海参皂苷nobiliside A脂质体及其溶血行为的初步研究

本文旨在制备海参皂苷nobiliside A(Nob A)脂质体,建立脂质体中Nob A的含量和包封率的测定方法,考察该脂质体的体内外溶血行为。以高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定脂质体中Nob A含量,微柱离心法测定其包封率。以溶血率和包封率、粒径为指标,单因素考察了制备方法、磷脂用量、胆固醇用量和药脂比。根据单因素的考察结果,以薄膜超声法制备3批脂质体,与同浓度的药物溶液进行体内外溶血行为的比较。结果显示:用于含量测定和包封率测定的HPLC-ELSD和微柱离心法准确、快速,采用薄膜超声法制备的脂质体形态圆整,粒径较为均匀。当磷脂与胆固醇比例为2∶1,药脂比为1∶40时,Nob A脂质体的平均包封率为95.7%,平均粒径为87.6nm。Nob A以脂质体作为给药载体,其体内外溶血行为大大降低,有望成为静脉注射用脂质体。

Nobiliside-A脂质体包封率测定方法的研究

目的:建立黑乳海参的三萜皂苷Nobiliside-A脂质体包封率的测定方法。方法:分别采用葡聚糖柱层析法、微柱离心法分离脂质体和游离药物,并进行方法学考察,优选出测定Nobiliside-A脂质体包封率的方法。结果:两种测定包封率的方法结果无差异。结论:可以采用微柱离心法方便、快速地测定Nobiliside-A脂质体的包封率。

黑乳海参皂苷nobilisideⅠ和nobilisideⅡ的体外抗真菌及抗肿瘤活性

目的:阐明黑乳海参皂苷nobilisideⅠ和nobilisideⅡ的体外抗真菌及抗肿瘤活性。方法:对黑乳海参的总提取物采取硅胶柱色谱及半制备HPLC等分离手段进行活性追踪分离,通过理化性质及波谱学手段进行化学结构鉴定,以SRB法评价化合物的抗肿瘤活性。结果:分离得到了2个新的三萜皂苷元类化合物,命名为nobilisideⅠ和nobilisideⅡ。2个新化合物均显示了较强的体外抗真菌及抗肿瘤活性。结论:通过该研究为研制新的抗肿瘤药物提供了先导化合物,为充分开发利用我国的海洋生物资源提供了物质基础和科学依据。

HPLC-ELSD法测定黑乳海参皂苷甲nobiliside A冻干脂质体中药物含量以及包封率

目的:建立HPLC-ELSD法测定黑乳海参皂苷甲nobiliside A冻干脂质体药物含量以及包封率。方法:采用SB-C18柱;流动相为甲醇-0.5%醋酸二元梯度洗脱;检测器为蒸发光散射检测器;采用微柱离心法分离重建后的nobilisideA脂质体和游离药物。结果:nobiliside A在0.120～1.92μg线性关系良好(r=0.9993);方法平均回收率为99.12%(n=9)。结论:本方法简便快速,结果准确可靠,可用于nobiliside A冻干脂质体含量及包封率的测定。

黑乳海参皂苷nobiliside B及单乙酰化物体外抗肿瘤活性研究

目的研究黑乳海参中化合物nobiliside B及单乙酰化衍生物体外抗肿瘤活性及溶血作用。方法no-biliside B溶于吡啶,冰浴中与醋酐反应15 min,室温反应5h,应用多种色谱技术对反应产物分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。采用磺酰罗单明B法,测定化合物的体外抗肿瘤活性。结果确定nobiliside B单乙酰化衍生物结构为:3-O-[6″-乙酰氧基-β-D-吡喃葡萄糖-(1(3)-4′-O-磺酸钠-β-D-吡喃木糖]-海参烷-9-烯22,25-环氧-3β,17α-二醇(2);活性测试结果表明,化合物2在保持抗肿瘤活性的同时,溶血活性显著降低。结论通过结构修饰,得到1个活性强,毒副作用小的新化合物。为进一步研发海参皂苷类化合物抗肿瘤新药提供了试验依据。

nobiliside A隐形纳米脂质体对小鼠RM-1前列腺癌的抑制作用

目的比较nobiliside A隐形纳米脂质体(NASNL)和nobiliside A普通脂质体(NACL)对小鼠RM-1前列腺癌的抑制作用。方法 RM-1前列腺癌荷瘤小鼠随机分为6组(均n=10):阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺20 mg·kg^(-1)·d^(-1))、NACL低、高剂量组(1 mg·kg^(-1)·d^(-1)、2 mg·kg^(-1)·d^(-1))和NASNL低、高剂量组(1 mg·kg^(-1)·d^(-1)、2 mg·kg^(-1)·d^(-1)),均尾静脉注射给予相应药物,连续7 d。通过比较各组小鼠的肿瘤生长曲线、抑瘤率、肿瘤组织的病理变化等考察2种脂质体的抑瘤效果。结果 NASNL两剂量组的肿瘤生长速度均低于相应剂量的NACL组(P<0.05)。NASNL两剂量组的抑瘤率均高于相应的NACL组,其中NASNL高剂量组的抑瘤率是NACL高剂量组的2倍。NASNL各组肿瘤细胞坏死程度高于NACL各组。结论 NASNL的肿瘤抑制作用明显优于NACL。