Full-length core sequence dependent complex-type glycosylation of hepatitis C virus E2 glycoprotein

AIM: To study HCV polyprotein processing is important for the understanding of the natural history of HCV and the design of vaccines against HCV. The purpose of this study is to investigate the affection of context sequences on hepatitis C virus (HCV) E2 processing. METHODS: HCV genes of different lengths were expressed and compared in vaccinia virus/T7 system with homologous patient serum S94 and mouse anti-serum M( E2116) raised against E.coli -derived E2 peptide, respectively.Deglycosylation analysis and GNA ( Galanthus nivalus ) lectin binding assay were performed to study the post-translational processing of the expressed products. RESULTS: E2 glycoproteins with different molecular weights (-75 kDa and -60 kDa) were detected using S94 and M( E2116), respectively. Deglycosylation analysis showed that this difference was mainly due to different glycosylation. Endo H resistance and its failure to bind to GNA lectin demonstrated that the higher molecular weight form (75 kDa) of E2 was complex-type glycosylated, which was readily recognized by homologous patient serum S94. Expression of complex-type glycosylated E2 could not be detected in all of the core-truncated constructs tested, but readily detected in constructs encoding full-length core sequences. CONCLUSION: The upstream conserved full-length core coding sequence was required for the production of E2 glycoproteins carrying complex-type N-glycans which reacted strongly with homologous patient serum and therefore possibly represented more mature forms of E2. As complex-type N-glycans indicated modification by Golgi enzymes, the results suggest that the presence of full-length core might be critical for E1/E2 complex to leave ER. Our data may contribute to a better understanding of the processing of HCV structural proteins as well as HCV morphogenesis.

Serum Mac-2 binding protein glycosylation isomer level predicts hepatocellular carcinoma development in E-negative chronic hepatitis B patients

BACKGROUND Liver cirrhosis is a major risk factor for hepatocellular carcinoma(HCC)development in chronic hepatitis B(CHB). Serum Mac-2 binding protein glycosylation isomer(M2 BPGi) is a novel serological marker for fibrosis. The role of M2 BPGi in prediction of HCC is unknown.AIM To examine the role of serum M2 BPGi in predicting HCC development in hepatitis B e antigen(HBeAg)-negative patients.METHODS Treatment-naive CHB patients with documented spontaneous HBeAg seroconversion were recruited. Serum M2 BPGi was measured at baseline(within3 years from HBeAg seroconversion), at 5 years and 10 years after HBeAg seroconversion and expressed as cut-off index(COI). Multivariate cox regression was performed to identify predictors for HCC development. ROC analysis was used to determine the cut-off value of M2 BPGi.RESULTS Among 207 patients(57% male, median age at HBeAg seroconversion 40 years old) with median follow-up of 13.1(11.8-15.5) years, the cumulative incidence of HCC at 15 years was 7%. Median M2 BPGi levels were significantly higher in patients with HCC compared to those without HCC(baseline: 1.39 COI vs 0.38 COI, P < 0.001; 5-year: 1.45 COI vs 0.47 COI, P < 0.001; 10-year: 1.20 COI vs 0.55 COI, P = 0.001). Multivariate analysis revealed age at HBeAg seroconversion[odds ratio(OR) = 1.196, 95% confidence interval(CI): 1.034-1.382, P = 0.016] and baseline M2 BPGi(OR = 4.666, 95%CI: 1.296-16.802, P = 0.018) were significant factors predictive of HCC. Using a cut-off value of 0.68 COI, baseline M2 BPGi yielded AUROC of 0.883 with 91.7% sensitivity and 80.8% specificity.CONCLUSION High serum M2 BPGi within 3 years after HBeAg seroconversion was a strong predictor for subsequent HCC development in treatment-naive HBeAg-negative CHB patients.

Usefulness of Mac-2 binding protein glycosylation isomer in noninvasive probing liver disease in the Vietnamese population

BACKGROUND Early diagnosis is critical for successful intervention before liver disease progresses to cirrhosis and hepatocellular carcinoma.AIM To examine a novel biomarker for probing early liver disease quickly using an automated immunology system.METHODS This was a cross-sectional study.140 patients at various stages of liver disease were randomly selected.The cohort consisted of patients who were treatment naïve and currently undergoing therapy.We included patients with diverse liver disease etiologies.Mac-2 binding protein glycosylation isomer(M2BPGi)levels in addition to different clinical parameters,co-morbidities and transient elastography results were collected and compared.RESULTS M2BPGi levels were significantly correlated with transient elastography for liver fibrosis staging across all disease etiologies.Statistically significant differences were observed in patients with F0-1;F2 and>F3 liver fibrosis.Further examination showed that M2BPGi levels were two-fold higher in F4 than F3 hepatitis C(HCV)patients.M2BPGi was observed to be etiology-specific and HCV patients had higher mean M2BPGi levels.We also observed significant correlations with aspartate aminotransferase to platelet ratio index and fibrosis-4 index as well as HBV DNA levels.Mean M2BPGi levels for HBV patients with a viral load lower than 2000 IU/mL was 1.75-fold lower than those with a viral load greater than 2000 IU/mL.CONCLUSION M2BPGi was observed to be a good indicator of early liver disease in patients with different etiologies.Our results provide reference cut-offs for different causes of liver disease and demonstrated the utility of this marker for early disease monitoring.This is useful for remote regions in developing countries.

Pre-sarcopenia and Mac-2 binding protein glycosylation isomer as predictors of recurrence and prognosis of early-stage hepatocellular carcinoma

BACKGROUND The Mac-2 binding protein glycosylation isomer(M2BPGi),a fibrosis marker in various liver diseases,is reportedly a prognostic marker in patients with hepatocellular carcinoma(HCC)who underwent hepatectomy.AIM To evaluate whether the M2BPGi value,M2BP,and pre-sarcopenia before radiofrequency ablation(RFA)could be useful recurrence and prognostic markers in patients with early-stage HCC.METHODS In total,160 patients with early-stage primary HCC treated with RFA were separately analyzed as hepatitis C virus(HCV)-positive and HCV-negative.Factors contributing to recurrence and liver-related death,including M2BP,M2BPGi,and skeletal muscle mass index,were statistically analyzed.Eighty-three patients were HCV-positive and 77 were HCV-negative.RESULTS In HCV-positive patients,only des-γ-carboxy-prothrombin≥23 mAU/mL was a significant poor prognostic factor affecting survival after RFA.In HCV-negative patients,M2BPGi≥1.86 cutoff index was significantly associated with tumor recurrence,while M2BP was not.M2BPGi≥1.86 cutoff index(hazard ratio,4.89;95%confidence interval:1.97-12.18;P<0.001)and pre-sarcopenia(hazard ratio,3.34,95%confidence interval:1.19-9.37;P=0.022)were independent significant poor prognostic factors in HCV-negative patients.CONCLUSION In HCV-negative patients with primary HCC treated with RFA,lower M2BPGi contributed to a lower tumor recurrence rate and longer survival period.Pre-sarcopenia contributed to the poor prognosis independently in HCV-negative patients.These factors might be useful recurrence and prognostic markers for early-stage primary HCC.

血清D-D、GSP、HbA1c水平对妊娠糖尿病的临床意义

目的 探究检测血清D-二聚体(D-D)、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbA1c)表达水平在妊娠糖尿病中的临床意义。方法 选取2020年1月至2022年12月于郑州大学第二附属医院就诊117例妊娠糖尿病患者为研究组,同期选择117例体检健康孕妇作为对照组进行研究,比较两组血清D-D、GSP、HbA1c水平及稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用Pearson分析入院时血清D-D、GSP、HbA1c水平与HOMA-IR相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清D-D、GSP联合HbA1c水平检测对妊娠糖尿病病情程度的评估价值。结果 与对照组相比,研究组血清D-D、GSP、HbA1c水平及HOMA-IR均升高(P<0.05)。不同病情程度孕妇的血清D-D、GSP、HbA1c水平及HOMA-IR指数比较:重度>中度>轻度(P<0.05)。血清D-D、GSP、HbA1c水平与HOMA-IR均呈正相关(r=0.671、0.715、0.696,P<0.05)。产检时血清D-D、GSP、HbA1c水平联合诊断中度、重度妊娠糖尿病的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.873,最佳敏感度分别为95.64%、96.30%,特异度分别为76.12%、78.26%。结论 血清D-D、GSP、HbA1c水平联合检测可为临床评估妊娠糖尿病病情程度提供可靠参考依据。

限制性酶解结合糖基化改性对大豆分离蛋白乳化性质的影响

目的:开发基于大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)的新型乳化剂。方法:采用限制性酶解结合糖基化处理对SPI进行结构修饰,研究协同改性对SPI乳化特性的影响。结果:SPI水解物(soybean protein isolate hydrolysate,SPIH)中的相对分子质量较大组分(F30)的乳化性最佳,且糖基化反应4 h的F30-葡聚糖轭合物乳化稳定性相对最好。相较于SPI,SPIH与F30,F30-葡聚糖轭合物稳定的乳液表现出最低的初始平均粒径,并且具有最佳的贮藏稳定性。当pH接近SPI等电点或体系处于高盐浓度时,所有乳液均出现不稳定聚集现象。与SPI相比,SPIH和F30稳定乳液的聚集程度更高,而F30-葡聚糖轭合物由于共价结合的葡聚糖提供了额外的空间位阻和亲水性,使得轭合物稳定的乳液能够耐受离子强度和温度的变化,在不利环境条件下表现出更高的抵抗力。结论:限制性酶解结合糖基化改性是开发SPI基乳化配料的潜在可靠途径。

库尔勒垦区健康孕妇妊娠24~28周GSP、HbA1c参考区间的建立

目的 建立库尔勒垦区健康孕妇妊娠24~28周糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)的参考区间,为临床筛查妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)提供依据。方法 选取2019年1月至2021年2月于新疆生产建设兵团第二师库尔勒医院产检并分娩的795名孕妇为研究对象,根据24~28周时口服葡萄糖耐量试验结果将孕妇分为健康研究组(n=627)和GDM组(n=168),健康研究组孕妇按分娩年龄又分为适龄组(年龄<35岁,n=491)和高龄组(年龄≥35岁,n=136);选取同期131名健康未孕女性为对照组。检测各组研究对象的GSP、HbA1c水平,采用百分位数法(P2.5~P97.5)建立参考区间。采用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评价GSP、HbA1c筛查GDM的效能。结果 适龄组、高龄组和对照组研究对象的GSP、HbA1c比较差异均有统计学意义(P<0.05)。适龄组和高龄组孕妇的GSP、HbA1c比较差异均无统计学意义(P>0.05)。健康孕妇妊娠24~28周时的GSP参考区间为188.15~257.75μmol/L,HbA1c参考区间为4.50%~5.70%。ROC曲线结果显示,GSP、HbA1c单独筛查GDM的曲线下面积分别为0.803、0.708。结论 库尔勒垦区健康孕妇妊娠24~28周的GSP、HbA1c参考区间分别为188.15~257.75μmol/L、4.5%~5.7%,且GSP、HbA1c对筛查GDM人群有较大应用价值。

湿法糖基化改性大豆分离蛋白在低致敏千页豆腐中的应用

为寻求高效的糖基化改性条件和良好的应用途径,本文以葡萄糖、木糖两种单糖为糖基供体,探究反应时间、反应温度、蛋白与糖比例、蛋白浓度对大豆分离蛋白湿法糖基化反应的影响,分析大豆分离蛋白-葡萄糖复合物(SPI-葡萄糖)、大豆分离蛋白-木糖复合物(SPI-木糖)致敏性的变化,并将SPI-葡萄糖、SPI-木糖应用于低致敏千页豆腐生产。结果表明,木糖相较于葡萄糖更易与大豆分离蛋白发生糖基化反应,但也更容易有类黑素产生。在蛋白浓度为25 mg/mL时,糖基化反应程度最高,并且糖基化反应程度与反应温度、反应时间、糖添加量呈正相关。SDS-PAGE和傅里叶变换红外光谱分析结果表明糖基化改性使大豆分离蛋白和糖分子发生了共价结合,SPI的自由氨基减少。糖基化反应程度越高,SPI致敏性越低,SPI-木糖接枝物致敏性降低程度最高可达50%,以其为原料经谷氨酰胺转氨酶(TG酶)交联所制作的千页豆腐有良好的弹性和咀嚼性。

芦丁调控miR-155和HMGB1/RAGE通路对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响

目的:探讨芦丁对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响及其机制。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液灌胃)和芦丁低、中、高剂量组[分别以50、100、150 mg/(kg·d)芦丁灌胃],并取正常大鼠作为对照组(0.9%氯化钠溶液灌胃),每组20只,持续给药12周后,比较各组大鼠视网膜组织中伊凡斯兰渗透量、神经节细胞凋亡和微小RNA(miR)-155、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达水平,以及炎症因子水平。结果:对照组、模型组和芦丁低、中、高剂量组中伊凡斯兰渗透量分别为(1.61±0.31)μg/g、(12.84±1.24)μg/g、(9.85±0.62)μg/g、(6.80±0.53)μg/g、(2.87±0.51)μg/g,神经节细胞凋亡指数分别为(1.09±0.45)%、(30.96±2.50)%、(24.65±2.48)%、(18.61±1.41)%、(8.36±0.54)%,miR-155表达水平分别为(0.38±0.03)、(1.92±0.15)、(1.55±0.12)、(1.09±0.10)、(0.55±0.05),HMGB1 mRNA表达水平分别为(0.26±0.03)、(0.77±0.05)、(0.68±0.04)、(0.57±0.04)、(0.34±0.03),RAGE mRNA表达水平分别为(0.18±0.02)、(0.67±0.04)、(0.58±0.03)、(0.45±0.03)、(0.23±0.02)。模型组和对照组比较,伊凡斯兰渗透量、凋亡指数和miR-155、HMGB1、RAGE mRNA水平均升高(均P<0.05);芦丁低、中、高剂量组中上述指标呈剂量依赖性降低(均P<0.05)。模型组、对照组与芦丁低、中、高剂量组,芦丁各组的炎症因子水平低于模型组(均P<0.05)。结论:芦丁可保护糖尿病大鼠视网膜损伤,延缓视网膜炎症效应,其作用机制可能与抑制miR-155和HMGB1/RAGE通路有关。

鸡蛋清蛋白质糖肽的结构鉴定

鸡蛋清中主要蛋白质均为糖蛋白,经胃肠消化后将在消化道内产生大量糖肽,这些糖肽的结构需要被鉴定和明确。本研究采用胰蛋白酶将鸡蛋清消化,然后从水解物中通过亲水相互作用层析富集N-糖肽、以Retain AX层析结合AminoLink树脂吸附富集O-糖肽,运用液相色谱-质谱联用技术对糖肽结构进行解析,并借助生物信息学分析探究蛋清糖蛋白对肠道的潜在作用。经质谱解析,共鉴定到来自于49种N-糖蛋白的1720个N-糖肽结构,以及来自29种O-糖蛋白的565个O-糖肽结构。其中,卵黏蛋白糖肽结构最为多样,共有490个N-糖肽结构和216个O-糖肽结构。京都基因与基因组百科全书通路富集分析发现,含唾液酸修饰的N-糖蛋白主要涉及白细胞介素-17信号通路和铁死亡,而含唾液酸修饰的O-糖蛋白主要涉及胆固醇代谢、维生素消化吸收、低氧诱导因子-1信号通路和肾素-血管紧张素系统。本研究系统解析了鸡蛋清蛋白质的糖肽结构,为后续探究蛋清糖肽对肠道的潜在作用提供了重要的结构信息。

促糖基化对香菇蛋白质消化特性及消化产物抗氧化活性的影响

为探讨促糖基化对香菇(Lentinula edodes)蛋白质消化特性及消化产物抗氧化活性的影响,采用碱溶酸沉法提取子实体蛋白质,并制备糖基化和谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase, TGase)促糖基化蛋白质,通过模拟胃肠消化分别测定蛋白质组(C)、糖基化蛋白质组(G)和促糖基化蛋白质组(TG)的蛋白质消化率、水解度、蛋白质消化产物中的游离氨基酸和多肽含量,以及蛋白质消化产物的DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、羟基自由基清除率和总抗氧化能力。结果表明:与C组相比,G组在模拟消化90、120、180、240、270min时和TG组在模拟消化90、120、210、240、270min时消化率显著降低,且G与TG组间无显著性差异;在模拟消化60 min时G组水解度显著增加,在90~360 min时显著降低,TG组在模拟消化30、60、150~240、300 min时显著增加,且在模拟消化60~360 min时显著高于G组;G组在模拟消化60、210~360 min时和TG组在模拟消化0、60~360 min时游离氨基酸含量显著增加,且在模拟消化0、120、300~360 min时TG组显著高于G组;在模拟消化所有时间点,G组和TG组多肽含量均显著降低,且在模拟消化0、300~360 min时TG组显著高于G组;在模拟消化所有时间点,G组DPPH自由基清除率均显著增加,且TG组在模拟消化0、150、210~360 min时显著增加,但在模拟消化120、150、180、330、360 min时TG组显著低于G组;G组在模拟消化240~360 min时和TG组在模拟消化330、360 min时超氧阴离子清除率显著增加,且在模拟消化270min时,TG组显著低于G组;在模拟消化所有时间点,G组和TG组羟基自由基清除率和总抗氧化能力均显著增加;但在模拟消化0~180、240 min时TG组羟基自由基清除率显著高于G组,在模拟消化0~180、240~360 min时TG组总抗氧化能力显著低于G组。

基于分子库策略的蛋白质O⁃糖基化研究

糖以共价键的形式连接到蛋白质氨基酸的侧链上可以形成糖基化。糖基化在许多情况下能够显著增加蛋白质结构、性质和功能的多样性。特定的糖基化模式还能够赋予蛋白质和酶特异的性能,同时异常的糖基化模式也可能导致疾病。因此,全面深入地了解蛋白质糖基化的作用,无论是对于基础研究还是应用研究,都有重要的意义。然而,由于难以获得适于研究的样品,这方面的进展一直异常缓慢。近年来,研究人员逐渐开始探索使用一个基于糖基化异形体分子库(glycoform library)的策略来改变这一现状。这一策略以使用合成的方法制备的具有高纯度且在结构上存在系统差异的一系列分子作为研究对象,通过对它们结构、性质和功能的比较,相对快速而准确地获得蛋白质糖基化的作用和作用机制,进而更好地提高糖基化在改善蛋白质和酶的性能方面的应用水平。本综述旨在通过对分子库策略在O-糖基化研究方向上的进展,以大致按照时间顺序进行的总结、概述和简单讨论,实现对现有不多的实例的研究方法、每个实例取得的研究成果的系统展示,从而能够帮助研究人员更清晰地了解该策略目前的发展状况和不足,帮助他们在今后更好地利用该策略进行蛋白质糖基化的研究和应用,更好地提高该策略的使用深度和广度。

SPI基茶多酚纳米复合物的制备及其分子间相互作用研究

大豆分离蛋白(soybean protein isolated,SPI)因其功能和营养价值被认为是一种广泛应用于食品工业的植物蛋白。然而,天然蛋白的功能有限,可对SPI的结构进行改性,以作为活性物质的优良载体。本研究利用Maillard反应,用葡萄糖(glucose,Glu)和SPI制备了糖基化大豆分离蛋白(GSPI)。使用SPI和GSPI负载茶多酚(tea polyphenols,TP),得到负载TP的SPI纳米复合物(S-T)和负载TP的糖基化大豆分离蛋白纳米复合物(GS-T)。探讨了Glu对GSPI的影响,并进一步探讨了TP与SPI和GSPI的相互作用。相比于S-T,GS-T平均粒径更小,稳定性较好,且表现出良好的抗氧化活性。分子间相互作用结果显示,GS-T可能是通过疏水相互作用形成的,且可能增加蛋白的溶解性。总之,GSPI有希望成为功能食品、饮料和医药产品中TP类物质的一种新型有效的载体材料。

靶向编辑O⁃GlcNAc糖基化修饰的化学生物学技术

糖基化修饰是最丰富和最复杂的蛋白质翻译后修饰之一。其中,氧连-N-乙酰氨基葡萄糖基化修饰(O-GlcNAcylation)作为广泛存在于真核细胞质或线粒体的蛋白质糖修饰,影响了蛋白质性质、细胞功能和疾病状态等方面,因此,在活细胞中的靶蛋白质上进行编辑O-GlcNAc糖基化对于与其相关的功能调控至关重要。这些在细胞靶蛋白质上操控O-GlcNAc糖基化修饰的新技术,将在很大程度上加速O-GlcNAc功能研究的发展。本文简要介绍了近年来靶向编辑O-GlcNAc糖基化修饰化学生物学技术的研究进展,讨论了目前可用的O-GlcNAc编辑策略并进行了分析,展望了相关技术的未来发展前景。这些技术组成了一个强大的化学生物学工具箱,并有望用于与O-GlcNAc糖基化相关疾病的诊断与治疗。

蛋白质糖基化修饰在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌作为中国最常见的恶性肿瘤之一,涉及多种复杂的病理生理过程。随着糖组学的深入研究,揭露了蛋白质糖基化修饰与结直肠癌的发生、进展、转移及多药耐药的密切关系,糖基化的改变作为重要的生物标志物,为早期诊断及干预治疗提供了新的靶点。本文综述了蛋白质糖基化修饰在结直肠癌中最新研究进展,希望可以通过靶向相关糖基化修饰位点,改善患者预后及耐药性。

文蛤分离蛋白糖基化产物的制备及其结构表征

文蛤是我国海水养殖的重要经济贝类之一,蛋白含量高且氨基酸种类齐全。以文蛤为原料,提取文蛤分离蛋白,通过湿热糖基化反应法制备文蛤分离蛋白-葡聚糖糖基化合物。以乳化活性及乳化稳定性为判定指标,通过单因素结合响应面法优化糖基化反应条件,结果表明:最佳糖基化反应条件为温度109℃、时间89 min、pH 11、蛋白/葡聚糖质量比1∶1,此条件下的乳化活性和乳化稳定性分别为1.22和75.56。游离氨基含量、傅里叶红外光谱、热稳定性、荧光光谱分析和扫描电子显微镜等结果分析表明文蛤分离蛋白和葡聚糖通过糖基化反应生成了糖基化产物,改善了文蛤蛋白的功能特性。本研究为扩展文蛤蛋白在食品工业中的应用提供了理论参考。

可溶性大豆多糖对大豆分离蛋白凝胶形成的影响

[目的]探讨可溶性大豆多糖(soluble soybean polysaccharides,SSPS)对大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)凝胶形成及凝胶特性的影响。[方法]制备不同SSPS添加量的SPI悬液和凝胶,以未添加SSPS的SPI悬液和凝胶为对照。分别测定结构特性、理化特性以及凝胶特性。[结果]SPI制备成凝胶的过程中,SPI与SSPS之间发生了糖基化反应,SSPS改变了蛋白的二级结构和三级结构。添加SSPS后样品zeta-电位绝对值降低、热稳定性增大;凝胶离子键、氢键、疏水相互作用及二硫键含量下降,非二硫键的共价键含量增加。添加量为10%时,SPI悬液表面疏水性降低程度最大,达到88.42%;SPI凝胶硬度下降28.85%,持水性增加了40.72%。扫描电镜结果表明,SSPS的添加导致凝胶网络疏松多孔,凝胶强度下降。[结论]SPI凝胶制备过程中添加SSPS,二者会发生糖基化反应,随SSPS添加量增多,蛋白结构特性和凝胶特性改变更明显。

酶解联合糖基化对花生蛋白结构及功能特性的影响

利用木瓜蛋白酶有限酶解花生分离蛋白,再与葡聚糖在80℃下进行湿法糖基化反应2~6 h,研究糖基化对花生分离蛋白酶解物结构及功能特性的影响。结果表明,糖基化反应后花生分离蛋白酶解物具有较高的接枝度,紫外光谱和内源荧光光谱表明其空间结构发生改变,傅里叶变换红外光谱结果证实花生分离蛋白酶解物与葡聚糖发生糖基化反应。通过对复合改性后花生分离蛋白功能特性进行评价,发现花生分离蛋白的溶解度在pH3~7内均有所改善,反应4 h的糖基化产物在pH7时溶解度达到最高,为91.56%,较相同pH值下的花生分离蛋白提高1.77倍。经过4 h的接枝反应后花生分离蛋白酶解物的乳化活性最高,达到61.08 m^(2)/g,较花生分离蛋白提高5.28倍。此外,有限酶解和糖基化反应能够明显降低花生分离蛋白的表面疏水性、提高花生分离蛋白的抗氧化活性。因此,通过酶解和糖基化复合改性能够有效改善花生蛋白的功能特性,扩大其应用范围。

糖基化修饰对油茶油脂体界面结构及稳定性的影响

油脂体是植物种子储油细胞器,由单层磷脂与界面蛋白共同稳定。为增加油脂体的pH稳定性,选用葡萄糖和乳糖为羰基供体,通过糖基化修饰油茶油脂体的界面结构。通过粒径及Zeta-电位的变化综合评估油脂体物理稳定性,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳考察油脂体膜蛋白分子质量变化,采用Thermo Scientific Pierce BCA试剂盒分析油脂体膜蛋白溶解度的变化,并利用拉曼共聚焦显微镜观察油脂体界面结构的变化。结果表明:糖基化反应增大了油茶油脂体粒径,但粒径分布更均一,而Zeta-电位未发生显著变化(p>0.05);葡萄糖和乳糖与油脂体质量比分别为2∶1和5∶1时糖基化油脂体膜蛋白溶解度最高,分别比对照组(未糖基化油脂体)提升了26.8倍和16.1倍。糖基化后油脂体膜蛋白分子质量小幅增大;拉曼光谱分析表明糖与油脂体膜蛋白成功接枝。综上,糖基化有利于提高油茶油脂体稳定性。

血清血管生成素样蛋白2与2型糖尿病性视网膜病变的关系

目的 探讨血清血管生成素样蛋白2(angiopoietin-like protein 2,ANGPTL2)与2型糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)的关系。方法 选取2019年1-12月在宁波大学附属第一医院内分泌科就诊的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)患者168例,其中合并DR患者84例(DR组),无DR患者84例(NDR组)。收集并比较两组一般资料和血清学指标。通过二分类logistic回归分析探究DR的危险因素,并绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估血清ANGPTL2、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA1c)对DR的预测价值。结果 一般资料比较:与NDR组比较,DR组病程更长,臀围较小,差异均有统计学意义(P<0.05);血清学指标比较:与NDR组比较,DR组患者血清ANGPTL2、空腹血糖、HbA1c较高,2 hC肽水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。二分类logistic回归分析提示,高水平血清ANGPTL2(OR=1.766,95%CI:1.115~2.797)、HbA1c(OR=2.423, 95%CI:1.258~4.669)是DR的危险因素。血清ANGPTL2预测DR的ROC曲线下面积为0.728(95%CI:0.653~0.803),预测效能中等。HbA1c预测DR的ROC曲线下面积为0.682(95%CI:0.580~0.784),预测效能较低。结论 高水平血清ANGPTL2、HbA1c是DR的危险因素,血清ANGPTL2对预测该疾病的发生具有一定的参考意义。