.05。结论实验结果提示,DNA错配修复基因hMLH1、hMSH2和nm23H1基因相互协同,参与了胆囊肿瘤发生、发展和转移的过程,可能是胆囊肿瘤发生的1个重要分子机制。

表皮蛋白BmCPR41在2龄不眠蚕突变体nm2中的表达和功能分析

家蚕(Bombyx mori)2龄不眠蚕(non-molting in the 2nd instar,nm2)突变体是从家蚕品种C603中发现的一种致死突变体,发育至2龄将眠期后不能正常入眠蜕皮,持续5~7 d后陆续死亡,图位克隆结果表明该突变体是由表皮蛋白BmCPG10突变引起的,且血淋巴中的蜕皮激素滴度显著低于野生型。蜕皮激素主要在前胸腺合成,因此本研究以nm2突变体和野生型家蚕2龄将眠蚕的前胸腺(包含第一对气管丛)为材料进行双向电泳分析,从中检测到一个表皮蛋白BmCPR41在突变体中的表达量高于野生型,组织表达谱表明BmCPR41在前胸腺的表达量远高于其他组织。通过RNAi敲低BmCPR41的表达,发现有部分家蚕推迟入眠或不入眠,蚕体重也显著低于对照组,且相关基因基于RNA-seq的表达情况与nm2突变体中的基本一致。基于上述实验结果推测BmCPR41基因在nm2突变体形成,尤其蜕皮激素信号通路上发挥重要作用。本研究结果为进一步研究nm2突变体的形成机制提供了实验证据,并可为研究蜕皮激素介导的信号通路提供理论依据。

NM23-H2通过下调P-STAT3表达抑制结直肠腺癌的发生及迁移

目的探讨抑癌基因——NM23-H2对结直肠腺癌迁移能力的影响,以及与Janus激酶-信号转导子与转录激活子(JAK-STAT)信号通路的相关性。方法选取2018年1月至2021年1月湖南省湘潭市第一人民医院收集的病理蜡块80个,其中腺癌35个,癌旁组织20个,淋巴结转移25个。使用免疫组织化学方法进行染色,统计分析3种蜡块P-STAT3、NM23-H2的表达是否具有差异性,将带有NM23-H2基因的重组质粒转染人结直肠腺癌SW620细胞,采用Transwell实验检测NM23-H2对SW620细胞迁移能力的影响,蛋白质印迹法检测稳定转染组和未转染组SW620细胞P-STAT3的表达。结果3种蜡块P-STAT3、NM23-H2表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05);NM23-H2能抑制SW620细胞的迁移能力,并能下调SW620细胞P-STAT3的表达。结论NM23-H2抑制结直肠腺癌发生、发展及迁移可能与JAK-STAT信号通路活性下调相关。

乳腺癌病人nm23蛋白的检测与癌转移的关系研究

ｎｍ２３基因是一个与癌转移相关的肿瘤抑制基因，位于１７号染色体着丝点附近，其表达产物为１７ＫＤ的核苷二磷酸激酶。近年来报告，当癌发生转移时，病人的ｎｍ２３蛋白水平下降或检测不出ｎｍ２３蛋白。本文应用斑点ＥＬＩＳＡ法检测了３１例临床病理和Ｘ线均诊断为乳腺癌的病人ｎｍ２３基因的表达水平。检查结果发现，３１例乳腺癌中，２０例阳性，１１例未测到ｎｍ２３基因的表达。经本法检查与临床病理和Ｘ线诊断比较，斑点ＥＬＩＳＡ法检查未发现ｎｍ２３基因表达的１１例中有８例临床病理和Ｘ线诊断证实乳腺癌已转移，两者符合率为７２％。实验结果表明：ｎｍ２３斑点ＥＬＩＳＡ法检查乳腺癌转移，由于方法简便、快速、取材容易，可作为临床判断乳腺癌病人转移的一个生化检测指标。

nm23-M2 cDNA克隆、表达及抗体制备

为通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白，进而制备高效价、高特异性的抗血清。构建在大肠杆菌中高效表达pQE30／nm23-M2表达质粒，Ni^＋-NTA亲和层析纯化；用纯化蛋白免疫兔，制备抗血清并纯化，琼脂双向扩散法测效价，免疫组织化学比较它与抗NM23-H2抗体的特异性。结果：nm23-M2 cDNA序列完全正确，表达的17KD可溶性融合蛋白占菌体总蛋白45％，纯化后纯度97％以上，抗血清效价为1：64—128，提纯后纯度在90％以上，特异性高于NM23-H2抗体。

大肠癌中nm23—H1,H2表达的研究

应用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术，研究３６例大肠癌标本中ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ２基因的ｍＲＮＡ表达。结果显示：ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达显著高于正常大肠粘膜，ＤｕｋｅｓＤ期中其表达显著低于Ａ、Ｂ、Ｃ期，有远处转移者其表达亦显著低于无远处转移者，ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达与大肠癌临床病理无显著相关，提示ｎｍ２３－Ｈ１可能参与大肠癌转移过程的调节。

禽源NME/NM23核苷二磷酸激酶2(NME2)基因的克隆及表达鉴定

参照GenBank中禽源核苷二磷酸激酶2(NME2)基因序列,设计了NME2基因的特异性引物。采用RT-PCR扩增NME2基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-NME2。将构建好的重组质粒pEF1α-Myc-NME2转染DF1细胞后,采用间接免疫荧光和Western blot技术对目的蛋白进行验证。结果表明,Myc-NME2融合蛋白在DF1细胞内得到了正确表达。本研究为后续研究禽源NME2基因的功能奠定了基础。

4种生物学因子对局部晚期乳腺癌新辅助化疗疗效评估的价值

目的探讨p53、ki67、nm23、表皮生长因子受体(EGFR)在局部晚期乳腺癌新辅助化疗疗效评估中的价值。方法选取2013年1月1日～2018年3月31日我院收治的局部晚期乳腺癌患者98例,检测新辅助化疗前后p53、ki67、nm23、EGFR的变化及其与临床疗效的关系。结果化疗后的p53、ki67、EGFR阳性表达均较化疗前降低,nm23阳性表达均较化疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。p53阳性者的有效率低于阴性者,差异有统计学意义(P<0.05);ki67、nm23阳性者的有效率均高于阴性者,差异均有统计学意义(P<0.05);EGFR阳性者与阴性者的有效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论新辅助化疗能够显著改善局部晚期乳腺癌患者生物学因子p53、ki67、EGFR、nm23的表达,同时p53、ki67、nm23对评估化疗疗效具有一定价值。

蓝宝石衬底材料CMP去除速率的影响因素

阐述了蓝宝石衬底应用的发展前景及加工中存在的问题,分析了蓝宝石衬底化学机械抛光过程中pH值、压力、温度、流量、抛光布等参数对去除速率的影响。提出了采用小流量快启动的方法迅速提高CMP温度,在化学作用和机械作用相匹配时(即高pH值、大流量或低pH值,小流量)可得到较高去除速率,且前者速率高于后者。实验采用nm级SiO2溶胶为磨料的碱性抛光液,使用强碱KOH作为pH调节剂,并加入了适当的表面活性剂及螯合剂等。工艺参数为压力0.18MPa、温度45℃、转速60r/min,采用Rodel-suba 600抛光布,在保证表面质量的同时得到的最大去除速率为11.35μm/h。

用于丝网印染的纳米水性涂料的研制

对纳米SiO2采取丙烯酸乳液原位共聚的方式进行表面修饰改性、得到nm-SiO2丙烯酸共聚乳液;以合成的nm-SiO2丙烯酸共聚乳液与水性丙烯酸色浆进行复配,即可制得适应于织物丝网印染的纳米水性涂料,该涂料既具有绿色环保性,又具有纳米功能性.

小鼠胚泡植入前、中、后子宫内膜nm3-M2动态表达

目的研究抑癌基因nm23-M2在小鼠胚泡植入前、中、后子宫内膜的动态表达。方法采用RT-PCR及免疫组织化学方法分别检测小鼠妊娠第2天(植入前)、第5天(植入中)、第7天(植入后)子宫内膜nm23-M2表达。结果 RT-PcR测得胚泡植入前、中、后子宫内膜中均存在nm23-M2的表达,但在妊娠第5天植入窗口期(植入中)nm23 -M2 mRNA／β-actin mRNA的比值明显升高,与植入前和植入后相比较,具有显著差异(P<0．01)。免疫组织化学分析显示妊娠第5天子宫内膜nm23-M2表达为强阳性,而植入前和植入后子宫内膜nm23-M2表达多为弱阳性。表明胚泡植入窗口期子宫内膜nm23-M2表达上调。结论 nm23-M2可能参与了小鼠胚泡植入。

CO_2激光联合585脉冲染料激光结合治疗毛细血管瘤临床分析

目的:观察CO2激光联合585染料激光结合治疗皮肤毛细血管瘤的临床疗效方法:2007年5月至2012年4月,我们应用CO2激光结合585染料激光治疗毛细血管瘤50例,结果:本组50例,痊愈23例,显效20例,有效7例,无效0例无明显并发症。结论:两种激光结合治疗毛细血管瘤,能缩短585nm激光治疗次数,减轻病人的经济负担,又能防止CO2激光高功率、穿透力强,易留有瘢痕的缺点。值得临床推广。