重组Noggin蛋白对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞凋亡的影响

目的观察重组Noggin蛋白对酸吸入致急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡上皮细胞(AECs)凋亡的影响。方法 30只Wistar雄性大鼠随机均分为对照组(C组)、ALI组(A组)和Noggin组(N组)。麻醉和气管插管后,在吸入相C组给予生理盐水,A组和N组给予盐酸制备模型。然后经尾静脉C组和A组注射生理盐水,N组注射重组Noggin蛋白。造模后6、20 h每组分别处死5只大鼠,取肺组织观察和计数AECs凋亡情况。结果造模后6 h,各组核染色阳性细胞均出现在与肺泡管连接的区域,分布于肺泡壁角落,与Ⅱ型AECs在肺泡内的定位一致;20 h后,许多核染色阳性细胞出现在肺泡腔。定量分析A组造模后6 h和20 h核染色阳性细胞计数明显高于C组,N组核染色阳性细胞数量明显少于A组。结论重组Noggin蛋白明显减轻ALI后AECs凋亡,具有减轻ALI的肺保护作用。

桃红四物汤对兔软骨损伤模型noggin蛋白表达的影响——骨伤名师孙达武学术思想与临床经验研究(四)

目的观察桃红四物汤对兔膝关节软骨损伤模型noggin蛋白表达的影响,探讨桃红四物汤对兔膝关节软骨损伤修复的分子作用机制。方法从40只新西兰兔中随机挑选10只为假手术组,其余新西兰兔根据改良Hulth法进行右膝关节软骨损伤造模后,随机分为模型组、桃红四物汤组、氨基葡萄糖组,每组10只。假手术组做同样切口切至软骨面,但不予以造模而直接缝合。术后各组分别以等量蒸馏水、桃红四物汤、氨基葡萄糖进行灌胃。干预4、6周后,每组随机抽取5只新西兰兔,麻醉后进行腹主动脉采血,并循原手术切口暴露软骨,大体观察后截取包含股骨下端在内的软骨关节面,采用ELISA法检测noggin蛋白表达量;Western blot检测软骨组织中noggin的蛋白表达水平,并进行数据统计分析。结果干预4、6周后,桃红四物汤组noggin蛋白的表达均低于模型组,高于假手术组(P<0.05);与氨基葡萄糖组比较,桃红四物汤组noggin蛋白的表达更低,差异有统计学意义(P<0.05)。干预6周后,模型组、桃红四物汤组、氨基葡萄糖组关节面均不平整,但桃红四物汤组、氨基葡萄糖组软骨修复情况优于模型组。结论桃红四物汤能抑制noggin蛋白的表达,促进膝关节软骨修复,且抑制noggin蛋白表达的效果较氨基葡萄糖更优。

Noggin蛋白对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及海马齿状回神经发生的影响

目的观察侧脑室注射Noggin蛋白后对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆行为能力与海马齿状回神经发生的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型后,连续7 d侧脑室注射Noggin蛋白,对照组同时注射等量生理盐水,造模42 d后对各组小鼠进行Y迷宫学习记忆能力测试,用BrdU标记海马齿状回增殖细胞。结果Y迷宫检测结果表明,模型组小鼠学习记忆能力较正常对照组明显降低(P<0.05),而模型治疗组小鼠学习记忆能力较模型对照组明显改善(P<0.05);模型组与模型对照组小鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组减少(P<0.05),而模型治疗组BrdU阳性细胞数较模型组、模型对照组显著增多(P<0.05)。结论侧脑室给予Noggin蛋白可改善衰老模型小鼠的空间学习及记忆能力,可能与Noggin能保护海马神经元并促使齿状回神经干细胞增殖有关。

Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤后学习和记忆能力与齿状回结构的影响

目的探讨侧脑室注射Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)后学习、记忆能力及齿状回(DG)结构的影响,以期为临床缺血性脑血管疾病的预防与治疗提供新思路。方法240只小鼠随机分为:假手术组(n=80)、缺血再灌注损伤组(I/R组,n=80)、缺血再灌注损伤+Noggin治疗组(Noggin组,n=80),每组再分为1、3、7、14 d共4个亚组;取材前1天采用Y型迷宫检测小鼠学习记忆能力(n=5);然后比色法检测缺血侧脑组织超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)含量(n=5);2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死面积(n=5);尼氏染色与免疫荧光检测DG神经元与胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞变化(n=5);Western blotting法检测骨形态发生蛋白4(BMP4)蛋白表达(n=5)。结果随着损伤时间的增加,I/R组、Noggin组与假手术组相比,小鼠神经功能评分升高(F组别=21.19,P<0.001;F时间=25.13,P<0.001),学习、记忆能力均下降[(F组别=216.10,P<0.001;F时间=260.10,P<0.001)、(F组别=114.40,P<0.001;F时间=184.60,P<0.001)],脑梗死面积增加(F组别=2374,P<0.001;F时间=3292,P<0.001),SOD活性降低(F组别=1426,P<0.001;F时间=1723,P<0.001),MDA含量升高(F组别=2.22,P<0.001;F时间=6.33,P<0.001),神经元数量减少(F组别=148.90,P<0.001;F时间=485.50,P<0.001),GFAP阳性细胞和BMP4蛋白表达量增加[(F组别=40.18,P<0.001;F时间=141.90,P<0.001)、(F组别=426.70,P<0.001;F时间=1329,P<0.001)]。在各个相同时间点,与I/R组相比,Noggin各组小鼠神经功能评分降低(P<0.001),学习、记忆能力提高(P<0.001),脑梗死面积减小(P<0.001),SOD活性升高及MDA含量降低(P<0.001),神经元数量增加及染色变浅(P<0.001),GFAP阳性细胞和BMP4蛋白表达量降低(P<0.001)。结论Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤后学习、记忆能力提高与DG组织损伤修复有改善作用,其作用机制可能与阻断BMP4蛋白表达和抑制胶质细胞的反应性增生有关。

Noggin参与海人酸损伤后成年大鼠海马颗粒下区颗粒细胞增殖

目的探讨侧脑室注射海人酸（KA）致大鼠海马损伤后Noggin的表达变化及其与颗粒细胞增殖的关系。方法健康雄性SD大鼠32只采用随机数字表法分为实验组（16只）及对照组（16只），对照组义分为生理盐水对照组和空白对照组，各8只。实验组大鼠侧脑室注射KA，生理盐水对照组注射等剂量生理盐水，空白对照组不作处理。侧脑室注射KA 1周内，尼氏染色检测海马神经元的丢失，免疫荧光染色与原位杂交的方法检测海马齿状回BrdU标记细胞与Noggin mRNA阳性细胞的变化。结果在侧脑室注射KA致海马损伤后1周，海马CA3、CA4区神经元丢失明显。与生理盐水对照组比较，实验组海马齿状同BrdU阳性细胞升高，差异有统计学意义（P=0．006），其中注射侧较对侧更为明显。海马Noggin mRNA阳性细胞在第3天时升高，第7天时下降。结论侧脑室注射KA致海马损伤后．成年大鼠海马齿状回颗粒细胞异常增殖可能与Noggin表达波动有关。