nmhaFGF对人乳腺癌细胞增殖的影响及相关机制

目的比较nmhaFGF和haFGF对恶性肿瘤细胞的促增殖作用及其机制,探讨nmhaFGF临床应用的安全性。方法以haFGF和nmhaFGF分别处理人乳腺癌细胞(MCF-7),用MTT法检测其细胞增殖活性;用流式细胞技术分析细胞周期;用蛋白免疫印迹法半定量检测MAPK通路中的信号蛋白G rb2和ERK1/2在MCF-7中的表达。结果nmhaFGF对MCF-7细胞的促增殖作用明显低于haFGF;haFGF组G1/G0和G2/M期细胞比例均低于nmhaFGF组和对照组,S期细胞比例显著高于nmhaFGF组和对照组;nmhaFGF组的G rb2和ERK1/2信号蛋白表达水平均低于haFGF组,亦接近对照组。结论nmhaFGF的促增殖活性显著下降,其机制是通过下调MAPK信号通路中的G rb2和ERK1/2信号分子的表达来实现的。

nmhaFGF对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

目的:研究非促分裂型酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:大鼠冠脉左前降支闭塞30min后再灌注3h,再灌注前10min尾静脉注射不同剂量nmhaFGF。测定各组大鼠室性心动过速(VT)和心室颤动(VF)的潜伏期、持续时间和发生率,评定心律失常分数;再灌注24h后,测定血清AST、LDH、CK-MB含量,并计算大鼠心肌梗死面积。结果:静脉注射nmhaFGF(20,40,80μg/kg)能明显抑制缺血再灌注引起的心肌损伤。和模型组相比,nmhaFGF各组大鼠的VT和VF发生率减少,出现心律失常的潜伏期延迟,持续时间缩短;另外心肌梗死区占左室面积的百分比及梗死区占危险区百分比均有所降低;此外,血清心肌酶含量AST、LDH、CK-MB显著降低;以80μg/kgnmhaFGF作用较明显,其作用强度与8mg/kg普萘洛尔相当。结论:nmhaFGF对大鼠缺血再灌损伤心肌具有保护作用。

非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子促小鼠烫伤愈合的研究

目的:研究非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenic human acidic fibroblastgrowth factor,nmhaFGF)在促小鼠深II度烫伤创面愈合中的作用。方法:采用大肠杆菌系统表达纯化制备nmhaFGF,细胞增殖法检测nmhaFGF生物活性,构建Balb/C小鼠深II度烫伤创面模型,分为实验组(20μg nmhaFGF/cm2创面,用PBS释稀)和空白对照组(外涂PBS),观察烫伤后1,3,7,9,14 d创面面积变化,并统计创面完全愈合所需要的时间;伤后7d,21d,取各组的伤口及周边皮肤HE及免疫组化染色(PCNA,胶原蛋白),观察创面病理组织学改变,胶原排列情况。结果:获得纯度为95.1%的nmhaFGF,有丝分裂活性较haFGF大大降低,外用nmhaFGF可促小鼠烫伤愈合,将愈合时间由17.2 d缩短至15.8 d(P<0.01);伤后7 d,nmhaFGF组创面肉芽组织生长较好,PCNA表达与空白对照组相比显著增加;21 d创面再上皮化较快,胶原蛋白排列较为整齐。结论:局部用nmhaFGF能促进小鼠深II度烫伤创面愈合,明显缩短愈合时间。