LINC00852调节miR-671-5p/MYH9信号轴对非小细胞肺癌细胞增殖侵袭及迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA00852(LINC00852)调节微小RNA-671-5p(miR-671-5p)/肌球蛋白重链9(MYH9)信号轴对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法:采用qRT-PCR法检测45例2022年9月至2023年12月期间在我院进行手术的NSCLC患者术中切除的NSCLC组织及癌旁组织中LINC00852、miR-671-5p、MYH9 mRNA的表达。以A549细胞为研究对象,将其随机分为Control组、sh-NC组、sh-LINC00852组、sh-LINC00852+anti-NC组、sh-LINC00852+anti-miR-671-5p组。检测各组中LINC00852、miR-671-5p、MYH9 mRNA的表达;平板克隆实验、Transwell实验、划痕实验分别检测敲低LINC00852对A549细胞的增殖、侵袭、迁移的影响;Western blot检测各组A549细胞中PCNA、MYH9、MMP-9蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测LINC00852与miR-671-5p、miR-671-5p与MYH9之间的互作。结果:NSCLC组织LINC00852(1.65±0.34)、MYH9 mRNA表达(1.73±0.35)高于癌旁组织[(0.98±0.29)、(1.01±0.33)](t=10.058、10.041,P<0.05),miR-671-5p表达(0.52±0.15)低于癌旁组织(1.00±0.18)(t=13.742,P<0.05)。sh-LINC00852组A549细胞的克隆数、侵袭数、划痕愈合率、LINC00852、MYH9 mRNA和蛋白、PCNA蛋白、MMP-9蛋白表达低于sh-NC组、Control组,miR-671-5p表达高于sh-NC组、Control组(P<0.05);与sh-LINC00852组、sh-LINC00852+anti-NC组相比,sh-LINC00852+anti-miR-671-5p组克隆数、侵袭数、划痕愈合率、MYH9 mRNA和蛋白、PCNA蛋白、MMP-9蛋白表达升高,miR-671-5p表达降低(P<0.05)。LINC00852可以靶向负调控miR-671-5p,miR-671-5p可以靶向负调控MYH9。结论:敲低LINC00852可以抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭、迁移,其机制可能是通过调控miR-671-5p/MYH9信号通路实现的。

MYH9、STAT4、uPA基因多态性与特发性膜性肾病的相关性

目的：探讨MYH9（rs12107）、STAT4（rs3024912）、uPA（rs4065）单核苷酸多态性与特发性膜性相关性。方法：2011年6月至2015年5月在新疆维吾尔自治区人民医院确诊的45例特发性膜性肾病（IMN）患者为病例组（IMN组），45例IgA肾病（IgAN）患者为疾病对照组（IgAN组），45例健康体检者为健康对照组，选取直接测序方法检测rs12107、rs3024912、rs4065位点单核苷酸多态性（SNP），分析3个位点基因型及等位基因频率与IMN相关性。结果：A组rs12107位点CC基因型、C等位基因频率（48．9％、65．6％）高于B组（13.3％、33．3％）和C组（20．0％、46．7％），差异有统计学意义（P〈0．05）：C等位基因携带者患IMN的风险是T等位基因的2．18倍（95％CI1．19～3．97）：单因素Logistic回归分析rs12107位点CC基因型较非CC基因型的患者发生肾功能衰竭的风险高（OR=5．56，95％CI 1．27～24．29，P=0．023）；rs3024912基因型和等位基因频率在3组之间差异均无统计学意义；rs3024912位点GG基因型的患者是非GG基因型的患者发生肾功能衰竭风险的6．30倍（95％CI1．48～26．83，P=0．013）；rs4065位点只有TT一种基因型，未见到TC、CC基因型。结论：MYH9基因m12107位点CC基因型和C等位基因是新疆维吾尔族IMN的易感因素，且CC基因型与肾功能相关：STAT4基因rs3024912位点GG基因型与新疆维吾尔族IMN易感性无关．但与肾功能相关。

食管癌细胞线粒体中MYH9蛋白的分布及与SLP-2结合的研究

目的研究非肌性肌球蛋白重链9(myosin,heavy chain 9,non-muscle,MYH9)蛋白在食管鳞癌细胞线粒体内的分布,及MYH9蛋白与线粒体相关蛋白SLP-2的结合情况。方法使用抗stomatinlike protein 2(SLP-2)抗体,在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂解液里进行免疫共沉淀,共沉淀物使用MALDI-TOF-MS蛋白质质谱进行分析,以分析与线粒体相关蛋白SLP-2结合的分子。对分析结果再继续使用免疫共沉淀及GST pull down法进行验证。使用蔗糖密度梯度离心纯化分离细胞线粒体,利用Western blot明确MYH9在食管癌细胞线粒体内的分布。结果在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂解液内,MYH9蛋白可与SLP-2蛋白共沉淀,并且MYH9蛋白也能与GST-SLP-2结合。MYH9蛋白既存在于KYSE150细胞分离纯化后的细胞质中,也存在于分离出的线粒体中。结论 MYH9在食管癌细胞内部分分布于线粒体中,并与线粒体相关蛋白SLP-2相互结合。MYH9可能影响食管癌细胞线粒体的功能。

MYH9在肝细胞癌中的临床意义及生物学功能研究

目的:检测非肌性肌球蛋白重链9(non-muscle myosin heavy chain 9,MYH9)在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及对HCC细胞迁移侵袭能力的影响。方法:收集2013年1月1日至2014年1月1日间于我院肝胆外科行手术切除的65例HCC及对应癌旁组织,q RT-PCR检测MYH9的m RNA水平,免疫组织化学染色检测组织中MYH9的蛋白表达水平,分析MYH9蛋白表达与肿瘤临床特征间的相关性。采用si RNA敲低MHCC-97H细胞中MYH9的表达分别采用划痕愈合试验及Transwell侵袭小室检测沉默MYH9之后MHCC-97H细胞迁移及侵袭能力的变化。结果:MYH9在HCC组织中表达水平均明显高于对应癌旁组织;HCC组织中MYH9高表达与肿瘤数量(≥2个)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)显著相关;si RNA可明显降低MHCC-97H细胞中MYH9的表达水平;下调MYH9表达能够明显抑制MHCC-97H细胞的迁移及侵袭能力。结论:MYH9在肝细胞癌组织中表达上调并与肿瘤恶性临床病理特征有关,下调MYH9能够通过抑制肝癌细胞的迁移及侵袭而实现抗肿瘤效应。

儿童散发性MYH9相关疾病1例报告

非肌性肌球蛋白重链9相关疾病(MYH9-RD)是遗传性血小板减少症的病因之一,常伴有肾脏损害、感觉神经性耳聋、白内障等血液系统以外的表现。患儿,女,13岁,血小板减少12年余,血尿、蛋白尿4年余。外周血涂片镜检存在血小板数量下降(10~30)×10^(9)/L,血小板体积增大。尿常规示蛋白+++,红细胞(15~17)/HP,24小时尿蛋白定量4.34 g[相当于76 mg/(kg·d)]。纯音阈测定提示高频听力受损,眼科检查提示存在早发性白内障。基因检测证实患儿存在MYH9基因c.2104C>T(p.R702C)位点杂合突变,为已见文献报道的致病性变异,家系验证患儿父母、哥哥均为野生型。明确诊断为MYH9-RD。先后予缬沙坦、环孢素治疗,患儿肾脏损害持续性进展,并进展至CKD2期。白内障及听力损害亦进行性加重。对于难治性血小板减少的患儿需警惕MYH9-RD可能,基因检测有助于早期明确断。

散发性主动脉猝死患者主动脉壁中膜层血管平滑肌细胞MYLK、MYH11、TGFβR2、MMP9的表达观察

目的观察散发性主动脉猝死(SAD)患者主动脉壁中膜层血管平滑肌细胞(VSMC)肌球蛋白轻链激酶(MYLK)、肌球蛋白重链11(MYH11)、转化生长因子β受体2(TGFβR2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达变化,并探讨其临床意义。方法 27例散发性SAD患者的主动脉壁中膜层标本为SAD组,27例死因排除主动脉夹层(AD)猝死患者的主动脉壁中膜层标本为对照组。采用免疫组化法检测两组主动脉壁中膜层VSMC中MYLK、MYH11、TGFβR2、MMP9。结果 SAD组主动脉壁中膜层VSMC中MYLK、TGFβR2、MYH11、MMP9阳性表达率分别为25. 9%(7/27)、29. 6%(8/27)、18. 5%(5/27)、88. 9%(24/27),对照组分别为77. 8%(21/27)、74. 1%(20/27)、81. 5%(22/27)、29. 6%(8/27)。与对照组比较,SAD组主动脉壁中膜层VSMC中MYLK、TGFβR2、MYH11阳性表达率升高,MMP9阳性表达率降低(P均<0. 05)。结论散发性SAD患者主动脉壁中膜层VSMC中MYLK、MYH11、TGFβR2低表达,MMP9高表达。MYLK、MYH11、TGFβR2、MMP9表达变化可能与散发性SAD的发生、发展有关。

非肌肉肌球蛋白重链-9在骨肉瘤组织中的表达及其对细胞上皮间质转换和侵袭能力的影响

目的非肌肉肌球蛋白重链-9(MYH9)对肿瘤的发生发展具有重要的调控作用,文中旨在探讨MYH9在骨肉瘤组织中的表达及对骨肉瘤细胞上皮间质转换(EMT)和侵袭能力的影响。方法收集52例骨肉瘤癌组织及距肿瘤边缘5cm处的癌旁组织,RT-PCR和免疫组化检测骨肉瘤癌组织和癌旁组织中MYH9的mRNA和蛋白表达水平。脂质体法转染U2-OS细胞MYH9 shRNA表达质粒,沉默MYH9表达,转染后将细胞分成3组:以正常的U2-OS细胞为对照组、以转染空质粒的U2-OS细胞为空载组和以转染MYH9 shRNA的U2-OS细胞为干扰组。采用RT-PCR检测转染后U2-OS细胞MYH9的mRNA水平,Western blot检测U2-OS细胞转染后MYH9以及EMT相关蛋白E-cadherin和Vimentin的蛋白水平变化,Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力变化。结果 RT-PCR检测结果表明,癌旁组织中MYH9 mRNA的相对表达量(1.526±0.148)较癌组织(3.547±0.195)明显减少(P<0.05);免疫组化检测结果表明,MYH9蛋白在肿瘤组织中主要表达于细胞质中,且MYH9蛋白在癌组织中表达显著高于癌旁组织,其阳性表达率分别为59.6%(31/52)和26.9%(14/52),差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR和Western blot检测结果表明,沉默MYH9基因表达后,干扰组MYH9 mRMA相对表达量和蛋白水平较对照组和空载组明显降低(P<0.05)。与对照组相比较,干扰组骨肉瘤细胞U2-OS中E-cadherin蛋白明显上调,Vimentin蛋白出现下调。Transwell实验表明,48 h后各组均有穿出微孔滤膜的细胞,干扰组穿出微孔滤膜的细胞[(41.2±15.1)个]较对照组[(117.3±12.4)个]和空载组[(193.5±14.7)个]明显减少(P<0.05)。结论 MYH9蛋白在骨肉瘤组织中表达显著高于癌旁组织,沉默MYH9可以通过降低骨肉瘤细胞上皮间质转换来降低骨肉瘤的侵袭能力。

1例非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病家系并文献复习

目的鉴定1例非肌性肌球蛋白重链9(MYH9)基因相关疾病家系的致病突变。方法调查收集先证者和家系成员病史资料,观察其临床特征和实验室检查指标。采用芯片捕获高通量测序方法检测先证者MYH9基因,确定突变位点后,对先证者和家系成员进行Sanger验证。结果该家系三代4名患者均有鼻衄、瘀斑紫癜、外伤血肿或月经量增多病史,长期存在镜下血尿和蛋白尿。血涂片镜检均有血小板减少、巨大血小板和粒细胞异常包涵体“三联征”。所有患者MYH9基因第40内含子供体剪接位点存在错义突变c.5765+2T>A(p.R1922Rfs*43),且该基因突变与疾病表型共分离。结论该家系存在MYH9基因c.5765+2T>A(p.R1922Rfs*43)剪接突变,是MYH9基因相关疾病的致病突变,为国内首次报道。

一非肌球蛋白重链9基因相关疾病家系患者的临床及分子生物学特点

目的:探讨一非肌球蛋白重链9基因相关疾病(MYH9-RD)家系的临床表型和分子生物学特性,以阐明MYH9-RD形成的分子机制。方法:通过临床评估和实验室检测对家系进行筛查,应用光学显微镜和自动血细胞计数仪对家系成员进行血小板计数及外周血细胞形态观察,应用聚合酶链反应和直接测序方法分析家系患者MYH9基因突变情况。结果:家系内MYH9-RD患者15例,所有患者均具有典型的"血小板减少、巨大血小板和粒细胞包涵体"三联症,而且都有轻至中度的出血倾向;临床表现具高度复杂性,并伴有严重的白血病、青光眼、心功能不全、转氨酶升高、血脂升高、哮喘、鼻炎及白内障等多种疾病;家系患者MYH9基因的所有外显子与侧翼区均未检测到致病性突变。结论:临床表现和实验室检测表明该家系MYH9-RD诊断成立,其临床表型复杂多样可能与家系患者MYH9基因的所有外显子与侧翼区未检测到致病性突变有关。

非肌球蛋白重链9相关疾病大家系患者中性粒细胞包含体特点分析

目的分析一非肌球蛋白重链9相关疾病(MYH9-RD)大家系患者中性粒细胞包涵体的形态和结构特点,阐明MYH9-RD中性粒细胞包涵体形成的特点,以探讨MYH9-RD中性粒细胞包涵体的致病机制。方法应用光学显微镜(瑞姬染色)和电子显微镜观察中性粒细胞包涵体形态和超微结构特点;应用间接免疫荧光复染技术观察MYH9-RD患者与正常对照者之间非肌性肌球蛋白IIA(NMMHC-IIA)在胞浆中的分布情况。结果光学显微镜和电子显微镜下可见中性粒细胞中明显的包涵体,形态多样,大多位于细胞边缘;间接免疫荧光复染技术显示患者和正常人之间NMMHC-IIA在中性粒细胞中的分布有差异,中性粒细胞胞浆中存在明显绿色荧光的包涵体,其形态和轮廓与瑞一姬氏染色显示的包涵体形状、大小基本一致,但更为清晰;正常对照的粒细胞胞浆中未见包涵体。结论光学显微镜和电子显微镜进一步确认了家系患者包涵体的存在。免疫荧光技术显示患者和正常人之间NMMHC-IIA在中性粒细胞中的分布有差异;MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要构成成份是NMMHC-IIA;包涵体的形态结构复杂多样可能与本家系临床表型复杂多样有关,该家系对进一步揭示MYH9-RD的致病机制具有重要的意义。

非肌性肌球蛋白重链9、信号转导和转录激活因子4、尿激酶型纤溶酶原激活物单核苷酸多态性与新疆维吾尔族特发性膜性肾病相关性

目的探讨非肌性肌球蛋白重链9(MYH9)(rs12107)、信号转导和转录激活因子4(STAT4)(rs3024912)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)(rs4065)位点单核苷酸多态性与特发性膜性肾病相关性。方法对2012年12月-2016年12月在新疆维吾尔自治区人民医院肾活检确诊的90例维吾尔族特发性膜性肾病(IMN)患者为病例组,90例维吾尔族健康对照,采用基因测序方法分析rs12107、rs3024912、rs4065位点单核苷酸多态性(SNP),分析其基因型与IMN易感性及IMN肾功能相关性。结果病例组rs12107位点CC基因型、C等位基因频率(46.67%,63.33%)高于对照组(28.89%,48.33%),差异有统计学意义(P=0.013,P=0.004);C等位基因携带者患IMN的风险是T等位基因的2倍(OR=1.85,95%CI=1.21-2.81);rs12107位点CC基因型较non-CC基因型的患者发生肾功能衰竭的风险高(OR=4.38,95%CI=1.80-2.92,P=0.002);病例组rs3024912位点GG基因型、G等位基因频率(50.00%,61.11%)高于对照组(28.89%,45.00%),差异有统计学意义(P=0.013,P=0.002);G等位基因携带者患IMN的风险是T等位基因的2倍(OR=1.92,95%CI=1.26-2.92);rs3024912位点GG基因型的患者是非GG基因型的患者发生肾功能衰竭风险的3倍(OR=3.20,95%CI=1.28-8.01,P=0.012);rs4065位点只有TT一种基因型,未见到TC、CC基因型。结论新疆维吾尔族MYH9基因rs12107位点存在C/T多态性,CC基因型在IMN患者中的频率高于正常对照组,且与IMN肾功能进展相关。STAT4基因rs3024912位点GG基因型既是IMN的功能基因,亦是其易感基因。uPA rs 4065位点未发现T/C多态性。

非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病2例报告并文献复习

目的探讨非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病(MYH9-RD)的基因突变及临床特征.方法回顾分析同一家系2例MYH9-RD患者的临床资料,并复习相关文献.结果先证者(男,1岁5个月)及其父亲(30岁)均有巨大血小板、血小板减少和粒细胞内包涵体,先证者之父还存在神经性耳聋,均曾误诊免疫性血小板减少症,接受激素治疗无效.先证者及其父亲存在MYH9基因c.4270G>A杂合突变,导致氨基酸改变p.D1424N,为错义突变.国内已报道48个家系MYH9-RD,38个有基因测序结果,其中c.4270G>A(p.D1424N)为国内报道最多的MYH9基因突变类型.结论结合细胞形态学及基因检测有利于MYH9-RD的早期诊断,c.4270G>A(p.D1424N)为国内最为常见的MYH9基因突变类型.

非家族性May—Hegglin异常伴MYH9基因R1933X突变及I1626V多态性

目的鉴定1例May—Hegglin异常（MHA）先证者非肌性肌球蛋白重链9基因（MYH9）突变类型，并对其无临床及血液学表型的家系成员进行基因分析，以确定先证者MYH9基因突变与其父母该基因遗传的非相关性。方法用透射电镜观察先证者外周血粒细胞包涵体，用扫描电镜观察患者外周血巨大血小板形态；用PCR技术扩增患者及其父母MYH9基因突变热点区域，并对PCR产物进行正反向测序，确定其突变位点。结果①先证者具有典型的“血小板减少、巨大血小板、中性粒细胞包涵体”三联征，MHA诊断成立；而患者父母及兄长均健康。②透射及扫描电镜观察证实先证者外周血存在巨大血小板及粒细胞包涵体。③先证者MYH9基因40号外显子第5797位核苷酸存在C→T突变，该突变导致编码的非肌性肌球蛋白重链ⅡA（NMMHC—A）蛋白第1933位精氨酸转变为终止密码子（R1933X）；先证者MYH9基因33号外显子存在4876A→G杂合突变；先证者父母均未检测出R1933X突变，其母不存在4876A→G多态性，其父为4876A→G多态性的纯合子。结论本例MHA患者缺乏常染色体显性遗传家族史，为“散发”病例；该患者MYH9基因40号外显子5797C→T突变为致病突变，而33号外显子4876A→G突变为一多态性。

番荔枝内酯单体squamocin下调MYH-9蛋白表达抑制胃癌MGC803细胞侵袭

目的探讨番荔枝内酯单体squamocin对胃癌MGC803细胞增殖,侵袭的影响及机制。方法人胃癌MGC803细胞分为低、高剂量实验组和对照组,每组设置8个复孔,实验组细胞分别以1,10μg·L-1squamocin处理,对照组细胞则以等量0.9%NaCl处理。用噻唑蓝(MTT)法检测MGC803细胞增殖抑制情况,用Transwell小室实验检测MGC803细胞侵袭能力,用蛋白免疫印迹法检测MGC803细胞非肌性肌球蛋白重链9基因(MYH-9)及侵袭蛋白表达情况。结果干预24 h,低、高剂量实验组MGC803细胞增殖抑制率分别为(39.76±1.54)%,(58.49±2.86)%。对照组,低、高剂量实验组相对侵袭指数分别为(100.00±0.00)%,(79.05±0.18)%,(52.47±0.15)%;MYH-9蛋白相对表达量分别为1.06±0.23,0.89±0.14,0.59±0.05,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白相对表达量分别为1.56±0.17,1.12±0.09,0.82±0.04,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白相对表达量分别为0.98±0.08,0.82±0.05,0.64±0.07。低、高剂量实验组分别与对照组比较,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论番荔枝内酯单体squamocin可能通过下调MYH-9及MMP-2,MMP-9蛋白表达,抑制胃癌MGC803细胞增殖、侵袭。

MYH9基因多态性与肾脏疾病关系研究进展

非肌性肌球蛋白重链9基因,编码非肌性肌球蛋白重链ⅡA,既往研究其与May-Hegglin异常(May-Hegglin anomaly,MHA)、Fechtner综合征(Fechtner syndrome,FTNS)、Sebastian综合征(Sebastian syndrome,SBS)、Epstein综合征(Epstein syndrome,EPS)和Alport样综合征相关。2008年首次用混合连锁不平衡绘图(MALD)方法证实其与非糖尿病终末期肾病及局灶节段性肾小球硬化症相关,后陆续有该基因与高血压肾病、C1q肾病等的相关报道。本文综合国外该基因与肾脏病的相关研究,对其与肾脏病的关系研究进展做一概括,对今后的研究起一定的帮助作用。

一个非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病家系的临床特征及基因突变分析

目的鉴定一个非肌性肌球蛋白重链9基因(myosin heavy chain 9,MHY9)相关疾病家系的基因突变类型并分析其表型特点。方法对先证者及其家系成员采集外周静脉血,分别进行血常规检查,包括血小板计数和外周血瑞氏染色分析观察粒细胞包涵体和巨大血小板。用PCR扩增先证者及家系成员和正常对照者MYH9基因的第2、17、27、31、39、41外显子,直接测序法分析PCR产物的核苷酸序列,确定其突变位点。结果家系中的患者有典型的"血小板减少、巨大血小板、粒细胞包涵体"三联征,2例患者有肾炎、白内障。家系中所有患者在MYH9基因上的第39外显子第5521位核苷酸均存在杂合错义突变c.5521G>A(p.Glu1841Lys),正常对照及家系中正常成员未见此突变。结论该家系存在MYH9基因c.5521G>A(p.Glu1841Lys)突变,导致MYH9相关疾病。

肌球蛋白重链9基因单核苷酸多态性与内蒙古自治区汉族IgA肾病临床、病理及预后的关系

目的探讨肌球蛋白重链（MYH）9基因单核苷酸多态性与内蒙古自治区汉族IgA肾病患者临床特征、病理及预后的关系。方法以经肾组织活检确诊的IgA肾病患者148例为研究对象，对其中56例患者进行了1-97月的随访。取外周血提取DNA，采用PCR限制性片段长度多态性分析（RFLP）法检测MYH9基因Rs3752462、Rs4821480位点单核苷酸多态性。研究各位点基因型与IgA肾病患者临床特征的相关性。分析不同基因型与疾病进展和预后的关系。结果（1）Rs3752462位点符合Hardy-Weinberg平衡，Rs4821480位点不符合Hardy-Weinberg平衡。（2）IgA肾病患者MYH9基因Rs3752462位点1rr基因型患者的收缩压低于CC＋CT基因型（P〈0．05）。Rs4821480位点GG基因型与Tr＋GT基因型两组患者收缩压、舒张压、年龄差异有统计学意义（P〈0．05）。Scr、肌酐清除率、血自蛋白、血红蛋白、镜下血尿、蛋白尿程度等临床指标及病理HASS分级、肾病理改变在Rs4821480位点、Rs3752462位点3种基因型组间差异无统计学意义。（3）Kaplan-Meier生存分析提示Rs3752462位点cc基因型、Rs4821480位点Tr基因型患者肾活检到肾功能减退时间显著较短（P〈0．05）。结论MYH9基因Rs3752462位点C等位基因是引起IgA肾病患者高血压损害的独立危险因素。MYH9基因Rs4821480位点3种基因型多态性与患者预后相关。携带Rs3752462位点C等位基因、Rs4821480位点T等位基因可能影响患者的预后。

儿童非肌性肌球蛋白重链9基因相关血小板减少性疾病诊断与治疗

非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病（nonmuscle myosin heavy chain 9 related disease，MYH9-RD）是MYH9基因突变引起的遗传性血小板减少性疾病，为常染色体显性遗传。患儿自出生起即表现为巨大血小板减少症，症状常伴随终生。通常表现为轻微出血症状，但因临床对该病认识不足，患儿常被漏诊或误诊为慢性免疫性血小板减少性紫癜（ITP），给予不必要甚至有害的治疗，造成不良预后。为避免这种情况发生，本文就儿童MYH9-RD诊断治疗进展做一阐述。

血清应答因子和肌球蛋白重链9在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血清应答因子(serum response factor,SRF)和肌球蛋白重链9(myosin heavy chain 9,MYH9)在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法回顾性分析唐山市人民医院2014年1月至2016年12月收治的113例食管鳞癌根治性手术患者的临床资料,采用免疫组织化学染色法检测SRF和MYH9在食管鳞癌组织和相应癌旁组织中的表达,分析SRF和MYH9在食管鳞癌组织中的差异表达与临床病理特征的相关性。结果免疫组织化学染色结果显示,SRF在食管鳞癌组织中的阳性表达率为42.48%(48/113),显著高于癌旁组织的6.25%(2/32),两组比较差异有统计学意义(χ^2=14.487,P<0.05);MYH9的阳性表达率为57.52%(65/113),显著高于癌旁组织的25.00%(8/32),两组比较差异有统计学意义(χ^2=10.551,P<0.05)。SRF和MYH9的表达水平与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移和TMN分期关系密切(P均<0.05);SRF与MYH9的阳性表达呈正相关性(r=0.521,P<0.05)。SRF和MYH9双阴性表达组、SRF和MYH9单阳性表达组、SRF和MYH9双阳性表达组中位生存期分别为30、20、12个月,双阴性、单阳性表达组与双阳性表达组比较,差异均有统计学意义(χ^2值分别43.855、17.799,P均<0.001),双阴性与单阳性表达组比较差异无统计学意义(χ^2=2.787,P=0.095)。结论SRF和MYH9在食管鳞癌组织中高表达,SRF和MYH9双阳性表达患者预后不佳。

肌球蛋白重链9在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖能力的影响

目的观察胃癌组织肌球蛋白重链9(myosin heavy chain 9,MYH9)表达变化,探讨其对胃癌细胞增殖能力的影响。方法自TCGA和GTEx数据库收集正常组织以及食管癌、胃癌、胆管癌、胶质瘤、急性髓系白血病、胰腺癌、胸腺瘤组织转录组测序数据,自TCGA数据库收集胃癌患者临床病理资料,比较不同癌组织与正常组织MYH9mRNA相对表达量,分析MYH9表达与胃癌患者临床病理特征的关系。自Kaplan-Meier Plotter数据库收集胃癌患者生存资料,绘制Kaplan-Meier曲线,比较MYH9高、低表达胃癌患者总生存率、首次进展生存率、进展后生存率。采用实时荧光定量PCR法检测人皮肤成纤维细胞CCC-HSF-1和胃癌AGS、SNU16、HGC27细胞MYH9mRNA相对表达量,筛选出表达最高的胃癌AGS细胞。取对数生长期AGS细胞,分为NC组(转染siRNA-NC)、siMYH9-1组(转染siMYH9-1)、siMYH9-2组(转染siMYH9-2)。转染48h,采用实时荧光定量PCR法检测MYH9mRNA相对表达量,采用Western blot法检测MYH9蛋白相对表达量,采用细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,采用EdU实验检测EdU阳性细胞率;转染后培养0、24、48、72、96h,采用CCK-8实验检测细胞增殖率。结果数据库分析结果显示,胃癌组织MYH9 mRNA相对表达量高于正常组织(P<0.05);T分期T_(3)~T_(4)期、组织学分级G_(3)级的胃癌患者MYH9高表达比率分别高于T分期T_(1)~T_(2)期、组织学分级G_(1)~G_(2)级者(P<0.05),不同性别、年龄以及有无幽门螺旋杆菌感染、胃癌家族史、淋巴结转移、远处转移的胃癌患者MYH9高表达比率比较差异均无统计学意义(P>0.05);MYH9高表达的胃癌患者总生存率、首次进展生存率、进展后生存率均低于MYH9低表达MYH9者(P<0.05)。AGS(2486.02±332.36)、SNU16(729.16±166.39)、HGC27(652.05±92.48)细胞MYH9mRNA相对表达量均高于CCC-HSF-1细胞(1.00±0.11)(P<0.05),SNU16、HGC27细胞MYH9 mRNA相对表达量均低于AGS细胞(P<0.05)。siMYH9-1组、siMYH9-2组细胞MYH9mRNA(0.14±0.02、0.23±0.01)及蛋白(0.19±0.13、0.22±0.14)相对表达量、细胞克隆形成数目[(95.00±16.52)、(100.67±8.50)个]、EdU阳性细胞率[(23.03±1.98)%、(27.07±1.89)%]均低于NC组(1.00±0.12、0.83±0.11、(325.67±26.69)个、(51.52±2.58)%)(P<0.05),siMYH9-1组细胞MYH9mRNA相对表达量低于siMYH9-2组(P<0.05),MYH9蛋白相对表达量、细胞克隆形成数目、EdU阳性细胞率与siMYH9-2组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。siMYH9-1组、siMYH9-2组转染后培养48h[(49.20±0.85)%、(73.33±1.16)%]、72h[(45.94±0.43)%、(59.50±1.22)%]、96h[(36.41±1.68)%、(47.24±0.29)%]时细胞增殖率均低于NC组[(100.00±0)%、(100.00±0)%、(100.00±0)%](P<0.05),0、24h时细胞增殖率与NC组比较差异均无统计学意义(P>0.05);siMYH9-2组转染后培养48、72、96h时细胞增殖率均高于siMYH9-1组(P<0.05),0、24h时与siMYH9-1组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MYH9在胃癌组织中呈高表达,提示胃癌患者预后不良,敲低MYH9表达可抑制胃癌AGS细胞增殖。